組織學技術(shù)基礎(chǔ)醫(yī)學論文
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1．1掌握原理是組織學技術(shù)的關(guān)鍵
任何一門技術(shù)首先要掌握的就是原理，組織學技術(shù)也是一樣。只有在充分掌握了組織學技術(shù)的原理，明白技術(shù)中每一步驟如何進行，要達到怎樣的效果，可以驗證何問題，才能在我們完成一項實驗后，抑或是結(jié)果出現(xiàn)了異樣的時候，有足夠的把握去分析我們操作時可能存在的問題，以及每個步驟的異?？赡茉斐傻慕Y(jié)果。在教授研究生組織學技術(shù)的過程中，部分研究生喜歡照葫蘆畫瓢，人家怎么做他就怎么做，根本不知道自己做的每一步實驗是為什么。只有當最后實驗結(jié)果不理想時，才考慮自己是不是哪個步驟操作的不夠規(guī)范或者出現(xiàn)錯誤，但卻分析不出出錯的環(huán)節(jié)，殊不知三年的研究生生涯就在這不經(jīng)意中流失了寶貴的時間。有句話叫“磨刀不誤砍柴工”，組織學技術(shù)就是這樣，只有把原理這把寶刀磨光亮了，后續(xù)的每個步驟才會順利。
1．2獨立操作是掌握組織學技術(shù)的途徑
“實踐是檢驗真理的標準”，研究生要想真正地掌握一項組織學技術(shù)，唯有靠他們自己的實際獨立操作。組織學技術(shù)作為研究生的一門課程，在老師的帶領(lǐng)下，幾乎每位學生都能做出理想的結(jié)果，但到了他們真正做課題的時候，總會出現(xiàn)這樣那樣的問題。究其原因，還是研究生對技術(shù)掌握得不夠熟練、全面，很多學生沒有經(jīng)歷過從配液到最后結(jié)果的采集分析，他們不知道制作一張組織切片到染色，再到圖像采集分析是一個怎樣的過程。一項技術(shù)，只有自己親自上手去做才會發(fā)現(xiàn)，原來要注意如此多的細節(jié)，而這些細節(jié)又直接決定著實驗的走向，科研容不得任何對細節(jié)的藐視。因此，研究生要想真正掌握組織學技術(shù)，除了理論功底的扎實，還要不斷進行科研實踐。
2提高基礎(chǔ)醫(yī)學研究生組織學技術(shù)的途徑
2．1設(shè)立組織學技術(shù)選修課
在研究生正式進入科研實踐活動之前，本校的碩士研究生有一個學期的基礎(chǔ)課程教育階段。在這一階段中，研究生除了學習一些英語、政治、統(tǒng)計等必修課外，本校還設(shè)置了很多與科研實踐相關(guān)的選修課程。其中，組織學技術(shù)便開設(shè)了相關(guān)的課程，課程設(shè)置以研究生的實踐為主，包括冰凍切片的制作、石蠟切片的制作、熒光顯微鏡的使用、HE染色的操作、免疫組化染色等。研究生的選修課程由導師根據(jù)其后續(xù)課題的需要進行主要的勾選，余下的課程研究生可依據(jù)自己的興趣進行選擇。根據(jù)選修組織學技術(shù)課程的人數(shù)，我們將學生分成多個組，每個組保持在10個人以內(nèi)，每個組按照輪次分別在不同的組織學技術(shù)操作室進行培訓。由帶教老師進行技術(shù)演練后，每一名學生在帶教老師的指導下進行獨立操作，及時發(fā)現(xiàn)問題并進行改正。組織學技術(shù)選修課的設(shè)置，為很多即將步入科研實踐的研究生提供了提早接觸組織學實驗的機會，為研究生后續(xù)的科研實踐打下了基礎(chǔ)。
2．2及時全面地進行入科培訓
研究生剛剛結(jié)束基礎(chǔ)課程進入課題研究的實踐工作中，很多儀器的基本操作及維護并不清楚。作為組織胚胎學的研究生，接觸與使用最多的就是組織學技術(shù)相關(guān)的一些儀器。因此，本科室在研究生入科后，會及時進行入科培訓。入科培訓主要是將新進科室的研究生及一些對相關(guān)儀器不熟悉的研究生組織起來，結(jié)合本科室的已有的相關(guān)儀器，包括冰凍切片機、石蠟切片機、組織石蠟包埋機、組織梯度脫水機、正置熒光顯微鏡、倒置熒光顯微鏡等，和一些其他常用實驗儀器，包括蛋白質(zhì)電泳轉(zhuǎn)印儀器、凝膠電泳儀、凝膠圖像分析儀、超純水過濾裝置、高壓滅菌裝置、PH計、分析天平、酶標儀等，分組進行相關(guān)儀器的講解，介紹內(nèi)容包括使用方法及注意事項，讓研究生熟悉本科室常用實驗儀器。在后續(xù)實驗中，課題組會實行一個博士生帶教1－2名碩士生的模式，熟悉常規(guī)實驗的操作，同時研究生作為師兄師姐的幫手，從基本的配液開始，在師兄師姐的帶教下逐漸熟悉常用儀器和實驗的操作規(guī)程。在研究生入科后的三個月，其主要任務(wù)就是熟悉常用儀器和實驗的操作，并結(jié)合實踐掌握實驗原理。
2．3建立技術(shù)原理的考核機制
研究生剛剛接觸科研工作，他們有些茫然與盲目，因此，研究生在剛剛著手課題的一段時間，可以建立一項科研技術(shù)原理的考核，一方面督促研究生盡快掌握組織學技術(shù)的原理，另一方面可以使研究生盡早駛?cè)肟蒲熊壍?。在后續(xù)的實驗過程中，能夠少出錯，把一遍遍改正實驗錯誤的時間放在閱讀文獻上，在掌握技術(shù)的同時，把結(jié)余的時間留給構(gòu)建科研思維上。這對于在有限的研究生生涯內(nèi)，爭取到與時間賽跑的資格，培養(yǎng)具有綜合素質(zhì)能力的研究生是非常重要的。經(jīng)過研究生入科后前三個月對各項實驗的熟悉，大多數(shù)研究生都已經(jīng)基本掌握常用實驗的操作及原理，此時結(jié)合實驗中常遇到的相關(guān)問題，以問答題的形式考查研究生對常用實驗原理的掌握程度，并且成績計入中期考核成績，以此督促研究生前三個月對實驗及其原理的學習。
2．4加強文獻匯報的整體全面性
閱讀文獻不只是為了提高科研思維。在研究生學習過程中，讀到一篇好的文獻，要做到能夠把文獻中的技術(shù)與結(jié)果、結(jié)論結(jié)合起來，知曉一個實驗思路是靠哪些實驗技術(shù)的堆積來實現(xiàn)的?？蒲兴季S可以天馬行空，但人類的技術(shù)是有限制的，因此，真正做到技術(shù)、思路相結(jié)合，最后才能實現(xiàn)真正的科研夢。研究生入科后，在動手做自己的課題前，他們在實驗室會議(labmeeting)中主要從他們自己閱讀過的文獻中找出比較經(jīng)典的文獻進行全面的匯報，包括實驗思路、實驗方法、實驗結(jié)果、說明了哪些問題、有何意義等。在此過程中，導師不僅要檢驗學生對文獻思路的理解程度，還要對研究生在技術(shù)和思路結(jié)合起來理解的程度進行指導，以使研究生在接手自己的課題前，形成一套完整的課題設(shè)計的思路，以便后續(xù)能夠發(fā)揮自己的主觀能動性，參與課題的設(shè)計、操作、結(jié)果分析中，真正做到“知其然，知其所以然”。另外，在labmeeting中，新入科室的研究生還要學習師兄師姐們對課題實驗結(jié)果的整理和分析，并把自己在實驗中遇到的無法解決的問題提出來進行討論，從而解決問題。不只是組織學技術(shù)，任何一項實驗技術(shù)都可以在這一過程中不斷地被加深理解，以至熟練應(yīng)用。
2．5及時給予技術(shù)指導
打好基礎(chǔ)，接下來就是實踐了?；A(chǔ)研究生的學習過程中，很大一部分時間就是要動手做實驗，只有在動手做的過程中，研究生才能真正發(fā)現(xiàn)自己對實驗技術(shù)的掌握程度。在組織學技術(shù)中，很多操作不止是簡單的動手，還要練就手感的輕重。組織學涉及的都是細微的結(jié)構(gòu)，稍有不慎，可能滿盤皆空。研究生畢竟是在有限的科研經(jīng)費的支撐下進行實驗操作的，為了讓科研經(jīng)費能夠更有效的利用，就要盡可能地減少一些不必要的錯誤。在課題實驗中，如果一位研究生連做三次都不能很好地獨立完成一項實驗技術(shù)，那么，在研究生第4次操作時，導師或熟練操作的師兄師姐應(yīng)全程跟蹤，以排除不必要的操作失誤或試劑問題，從而及時糾正問題。
2．6及時記錄總結(jié)實驗技巧
組織學技術(shù)作為一項以操作為主的技術(shù)，在動手的每一步可能都蘊藏著玄機。所謂“好記性不如爛筆頭”，在做組織切片染色時，不同大小的組織染液浸泡的時間不同、染液濃度配方也會有不同，組織清洗時水流的速度，組織在梯度酒精中脫水的時間，二甲苯透明組織的程度等，要記憶的東西很多，如果不加以詳細及時的記錄，有些細節(jié)性的技巧都會被遺忘。所以，每一次的操作，研究生都應(yīng)該盡可能詳盡地記錄整個實驗過程，記錄實驗失敗的原因和改進的方式以及實驗結(jié)果和現(xiàn)象。這樣，不知不覺中，研究生已經(jīng)鍛煉出一種解決問題的能力，不僅是組織學技術(shù)，它也會滲透到生活中，以一種堅毅的品格解決今后遇到的一個又一個問題。
作者：李娟 張璐 單位：南方醫(yī)科大學