膠質(zhì)母細(xì)胞瘤精選(九篇)
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第1篇：膠質(zhì)母細(xì)胞瘤范文
目的 觀測(cè)Smad7對(duì)腦膠質(zhì)母細(xì)胞瘤U251細(xì)胞增殖及浸潤(rùn)的影響。方法 應(yīng)用CCK8和RTPCR分別檢測(cè)Smad7穩(wěn)定轉(zhuǎn)染U251細(xì)胞與空載體轉(zhuǎn)染U251細(xì)胞及U251細(xì)胞在增殖和Ncadherin 、Ecadherin、 vimentin、 twist基因表達(dá)的差異。結(jié)果 Smad7轉(zhuǎn)染后，上皮細(xì)胞間質(zhì)化相關(guān)基因表達(dá)未見(jiàn)改變(P＞0.05)，但相對(duì)于空載體轉(zhuǎn)染U251細(xì)胞及U251細(xì)胞其增殖速度減慢。結(jié)論 Smad7穩(wěn)定轉(zhuǎn)染后未見(jiàn)膠質(zhì)母細(xì)胞瘤上皮細(xì)胞間質(zhì)化改變，但Smad7高表達(dá)可抑制膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞增殖。
膠質(zhì)母細(xì)胞瘤（GBA）是最為惡性的顱內(nèi)腫瘤之一，由于缺乏有效的臨床治療手段，GBA的預(yù)后極差。大量的研究數(shù)據(jù)表明，轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β（TGFβ）1在GBA惡性演進(jìn)過(guò)程中發(fā)揮著至關(guān)重要的作用〔1～3〕。TGFβ異常所致疾病，通常是由于它的信號(hào)通路調(diào)控異常所引起的。Smad7蛋白作為T(mén)GFβ的細(xì)胞內(nèi)重要負(fù)反饋調(diào)節(jié)因子，在腫瘤分子治療方面的作用日益受到重視〔4～6〕。然而，Smad7在腫瘤惡性演進(jìn)過(guò)程中所發(fā)揮的生物學(xué)作用卻存在著爭(zhēng)議，在一些腫瘤中，Smad7抑制腫瘤的生長(zhǎng)與增殖，發(fā)揮著抑瘤因子的作用〔7，8〕，但在另外一些腫瘤中，Smad7的高表達(dá)水平卻與該腫瘤的發(fā)生密切相關(guān)〔5〕。所以現(xiàn)多認(rèn)為，Smad7生物學(xué)作用是細(xì)胞依賴性的，而目前，關(guān)于Smad7對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞生物學(xué)行為影響的研究少有報(bào)道。
本實(shí)驗(yàn)以穩(wěn)定轉(zhuǎn)染了Smad7的GBA細(xì)胞系U251細(xì)胞（SU2）、轉(zhuǎn)染了空載質(zhì)粒PcDNA3.0的U251細(xì)胞（CU）及正常U251細(xì)胞為研究模型，比較SU2細(xì)胞與CU及U251細(xì)胞生物學(xué)行為的不同，探討Smad7對(duì)GBA細(xì)胞生物學(xué)行為的影響。
1 材料與方法
1.1 質(zhì)粒和細(xì)胞株
人GBA U251細(xì)胞、Smad7穩(wěn)定轉(zhuǎn)染GBA細(xì)胞及空載質(zhì)粒PcDNA3.0穩(wěn)定轉(zhuǎn)染U251細(xì)胞為本實(shí)驗(yàn)室所保存。試劑：IMEM培養(yǎng)基 (Gibco公司)；新生牛血清(杭州四季青公司)；G418 (Invitrogen)；RTPCR試劑盒（TaKaRa）;CCK8試劑盒（碧云天）。人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤U251細(xì)胞(U251組)、Smad7穩(wěn)定轉(zhuǎn)染GBA U251細(xì)胞(SU2組)及空載質(zhì)粒PcDNA3.0穩(wěn)定轉(zhuǎn)染U251細(xì)胞(CU組)由本實(shí)驗(yàn)室凍存；細(xì)胞復(fù)蘇用含10%胎牛血清IMEM培養(yǎng)，置于含5%CO2的培養(yǎng)箱中，在37℃、95%濕度條件下培養(yǎng)。
1.2 細(xì)胞總RNA抽提
分別復(fù)蘇人GBA U251細(xì)胞、Smad7穩(wěn)定轉(zhuǎn)染GBA細(xì)胞及空載質(zhì)粒PcDNA3.0穩(wěn)定轉(zhuǎn)染U251細(xì)胞，以1?05/ml的接種密度將其分別接種入3塊六孔板中，待細(xì)胞長(zhǎng)滿后，每3孔為1組，每孔中分別加入100 μl Trizol(Invitrogen)裂解，按照試劑盒說(shuō)明書(shū)抽提RNA，分光光度計(jì)測(cè)定濃度。所有樣品RNA 260/280 OD比值均為1.8～2.0。
1.3 RTPCR
逆轉(zhuǎn)錄cDNA：反應(yīng)總體系30 μl，取標(biāo)本總RNA1.5 μg，加入RT反應(yīng)液中（TaKaRa）。反應(yīng)條件為：30℃ 10 min，42℃ 30 min，99℃ 5 min，5℃ 5 min。PCR：反應(yīng)總體系50 μl，取RT反應(yīng)產(chǎn)物10 μl加入PCR反應(yīng)液（TaKaRa）40 μl中，各引物序列見(jiàn)表1。反應(yīng)條件：94℃ 2 min，94℃變性15 s，53℃退火30 s，72℃延伸45 s，共30個(gè)循環(huán)。最后72℃ 5 min。PCR產(chǎn)物用2%瓊脂糖凝膠，80 V電壓電泳45 min，PCR產(chǎn)物條帶密度應(yīng)用凝膠成像系統(tǒng)掃描，并應(yīng)用Kodak Digital Science 1D軟件進(jìn)行定量，每組實(shí)驗(yàn)均重復(fù)3次。表1 引物序列（略）
1.4 細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)
以1?05/ml的接種密度將人GBA U251細(xì)胞、Smad7穩(wěn)定轉(zhuǎn)染GBA細(xì)胞及空載質(zhì)粒PcDNA3.0穩(wěn)定轉(zhuǎn)染U251細(xì)胞分別接種入3塊六孔板中，待細(xì)胞長(zhǎng)滿后，移除細(xì)胞培養(yǎng)基，經(jīng)PBS清洗后，加入不含血清的IMEM培養(yǎng)基，用200 μl黃色槍頭在各個(gè)孔中垂直劃痕，24 h后，顯微鏡下觀察細(xì)胞遷移情況。
1.5 CCK8計(jì)數(shù)細(xì)胞
將人GBA U251細(xì)胞、Smad7穩(wěn)定轉(zhuǎn)染GBA細(xì)胞及空載質(zhì)粒PcDNA3.0穩(wěn)定轉(zhuǎn)染U251細(xì)胞分別接種入96孔板內(nèi)，每種細(xì)胞接種于3個(gè)孔內(nèi)，細(xì)胞密度為0.5?04/孔，置于37℃，5% CO2飽和濕度培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)24 h后，取出1個(gè)96孔板，在各孔內(nèi)加入10 μl的CCK8試劑，前后搖勻；將培養(yǎng)板放在培養(yǎng)箱內(nèi)孵育2 h后450 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，將各實(shí)驗(yàn)組OD值減去無(wú)細(xì)胞組及空白孔OD值，每隔24 h重復(fù)上述實(shí)驗(yàn)步驟，共重復(fù)6次。
1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
計(jì)量數(shù)據(jù)以x眘表示，采用SPSS14.0軟件進(jìn)行組間t檢驗(yàn)。
2 結(jié)果
2.1 Ncadherin 、Ecadherin、 vimentin、 twist等基因的瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)
紫外光下觀察見(jiàn)Ncadherin 、Ecadherin、 vimentin、 twist等靶基因均為單一條帶，且大小與目的片段大小相符。然而，上述基因在人GBA U251細(xì)胞、Smad7穩(wěn)定轉(zhuǎn)染GBA細(xì)胞及空載質(zhì)粒PcDNA3.0穩(wěn)定轉(zhuǎn)染U251細(xì)胞的表達(dá)未見(jiàn)有明顯差異(P＞0.05)，見(jiàn)圖1。為了觀察Smad7轉(zhuǎn)染后對(duì)GBA 生長(zhǎng)的影響，應(yīng)用CCK8試劑盒測(cè)定細(xì)胞數(shù)目，并制定生長(zhǎng)曲線，發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)染了Smad7的GBA 細(xì)胞生長(zhǎng)速度較U251細(xì)胞及空載轉(zhuǎn)染細(xì)胞明顯低(P＜0.05)。見(jiàn)圖2。
2.2 腫瘤細(xì)胞的培養(yǎng)及劃痕實(shí)驗(yàn)
人GBA U251細(xì)胞、Smad7穩(wěn)定轉(zhuǎn)染GBA 細(xì)胞及空載質(zhì)粒PcDNA3.0穩(wěn)定轉(zhuǎn)染U251細(xì)胞經(jīng)培養(yǎng)后，未見(jiàn)明顯形態(tài)差異，均呈貼壁生長(zhǎng)，胞體較大，呈多形性，有多個(gè)突起，培養(yǎng)2 d后，當(dāng)細(xì)胞密度增加后，胞體呈成纖維樣改變。同時(shí)，三種細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)結(jié)果未見(jiàn)顯著性區(qū)別(P＞0.05)。
3 討 論
Smads是TGFβ的重要細(xì)胞內(nèi)調(diào)節(jié)因子，通常將其分為3種類(lèi)型受體調(diào)節(jié)型：包括Smad2和Smad3，其最先由TGFβ1型受體激活；協(xié)同調(diào)節(jié)型：即Smad4；抑制型：包括Smad6和Smad7。當(dāng)受體調(diào)節(jié)型Smad被激活后，與Smad4形成異聚體，進(jìn)而從細(xì)胞質(zhì)進(jìn)入核內(nèi)，發(fā)揮轉(zhuǎn)錄因子功能而激活靶基因。同時(shí)也激活抑制型Smad，形成反饋調(diào)節(jié)抑制。
TGFβ與惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，但具體分子機(jī)制目前仍不清楚，現(xiàn)有研究認(rèn)為，TGFβ主要是通過(guò)促進(jìn)上皮細(xì)胞間質(zhì)化（EMT）的過(guò)程來(lái)促進(jìn)腫瘤的侵襲及轉(zhuǎn)移。EMT 主要是指已分化的上皮細(xì)胞向間質(zhì)成纖維樣細(xì)胞過(guò)渡的一種過(guò)程，在EMT過(guò)程中，上皮細(xì)胞失去上皮細(xì)胞標(biāo)記，如：Ecadherin。而一些間質(zhì)化細(xì)胞的標(biāo)記，如：Ncadherin、 vimentin、 twist等卻得以表達(dá)。作為T(mén)GFβ的主要細(xì)胞內(nèi)抑制因子，Smad7對(duì)于EMT的影響少有報(bào)道，本研究發(fā)現(xiàn)Smad7穩(wěn)定轉(zhuǎn)染U251細(xì)胞的形態(tài)與U251細(xì)胞及空載質(zhì)粒PcDNA3.0穩(wěn)定轉(zhuǎn)染U251細(xì)胞的形態(tài)沒(méi)有明顯區(qū)別。同時(shí)在本研究中，還對(duì)Ecadherin 、Ncadherin、 vimentin、 twist等基因在上述幾種細(xì)胞的表達(dá)情況進(jìn)行了分析，上述基因在這幾種細(xì)胞表達(dá)也未見(jiàn)明顯異常。這至少說(shuō)明了Smad7對(duì)于GBA 的EMT的影響不大。
本實(shí)驗(yàn)還發(fā)現(xiàn)Smad7穩(wěn)定轉(zhuǎn)染U251細(xì)胞的生長(zhǎng)速度明顯較U251細(xì)胞及空載質(zhì)粒PcDNA3.0穩(wěn)定轉(zhuǎn)染U251細(xì)胞低，通常認(rèn)為，TGFβ具有抑制細(xì)胞生長(zhǎng)的作用，Smad7作為T(mén)GFβ的重要抑制因子，其高表達(dá)應(yīng)該促進(jìn)細(xì)胞增殖，但本實(shí)驗(yàn)結(jié)果卻不支持該理論。最近的研究發(fā)現(xiàn)，Smad7尚可不依賴于TGFβ而獨(dú)立發(fā)揮生物學(xué)功能，且與腫瘤細(xì)胞凋亡的發(fā)生密切相關(guān)〔7，9〕。推測(cè)很有可能Smad7也參與了膠質(zhì)瘤細(xì)胞的凋亡過(guò)程，如果這個(gè)推論成立的話，那么Smad7對(duì)于GBA 的基因治療將具有重要意義。
【參考文獻(xiàn)】
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第2篇：膠質(zhì)母細(xì)胞瘤范文
【關(guān)鍵詞】 多中心膠質(zhì)瘤;膠質(zhì)母細(xì)胞瘤;診斷;治療
多中心膠質(zhì)瘤指遠(yuǎn)離的各自獨(dú)立的膠質(zhì)瘤存在于不同腦葉或半球，其間無(wú)既定途徑相連(如胼胝體，穹窿，內(nèi)囊等)，排除經(jīng)腦脊液循環(huán)播散的原發(fā)腦腫瘤或轉(zhuǎn)移瘤[1]。本科于2009年10月收治1例經(jīng)病理切片證實(shí)的多中心膠質(zhì)母細(xì)胞瘤。結(jié)合文獻(xiàn)對(duì)其組織起源、發(fā)病機(jī)理、診斷、治療及預(yù)后探討如下。
1 病 例
患者，男，44歲。因“頭痛20余天加重1周伴惡心嘔吐”入院。查體：神清，語(yǔ)利，四肢活動(dòng)正常。視野檢查雙顳外上象限視野缺損。頭顱mri平掃：雙側(cè)枕葉及左側(cè)顳葉海馬區(qū)示散在長(zhǎng)t1(圖1)長(zhǎng)t2(圖2)信號(hào)，其周可見(jiàn)大片水腫樣信號(hào)，雙側(cè)腦室后角受壓。增強(qiáng)掃描可見(jiàn)2枚明顯環(huán)化強(qiáng)化灶(圖3)。入院診斷：顱內(nèi)多發(fā)占位，考慮轉(zhuǎn)移瘤可能性大。就其原發(fā)病灶進(jìn)行相關(guān)檢查尋找：腹部b超(肝膽脾胰雙腎)，甲狀腺及前列腺b超未見(jiàn)異常，相關(guān)腫瘤標(biāo)記檢查結(jié)果均陰性。入院完善相關(guān)檢查后在全麻下行右枕葉開(kāi)顱腫瘤切除術(shù)。術(shù)中見(jiàn)腦組織張力極高，腦膨出明顯，于矢狀竇與橫竇交匯處皮層造瘺約1cm見(jiàn)腫瘤組織，血供豐富，暗紅色，魚(yú)肉狀，腫瘤中心部分壞死囊變，包膜不完整，與周?chē)纸缜非?，大小約3cm×3cm×4cm，切除腫瘤及部分水腫外膨腦組織，并去骨瓣減壓。病理報(bào)告為膠質(zhì)母細(xì)胞瘤(who iv)gfap(+)(見(jiàn)第92頁(yè)彩色圖版ⅷ之圖4)、vimentin(+)(見(jiàn)第92頁(yè)彩色圖版ⅷ之圖5)。術(shù)后患者頭痛嘔吐等癥狀緩解，遺有雙顳外上象限視野缺損，術(shù)后2周接受放化療。
頭顱mri平掃：雙側(cè)枕葉及左側(cè)顳葉海馬區(qū)示散在長(zhǎng)t1(圖1)長(zhǎng)t2(圖2)信號(hào)，
其周可見(jiàn)大片水腫樣信號(hào)。增強(qiáng)掃描可見(jiàn)2枚明顯環(huán)化強(qiáng)化灶(圖3)。
2 討 論
2.1 組織起源與發(fā)病機(jī)理 多發(fā)顱內(nèi)占位，常?？紤]為轉(zhuǎn)移瘤，但原發(fā)性膠質(zhì)瘤也可有類(lèi)似表現(xiàn)[1]。多中心膠質(zhì)瘤非常罕見(jiàn)，由于臨床表現(xiàn)，影像學(xué)及病檢多樣性不同，其發(fā)生率據(jù)報(bào)道約1%～10%[1,2]。brandley[1,3]于1880年第1次報(bào)道了多發(fā)膠質(zhì)瘤病例，1963年batzdorf和malamud將其分為多局灶和多中心膠質(zhì)瘤[4]，以區(qū)別于其他顱內(nèi)腫瘤。與多中心膠質(zhì)瘤不同，多局灶膠質(zhì)瘤通過(guò)既定通路蔓延生長(zhǎng)，或腦脊液血液循環(huán)播散，在局灶形成衛(wèi)星結(jié)節(jié)樣改變[1]。膠質(zhì)母細(xì)胞瘤(who iv)是其常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，本例通過(guò)病檢證實(shí);其次，星形細(xì)胞瘤，室管膜細(xì)胞瘤等亦有相關(guān)報(bào)道。有報(bào)道多中心膠質(zhì)母細(xì)胞瘤占其膠質(zhì)母細(xì)胞瘤的2.4%～4.9%[5]。kyritsis等，對(duì)51例多發(fā)性膠質(zhì)瘤病理切片觀察，其中有31例病檢為膠質(zhì)母細(xì)胞瘤，且多中心膠質(zhì)瘤各瘤結(jié)節(jié)可為相同類(lèi)型或不同類(lèi)型組成[6]。
多中心膠質(zhì)瘤發(fā)病機(jī)理尚不明確，有多種假說(shuō)，但或多或少都存在質(zhì)疑。有學(xué)者認(rèn)為源于膠質(zhì)母細(xì)胞在最初發(fā)育時(shí)突變散播在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中形成，或者身體其他器官的癌細(xì)胞突破血腦屏障，種植在大腦中，其具體入腦途徑及發(fā)病機(jī)理尚不清楚。willis提出“兩階段”假說(shuō)：首先，腫瘤突變過(guò)程發(fā)生在整個(gè)大腦或其廣泛領(lǐng)域，其中一些對(duì)其有抵抗性，而另一些則有傾向性，適于腫瘤生長(zhǎng);其次，在其發(fā)育過(guò)程中，腫瘤可能源于同種或非同種原始細(xì)胞，在不同因素(生化，激素，病毒，寄生蟲(chóng)等)刺激下進(jìn)而形成[1,2,7,8]。迄今尚無(wú)確實(shí)滿意學(xué)說(shuō)解釋其發(fā)病機(jī)理。
2.2 臨床表現(xiàn)與診斷 多中心膠質(zhì)瘤發(fā)病年齡廣泛，但多發(fā)生于中老年人，兒童亦有相關(guān)報(bào)道[2,7,8]。其臨床表現(xiàn)多樣而無(wú)特征性，多取決于腫瘤侵犯部位和速度，臨床表現(xiàn)有局灶神經(jīng)系統(tǒng)癥狀，如感覺(jué)運(yùn)動(dòng)障礙、視野缺損、失語(yǔ)，以及癲癇和顱內(nèi)高壓癥狀等[2]，本例表現(xiàn)為顱內(nèi)高壓及視野缺損。頭顱mri及ct為診斷提供了不可或缺的輔助工具，但與ct相比，mri及增強(qiáng)對(duì)明確其腫瘤數(shù)量、性質(zhì)、侵犯邊界及水腫延伸帶更有優(yōu)勢(shì)。多中心膠質(zhì)瘤主要應(yīng)與顱內(nèi)多發(fā)轉(zhuǎn)移瘤、腦膿腫相鑒別，轉(zhuǎn)移瘤常有原發(fā)病灶存在，且轉(zhuǎn)移瘤多位于頂枕葉皮質(zhì)層或白質(zhì)交界，而多中心膠質(zhì)瘤則位置不定，轉(zhuǎn)移瘤多不規(guī)則環(huán)形強(qiáng)化，而多發(fā)膠質(zhì)瘤在增強(qiáng)可表現(xiàn)單一增強(qiáng)或環(huán)形強(qiáng)化，轉(zhuǎn)移瘤邊界呈多樣性，而多中心膠質(zhì)瘤邊界多不清楚。膿腫壞死多伴有周身病菌原發(fā)灶感染及腦脊液炎性改變，另外，dwi擴(kuò)散加權(quán)常用來(lái)鑒別腫瘤壞死(低信號(hào))和膿腫壞死(高信號(hào))?？傊?，其鑒別診斷在ct、mri上區(qū)分仍存在困難[2]，易誤診，本例最初即誤診為多發(fā)轉(zhuǎn)移瘤，確診金標(biāo)準(zhǔn)仍是病理活檢。多數(shù)學(xué)者認(rèn)為立體定位穿刺活檢對(duì)明確診斷是非常安全可靠的，國(guó)外有報(bào)道致殘率和死亡率均0%[1]。
近來(lái)，新技術(shù)fdgpet可以觀察其腫瘤生物特性及分化代謝之優(yōu)勢(shì)，特別是針對(duì)顱內(nèi)多發(fā)腫瘤的不同代謝方式，并對(duì)其臨床、生物形態(tài)學(xué)及分子生化特性具有潛在的預(yù)見(jiàn)能力[5]。多中心膠質(zhì)瘤的真實(shí)發(fā)生率很可能與現(xiàn)實(shí)報(bào)道不符，特別是與九十年代前比較，其主要原因在于神經(jīng)系統(tǒng)影像學(xué)如mri發(fā)展及普及應(yīng)用。另外，不同學(xué)者依據(jù)其發(fā)病機(jī)理、生長(zhǎng)部位、產(chǎn)生時(shí)間先后、病理特點(diǎn)分級(jí)及預(yù)后好壞等側(cè)重點(diǎn)不同，使得多中心或多局灶膠質(zhì)瘤的診斷和分類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)亦存在多樣性[2,9]。
2.3 治療與預(yù)后 多中心膠質(zhì)母細(xì)胞瘤預(yù)后多不佳，不少國(guó)外學(xué)者認(rèn)為其確診比積極手術(shù)治療對(duì)其延長(zhǎng)患者生命更有意義[1,2,7]。在治療方面的選擇仍存在爭(zhēng)議：以往多拒絕手術(shù)，選擇“姑息治療”，主要原因在于手術(shù)過(guò)多切除腦組織及大量出血可能危及患者生命和出現(xiàn)神經(jīng)功能受損影響其生活質(zhì)量[7]。目前觀點(diǎn)認(rèn)為應(yīng)早期診斷，盡可能多地切除腫瘤，且通過(guò)立體定向顯微外科入路避免損傷功能區(qū)和防止過(guò)多出血，輔以放化療[10]。而國(guó)內(nèi)更傾向于以手術(shù)治療為主，但膠質(zhì)母細(xì)胞瘤不太可能做到真正完全切除，應(yīng)盡量做到多切除腫瘤同時(shí)作內(nèi)外減壓術(shù)[11]?？傊?，多中心膠質(zhì)瘤以中老年多見(jiàn)，發(fā)病機(jī)理不詳，其臨床表現(xiàn)多樣，可依據(jù)影像學(xué)檢查并借助立體定向穿刺活檢提高確診率，選擇適宜手術(shù)結(jié)合放化療的治療方案，以延長(zhǎng)患者生存時(shí)間和提高生活質(zhì)量[1]。
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第3篇：膠質(zhì)母細(xì)胞瘤范文
【關(guān)鍵詞】 腦腫瘤，膠質(zhì)瘤；體層攝 影術(shù)，X線計(jì)算機(jī)
CT圖像上表現(xiàn)為均勻高密度的腦星形膠質(zhì)細(xì)胞瘤不多見(jiàn)，國(guó)內(nèi)文獻(xiàn)只有零星報(bào)道，較少有系統(tǒng)介紹[1]。本文收集1997年3月-2008年12月間經(jīng)手術(shù)病理或臨床、影像追蹤證實(shí)的27例，主要就其CT表現(xiàn)介紹如下。
材料與方法
1.一般資料
本組27例，男8例，女19例。年齡30-70歲，以頭部外傷檢查者7例，以突發(fā)癲癇來(lái)檢查者9例，以頭痛伴肢體無(wú)力來(lái)檢查者11例，病程最短1天，最長(zhǎng)3個(gè)月。
2.檢查方法
使用philips Brilliance 6全身螺旋CT機(jī)或島津SCT-4500TF全身CT機(jī)。使用島津SCT-4500TF全身CT機(jī)掃描12例。常規(guī)10mm層厚/層距，部分5mm層厚/層距。其中2例行增強(qiáng)掃描，用60%泛影葡胺50ml靜脈手推后掃描。使用philips Brilliance 6全身螺旋CT機(jī)掃描15例，9例直接軸掃，6例螺掃后重建。其中3例行增強(qiáng)掃描，50ml碘海醇高壓注射器注入靜脈后螺旋掃描。
結(jié)果
1．CT表現(xiàn)
本組幕上多見(jiàn)，共23例，幕下4例。幕上者分別位于額葉、頂葉、枕葉各7例，基底節(jié)3例，位于大腦白質(zhì)區(qū)20例，灰質(zhì)區(qū)10例。病灶邊緣不清楚者24例，清楚者3例。病灶最大者2.8cm×3.2cm，最小者1.0cm×1.0cm。病灶周邊均無(wú)水腫。12例行增強(qiáng)掃描，4例無(wú)強(qiáng)化，8例輕度至中度均勻強(qiáng)化。
2.手術(shù)病理
19例于一周內(nèi)手術(shù)，2例經(jīng)定向穿刺活檢。病檢結(jié)果：間變性星形細(xì)胞瘤7例，巨細(xì)胞性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤7例，毛細(xì)胞性星形細(xì)胞瘤3例，多形性黃色星形細(xì)胞瘤4例。
3.病例舉例
患者，女，60歲，以突發(fā)癲癇來(lái)診。頭部CT平掃示：左額頂葉白質(zhì)區(qū)見(jiàn)一大小約1.2cm×2.0cm稍高密度影，邊緣不清，質(zhì)地均勻，CT值約47HU，周邊無(wú)水腫影，考慮灰質(zhì)異位或者腦腫瘤（圖1）。臨床經(jīng)脫水對(duì)癥治療，兩周后復(fù)查CT。平掃見(jiàn)左額葉病灶明顯擴(kuò)大，邊緣不清，質(zhì)地不均，局部密度增高（圖2）。手術(shù)見(jiàn)腫瘤呈紫紅色，質(zhì)軟脆，血運(yùn)豐富，邊界不清，無(wú)包膜，分塊切除腫瘤，鏡下全切。病理診斷：巨細(xì)胞性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤（WHO IV級(jí)）。
患者，女，60歲，頭痛一周，伴右下肢無(wú)力。頭部CT平掃示：左尾狀核頭部見(jiàn)一小結(jié)節(jié)影，呈稍高密度，CT值約67HU，邊緣尚清，外緣不整，增強(qiáng)掃描無(wú)強(qiáng)化（圖3，4）。選擇病變?yōu)榘悬c(diǎn)，穿刺搜集約5mmX5mmX10mm組織，見(jiàn)組織呈暗紫紅色，血運(yùn)豐富，冷凍送檢。病理結(jié)果：間變性星形細(xì)胞瘤（WHO III級(jí)）。
討 論
腦膠質(zhì)瘤起源于神經(jīng)間質(zhì)細(xì)胞即膠質(zhì)細(xì)胞，為顱內(nèi)最常見(jiàn)的腫瘤，占全部顱內(nèi)腫瘤的40%。常見(jiàn)的有星形細(xì)胞瘤、少枝膠質(zhì)瘤、室管膜瘤及髓母細(xì)胞瘤等，以前者最常見(jiàn)。該瘤可發(fā)生于任何年齡，但多發(fā)于青年人。成人好發(fā)于幕上，兒童好發(fā)于幕下。腫瘤無(wú)包膜，生長(zhǎng)方式呈浸潤(rùn)性。腫瘤易發(fā)生囊變、壞死、鈣化、出血等。其病理表現(xiàn)因細(xì)胞間變程度，腫瘤血管及退行性變而異。通常CT表現(xiàn)為腦內(nèi)低密度腫塊，邊界不清，形態(tài)不規(guī)則，周?chē)X質(zhì)有水腫，有顯著占位效應(yīng)。而Ⅰ、Ⅱ級(jí)星形細(xì)胞瘤呈浸潤(rùn)性生長(zhǎng)，但與膠質(zhì)間境界清晰，周?chē)苌儆兴[區(qū)。由于腫瘤血管內(nèi)皮細(xì)胞結(jié)合緊密，血腦屏障較為良好，因而不發(fā)生或較少發(fā)生造影劑血管外溢，故無(wú)強(qiáng)化或僅有輕度強(qiáng)化[1，2]。
組織學(xué)上腦膠質(zhì)瘤分4型，即纖維細(xì)胞型，原漿細(xì)胞型，毛發(fā)細(xì)胞型和肥胖細(xì)胞型，在CT和MRI上4型無(wú)明顯區(qū)別。CT及MRI將其分為四級(jí)，I級(jí)為良性，II級(jí)為過(guò)度性，III，IV級(jí)為惡性[2]。
文獻(xiàn)介紹，通過(guò)對(duì)照研究發(fā)現(xiàn)，毛發(fā)細(xì)胞型一般僅表現(xiàn)在I級(jí)，肥胖細(xì)胞型僅表現(xiàn)在II級(jí)以上者，以III，IV級(jí)為多，纖維細(xì)胞型和原漿細(xì)胞型表現(xiàn)在I-IV級(jí)中[2]。據(jù)統(tǒng)計(jì)，I級(jí)者13.3%為混合密度灶，III，IV級(jí)中13.1%為高低等密度灶，其中高密度灶為出血，II級(jí)中多數(shù)為混合密度灶[2]。本組病例所見(jiàn)與此不一，本組病理分級(jí)為III--IV級(jí)，但均為均勻高密度病灶。本組CT顯示的高密度灶病理中未發(fā)現(xiàn)出血灶，多為纖維細(xì)胞。
作者發(fā)現(xiàn)部分膠質(zhì)瘤平掃時(shí)為片狀略高密度影，邊界清晰，周?chē)鸁o(wú)水腫，中等強(qiáng)度強(qiáng)化，此類(lèi)腫瘤易被誤診為腦血管畸型，海綿狀血管瘤。此類(lèi)膠質(zhì)瘤病理改變常為細(xì)胞間變程度低、浸潤(rùn)性小、生長(zhǎng)緩慢，多為Ⅰ、Ⅱ級(jí)星形細(xì)胞瘤[3]。本組CT表現(xiàn)與其相似，但病理分級(jí)均比較高，多為III-IV級(jí)。
本組病例在早期多數(shù)被誤診[1]，分別誤診為腦挫裂傷并血腫、高血壓腦出血、血管畸形、腦灰質(zhì)異位、腦膜瘤等。所以，在日常工作中，遇到上述CT表現(xiàn)應(yīng)想到高密度腦星形膠質(zhì)細(xì)胞瘤可能。
參考文獻(xiàn)
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第4篇：膠質(zhì)母細(xì)胞瘤范文
【關(guān)鍵詞】 腦腫瘤 神經(jīng)膠質(zhì)瘤 腫瘤轉(zhuǎn)移 層粘連蛋白 免疫組織化學(xué)
ABSTRACT: Objective To explore expression patterns of laminin α1、α2、α3、α5 subunit in the human brain glioma. Methods The expression of laminin α1、α2、α3、α5 subunit in 77 brain glioma，8 normal brain tissue and 10 metastatic tumor specimens were analyzed by immunohistochemistry and image analysis technique. Results 1.There were negative expression of laminin α2、α3 subunit and positive expression of laminin α1、α5 subunit in the human brain gliomas， whose positive staining located in tumour cell membrane， plasma. The positive staining intensity was correlated with pathological grade of glioma（P0.05)， but was stronger than expression in metastatic tumor (P
KEY WORDS: brain neoplasms; glioma; neoplasm metastasis; laminin; immunohistochemistry
福建醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào) 2008年7月 第42卷第4期梅文忠等：層黏連蛋白α1、α2、α3、α5亞基在人腦膠質(zhì)瘤中的表達(dá)層黏連蛋白（laminin，LN）是一族具有多種生物學(xué)功能的細(xì)胞外基質(zhì)(extracellular matrix，ECM)糖蛋白，它們參與基底膜構(gòu)建，對(duì)維持基底膜的完整結(jié)構(gòu)起重要作用，還在細(xì)胞黏附、生長(zhǎng)、遷移中扮演著至關(guān)重要的角色[1]。研究表明，某些LN分子在膠質(zhì)瘤細(xì)胞中表達(dá)增高，且與腫瘤病理級(jí)別相關(guān)，參與膠質(zhì)瘤侵襲性生長(zhǎng)而罕見(jiàn)顱外轉(zhuǎn)移行為的調(diào)控[23]，但是以往的研究多是針對(duì)LN蛋白分子或某些LN亞型分子的研究，如LN5，LN8，LN9，LN10/11等。本實(shí)驗(yàn)采用免疫組織化學(xué)SP法檢測(cè)LNα1，α2，α3，α5亞基在不同病理級(jí)別的腦膠質(zhì)瘤中的表達(dá)情況，探討其與人腦膠質(zhì)瘤生物學(xué)行為的關(guān)系。
1 材料和方法
1.1 材料
手術(shù)切除并經(jīng)病理檢查證實(shí)的人腦膠質(zhì)瘤標(biāo)本77例，其中星形細(xì)胞瘤41例、少突膠質(zhì)細(xì)胞瘤7例、混合型膠質(zhì)細(xì)胞瘤10例、室管膜瘤9例、髓母細(xì)胞瘤3例、膠質(zhì)母細(xì)胞瘤7例。77例中，男性49例、女性28例，年齡（35±5.9）歲（3～70歲）。參照2000年WHO神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤分類(lèi)及分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)：Ⅰ級(jí)10例，Ⅱ級(jí)34例，Ⅲ級(jí)23例，Ⅳ級(jí)10例；術(shù)前均未接受放療或化療。取10例經(jīng)病理檢查證實(shí)的非神經(jīng)系統(tǒng)來(lái)源的腦內(nèi)轉(zhuǎn)移瘤標(biāo)本，男性7例，女性3例，年齡（54±2.8）歲（45～72歲）。8例正常腦組織標(biāo)本取自顱腦損傷行內(nèi)減壓術(shù)患者，男性5例、女性3例，年齡（37±4.3）歲（13～61歲）。所有組織標(biāo)本取后立即用10％福爾馬林固定，常規(guī)石蠟包埋，研究時(shí)選取典型蠟塊作2～4 μm連續(xù)切片。
1.2 方法
1.2.1 主要試劑
羊抗人LNα1，α2，α3，α5亞基多克隆抗體(濃縮型)購(gòu)自美國(guó)SantaCruz公司；超敏SP試劑盒購(gòu)自福州Maixin Bio公司。
1.2.2 免疫組織化學(xué)
使用檸檬酸鹽（PH 6.0）高溫高壓修復(fù)法進(jìn)行抗原修復(fù)，免疫組織化學(xué)使用超敏SP法，具體參照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行?？贵w工作濃度（1∶100）。
1.2.3 結(jié)果判斷
定位于腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞質(zhì)及細(xì)胞膜上根據(jù)染色程度及染色細(xì)胞百分率進(jìn)行分析評(píng)分[3]：著色缺如者為0分、淡者為1分、適中者為2分、深者為3分；著色細(xì)胞占細(xì)胞記數(shù)百分率＜5%為0分、5%～25%為1分、26%～50%為2分、＞50%為3分；每張切片著色與著色百分率得分相乘為其最后得分：規(guī)定0～1分者為陰性（-）、2～3分者為弱陽(yáng)性（+）、4～6分者為陽(yáng)性（++）、>6分者為強(qiáng)陽(yáng)性（+++）。
在腦膠質(zhì)瘤血管內(nèi)皮細(xì)胞膜及血管基膜染色陽(yáng)性的指標(biāo)，利用ImagePro Plus 6.0軟件測(cè)定陽(yáng)性染色的血管內(nèi)皮及基膜的平均光密度值（average optical density，AOD）和陽(yáng)性染色的微血管管壁厚度（microvascular wall thickness，MWT）。
1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
應(yīng)用SPSS 11.5軟件對(duì)檢測(cè)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理，采用單因素方差分析、Kendall’s等級(jí)相關(guān)分析檢驗(yàn)方法。P
2 結(jié) 果
2.1 LNα1，α5的表達(dá)
LNα1主要定位在腫瘤細(xì)胞膜上，病理級(jí)別越高染色越強(qiáng)；陽(yáng)性染色的細(xì)胞呈巢狀分布或散在分布，在少數(shù)高級(jí)別膠質(zhì)瘤標(biāo)本中還可見(jiàn)陽(yáng)性染色的瘤細(xì)胞圍繞著血管分布，而在血管內(nèi)皮細(xì)胞及基膜無(wú)染色（表1～2，圖1）。表1 LNα1，LNα5在膠質(zhì)瘤細(xì)胞中的陽(yáng)性表達(dá)強(qiáng)度與病理級(jí)別的關(guān)系（略）表2 LNα5在血管內(nèi)皮及基膜中的陽(yáng)性表達(dá)強(qiáng)度與腦內(nèi)腫瘤惡性程度的關(guān)系（略）
LNα5不僅在所有膠質(zhì)瘤的瘤體及瘤周腫瘤細(xì)胞膜與細(xì)胞質(zhì)上有染色，且病理級(jí)別越高染色越強(qiáng)；同時(shí)，血管內(nèi)皮細(xì)胞及基膜也出現(xiàn)陽(yáng)性染色，表現(xiàn)為靠管腔的一層內(nèi)皮細(xì)胞和基膜呈連續(xù)、完整的陽(yáng)性染色，但染色強(qiáng)度在膠質(zhì)瘤各級(jí)別之間無(wú)明顯差異。然而，LNα5在正常腦組織的血管內(nèi)皮細(xì)胞及基膜無(wú)陽(yáng)性染色，在腦內(nèi)轉(zhuǎn)移瘤的血管內(nèi)皮細(xì)胞及基膜也僅見(jiàn)弱陽(yáng)性染色，但染色基膜呈不連續(xù)，染色強(qiáng)度低于膠質(zhì)瘤組；不過(guò)，膠質(zhì)瘤和轉(zhuǎn)移瘤標(biāo)本血管腔中紅細(xì)胞膜上均可見(jiàn)LNα5強(qiáng)陽(yáng)性染色(圖1，2)。
2.2 LNα2、α3的表達(dá)情況 LNα2、α3亞基在膠質(zhì)瘤細(xì)胞及血管內(nèi)皮細(xì)胞和基膜中均無(wú)陽(yáng)性表達(dá)。
3 討 論
研究發(fā)現(xiàn)，LN能增強(qiáng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞活動(dòng)性，促進(jìn)膠質(zhì)瘤細(xì)胞粘附和遷移，促進(jìn)腫瘤的侵襲[1，3]。陳菊祥等利用含13939種人類(lèi)基因的BioStarH40S型芯片篩選人腦膠質(zhì)母細(xì)胞瘤與侵襲性相關(guān)基因的表達(dá)和功能，結(jié)果發(fā)現(xiàn)層黏連蛋白、血小板衍化生長(zhǎng)因子受體A（PDGFRA）等8條細(xì)胞骨架和細(xì)胞外基質(zhì)基因均在膠質(zhì)母細(xì)胞瘤中顯著上調(diào)[4]。研究也發(fā)現(xiàn)PDGFRA和LN可以促進(jìn)腫瘤新生血管的形成，導(dǎo)致膠質(zhì)母細(xì)胞瘤侵襲性增強(qiáng)[5]。最近，Kawataki等在體外實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)含α3的LN5和含α5的LN10可強(qiáng)烈的促進(jìn)膠質(zhì)瘤細(xì)胞遷移，含α1的LN1作用較弱，含α2的LN2和α4的LN8在體外對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞遷移無(wú)促進(jìn)作用[6]。本研究發(fā)現(xiàn)，LNα1、α5在膠質(zhì)瘤的瘤體及瘤周、瘤細(xì)胞質(zhì)與細(xì)胞膜均有表達(dá)，表明LN可由瘤細(xì)胞合成、組裝、分泌；本研究發(fā)現(xiàn)LNα1、α5在膠質(zhì)瘤細(xì)胞漿膜的表達(dá)強(qiáng)度與病理級(jí)別密切相關(guān)，隨著病理級(jí)別的增高而表達(dá)增強(qiáng)，提示它們可能與瘤細(xì)胞惡性程度有關(guān)，促進(jìn)瘤細(xì)胞之間或瘤細(xì)胞與ECM、血管基膜之間的黏附和遷移。
臨床病理發(fā)現(xiàn)，腦組織雖是身體其他器官原發(fā)癌轉(zhuǎn)移的好發(fā)部位，但顱內(nèi)原發(fā)腫瘤卻很少顱外轉(zhuǎn)移，其原因也被認(rèn)為與LN在腦膠質(zhì)瘤中的分布特征有關(guān)[3]。本研究發(fā)現(xiàn)，LNα5在膠質(zhì)瘤血管內(nèi)皮細(xì)胞和基膜上表達(dá)增高，且LNα5在基膜上的表達(dá)是連續(xù)的、完整的，與之前的文獻(xiàn)報(bào)道基本相符；而在腦內(nèi)轉(zhuǎn)移瘤中見(jiàn)LNα5在血管內(nèi)皮和基膜的表達(dá)較弱，且不連續(xù)、有斷裂。提示LNα5可能影響膠質(zhì)瘤細(xì)胞侵襲血管向顱外轉(zhuǎn)移。
基膜上的LN除了可抑制瘤細(xì)胞穿越血管壁而發(fā)生轉(zhuǎn)移外，還可通過(guò)與瘤細(xì)胞表面存在LN受體（整合素類(lèi)和非整合素類(lèi)）的結(jié)合，誘導(dǎo)瘤細(xì)胞的黏附和遷移[7]。Lugassy等用內(nèi)皮細(xì)胞形成類(lèi)管腔結(jié)構(gòu)并與腫瘤細(xì)胞共培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)，膠質(zhì)瘤細(xì)胞可沿著管腔外表面前行，并包繞在血管基底膜成分LN的外周[8]。提示本研究中的LNα5可能在影響膠質(zhì)瘤顱外轉(zhuǎn)移的同時(shí)，還誘導(dǎo)膠質(zhì)瘤細(xì)胞沿著血管基膜向正常腦組織遷移。此外，在臨床和不同動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中也觀察到腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞還常沿有髓纖維（束內(nèi)、束周及束間）侵襲，研究表明雖然腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞系能特異地粘附到中樞神經(jīng)系統(tǒng)髓磷脂提取物，但比粘附到純化的LN上明顯要慢[9]。
呂德蘭血型糖蛋白（Lu），也稱為基底細(xì)胞黏附分子（BCAM），是表達(dá)于紅細(xì)胞膜上的一種LN受體，屬于免疫球蛋白超家族，研究表明它與LN的高親和力結(jié)合有助于器官發(fā)生、血管形成、紅細(xì)胞生成，研究還表明它在一些疾病和惡性腫瘤中高表達(dá)，并和其它的黏附受體一起涉及到腫瘤的惡性轉(zhuǎn)化和轉(zhuǎn)移[1011]。Kikkawa等研究發(fā)現(xiàn)在ECM蛋白中，僅僅含α5鏈的LN是Lu/BCAM的配體[12]。本研究發(fā)現(xiàn)LNα5除了在血管內(nèi)皮細(xì)胞和基膜表達(dá)外，還在紅細(xì)胞膜上呈陽(yáng)性染色，膠質(zhì)瘤和轉(zhuǎn)移瘤標(biāo)本中紅細(xì)胞膜上染色遠(yuǎn)強(qiáng)于正常腦組織，膠質(zhì)瘤與轉(zhuǎn)移瘤之間染色無(wú)明顯差異。提示高表達(dá)的LNα5結(jié)合到紅細(xì)胞膜受體上，其來(lái)源有可能是內(nèi)皮細(xì)胞合成、分泌的，LNα5與Lu/BCAM相互作用在紅細(xì)胞運(yùn)輸、腫瘤營(yíng)養(yǎng)、血管內(nèi)皮增生/新血管生成等過(guò)程中可能起重要作用。
不過(guò)，要確切地搞清楚是哪些LN亞基在腦膠質(zhì)瘤的那些生物學(xué)行為中起作用？作用如何？分子機(jī)制何在？還需要借助現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)（基因敲除，基因轉(zhuǎn)染、RNAi干擾技術(shù)等）在體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)（黏附、遷移、侵襲實(shí)驗(yàn)）中進(jìn)一步研究。
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第5篇：膠質(zhì)母細(xì)胞瘤范文
[關(guān)鍵詞] 膠質(zhì)瘤；PI3K/AKT/mTOR；靶向治療；抑制劑
[中圖分類(lèi)號(hào)] R739.41 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1673-9701（2016）30-0165-04
膠質(zhì)瘤是一種臨床上常見(jiàn)的顱內(nèi)腫瘤，可占中樞神經(jīng)系統(tǒng)原發(fā)性惡性腫瘤的80%。其中，中間變性膠質(zhì)瘤以及膠質(zhì)母細(xì)胞瘤往往伴隨著較低的治愈率及較高的死亡率[1]。臨床上，膠質(zhì)瘤的治療主要是以外科手術(shù)結(jié)合放療、化療等措施為主，然而該類(lèi)方案的治療效果仍不理想。隨著分子生物學(xué)的發(fā)展，針對(duì)影響膠質(zhì)瘤增殖、轉(zhuǎn)移及遷移相關(guān)信號(hào)韉紀(jì)路的靶向治療成為一種新的治療模式并取得較好的療效[2]。其中，由于其促腫瘤作用，PI3K/AKT/mTOR信號(hào)通路分子靶向治療備受關(guān)注。接下來(lái)，本文著重對(duì)PI3K/AKT/mTOR信號(hào)通路在膠質(zhì)瘤發(fā)生、發(fā)展中的作用及相關(guān)分子靶向治療藥物進(jìn)行綜述。
1 PI3K/AKT/mTOR信號(hào)通路與膠質(zhì)瘤
PI3K/AKT/mTOR信號(hào)通路主要由PI3K、AKT及mTOR三個(gè)關(guān)鍵因子組成。該通路的主要傳導(dǎo)機(jī)制如下：當(dāng)PI3K受到受體酪氨酸激酶、Ras、整合素以及各種生長(zhǎng)因子等多種因子作用而激活時(shí)，可通過(guò)磷酸化肌醇誘導(dǎo)3，4，5-三磷酸磷脂酰肌醇及3，4-二磷酸磷脂酰肌醇的生成[3]；接下來(lái)，激活的Akt可通過(guò)3-磷脂酰肌醇依賴性蛋白激酶1及3-磷脂酰肌醇依賴性蛋白激酶2磷酸化，進(jìn)而將信號(hào)傳遞給mTOR[4]；而兩種復(fù)合體形態(tài)的mTOR（雷帕霉素敏感mTORC1，對(duì)雷帕霉素不敏感mTORC2）可進(jìn)而對(duì)下游相關(guān)mRNA的轉(zhuǎn)錄進(jìn)行調(diào)節(jié)，最終影響細(xì)胞增殖、凋亡、分化、遷移等多種生理過(guò)程[5]。
近年來(lái)，PI3K/AKT/mTOR信號(hào)通路在腫瘤發(fā)生及發(fā)展中作用的研究多有報(bào)道[6]。在腫瘤細(xì)胞中，AKT可以通過(guò)磷脂酰肌醇3-激酶磷酸化轉(zhuǎn)變?yōu)閜AKT，而pAKT可進(jìn)一步通過(guò)磷酸化激活caspase 9、Bad、FOXO、GSK-3b及IKK等因子促進(jìn)細(xì)胞增殖，抑制細(xì)胞凋亡。同時(shí)，pAKT還可以緩解TSC1/2和Rheb對(duì)mTOR的抑制，而激活的mTOR與RAPTOR結(jié)合后可以通過(guò)mTORC1磷酸化激活核糖體S6激酶，進(jìn)而干預(yù)5’-TOP結(jié)構(gòu)的mRNA翻譯，影響細(xì)胞的增殖。同時(shí)，pmTOR還可以與RICTOR結(jié)合并通過(guò)mTORC2磷酸化激活A(yù)KT，進(jìn)一步促進(jìn)細(xì)胞增殖。因此，PI3K/AKT/mTOR信號(hào)通路的激活表現(xiàn)出明顯的促腫瘤作用[7]。
至今為止，大量研究證實(shí)PI3K/AKT/mTOR信號(hào)通路可以促進(jìn)膠質(zhì)瘤的發(fā)生與發(fā)展。據(jù)報(bào)道，PI3K的陽(yáng)性表達(dá)率與膠質(zhì)瘤的分級(jí)、分期及KPS評(píng)分密切相關(guān)，還與膠質(zhì)瘤較差的預(yù)后明顯相關(guān)[8，9]；AKT的表達(dá)與膠質(zhì)瘤的惡性程度正相關(guān)，抑制AKT可以有效地抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞的增殖及侵襲能力[10，11]；此外，mTOR對(duì)細(xì)胞周期有著明顯的調(diào)控作用，其高表達(dá)不僅會(huì)加速腫瘤細(xì)胞的增殖，還會(huì)抑制腫瘤細(xì)胞發(fā)生自噬，最終促進(jìn)膠質(zhì)瘤的發(fā)生與進(jìn)展[12]。
2 PI3K /AKT/mTOR信號(hào)通路抑制劑
2.1 PI3K抑制劑
PI3K抑制劑最初主要以LY294002及渥曼青霉素為主。大量研究證實(shí)該兩種物質(zhì)不僅具有明顯的抗瘤作用，還體現(xiàn)出對(duì)化療和放療敏感性的增強(qiáng)上。研究發(fā)現(xiàn)，LY294002可以通過(guò)促進(jìn)p-AKT及Bcl-2的表達(dá)降低膠質(zhì)瘤對(duì)替莫唑胺的耐藥性，并可以通過(guò)下調(diào)PI3K/AKT通路增加替莫唑胺對(duì)膠質(zhì)瘤的細(xì)胞毒性，因而LY294002合并替莫唑胺可以有效地抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞的增殖[13]。然而，由于其較短的半衰期，LY294002單獨(dú)使用往往不能有效地抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)[14]。同時(shí)，放療誘導(dǎo)的端粒酶活性上調(diào)可以逃避LY294002對(duì)PI3K的抑制，說(shuō)明在膠質(zhì)瘤放療時(shí)還需注意對(duì)端粒酶活性的抑制[15]。對(duì)于渥曼青霉素，研究證實(shí)該藥物可以通過(guò)抑制PI3K有效地阻礙膠質(zhì)瘤的發(fā)展，并增強(qiáng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞對(duì)放療的敏感性[16]。然而，渥曼青霉素因毒副作用大、水溶性差及選擇性低等特征限制了其在臨床上的應(yīng)用[17，18]。隨著分子生物學(xué)的發(fā)展，許多新型的PI3K抑制劑逐漸顯露并應(yīng)用于膠質(zhì)瘤的臨床研究中。作為渥曼青霉素的一種衍生物，PX-866可以明顯抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞體外的侵襲力，而動(dòng)物模型中的研究發(fā)現(xiàn)PX-866可以有效地抑制膠質(zhì)瘤的生長(zhǎng)并延長(zhǎng)中位生存期[19]。BKM120是一種可以通過(guò)血腦屏障的PI3K抑制劑，表現(xiàn)出對(duì)腫瘤增殖抑制以及促進(jìn)凋亡的作用。研究證實(shí)，BKM120可以劑量依賴性地抑制小鼠體內(nèi)膠質(zhì)瘤的生長(zhǎng)，并提高生存期[20]；I期臨床試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)患者可以耐受BKM120聯(lián)合貝伐單抗的治療，該方案將進(jìn)入Ⅱ期臨床試驗(yàn)階段。此外，GDC-0032、BYL719及INK1117等一系列新型的PI3K抑制劑逐漸顯現(xiàn)，并有望成為高穩(wěn)定性、低毒副作用的抗癌藥物。
2.2 AKT抑制劑
哌立福新和MK-2206是最常用的AKT抑制劑，均已進(jìn)入Ⅱ期臨床試驗(yàn)階段。在細(xì)胞中，哌立福新可以有效地通過(guò)阻礙AKT在細(xì)胞膜上的易位抑制AKT磷酸化。研究發(fā)現(xiàn)，哌立福新聯(lián)合mTOR抑制劑西羅莫司（CCI-779）可以有效地抑制小鼠體內(nèi)膠質(zhì)瘤的生長(zhǎng)，并誘導(dǎo)凋亡；哌立福新聯(lián)合替莫唑胺表現(xiàn)出較強(qiáng)的抗腫瘤活性，但未能提高膠質(zhì)瘤細(xì)胞對(duì)放療的敏感性。然而，較大的分子量使哌立福新不易通過(guò)血腦屏障，且其使用時(shí)往往伴有嚴(yán)重的胃腸道反應(yīng)，因而限制了其臨床應(yīng)用[20]。同樣作為AKT抑制劑，MK-2206表現(xiàn)出較好的抗腫瘤作用。據(jù)報(bào)道，MK-2206可以誘導(dǎo)膠質(zhì)瘤LN-229和T98G細(xì)胞株自噬；MK-2206聯(lián)合吉非替尼可以促進(jìn)小鼠體內(nèi)膠質(zhì)瘤的自噬與凋亡。鑒于AKT在PI3K/AKT/mTOR信號(hào)通路中既可以接受上游信號(hào)，也可以調(diào)控下游底物，AKT抑制劑在應(yīng)用時(shí)建議與其他抑制劑聯(lián)合使用，以發(fā)揮更理想的抗腫瘤效果。
2.3 mTOR抑制劑
至今為止，大量的研究證實(shí)mTOR與腫瘤的增殖、凋亡以及耐藥性密切相關(guān)，因而mTOR抑制劑成為腫瘤靶向治療的熱點(diǎn)之一。鑒于PTEN缺失膠質(zhì)瘤對(duì)mTOR抑制劑更為敏感，mTOR抑制劑在PTEN高頻率異常的情況下表現(xiàn)出更好的前景[6]。根據(jù)mTOR的兩種形態(tài)，研究較多的mTOR抑制劑主要包括mTORC1和mTORC1/2抑制劑。目前，研究較多的mTORC1抑制劑主要為雷帕霉素及相關(guān)類(lèi)似物（如西羅莫司、依維莫司及AP23573等）。臨床上，雷帕霉素是移植時(shí)常用的免疫抑制劑，而依維莫司及西羅莫司多用于抗腫瘤的治療并已進(jìn)入臨床試驗(yàn)階段。據(jù)報(bào)道，雷帕霉素可以有效地阻滯細(xì)胞周期于G1期，抑制星形細(xì)胞膠質(zhì)瘤的增殖，并誘導(dǎo)其凋亡及自噬；西羅莫司可以有效地抑制對(duì)雷帕霉素耐藥膠質(zhì)瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)；依維莫司在膠質(zhì)瘤細(xì)胞和動(dòng)物模型中均表現(xiàn)出了較好的抗腫瘤作用。雖然大量研究表明這些藥物在臨床治療中表現(xiàn)出較好的耐受性，但單一藥物的干預(yù)往往無(wú)法有效地治療惡性膠質(zhì)瘤。研究證實(shí)，西羅莫司單一治療復(fù)發(fā)性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤表現(xiàn)出較低的無(wú)進(jìn)展生存期及中位生存期[21]；相比單用西羅莫司，西羅莫司聯(lián)合細(xì)胞毒藥物在膠質(zhì)瘤的治療中表現(xiàn)出更好的效果；依維莫司聯(lián)合替莫唑胺及放療治療多形性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤患者表現(xiàn)出較好的耐受性以及較長(zhǎng)的中位生存期；依維莫司聯(lián)合替莫唑胺、貝伐單抗及放療治療惡性膠質(zhì)瘤的有效率可達(dá)61%。然而，還有報(bào)道稱雖然西羅莫司聯(lián)合放可以明顯提高膠質(zhì)瘤小鼠的生存期，但由于對(duì)免疫系統(tǒng)的抑制，該方案會(huì)提高膠質(zhì)母細(xì)胞瘤患者感染的風(fēng)險(xiǎn)；西羅莫司聯(lián)合索拉非尼治療膠質(zhì)瘤表現(xiàn)出血小板減少的副作用。此外，一些交叉信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路及反饋回路的干擾也限制了這些藥物的臨床應(yīng)用。另一方面，mTORC1/2雙重抑制劑主要為一些小分子的ATP競(jìng)爭(zhēng)抑制劑，如Ku0063794、pp242、AZD8055、AZD2014及Torin等。除對(duì)mTORC1的抑制，mTORC1/2抑制劑還可以通過(guò)干預(yù)AKT磷酸化抑制mTORC2。據(jù)報(bào)道，Ku0063794可以通過(guò)抑制AKT磷酸化誘導(dǎo)膠質(zhì)瘤自噬[22]；pp242可以誘導(dǎo)膠質(zhì)母細(xì)胞瘤發(fā)生自噬；I期臨床試驗(yàn)表明AZD8055可以通過(guò)阻滯細(xì)胞周期于G1期抑制腫瘤細(xì)胞的增殖；小鼠體內(nèi)模型實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)AZD2014可以增強(qiáng)膠質(zhì)母細(xì)胞瘤對(duì)放療的敏感性，進(jìn)而延長(zhǎng)生存期。
3 PI3K/mTOR 雙重抑制劑
鑒于mTOR相關(guān)抑制劑臨床活性的限制主要?dú)w結(jié)于mTOR-p70S6K-PI3K反饋回路，因而同時(shí)作用于PI3K及mTOR抑制劑的開(kāi)發(fā)展現(xiàn)出更為遠(yuǎn)大的前景。通過(guò)大量的研究，人們發(fā)現(xiàn)許多PI3K/mTOR雙重抑制劑，并表現(xiàn)出較好的抗腫瘤作用，其中包括PI-103、SF-1126、NVP-BEZ235及XL765等。研究發(fā)現(xiàn)，PI-103對(duì)體內(nèi)及體外膠質(zhì)瘤模型均表現(xiàn)出較好的抑制效果；低濃度的PI-103可以通過(guò)阻滯細(xì)胞周期于G0-G1期有效地抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞的增殖[23]；PI-103可以有效地抑制膠質(zhì)瘤在體內(nèi)模型中的生長(zhǎng)，并未表現(xiàn)對(duì)細(xì)胞的明顯毒性。同時(shí)，SF-1126能夠明顯抑制動(dòng)物模型中膠質(zhì)瘤細(xì)胞株U87MG的生長(zhǎng)[24]；XL765 能夠明顯減少腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)活性，與替莫唑胺聯(lián)合后表現(xiàn)出出色的抗瘤能力[25]。再者，體內(nèi)及體外試驗(yàn)均說(shuō)明NVP-BEZ235可以增強(qiáng)膠質(zhì)瘤對(duì)放療的敏感性，促進(jìn)自噬，下調(diào)內(nèi)皮生長(zhǎng)因子的表達(dá)，防止血管生成，進(jìn)而延長(zhǎng)患瘤動(dòng)物的生存期。此外，通過(guò)對(duì)細(xì)胞膜上PIP3形成的抑制，XL765能夠阻礙腫瘤細(xì)胞中AKT、p70S6K和S6的磷酸化，最終抑制腫瘤生長(zhǎng)；與替莫唑胺相比，XL765干預(yù)后異種移植模型表現(xiàn)出更長(zhǎng)的生存期。雖然這些抑制劑表現(xiàn)出較好的抗腫瘤作用，其應(yīng)用仍需要進(jìn)一步臨床試驗(yàn)的證實(shí)。
4 小結(jié)
近年來(lái)，隨著抑瘤靶點(diǎn)的不斷發(fā)現(xiàn)，分子靶向治療得到飛速的發(fā)展。作為腫瘤發(fā)生與發(fā)展重要的信號(hào)傳導(dǎo)通路，特異性的PI3K/AKT/mTOR通路抑制劑成為膠質(zhì)瘤治療的新方案。然而，PI3K/AKT/mTOR通路靶向抑制劑在臨床應(yīng)用時(shí)同樣存在藥物耐受、毒副作用及個(gè)體差異等問(wèn)題。因此，在保證該通路抑制劑臨床抗瘤療效的前提下，避免不良反應(yīng)的發(fā)生成為未來(lái)研究的主要發(fā)展方向。同時(shí)，個(gè)性化的靶向藥物之間以及與傳統(tǒng)治療手段的聯(lián)合應(yīng)用成為有效增加抗腫瘤效果、降低不良反應(yīng)的重要手段。隨著基因靶向治療的發(fā)展，腦膠質(zhì)瘤臨床治療方向?qū)⒂型a(chǎn)生更大的突破。
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第6篇：膠質(zhì)母細(xì)胞瘤范文
【摘要】 目的 探討細(xì)胞粘附分子CD44、細(xì)胞增值核抗原Ki67在侵襲性垂體腺瘤中的表達(dá)及意義并探討二者之間的關(guān)系。方法 用免疫組化法檢測(cè)CD44s、CD44v5、Ki67在20例侵襲性垂體腺瘤和18例非侵襲性垂體腺瘤中的表達(dá)。結(jié)果 CD44s 和Ki67在侵襲性垂體腺瘤組中表達(dá)高于非侵襲性垂體腺瘤組(P0.05)。結(jié)論 CD44s和Ki67與垂體腺瘤的侵襲性生長(zhǎng)行為有關(guān)，二者協(xié)同作用，在侵襲性垂體腺瘤的發(fā)生、發(fā)展中起重要作用，可作為侵襲性垂體腺瘤診斷和判斷預(yù)后的重要生物學(xué)指標(biāo)。
【關(guān)鍵詞】 侵襲性垂體腺瘤；非侵襲性垂體腺瘤；CD44s；CD44v5；Ki67
Expression and Relationship between CD44 and Ki67 in Invasive Pituitary Adenoma
Key words：Invasive pituitary adenoma；Noninvasive pituitary adenoma；CD44s；CD44v5；Ki67
CD44是一種細(xì)胞表面糖蛋白，參與細(xì)胞與細(xì)胞、細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）之間的特異性粘附，在腫瘤細(xì)胞的侵襲性生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移過(guò)程中發(fā)揮重要作用。Ki67是一種與細(xì)胞增殖相關(guān)的核抗原，是近年來(lái)研究較為廣泛的細(xì)胞增生的標(biāo)記。細(xì)胞的增殖與腫瘤的發(fā)生、浸潤(rùn)、種植與轉(zhuǎn)移過(guò)程相關(guān)，評(píng)價(jià)細(xì)胞的增殖狀態(tài)對(duì)研究腫瘤的生物學(xué)行為，判斷其危害性具有重要意義。
本文對(duì)侵襲性垂體腺瘤中CD44及Ki67的表達(dá)進(jìn)行研究，以探討這兩種蛋白在侵襲性垂體腺瘤生長(zhǎng)中的意義及二者之間的相關(guān)性。
1 材料與方法
1.1 材料 標(biāo)本取自2001～2005年華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬協(xié)和醫(yī)院神經(jīng)外科手術(shù)切除并經(jīng)病理學(xué)證實(shí)的垂體腺瘤標(biāo)本38例。男21例，女17例。年齡23～71歲，平均年齡39歲。依據(jù)內(nèi)分泌學(xué)檢查：非功能腺瘤23例，生長(zhǎng)激素腺瘤9例，泌乳素腺瘤5例，ACTH腺瘤1例。所有標(biāo)本均有完整臨床資料并依據(jù)Wilson改良Hardy分類(lèi)系統(tǒng)分級(jí)分期標(biāo)準(zhǔn)分組［1］：侵襲性垂體腺瘤組20例，非侵襲性垂體腺瘤組18例。
1.2 試劑和方法
1.2.1 試劑來(lái)源 CD44s、CD44v5、Ki67單克隆抗體及即用型鏈霉菌抗生物素蛋白過(guò)氧化酶（SP）免疫組化染色超敏試劑盒，DAB顯色試劑盒均購(gòu)自福建邁新生物工程技術(shù)公司，均為工作液。
1.2.2 免疫組化染色 標(biāo)本經(jīng)10%甲醛固定，石蠟包埋，5μm厚連續(xù)切片，常規(guī)脫蠟和水化后，分別用過(guò)氧化氫酶和動(dòng)物血清處理10min。與CD44s、CD44v5、Ki67單克隆抗體4℃過(guò)夜。二抗溫育20min，DAB顯色5min，蘇木素襯染，各步驟間均以PBS洗片。用已知陽(yáng)性片作陽(yáng)性對(duì)照，以PBS代替一抗作空白對(duì)照， HE染色作組織學(xué)參照。
1.2.3 結(jié)果判斷 CD44s、CD44v5陽(yáng)性細(xì)胞均定位于細(xì)胞膜，表現(xiàn)為細(xì)胞膜呈黃色或棕黃色，部分細(xì)胞漿染色。每張切片均在×400顯微鏡下觀察，連續(xù)觀察5個(gè)高倍視野，各記數(shù)100個(gè)細(xì)胞取其平均值，以百分?jǐn)?shù)表示，陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)>30%定為強(qiáng)陽(yáng)性，10%～30%定為弱陽(yáng)性，
1.2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用卡方檢驗(yàn)及Pearson相關(guān)檢驗(yàn)，P
2 結(jié)果
2.1 CD44s、CD44v5在垂體腺瘤中的表達(dá)
侵襲性垂體腺瘤中，CD44s陽(yáng)性細(xì)胞染色較深，陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)多且集中。而非侵襲性垂體腺瘤中陽(yáng)性細(xì)胞染色淺，陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)少且分散，見(jiàn)圖1。CD44v5 在各組中陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)均較少，染色淺，見(jiàn)圖2。侵襲性垂體腺瘤組中CD44s陽(yáng)性15例（75%），CD44v5陽(yáng)性7例（35%）。非侵襲性垂體腺瘤組CD44s陽(yáng)性5例（27.8%），CD44v5陽(yáng)性4例（22.2%）。兩組之間CD44s蛋白表達(dá)具有顯著性差異（χ2=8.474，P0.05），見(jiàn)表1。
2.2 Ki67抗原在垂體腺瘤中的表達(dá)
Ki67抗原陽(yáng)性細(xì)胞定位于細(xì)胞核，表現(xiàn)為細(xì)胞核呈黃色或棕黃色，見(jiàn)圖3。Ki67抗原在垂體腺瘤中的表達(dá)見(jiàn)表1，兩組之間具有顯著性差異（χ2=8.657，P
2.3 CD44s和Ki67在垂體腺瘤中表達(dá)的相關(guān)性
CD44s蛋白陽(yáng)性表達(dá)的標(biāo)本中，有17例Ki67陽(yáng)性，CD44s蛋白陰性表達(dá)的標(biāo)本中，有11例Ki67陰性，CD44s強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)的標(biāo)本中Ki67也多呈強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)（9/11，81.8%），二者具有顯著正相關(guān)（r＝0.473，P
3 討論
垂體腺瘤是顱內(nèi)常見(jiàn)的一種良性腫瘤，因部分腫瘤生長(zhǎng)突破包膜，侵襲鄰近組織，有學(xué)者將這部分腫瘤稱為侵襲性垂體腺瘤，其危害性主要在于對(duì)周?chē)Y(jié)構(gòu)的侵蝕，手術(shù)不易全切，術(shù)后易復(fù)發(fā)。侵襲性垂體腺瘤主要根據(jù)臨床及手術(shù)中所見(jiàn)判斷，尚缺乏統(tǒng)一有效的診斷標(biāo)準(zhǔn)。本研究采用的是目前比較公認(rèn)的Wilson改良Hardy分類(lèi)系統(tǒng)分級(jí)分期標(biāo)準(zhǔn)，3級(jí)和4級(jí)是侵襲性垂體瘤［1］。
腫瘤侵襲性生長(zhǎng)及轉(zhuǎn)移的過(guò)程中，腫瘤細(xì)胞首先需從腫瘤基團(tuán)分離并與細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）粘附，在這一過(guò)程中，細(xì)胞粘附分子發(fā)揮著重要的作用［3］。CD44作為粘附分子家族中的一員，介導(dǎo)細(xì)胞與細(xì)胞、細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)間的粘附，是細(xì)胞外基質(zhì)成分透明質(zhì)酸鹽的主要受體。根據(jù)CD44蛋白外顯子表達(dá)方式的不同分為標(biāo)準(zhǔn)型CD44（CD44s）和變異型CD44（CD44v）兩種類(lèi)型［4］，對(duì)于它們?cè)谀[瘤中所起作用有不同的觀點(diǎn)。熊正文等［5］檢測(cè)正常腦組織及顱內(nèi)轉(zhuǎn)移瘤和膠質(zhì)母細(xì)胞瘤中CD44s和CD44v6蛋白的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)正常腦組織中CD44s和CD44v6均為陰性，而CD44s在腦膠質(zhì)母細(xì)胞瘤和顱內(nèi)轉(zhuǎn)移瘤中呈高表達(dá)，CD44v6只在顱內(nèi)轉(zhuǎn)移瘤中表達(dá)，在腦膠質(zhì)母細(xì)胞瘤中不表達(dá)。由此認(rèn)為CD44s與腫瘤的侵襲行為有關(guān)，而CD44v6則與腫瘤的轉(zhuǎn)移相關(guān)。本試驗(yàn)研究結(jié)果也表明，CD44s在侵襲性和非侵襲性垂體腺瘤中的表達(dá)具有顯著性差異（P
腫瘤的侵襲性生長(zhǎng)還與腫瘤細(xì)胞的增殖活性有關(guān)，生長(zhǎng)快的腫瘤具有比較強(qiáng)的侵襲性。細(xì)胞增殖核抗原Ki67標(biāo)記指數(shù)能準(zhǔn)確、可靠的評(píng)價(jià)細(xì)胞的增殖活性，是一種較理想、獨(dú)立的生物標(biāo)志物。Mastronardi等［6］研究垂體腺瘤中Ki67抗原的表達(dá)，認(rèn)為在侵襲性垂體腺瘤中的Ki67標(biāo)記指數(shù)明顯高于非侵襲性垂體腺瘤，并提出將Ki67標(biāo)記指數(shù)3.5%作為區(qū)分侵襲性和非侵襲性垂體腺瘤的標(biāo)準(zhǔn)。Ekramullah等［7］也認(rèn)為高增殖能力的垂體腺瘤侵襲力強(qiáng)。我們分析38例垂體腺瘤中Ki67抗原的表達(dá)，也得出同樣的結(jié)論：Ki67抗原在侵襲性垂體腺瘤中的表達(dá)明顯高于非侵襲性垂體腺瘤，且有顯著性差異，說(shuō)明Ki67抗原標(biāo)記可以反應(yīng)垂體腺瘤的生長(zhǎng)速度及侵襲性，可以作為垂體腺瘤診斷及判斷預(yù)后的有價(jià)值的標(biāo)記物［8］。
腫瘤細(xì)胞粘附性和細(xì)胞增殖活性與腫瘤侵襲性生長(zhǎng)之間是否具有協(xié)同作用，尚未見(jiàn)文獻(xiàn)報(bào)道。本試驗(yàn)中，CD44s和Ki67陽(yáng)性表達(dá)具有顯著正相關(guān)（r＝0.473，P
綜上所述，我們認(rèn)為垂體腺瘤侵襲性生長(zhǎng)與腫瘤細(xì)胞的粘附及增值活性密切相關(guān)。因此，降低腫瘤細(xì)胞的粘附及增值活性也可降低腫瘤的侵襲性。同時(shí)，聯(lián)合檢測(cè)Ki67和CD44s則對(duì)提高侵襲性垂體腺瘤診斷的準(zhǔn)確性及判斷預(yù)后具有重要意義。
【參考文獻(xiàn)】
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第7篇：膠質(zhì)母細(xì)胞瘤范文
關(guān)鍵詞： 惡性腦膠質(zhì)瘤;ΔNp73;免疫組織化學(xué);預(yù)后
p73基因是近年發(fā)現(xiàn)的新的腫瘤相關(guān)基因[1]，因其基因、蛋白結(jié)構(gòu)及功能與p53 基因具有相似性,被認(rèn)為是p53基因家族抑癌基因的新成員[2]。ΔNp73是p73基因最常見(jiàn)的表達(dá)產(chǎn)物之一，在多數(shù)腫瘤組織中呈現(xiàn)高表達(dá)，如神經(jīng)母細(xì)胞瘤、乳腺癌等[34]，表現(xiàn)出癌基因的作用，被認(rèn)為與腫瘤的發(fā)生發(fā)展有關(guān)。 ΔNp73和惡性腦膠質(zhì)瘤有無(wú)關(guān)聯(lián)性，能否作為預(yù)測(cè)5年生存率的一項(xiàng)新指標(biāo)，目前報(bào)道很少。
1 材料與方法
1.1 一般資料 我院1999—2003年收治的94例惡性腦膠質(zhì)瘤患者，隨訪術(shù)后5年生存情況，由病理醫(yī)師按WHO標(biāo)準(zhǔn)重新復(fù)核分級(jí)，其中多形性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤Ⅳ級(jí)12例，退變型星形細(xì)胞瘤Ⅲ級(jí)44例，膠質(zhì)瘤Ⅱ級(jí)27例。
1.2 主要試劑 ΔNp73購(gòu)自美國(guó)Calbiochem公司，SP試劑盒(中國(guó)福州邁新公司)。
1.3 方法 采用免疫組織化學(xué)SP法，切片常規(guī)脫蠟, 梯度乙醇水化, 抗原修復(fù), 雙氧水去除非特異染色10 min, 加入一抗, 4℃冰箱過(guò)夜。滴加生物素標(biāo)記二抗,室溫孵育15 min。DAB顯色。蘇木素復(fù)染、脫色、封片、照相。陰性對(duì)照用PBS代替一抗。甲醛固定的石蠟組織塊,連續(xù)4 μm 切片后行HE染色。
1.4 結(jié)果判定 陽(yáng)性判斷標(biāo)準(zhǔn)參照文獻(xiàn)報(bào)道[2],ΔNp73陽(yáng)性細(xì)胞顆粒位于細(xì)胞漿，在顯微鏡下隨機(jī)選5個(gè)高倍視野(200×)，每個(gè)高倍視野隨機(jī)選100個(gè)細(xì)胞來(lái)計(jì)數(shù)陽(yáng)性細(xì)胞,取其平均值。陽(yáng)性細(xì)胞率<10%記為陰性,陽(yáng)性細(xì)胞率10%～25%記為弱陽(yáng)性(+)，>25%～50%記為陽(yáng)性(++)，>50%記為強(qiáng)陽(yáng)性(+++)。
1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 運(yùn)用SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2 結(jié)果
2.1 ΔNp73在惡性腦膠質(zhì)瘤組織中的表達(dá)與5年生存率之間的關(guān)系 見(jiàn)表1。表1 ΔNp73在惡性腦膠質(zhì)瘤組織中的表達(dá)與5年生存率之間的關(guān)系注：χ2=5.246，P=0.035
2.2 ΔNp73在惡性腦膠質(zhì)瘤組織中的表達(dá)與臨床病理分級(jí)的關(guān)系 見(jiàn)表2。表2 ΔNp73在惡性腦膠質(zhì)瘤組織中的表達(dá)與臨床病理分級(jí)的關(guān)系注：χ2=2.361，P=0.394
2.3 ΔNp73在乳腺癌中表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移之間的關(guān)系 見(jiàn)表3。表3 ΔNp73在乳腺癌中表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移之間的關(guān)系淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況注：χ2=12.724，P=0.001
3 討論
腦膠質(zhì)瘤是起源于神經(jīng)外胚層細(xì)胞多種腫瘤的總稱[5]，其中惡性膠質(zhì)瘤在原發(fā)性腦瘤中占35%～45%。根據(jù) WHO 1997年病理分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)，惡性膠質(zhì)瘤主要包括WHOⅡ級(jí)膠質(zhì)瘤、退變型星形細(xì)胞瘤Ⅲ級(jí)和多形性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤 Ⅳ級(jí)。惡性膠質(zhì)瘤常呈浸潤(rùn)性生長(zhǎng)[6]，且多處于腦部重要結(jié)構(gòu)，手術(shù)無(wú)法做到徹底切除，總體預(yù)后極差[7]。對(duì)人類(lèi)的健康構(gòu)成了極大的威脅，但其病因和發(fā)病機(jī)制還不清楚[8]。
本研究結(jié)果表明，ΔNP73在生存期>5年的惡性腦膠質(zhì)瘤患者中陽(yáng)性表達(dá)率，與生存期≤5年的陽(yáng)性表達(dá)率相比，兩者之間存在顯著性差異(P<0.05)，提示ΔNp73基因的陽(yáng)性表達(dá)是影響患者預(yù)后的因子。
ΔNP73在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者中陽(yáng)性率與無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者中陽(yáng)性率之間存在差異(P<0.05)，表明ΔNp73的過(guò)表達(dá)與腦膠質(zhì)瘤的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)，可以認(rèn)為它在腦膠質(zhì)瘤患者的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移過(guò)程中起某種作用。但通過(guò)那些途徑對(duì)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移起作用，有待進(jìn)一步研究。
在低級(jí)別及中、高級(jí)別的腦膠質(zhì)瘤中，ΔNp73的陽(yáng)性表達(dá)率之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，表明ΔNp73過(guò)表達(dá)與乳腺癌病理分級(jí)無(wú)關(guān)。
本實(shí)驗(yàn)表明，ΔNp73在腦膠質(zhì)瘤組織中陽(yáng)性表達(dá)的患者，總體預(yù)后較陰性表達(dá)的患者差，且ΔNp73的表達(dá)程度與淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移是公認(rèn)的預(yù)后指標(biāo)，因此ΔNp73的陽(yáng)性表達(dá)程度可作為腦膠質(zhì)瘤患者預(yù)后評(píng)估的一項(xiàng)重要指標(biāo)，但其作用的詳細(xì)機(jī)制還需進(jìn)一步研究。
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第8篇：膠質(zhì)母細(xì)胞瘤范文
【關(guān)鍵詞】質(zhì)子磁共振波譜;顱內(nèi)腫瘤;多體素;鑒別診斷
Comparative study of high-grade gliomas and brain metasmses with multivoxel proton magnetic resonance spectroscopy
WANG Yan-bing,XU Rui,ZHANG Tong.Department of Radiology,The People,s Hospital of Rizhao,Shandong 276826,China
【Abstract】 Objective To investigate the value in MR spectrum in differentialdiagnosis between high grade gliomas and metastases.Methods 30 cases of patients who confirmed by histopathologic findings or clinical follow-up were collected.Using a GE Signa EXCITE HD 3.0T super conduct MR unit,all the cases of patients were performed conventional MR scan and mutlti-voxel with 2-D mutlti-voxel PRESS 144 ms.Functool software was used for post-processing of spectrum.The ratios of NAA/Cr,NAA/Cho,Cho/Cr were measured in the solid part of masses,circum of tumors and contralateral parenchyma respectively.The result was used as the statistical method by SPSS13.0 software.Results In the solid part of masses,there were significant differences between high grade gliomas and metastases in the ratios of Cho/NAA(P
【Key words】
1H-magnetic resonance spectroscopy; Gliomas; Multivoxel; Differential diagnosis
高級(jí)別膠質(zhì)瘤和腦轉(zhuǎn)移瘤是顱內(nèi)較常見(jiàn)的腦腫瘤,CT和常規(guī)MRI是檢查二者的主要方法,但對(duì)于二者的鑒別診斷有一定的難度,尤其對(duì)于轉(zhuǎn)移瘤單發(fā)或膠質(zhì)瘤多發(fā)的患者就更難以鑒別。核磁共振波譜(magnetic resonance spectroscopy,MRS)是一種利用磁共振化學(xué)位移現(xiàn)象來(lái)測(cè)定人體內(nèi)部器官及組織代謝、生理生化改變的定量分析方法[1],可用于觀察顱內(nèi)腫瘤的生化和代謝物的變化。本文通過(guò)3.0T MR儀進(jìn)行多體素1H-MRS分析高級(jí)別腦膠質(zhì)瘤和轉(zhuǎn)移瘤瘤體及瘤周代謝物的成分及變化,探討多體素1H-MRS在高級(jí)別腦膠質(zhì)瘤與腦轉(zhuǎn)移瘤中診斷及鑒別診斷的臨床應(yīng)用價(jià)值。
1 資料與方法
1.1臨床資料 選取青島市立醫(yī)院及日照市人民醫(yī)院自2006年8月至2009年12月臨床資料齊全、經(jīng)手術(shù)病理或臨床確診的30例腦腫瘤患者,其中高級(jí)別膠質(zhì)瘤患者17例(參照WHO 2007年分級(jí)標(biāo)準(zhǔn),間變型星形細(xì)胞瘤6例,膠質(zhì)母細(xì)胞瘤9例,髓母細(xì)胞瘤1例,大腦膠質(zhì)瘤病1例),男11例,女6例,年齡35~69歲,平均46.2歲;腦轉(zhuǎn)移瘤患者13例,年齡41~76歲,平均59.5歲,其中肺癌轉(zhuǎn)移9例,乳腺癌轉(zhuǎn)移2例,結(jié)腸癌轉(zhuǎn)移1例,1例來(lái)源不明。
1.2 方法
1.2.1 儀器及掃描參數(shù) 采用美國(guó)GE公司 Signa EXCITE HD 3.0T超導(dǎo)型MR掃描儀,對(duì)30例患者分別行常規(guī)MRI平掃、多體素化學(xué)位移成像(chemical shift imaging,CSI)MRS檢查、MR增強(qiáng)掃描。常規(guī)MRI平掃時(shí)使用標(biāo)準(zhǔn)正交頭線圈,取仰臥位,以快速自旋回波(fast spin echo,FSE)序列進(jìn)行頭部橫斷位的T1加權(quán)像(T1 weighted imaging,T1WI)及橫斷、矢狀和冠狀位的T2加權(quán)像(T2 weighted imaging,T2WI)掃描。T2WI是重要序列,要求橫斷、矢狀和冠狀位三個(gè)方向的掃描互相垂直,采用重復(fù)時(shí)間(repetition time,TR)4000 ms,回波時(shí)間(echo time,TE)104 ms,視野(field of view,FOV)18 cm,矩陣512×336,層間隔1 mm,層厚5 mm。MRS檢查以T2WI圖像作為波譜定位像,采用2D多體素點(diǎn)解析波譜序列(point-resolved selective spectroscopy,PRESS),掃描參數(shù):TR1000 ms,TE144 ms,層間隔2 mm,層厚10 mm,FOV 16 cm,矩陣16×16,成像時(shí)間260 s;感興趣區(qū)(region of interest,ROI)盡可能涵蓋腫瘤實(shí)質(zhì)、壞死區(qū)、水腫區(qū)以及對(duì)側(cè)正常腦組織,避開(kāi)骨骼、脂肪以及含氣結(jié)構(gòu)等;掃描周邊加用飽和帶以避免其他組織的干擾,掃描前均進(jìn)行勻場(chǎng)、抑水,保證基線平穩(wěn),數(shù)據(jù)準(zhǔn)確,勻場(chǎng)要求水共振峰的半高線寬(FWHM)98%。采集完CSI數(shù)據(jù)后靜脈注射釓噴替酸葡甲胺(Gd-DTPA),采用FSE T1WI序列掃描橫斷、矢狀、冠狀圖像,并與T2WI的層面保持一致。
1.2.2 圖像后處理 所得1H-MRS數(shù)據(jù)在GE ADW4.2工作站采用Functool3.1軟件包進(jìn)行后處理,分別測(cè)定瘤體區(qū)(平掃T1WI低信號(hào),T2WI高信號(hào),增強(qiáng)后無(wú)明顯強(qiáng)化或者強(qiáng)化的區(qū)域,同時(shí)排除囊變壞死區(qū))、瘤體周?chē)[區(qū)(腫瘤常規(guī)影像學(xué)邊緣區(qū),平掃T1WI低信號(hào),T2WI高信號(hào),FLAIR上信號(hào)高于病灶實(shí)質(zhì),無(wú)明顯強(qiáng)化)及對(duì)側(cè)正常腦組織或同側(cè)遠(yuǎn)離病灶區(qū)域(平掃和增強(qiáng)都未見(jiàn)異常信號(hào))的各代謝物值及Cho/Cr、Cho/NAA、NAA/Cr等比值,重建出化學(xué)位移偽彩圖,計(jì)算每個(gè)主峰曲線下面積。
1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 本研究數(shù)據(jù)為計(jì)量資料,全組數(shù)據(jù)資料采用SPSS13.0軟件進(jìn)行處理,首先對(duì)所有數(shù)據(jù)進(jìn)行正態(tài)性分布和方差齊性檢驗(yàn),兩組數(shù)據(jù)比較采用t檢驗(yàn),所有統(tǒng)計(jì)結(jié)果以x±s形式表示。P
2 結(jié)果
2.1 高級(jí)別腦膠質(zhì)瘤及腦轉(zhuǎn)移瘤的MR表現(xiàn) 17例高級(jí)別膠質(zhì)瘤中(Ⅲ-Ⅳ級(jí)膠質(zhì)瘤),平掃表現(xiàn)為大片狀長(zhǎng)T1、長(zhǎng)T2信號(hào),邊界欠清楚,瘤周水腫較明顯,增強(qiáng)掃描表現(xiàn)為花環(huán)或不規(guī)則狀強(qiáng)化,3例表現(xiàn)為較均勻強(qiáng)化。13例腦轉(zhuǎn)移瘤平掃呈長(zhǎng)T1、長(zhǎng)T2信號(hào),瘤周均表現(xiàn)為大片狀水腫,增強(qiáng)后8例表現(xiàn)為環(huán)狀強(qiáng)化,其余表現(xiàn)為團(tuán)塊狀強(qiáng)化。
2.2 腦高級(jí)別膠質(zhì)瘤及腦轉(zhuǎn)移瘤的1H-MRS表現(xiàn)
2.2.1 高級(jí)別膠質(zhì)瘤的1H-MRS表現(xiàn) 17例腫瘤瘤體實(shí)質(zhì)部分區(qū)域Cho/Cr、Cho/NAA比值均較健側(cè)區(qū)域明顯升高,而NAA/Cr比值降低(圖2)。明顯升高的脂質(zhì)(Lip)峰及Lac峰在高級(jí)別膠質(zhì)瘤的實(shí)質(zhì)和壞死區(qū)域中均可顯示(圖2A),瘤周水腫區(qū)域可見(jiàn)異常波譜(圖2B)。8例病灶實(shí)質(zhì)區(qū)發(fā)現(xiàn)Lac峰;除1例膠質(zhì)母細(xì)胞瘤外,其余16例高級(jí)別膠質(zhì)瘤均顯示Lip峰。瘤周水腫區(qū)域可見(jiàn)異常波譜,近側(cè)可見(jiàn)明顯異常波譜,至遠(yuǎn)側(cè)Cho逐漸降低,NAA值、Cr值逐漸升高,直至成為正常譜線。瘤體及瘤周區(qū)波譜定位圖見(jiàn)圖2C。
2.2.2 腦轉(zhuǎn)移瘤1H-MRS表現(xiàn) 13例腫瘤瘤體實(shí)質(zhì)區(qū)Cho/Cr、Cho/NAA比值均較健側(cè)區(qū)域升高,而NAA/Cr比值降低(見(jiàn)圖2A),8例見(jiàn)Lac峰升高,7例Lip峰升高;瘤周近側(cè)水腫區(qū)域未見(jiàn)異常波譜(圖2B)。瘤體及瘤周區(qū)波譜定位圖見(jiàn)圖2C。
2.3 高級(jí)別腦膠質(zhì)瘤與腦轉(zhuǎn)移瘤代謝物比值及結(jié)果比較 高級(jí)別膠質(zhì)瘤與腦轉(zhuǎn)移瘤瘤體區(qū)、瘤周區(qū)各代謝物比值結(jié)果以(x±s)形式表示(見(jiàn)表1);全組資料采用SPSS13.0軟件進(jìn)行處理(P
表1
兩組腫瘤的瘤體區(qū)、瘤周區(qū)各代謝物比值(x±s)
組別Cho/CrCho/NAANAA/Cr
高級(jí)別膠質(zhì)瘤瘤體區(qū)4.148±1.6724.166±2.9411.548±1.156
瘤周區(qū)2.058±0.5501.659±0.8551.077±0.433
腦轉(zhuǎn)移瘤瘤體區(qū)3.831±1.7622.194±1.2952.008±0.789
瘤周區(qū)1.132±0.2360.907±0.3751.405±0.455
表2
兩組腫瘤瘤體區(qū)、瘤周區(qū)各代謝物比值
兩兩比較(P值)
變量Cho/CrCho/NAANAA/Cr
瘤體區(qū)0.63580.03550.2422
瘤周區(qū)0.00010.01930.1458
3 討論
近年來(lái)多體素氫質(zhì)子核磁共振波譜對(duì)腦腫瘤的診斷和鑒別診斷已經(jīng)在臨床得到廣泛應(yīng)用,對(duì)于高級(jí)別膠質(zhì)瘤與腦轉(zhuǎn)移瘤的鑒別診斷具有非常重要的價(jià)值,尤其在轉(zhuǎn)移瘤單發(fā)或膠質(zhì)瘤多發(fā)而臨床表現(xiàn)和病史又不能提供鑒別,單靠常規(guī)CT及MR圖像難以作出正確診斷時(shí)更具有重要意義。顱內(nèi)腫瘤的常見(jiàn)代謝物有N-乙酰天門(mén)冬氨酸(NAA)、膽堿(Cho)、肌酸(Cr)、乳酸(Lac)、 脂質(zhì)(Lip)、肌醇(myoinositol,MI)等。目前波譜檢查技術(shù)包括單體素波譜(single voxelspectroscopy)、多體素波譜(multi-voxel spectroscopy),后者又分為二維MRS和三維MRS,即化學(xué)位移成像(CSI)。MRS常用序列是點(diǎn)分辨波譜分析法(PRESS)和激勵(lì)回波探測(cè)法(STEAM)。PRESS用于長(zhǎng)回波時(shí)間TE(135-270 ms),可獲得長(zhǎng)T2物質(zhì)的波譜(如NAA、Cr、Cho、Lac等),對(duì)運(yùn)動(dòng)不敏感,基線穩(wěn)定,信噪比(SNR)亦比STEAM要高,而且易于定量[2]。由于本研究觀測(cè)的主要代謝物大都是長(zhǎng)T2物質(zhì),所以本研究采用PRESS序列。多體素MRS可了解腫瘤的實(shí)質(zhì)部位、瘤周水腫區(qū)及腫瘤周?chē)盘?hào)正常區(qū)域等部位的代謝變化,可提供多個(gè)興趣區(qū)的代謝信息,更加便于對(duì)高級(jí)別膠質(zhì)瘤和轉(zhuǎn)移瘤二者的鑒別,還可進(jìn)一步確定病灶的邊緣,利于手術(shù)和放療時(shí)盡量減少對(duì)正常腦組織的損傷。3.0T MRS較1.5TMRS最明顯的優(yōu)勢(shì)是信噪比(SNR)可提高23%~46%,信號(hào)采集時(shí)間明顯縮短,波譜分辨率更高,基線更加穩(wěn)定[3]。并可發(fā)現(xiàn)1.5T MRS未能檢出的某些具有重要意義的代謝物峰,可設(shè)定較小體素,更能確切反映體素內(nèi)組織代謝情況,改善波譜空間分辨率。體積小于1.0 cm3(1.5T核磁共振波譜體素的上限)的體素在不增加檢查時(shí)間的情況下,仍可獲得足夠的信噪比,從而克服了勻場(chǎng)、水抑制及快速空間編碼上的技術(shù)障礙。Inoue[4]等曾報(bào)道一例發(fā)生在右頂枕葉大腦深層白質(zhì)內(nèi)直徑小于15 mm的膠質(zhì)瘤,用3.0TMRS能夠檢出,而1.5TMRS未能測(cè)出。因此,超高場(chǎng)強(qiáng)MR成像系統(tǒng)將提高M(jìn)RS在腦腫瘤診斷中的應(yīng)用價(jià)值。
3.1 高級(jí)別膠質(zhì)瘤與腦轉(zhuǎn)移瘤腫瘤強(qiáng)化區(qū)1H-MRS表現(xiàn) 高級(jí)別膠質(zhì)瘤為顱內(nèi)較常見(jiàn)的腫瘤,是由腫瘤性星形細(xì)胞、少突膠質(zhì)細(xì)胞、室管膜細(xì)胞或者脈絡(luò)膜細(xì)胞產(chǎn)生的。高級(jí)別膠質(zhì)瘤其典型的波譜為NAA峰顯著下降,Cr峰中等下降和Cho峰明顯升高。腦轉(zhuǎn)移瘤沒(méi)有星形細(xì)胞或神經(jīng)元,主要表現(xiàn)為NAA峰缺乏,Cho明顯增高,Cr下降或消失,Cho/Cr比值升高,可出現(xiàn)Lac峰和Lip峰。盡管顱內(nèi)腫瘤的1H-MRS研究揭示了幾乎所有腫瘤與正常腦組織波譜表現(xiàn)均存在差異,但這些差異在不同的腫瘤之間缺乏特征性[5]。本研究中高級(jí)別膠質(zhì)瘤與腦轉(zhuǎn)移瘤瘤體實(shí)質(zhì)區(qū)Cho/Cr 值分別為(4.148±1.672)、(3.831±1.762),NAA/Cr值分別為(1.548±1.156)、(2.008±0.789),兩者Cho/Cr、NAA/Cr比值比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,而Cho/NAA值分別為(4.166±2.941)、(2.194±1.295),兩者比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,這可能與轉(zhuǎn)移瘤神經(jīng)元缺乏有關(guān)。有文獻(xiàn)[6]報(bào)道腦轉(zhuǎn)移瘤與高級(jí)別膠質(zhì)瘤組相比,Cho/Cr、NAA/Cr值比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,并認(rèn)為惡性程度較高的腫瘤,其波譜表現(xiàn)相似。與本研究結(jié)果相符。Lac是能量代謝低能通路-葡萄糖無(wú)氧酵解的終產(chǎn)物,常見(jiàn)于腫瘤增長(zhǎng)過(guò)快。Lip常見(jiàn)于腫瘤壞死、脂質(zhì)析出,而惡性腫瘤更容易發(fā)生壞死,故使其成為較有意義的鑒別腫瘤良惡性的指標(biāo)。本文在17例高級(jí)別膠質(zhì)瘤中發(fā)現(xiàn)Lac峰8例,16例顯示Lip峰,可見(jiàn)Lip峰是最具鑒別診斷意義指標(biāo),若出現(xiàn)即高度提示惡性腫瘤。本組腦轉(zhuǎn)移瘤中轉(zhuǎn)移灶較小者,無(wú)Lip峰,而Lac峰出現(xiàn)時(shí),病灶明顯增大。
3.2 腦膠質(zhì)瘤與腦轉(zhuǎn)移瘤瘤周水腫發(fā)生機(jī)制及代謝物比較 腦膠質(zhì)瘤、轉(zhuǎn)移瘤瘤周水腫的發(fā)生機(jī)理較復(fù)雜,一般認(rèn)為其均為血管源性水腫。局部侵襲是腦膠質(zhì)瘤的一個(gè)顯著特征,膠質(zhì)瘤內(nèi)腫瘤新生血管血腦屏障(BBB)不完整,其程度與病理分級(jí)有關(guān),腫瘤侵襲范圍與瘤周水腫程度相一致[7]。轉(zhuǎn)移瘤血管屬有窗性血管,與起源組織血管相同,不具血腦屏障,是腦水腫形成的基礎(chǔ)。本文研究中高級(jí)別膠質(zhì)瘤與腦轉(zhuǎn)移瘤瘤周區(qū)Cho/Cr值分別為(2.058±0.550)、(1.132 ±0.236),NAA/Cr值分別為(1.077±0.433)、(1.405±0.455),Cho/Cr、NAA/Cr值分別比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。Law [8]等研究發(fā)現(xiàn)膠質(zhì)瘤瘤周水腫Cho值升高,常規(guī)MRI圖像上表現(xiàn)正常的腫瘤周?chē)鸁o(wú)水腫區(qū)域腦組織也存在病理性波譜,但轉(zhuǎn)移瘤則不然,二者Cho/Cr值差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。Smith[7]等亦認(rèn)為腦轉(zhuǎn)移瘤和星形細(xì)胞瘤的區(qū)別在于轉(zhuǎn)移瘤有清楚的邊界,瘤體鄰近的組織在波譜上無(wú)明顯異常表現(xiàn),膠質(zhì)瘤在強(qiáng)化區(qū)域以外可以顯示異常的波譜。本文研究亦發(fā)現(xiàn)高級(jí)別膠質(zhì)瘤瘤周水腫區(qū)出現(xiàn)異常波譜,而在腦轉(zhuǎn)移瘤水腫區(qū)未出現(xiàn)異常波譜,與以上研究觀點(diǎn)一致。
總之,H-MRS為研究活體生化、能量代謝提供了一種全新的、無(wú)創(chuàng)的方法,當(dāng)腦高級(jí)別膠質(zhì)瘤與腦轉(zhuǎn)移瘤在常規(guī)MR檢查中鑒別診斷困難時(shí),行多體素波譜檢查可對(duì)二者作出較為準(zhǔn)確的鑒別診斷,為臨床治療提供更多獨(dú)特的信息。
圖1 男,30歲,右額葉膠質(zhì)母細(xì)胞瘤。 A 瘤體區(qū)單個(gè)體素的譜線圖,表現(xiàn)為高聳的Cho峰,明顯降低的Cr峰,明顯升高的Lip峰;B 瘤周區(qū)單個(gè)體素譜線圖,表現(xiàn)為異常波譜;C 右額葉膠質(zhì)母細(xì)胞瘤波譜定位圖。
圖2 男 64歲 肺癌腦轉(zhuǎn)移瘤。A瘤體區(qū)單個(gè)體素譜線圖,Cho峰明顯升高,NAA峰明顯降低,可見(jiàn) Lip峰;B 瘤周區(qū)單個(gè)體素的譜線圖,表現(xiàn)為正常波譜;C 腦轉(zhuǎn)移瘤波譜定位圖
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第9篇：膠質(zhì)母細(xì)胞瘤范文
【關(guān)鍵詞】 腫瘤，神經(jīng)上皮;存活素;livin;免疫組織化學(xué)
【摘要】 目的 探討存活素(survivin)和livin蛋白在腦膠質(zhì)瘤的表達(dá)情況及其與腫瘤惡性程度之間的相互關(guān)系。方法 應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)72例腦膠質(zhì)瘤標(biāo)本survivin及l(fā)ivin蛋白的表達(dá)強(qiáng)度、陽(yáng)性細(xì)胞百分比及其與膠質(zhì)瘤組織學(xué)分級(jí)之間的關(guān)系。結(jié)果 survivin及l(fā)ivin蛋白表達(dá)陽(yáng)性染色主要位于腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞的胞漿，并與腦膠質(zhì)瘤的組織學(xué)分級(jí)相關(guān)，各級(jí)之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)，隨著腦膠質(zhì)瘤惡性程度增高，survivin與livin的表達(dá)強(qiáng)度和陽(yáng)性細(xì)胞百分比也隨之逐漸增加，且兩者表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.353，p<0.01)。結(jié)論 survivin和livin蛋白在腦膠質(zhì)瘤呈過(guò)度表達(dá)，并與腦膠質(zhì)瘤的惡性程度密切相關(guān)，兩者的激活在膠質(zhì)瘤的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中可能起協(xié)同作用。
【關(guān)鍵詞】 腫瘤，神經(jīng)上皮;存活素;livin;免疫組織化學(xué)
expression and significance of livin and survivin in brain glioma zhao libin,zhao yonghong,he hongmei,et al. tcm hospital of funing country,hebei, funing country 066001,china
【abstract】 objective to investigate the expression and significance of survivin and livin in brain glioma. methods the expression of survivin and livin in 72 patients with brain glioma were detected by immunohistochemical technique. the relationship between the expression of survivin and livin and the histological grades was analyzed. results survivin and livin was over-expressed in gliomas and the expression levels were related to the histological grades of gliomas, and the expression levels of survivin and livin in the gliomas with higher malignancy were significantly increased(p<0.05),and there was significant difference between the expression of survivin and livin in the gliomas of different grades,and the expression of survivin was positively related with that of livin(r=0.353,p<0.01).conclusion survivin and livin is over-expressed in gliomas,which is related to the malignancy of the tumor,there may be some correlations between their activation.
【key words】 tumor,neurepithelium; survivin; livin; immunohistochemistry
腦膠質(zhì)瘤是中樞神經(jīng)系統(tǒng)最常見(jiàn)的腫瘤，由于膠質(zhì)瘤具有較強(qiáng)的侵襲潛能，因而術(shù)后復(fù)發(fā)率極高，成為影響預(yù)后的重要因素，為此，人們一直致力于新療法的研究。作為調(diào)整抑制蛋白(iaps)家族的新成員livin和存活素(survivin)在多種腫瘤組織中高表達(dá)，且最近的研究證實(shí)livin和survivin在肺癌、乳腺癌等[1，2]中表達(dá)無(wú)明顯相關(guān)性，表明其可能具有不同的作用機(jī)制;survivin除具有凋亡抑制作用外，還有干擾細(xì)胞周期、促進(jìn)細(xì)胞增殖和分裂、參與血管生成作用，而livin目前以抗凋亡作用為主，其生物學(xué)功能有待進(jìn)一步的研究。本研究通過(guò)采用免疫組織化學(xué)方法分別檢測(cè)腦膠質(zhì)瘤組織中survivin和livin的表達(dá)情況，以探討兩者在膠質(zhì)瘤細(xì)胞惡性增殖過(guò)程中的作用及二者的關(guān)系，旨在為膠質(zhì)瘤的基因治療提供新的途經(jīng)。
1 資料與方法
1.1 一般資料 收集秦皇島市撫寧縣中醫(yī)院神經(jīng)外科于2003年5月至2008年5月手術(shù)切除的腦膠質(zhì)瘤石蠟標(biāo)本72例，其中男47例，女25例;年齡21～73歲，平均年齡44.6歲;術(shù)前均未經(jīng)放射治療或化學(xué)治療。根據(jù)1999年who制訂的中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤分類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)，低度惡性(ⅰ～ⅱ級(jí))34例，中度惡性(ⅲ級(jí))22例，高度惡性(ⅳ級(jí))16例。所有標(biāo)本常規(guī)石蠟連續(xù)切片，行he染色和免疫組化染色。he染色的切片由臨床病理學(xué)醫(yī)師進(jìn)行病理學(xué)觀察核實(shí)診斷。對(duì)照組的腦組織取自9例因顱腦損傷行內(nèi)減壓術(shù)者。
1.2 主要儀器和試劑 兔抗人survivin多克隆抗體為中山公司產(chǎn)品，livin羊抗人單克隆抗體購(gòu)自rd公司，免疫組化sp法試劑盒購(gòu)于北京中山生物技術(shù)有限公司。主要儀器有自動(dòng)切片機(jī)(德國(guó))、抗原微波自動(dòng)修復(fù)儀(上海)、yb6型生物組織包埋機(jī)(湖北)、低溫冰箱(日本)、olympus雙目生物顯微鏡(日本)等。
1.3 結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn) 采用半定量方法，光鏡下分析。組織切片中，在排除非特異性染色的前提下，細(xì)胞的胞漿有黃色、棕黃色、棕褐色顆粒分布即為陽(yáng)性，記分方法：(1)按切片中細(xì)胞染色的深淺程度評(píng)分：(-)，無(wú)著色，計(jì)0分;(+)，細(xì)胞染色呈淡黃色，計(jì)1分;(++)，細(xì)胞染色呈黃色，計(jì)2分;(+++)，細(xì)胞染色呈棕黃色，計(jì)3分;(++++)，細(xì)胞染色呈棕褐色，計(jì)4分;(2)計(jì)算染色陽(yáng)性細(xì)胞所占比例，每例隨機(jī)觀察5個(gè)高倍鏡視野(×400)，每個(gè)視野計(jì)數(shù)100個(gè)細(xì)胞，計(jì)數(shù)500個(gè)細(xì)胞中染色陽(yáng)性細(xì)胞百分比。
1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 應(yīng)用sas 11.0統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)和speaman等級(jí)相關(guān)分析，p<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2 結(jié)果
2.1 2組survivin與livin蛋白的表達(dá)比較 survivin與livin蛋白在對(duì)照組中均為陰性表達(dá)。2組survivin和livin蛋白陽(yáng)性表達(dá)率間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)。見(jiàn)表1。表1 2組survivin與livin蛋白表達(dá)比較例
2.2 survivin與livin在不同級(jí)別腦膠質(zhì)瘤組織中的表達(dá) survivin蛋白表達(dá)陽(yáng)性率在腦膠質(zhì)瘤低、中、高度惡性組中分別為32.35%(11/34)，45.45%(10/22)和75.0%(12/16)，3組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=7.97，p<0.05)。livin蛋白表達(dá)陽(yáng)性率在低、中、高度惡性組分別為44.12%(15/34)、59.09%(13/22)和81.25%(13/16)，3組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=6.18，p<0.05)。
2.3 腦膠質(zhì)瘤中survivin與livin表達(dá)的關(guān)系 在72例膠質(zhì)瘤中survivin與livin共陽(yáng)性26例，共陰性24例，spearman等級(jí)相關(guān)分析表明，二者的表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.353，p<0.01)。見(jiàn)表2。表2 人腦膠質(zhì)瘤中survivin與livin表達(dá)的關(guān)系例
3 討論
livin是凋亡抑制蛋白家族新成員，特異性高表達(dá)于多種腫瘤組織，它具有抗細(xì)胞凋亡的作用，并可使腫瘤對(duì)放化療抵抗。livin在生理狀態(tài)下，通過(guò)凋亡途徑清除體內(nèi)衰老和異常的細(xì)胞，有利于維持體內(nèi)組織的動(dòng)態(tài)平衡。livin過(guò)度表達(dá)在腫瘤中直接或間接抑制凋亡，不僅有利于細(xì)胞的繼續(xù)增殖，還有利于異?；虻倪M(jìn)一步積聚，促使細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化，從而有利于腫瘤的進(jìn)展[3]。有研究表明livin可能成為腫瘤治療的又一靶點(diǎn)[4,5]。livin在胃癌、食管癌、乳腺癌、肺癌、膀胱癌、黑色素瘤、白血病等呈高表達(dá)。hariu等[6]研究表明livin與肺癌有一定的相關(guān)關(guān)系，他們應(yīng)用rtpcr方法檢測(cè)livin可在許多肺癌細(xì)胞株和原發(fā)性肺癌組織中呈異常表達(dá)，而在正常的肺組織中卻未見(jiàn)表達(dá)。本研究采用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)livin在72例腦膠質(zhì)瘤組織和9例腦外傷組織中的表達(dá)情況，結(jié)果表明正常腦組織中無(wú)livin陽(yáng)性表達(dá)，膠質(zhì)瘤組織中l(wèi)ivin的總陽(yáng)性表達(dá)率為56.94%(41/72)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.01)。本研究還發(fā)現(xiàn)，隨著腦膠質(zhì)瘤病理分級(jí)的升高，livin的表達(dá)增強(qiáng)，因此livin可作為膠質(zhì)瘤惡性程度評(píng)估的標(biāo)志物。
在正常情況下，survivin僅在胚胎組織中有顯著表達(dá)，在大多數(shù)人類(lèi)常見(jiàn)腫瘤如肺癌、結(jié)直腸癌、胰腺癌、前列腺癌、乳腺癌、胃癌等中表達(dá)異常升高。美國(guó)國(guó)立癌癥研究中心的抗癌藥物篩選計(jì)劃所選用的60種腫瘤細(xì)胞系中均可發(fā)現(xiàn)survivin的陽(yáng)性表達(dá)，研究提示survivin可通過(guò)抑制凋亡通路下游的caspase和caspase7發(fā)揮抗凋亡作用。本研究結(jié)果顯示survivin在人腦膠質(zhì)瘤中的陽(yáng)性表達(dá)率明顯高于正常腦組織，且survivin蛋白表達(dá)陽(yáng)性率隨腫瘤的惡性程度增高而呈現(xiàn)逐漸升高的趨勢(shì)。膠質(zhì)瘤低、中度惡性與高度惡性之間、ⅲ級(jí)與ⅳ級(jí)之間survivin蛋白表達(dá)陽(yáng)性率均存在著顯著性差異，說(shuō)明組織學(xué)分級(jí)越差，survivin陽(yáng)性表達(dá)率越高，表明該基因的過(guò)表達(dá)在腦膠質(zhì)瘤的發(fā)生發(fā)展中起著較為重要的作用，并與腫瘤的組織病理學(xué)分級(jí)及良惡性程度有關(guān)。
人們對(duì)survivin在腦膠質(zhì)瘤的表達(dá)也進(jìn)行了較深入的研究。chakravarti等[7]用半定量western印跡檢測(cè)了92例腦膠質(zhì)瘤患者手術(shù)標(biāo)本中survivin蛋白的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)陽(yáng)性表達(dá)率為64%(59/92)，表達(dá)陽(yáng)性的患者中位存活期僅為11個(gè)月，而表達(dá)陰性的33例患者中位存活期則為64個(gè)月，二者存活期之間差異顯著。在惡性程度最高的多形性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤，survivin陽(yáng)性表達(dá)率為80%(45/56)，明顯高于非多形性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤的陽(yáng)性表達(dá)率(39%)[7]，且survivin陽(yáng)性表達(dá)的多形性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤患者平均存活時(shí)間明顯短于survivin陰性表達(dá)者;同時(shí)還發(fā)現(xiàn)survivin表達(dá)水平越高，凋亡蛋白caspase3表達(dá)水平越低，患者預(yù)后也越差[8]。研究表明，通過(guò)腺病毒載體，運(yùn)用rna干擾技術(shù)抑制survivin表達(dá)，能夠抑制腫瘤生長(zhǎng)[9]。
本研究結(jié)果表明，survivin蛋白在正常腦組織中無(wú)表達(dá)，在腦膠質(zhì)瘤中過(guò)度表達(dá)，并與腦膠質(zhì)瘤的組織學(xué)分級(jí)相關(guān)，各級(jí)之間差異顯著，隨著腦膠質(zhì)瘤惡性程度增高，survivin的表達(dá)強(qiáng)度和陽(yáng)性細(xì)胞百分比也隨之逐漸增加，提示survivin在腦膠質(zhì)瘤的惡變過(guò)程中起重要作用，survivin基因在膠質(zhì)瘤中高表達(dá)的特性提示它可能是一個(gè)有效的膠質(zhì)瘤基因治療靶點(diǎn)。
另外，livin和survivin基因也是腫瘤耐藥的關(guān)鍵，這兩基因有可能成為解決腫瘤耐藥性的突破口。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，在人腦膠質(zhì)瘤中survivin與livin的表達(dá)呈正相關(guān)關(guān)系。說(shuō)明在腦膠質(zhì)瘤中survivin的再激活與livin的表達(dá)不是兩個(gè)孤立事件，兩者共同促進(jìn)了膠質(zhì)瘤的發(fā)生發(fā)展。因此，survivin、livin在腦膠質(zhì)瘤組織中的表達(dá)上調(diào)對(duì)膠質(zhì)瘤的發(fā)生、發(fā)展起重要的促進(jìn)作用，并且其表達(dá)率與腫瘤的病理分級(jí)、惡性程度呈起正相關(guān)。盡管其具體的作用機(jī)制尚不明確，但對(duì)膠質(zhì)瘤中凋亡抑制因子survivin、livin的表達(dá)研究，有助于理解膠質(zhì)瘤的生物學(xué)特性，從而為膠質(zhì)瘤基因治療靶點(diǎn)的選擇和進(jìn)一步的臨床治療提供依據(jù)。
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