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【中圖分類號】R759.1
【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A
【文章編號】1814-8824(2010)-03-0080-01
梅毒屬于一種性傳播疾病,病原體為蒼白密螺旋體,又稱梅毒螺旋體。梅毒的血清學(xué)試驗(yàn)方法大致分為非特異性的類脂質(zhì)抗原試驗(yàn)和特異性的梅毒螺旋體抗原試驗(yàn)兩大類:①類脂質(zhì)抗原試驗(yàn)即以牛心磷脂等為抗原,檢查患者血清中的反應(yīng)素如RPR、USR、VDRL、TRUST等,常用作初篩試驗(yàn)。②梅毒螺旋體抗原試驗(yàn)即以純化TP抗原,檢測特異性抗TP抗體,常用的有TPPA、TPHA、TP-ELISA、FTA-ABC等,用作梅毒感染的確證試驗(yàn)。初篩試驗(yàn)中VDRL因操作麻煩在大多數(shù)醫(yī)院沒有開展。RPR檢測操作簡單有同樣的特異性與敏感性因而被廣泛應(yīng)用。TP-PA特異性、靈敏度較高,是目前公認(rèn)的梅毒血清學(xué)確證試驗(yàn);但試劑較貴,檢測時需將標(biāo)本作系列稀釋,不利于大批量標(biāo)本檢測,且以肉眼判斷結(jié)果,自動化程度低??姑范韭菪w特異性抗(TP-Ab)其特異性,靈敏度與TP-PA相近符合率也高,而且ELISA試劑成本低,操作方便,自動化程度高,是大批量標(biāo)本梅毒篩查的理想方法。也是住院患者梅毒篩查的理想方法。我們于2008~2009年間,在我院住院的各科各年齡段患者中常規(guī)進(jìn)行了RPR和TP-ELISA法檢測。
1 對象和方法
1.1 對象 我院于2008~2009年間住院患者,包括各科各年齡段共1320例。
1.2 方法 住院患者抽血,用TP-ELISA法進(jìn)行梅毒篩查,并檢測RPR(血清作倍比稀釋)。RPR試劑購自上海科華公司,ELISA試劑購自廈門新創(chuàng)公司,均為“國藥準(zhǔn)字號”試劑。TP-ELISA用北京托普DEM-3型自動酶標(biāo)洗板機(jī)洗板,用北京新風(fēng)ZS-3型板式酶標(biāo)儀讀取OD值。兩種方法均嚴(yán)格按說明書操作。
2 結(jié)果
1320例各年齡段患者標(biāo)本中,TP-ELISA共檢出陽性65例,檢出率4.92%。65例TP-ELISA陽性標(biāo)本中,檢出RPR陽性33例,檢出率50.7%。其余32例RPR為陰性。RPR陽性標(biāo)本再將血清作倍比稀釋后重檢,RPR>1:8為6例。
3 討論
各種梅毒的血清學(xué)檢測方法并不能在梅毒的不同病期檢測出抗類脂質(zhì)抗體或抗TP抗體,據(jù)報(bào)導(dǎo)RPR在一期、二期、三期梅毒的陽性率分別為85%、100%、75%。在一期梅毒早期和晚期梅毒潛伏期可呈陰性。RPR即快速血漿反應(yīng)素試驗(yàn),檢測血清中的抗類脂質(zhì)抗體,抗類脂質(zhì)抗體的出現(xiàn)較特異性抗體遲。而梅毒特異性抗體(TP-Ab)出現(xiàn)早,消失遲,即便進(jìn)過正規(guī)抗梅毒治療,仍可檢出其特異性抗體。在65例TP-ELISA陽性標(biāo)本中,只有33例(50.7%)檢出RPR陽性。其余32例RPR為陰性。RPR陽性標(biāo)本再將血清作倍比稀釋后重檢,RPR>1:8為6例。由于采用TP-ELISA法,梅毒治愈多年后仍能檢測到特異性抗體。因此,對確證活動性梅毒,監(jiān)測療法,發(fā)現(xiàn)治療失敗的病例和再感染方面使用RPR是有必要的。
關(guān)鍵詞:梅毒;TRUST;TPPA
梅毒是由蒼白密螺旋體(Treponema pallidum,TP)感染所致的一種性傳播疾病,可以累及多個器官和組織,嚴(yán)重危害人類健康。近年來其發(fā)病率呈快速上升趨勢[1,2],由增長較快的珠江三角洲及附近地區(qū)的向全國各地蔓延,各地發(fā)病率增長都較快。為了解本地區(qū)近幾年梅毒的感染情況以便及時采取相應(yīng)恰當(dāng)?shù)姆乐未胧?,我們?005年到2009年1155 例梅毒血清學(xué)檢測結(jié)果進(jìn)行分析報(bào)告如下。
1資料與方法
1.1一般資料2005年至2009年來院就診的可疑梅毒患者血液標(biāo)本。
1.2 檢測方法 靜脈抽血3ml,離心后取血清做甲苯胺紅不加熱血清反應(yīng)素試驗(yàn)(TRUST)及梅毒螺旋體乳膠凝集試驗(yàn)(TPPA),操作均按標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程(SOP)進(jìn)行。
1.3 檢測試劑TRUST試劑由上海榮盛生物技術(shù)公司生產(chǎn);TPPA試劑由日本富士公司生產(chǎn);儀器使用北京海淀電子醫(yī)療儀器廠生產(chǎn)的W2-2A型微量震蕩器;荷蘭產(chǎn)可調(diào)移液器及U型反應(yīng)板。使用試劑三證具全,均在有效期內(nèi)使用。
2結(jié)果
2.1 2005-2009年梅毒血清學(xué)檢測情況見表1。
注:2005年到2009年TRUST、TPPA陽性檢出率逐年上升,經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析差異非常顯著(TRUST:x2=40.66,P
2.21155例梅毒檢測標(biāo)本中性別情況見表2。
注:2005年到2009年梅毒檢測男性多于女性,經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析差異非常顯著(x2=57.99,P
2.3 1155例梅毒檢測標(biāo)本中年齡最小的7歲,最大的77歲,根據(jù)性生理特點(diǎn)分為五個年齡段,見表3。
注:以TPPA陽性判為梅毒患者,各年齡段檢出率不同,經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,差異非常顯著(x2=151.69,P
2.4 325例梅毒陽性標(biāo)本TRUST滴度分布情況見表4。
注:325例梅毒陽性標(biāo)本中,TRUST以低滴度居多,經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,差異非常顯著(x2=46.06,P
3討論
梅毒血清學(xué)檢測是許多服務(wù)行業(yè)、義務(wù)獻(xiàn)血者等群體體檢的必檢項(xiàng)目之一,也是現(xiàn)癥病人診斷及療效觀察的重要手段。對可疑梅毒患者進(jìn)行血清學(xué)試驗(yàn)是診斷和控制梅毒流行的重要環(huán)節(jié)之一。從表1可以看出,2006年后,梅毒的發(fā)病率顯著增高,檢出率達(dá)到或超過了25%,文獻(xiàn)報(bào)道近年來我國梅毒發(fā)病率迅速增長,為法定報(bào)告性病之首[3],本文檢測結(jié)果與其一致。
1155例梅毒檢測標(biāo)本中,有9例TRUST陰性而TPPA陽性,考慮就診者有既往梅毒史,或是梅毒治療過程檢測的患者,梅毒初篩試驗(yàn)(TRUST)已經(jīng)正常,還可能是梅毒感染初期,非特異性抗心磷脂抗體還沒有產(chǎn)生而特異性梅毒螺旋體抗體已產(chǎn)生之故。
從表2可以看出,男女之比在不同年份基本相同,平均為1.4:1,經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析差異非常顯著(x2=57.99,P
從表3可以看出,以26-35歲年齡組的發(fā)病率最高(45%),其次是36-45歲年齡組(24%),經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,差異非常顯著(x2=151.69,P
從表4可以看出,325例梅毒陽性標(biāo)本中,TRUST以低滴度居多,
由于梅毒患者細(xì)胞免疫功能受到影響,感染艾滋病的危險(xiǎn)性明顯增加,所以對確認(rèn)梅毒的患者應(yīng)該做HIV初篩檢查,這對治療和預(yù)防艾滋病的傳播有重要意義[7]。
參考文獻(xiàn)
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【關(guān)鍵詞】梅毒;診斷;血清學(xué)
梅毒是由蒼白螺旋體引起的一種經(jīng)典的性傳播疾病(STD),主要經(jīng)性傳播、血液傳播、垂直傳播嚴(yán)重危害下一代。近年來,本病的發(fā)病率呈明顯上升趨勢。選擇簡單、有效的試劑對梅毒的早期診斷、治療有積極作用[1]。筆者采用TRUST、ELISA、TPPA這3種梅毒抗體檢測方法對88例梅毒患者進(jìn)行回顧性比較和分析,現(xiàn)報(bào)告如下。
1 資料與方法
1.1 一般資料 選擇我院2008年3月~2010年4月皮膚科住院和門診梅毒患者共計(jì)88例。其中男57例,女31 例;年齡16~72歲,平均年齡(43.55±6.55)歲;早期潛伏期梅毒15例,一期梅毒42例,二期梅毒22例,不明期梅毒9例。
1.2 試劑 TRUST 試劑由上海榮盛生物公司提供,ELISA試劑由廈門新創(chuàng)科技有限公司提供,TPPA 試劑由日本富士株式會社提供。
1.3 儀器 XD711酶標(biāo)儀1臺,梅毒旋轉(zhuǎn)振蕩器1臺。
1.4 方法 三種檢測方法均嚴(yán)格按說明書進(jìn)行操作,并且采用ELISA 行梅毒篩查,陽性者再用TPPA確診。
1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS12.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)數(shù)資料采用X2檢驗(yàn),以P
2 結(jié)果
TRUST、ELISA 和TPPA 3 種方法檢測結(jié)果比較??見表1。TRU ST、ELI SA 和TPPA檢測各期梅毒陽性率分別為: 早期潛伏期為66.66%、80%、86.66%;一期梅毒為73.81%、90.47%、100%;二期梅毒為81.82%、90.91%、95.45%;不明期梅毒為66.67%、88.89%、100%。從上述數(shù)據(jù)可以看出,TPPA 和ELISA 在檢測早期、一期、不明期梅毒的陽性率明顯高于TRUST,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。
表1 TRUST、ELISA 和TPPA 3 種方法檢測結(jié)果比較
3討論
梅毒抗體檢測是臨床梅毒診斷的主要方法之一。由于人體感染梅毒螺旋體后大約在4~6 周在血清中可產(chǎn)生抗類脂抗原的非特異性抗體和抗梅毒螺旋體抗原的特異性抗體。臨床以特異性抗梅毒螺旋體抗體的檢測方法作為確認(rèn)試驗(yàn)方法。而針對這兩種抗體的檢測方法有許多種,目前主要有TRUST、ELIAS、TPPA等方法。在以上幾種方法中,TRUST 由于其廉價、快速、方便,其測定效價比RPR、USR 高一個滴度等特點(diǎn),所以廣泛用于臨床住院和門診患者的梅毒篩查和療效評價工作[2]。另一些針對特異性抗螺旋體抗體的檢測方法有ELISA、TPPA等技術(shù),其中ELISA 法是近年來發(fā)展起來的一種血清學(xué)檢測法,通過將基因重組表達(dá)的梅毒螺旋體抗原包被在微孔板上,采用雙抗原夾心法測定,極大地提高了檢驗(yàn)的敏感性和特異性。而T PPA是目前國內(nèi)推薦的確診梅毒的重要方法,它是使用純化的致病性螺旋體抗原成分包被活致敏紅細(xì)胞和明膠顆粒,其結(jié)果可靠, 具有極高的敏感性和特異性, 是目前國內(nèi)外被公認(rèn)的準(zhǔn)確度較高的梅毒血清學(xué)確證試驗(yàn) 但由于其操作比較繁瑣,不利于大樣本的檢測,因此,它主要運(yùn)用排除用非特異性抗體檢測所致的假陽性[3]。
從本次研究結(jié)果分析,TPPA和ELISA在檢測早期、一期、不明期梅毒的陽性率明顯高于TRUST,且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P< 0.05);在二期梅毒檢驗(yàn)中,3 種方法檢測的陽性率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。說明ELISA 和TPPA較TRUST準(zhǔn)確性更高,對梅毒患者的療效監(jiān)測過程中可采用TRUST,而對于潛伏期梅毒和難以診斷的梅毒可以采用TPPA。如果能夠聯(lián)合篩選試驗(yàn)與確診試驗(yàn),將對梅毒的診治提供重要的參考,也可為梅毒的早發(fā)現(xiàn)、早治療贏得時間。也可將3 種試驗(yàn)方法結(jié)合應(yīng)用,可以減少漏診、誤診率[4]。
參考文獻(xiàn)
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[3]杜潘艷.三種梅毒血清學(xué)檢測方法對比分析[J].中國誤診學(xué)雜志,2011,1(6):1303-1304.
【關(guān)鍵詞】梅毒;梅毒特異性抗體檢測;梅毒螺旋體明膠凝集試驗(yàn);流行病學(xué)
doi:10.3969/j.issn.1004-7484(s).2014.01.584文章編號:1004-7484(2014)-01-0482-01
梅毒隸屬于《中華人民共和國傳染病防治法》規(guī)定的乙類傳染病。其為一種性傳播疾病,病原體為蒼白梅毒螺旋體,可引起全身多組織、器官損害,臨床上可分為一期梅毒、二期梅毒、三期梅毒、潛伏梅毒。傳播途徑包括:性傳播、血液傳播等[1]。因此,梅毒血清學(xué)檢查被列入獻(xiàn)血者、輸血前、手術(shù)、有創(chuàng)操作前等的必備檢測項(xiàng)目。臨床上梅毒血清學(xué)檢查主要包括兩種:非梅毒螺旋體血清學(xué)試驗(yàn)和梅毒螺旋體血清學(xué)試驗(yàn)。前者主要是梅毒非特異性抗體檢測快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(yàn)(RPR),臨床上常用于篩選和治療效果的判斷,成本低廉,檢測時間短,僅需1小時。后者為梅毒特異性抗體檢測梅毒螺旋體明膠凝集試驗(yàn)(TPPA),只要感染過梅毒,便終身陽性[2],因此只能作為臨床篩選,不能判斷治療效果。本文采用RPR和TPPA兩種方法對德州市人民醫(yī)院門診4643例行腔鏡檢查患者梅毒血清學(xué)進(jìn)行檢測分析,了解德州地區(qū)甚至魯西北冀東南地區(qū)梅毒流行病學(xué)概況,現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。
1資料與方法
1.1資料來源選擇2009年10月至2010年5月在我院門診行腔鏡檢查患者4673例,年齡18歲-85歲,其中男性2816例,女性1857例。
1.2試劑RPR試劑由(上海科華生物工程股份有限公司)提供,TPPA試劑由(日本富士瑞必歐株式會社)提供。
1.3方法取受檢者靜脈血2ml,分離血清。采用梅毒非特異性抗體檢測快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(yàn)(RPR)和梅毒特異性抗體檢測梅毒螺旋體明膠凝集試驗(yàn)(TPPA)分別檢測。所有檢測方法步驟和結(jié)果判定均按試劑盒說明書嚴(yán)格操作,并在試劑盒有效期內(nèi)使用。
2結(jié)果
2.1各年齡段梅毒血清陽性率比較見表1。
2.2不同科室陽性結(jié)果分析見表2。
由表2結(jié)果顯示,在全院所有科室中,梅毒陽性覆蓋率為100%,其中TPPA檢測陽性率較高的科室依次為感染內(nèi)科(7.14%)、神經(jīng)內(nèi)科(4.76%)、腫瘤科(4.48%)、血液科及消化內(nèi)科(3.50%)、神經(jīng)外科(3.45%),RPR檢測陽性率較高的科室依次為感染內(nèi)科(7.14%)、神經(jīng)內(nèi)科(4.76%)、神經(jīng)外科(3.45%)、腫瘤科(2.99%)、血液科及消化內(nèi)科(2.92%)。
3討論
梅毒螺旋體感染機(jī)體后,可刺激機(jī)體產(chǎn)生2類抗體,一為特異性抗體,另一為反應(yīng)素。我們的檢測方法之一TPPA即是檢測梅毒螺旋體的特異性抗體,潛伏梅毒期機(jī)體便可產(chǎn)生,感染后約2-4周即可檢出,治愈后甚至終生都可被檢出。TPPA法通過抗原抗體凝集的原理檢測梅毒特異性抗體,特異性極高,敏感性也很高,但其檢驗(yàn)操作步驟繁瑣,檢測時間長,且只能用于臨床篩選,不能判定治療效果。另一類反應(yīng)素,是梅毒螺旋體釋放出的一種抗原物質(zhì)刺激機(jī)體產(chǎn)生,其具有抗體性,我們使用的RPR試驗(yàn)檢測的即為反應(yīng)素??蓹z測時間比特異性抗體稍晚2周,此種檢驗(yàn)方法檢測時間短,費(fèi)用低廉,而且,反應(yīng)素的多少與梅毒治療效果相關(guān),抗體滴度越高,梅毒治療效果差,因此,這種方法可以用來判定治療效果。值得一提的是,多數(shù)學(xué)者認(rèn)為反應(yīng)素不僅僅存在于感染梅毒螺旋體的機(jī)體中,妊娠、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、慢性腎炎、風(fēng)疹、水痘等,RPR同樣可呈陽性[3]。因此如遇到RPR檢驗(yàn)陽性時,臨床上不能盲目定為梅毒感染。綜上,臨床上我們應(yīng)該結(jié)合TPPA和RPR兩種梅毒檢測手段綜合評判[4-5]。
本次統(tǒng)計(jì)由表1可見,對于梅毒,TPPA檢測方法在80歲以上陽性率最高,達(dá)3.26%,考慮機(jī)體感染梅毒后年輕時機(jī)體抵抗力高而年齡增高抵抗力降低,導(dǎo)致老年人檢測陽性。再者,老年人所患基礎(chǔ)疾病多,有可能是基礎(chǔ)疾病誘導(dǎo)產(chǎn)生的抗類質(zhì)抗體或者TP抗體的交叉抗原引起的假陽性。21-40歲組RPR陽性率最高,達(dá)到2.41%,說明處于性活躍期的青壯年是梅毒感染的主體。由于梅毒傳染多為性傳播途徑,而調(diào)查顯示感染梅毒者多有不結(jié)性生活史,多見于、非婚性接觸、患有梅毒等。因此社會應(yīng)加強(qiáng)對群眾尤其年輕人的性教育,樹立正確的價值觀,并普及性病知識。
由表2可見,全院各科室梅毒陽性覆蓋率100%,提示梅毒廣泛分布于臨床,醫(yī)護(hù)人員在醫(yī)療操作中,尤其是手術(shù)、輸血、有創(chuàng)操作等,嚴(yán)格篩選患者是否感染梅毒,確定其傳染性,醫(yī)療器械、醫(yī)療廢物嚴(yán)格消毒滅菌,減少院內(nèi)梅毒傳播。再者醫(yī)護(hù)人員需嚴(yán)格無菌操作,加強(qiáng)自我保護(hù)意識,防止職業(yè)暴露,萬一在醫(yī)務(wù)工作中受患者污染,立即采取有效措施。
因此,聯(lián)合TPPA和RPR檢測方法確定患者是否患有梅毒及傳染性,患者接受有創(chuàng)操作、輸血、手術(shù)、介入等醫(yī)療工作前后檢測梅毒血清學(xué),可有效判斷患者所患梅毒是何時感染,避免不必要的醫(yī)療糾紛,保護(hù)醫(yī)患雙方利益。此外,正確、有效的判斷患者是否感染梅毒可協(xié)助醫(yī)護(hù)人員做好合理的防護(hù)措施,避免院內(nèi)感染,有效防止醫(yī)護(hù)人員職業(yè)暴露。
參考文獻(xiàn)
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關(guān)鍵詞:新生兒溶血病血型系統(tǒng)免疫性血型抗體
新生兒溶血?。╤emolytic disease of the newborn,HDN)是指母嬰血型抗原不一致,母親血液中存在胎兒或新生兒紅細(xì)胞抗原的免疫性抗體,并通過胎盤進(jìn)入胎兒血液循環(huán),因同種免疫反應(yīng)而引起紅細(xì)胞破壞發(fā)生溶血[1]。新生兒溶血?。℉DN)主要發(fā)生于ABO血型系統(tǒng),約占新生兒溶血病的85%[2],而血型血清學(xué)檢測是確診該病的重要依據(jù)[3]。為探討血型免疫性抗體與新生兒溶血病的關(guān)系,本文對41例新生兒溶血病的患者進(jìn)行ABO血型、Rh(D)血型、直接抗人球蛋白試驗(yàn),游離試驗(yàn)、放散試驗(yàn)和不規(guī)則抗體篩查及抗體鑒定等檢測,報(bào)告如下。
1資料與方法
1.1一般資料 2012年2月~2014年1月,我院41例新生兒溶血病的患者,其中男性19例,女性22例,年齡5 h~7 d。
1.2試劑與儀器 ABO血型、Rh(D)血型檢測卡由長春博德生物制品有限公司提供,直接抗人球蛋白試驗(yàn),游離試驗(yàn)、放散試驗(yàn)和不規(guī)則抗體篩查及抗體鑒定的微柱凝膠卡、離心機(jī)、孵育器由瑞士達(dá)亞美公司提供,抗體篩查細(xì)胞及譜細(xì)胞由上海市血液中心提供,所有試劑均在有效期內(nèi)使用,并嚴(yán)格按說明書進(jìn)行操作。
1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用χ2檢驗(yàn)對檢測數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。
2結(jié)果
2.1不同血型抗體與新生兒溶血病的關(guān)系 在41例新生兒溶血病患者中,有38例患者不規(guī)則抗體篩查為陰性,為ABO血型不合引起的新生兒溶血病(HDN),占92.68%。其中由免疫性IgG抗-A抗體引起者21例,占55.26%,由免疫性IgG抗-B抗體引起者17例,占44.74%。有3例患者不規(guī)則抗體篩查為陽性,為Rh血型不合引起的新生兒溶血?。℉DN),占7.32%。此3例患者經(jīng)抗體鑒定有2例為抗-D抗體,占66.67%;1例為抗-E抗體,占33.33%。ABO血型不合引起的新生兒溶血?。℉DN)與Rh血型不合引起的新生兒溶血?。℉DN)二者比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);免疫性抗-D抗體引起的新生兒溶血?。℉DN)與免疫性抗-E抗體引起的新生兒溶血?。℉DN)二者比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P
2.2新生兒溶血?。℉DN)檢測"三項(xiàng)試驗(yàn)"與新生兒溶血?。℉DN)的關(guān)系。在38例診斷為ABO新生兒溶血病(HDN)患者中,直接抗人球蛋白試驗(yàn)陽性者有17例,陽性率為44.74%;游離試驗(yàn)陽性者有33例,陽性率為86.84%;放散試驗(yàn)陽性者有38例,陽性率為100.00%。3例診斷為Rh新生兒溶血?。℉DN)患者中,直接抗人球蛋白試驗(yàn)、游離試驗(yàn)、放散試驗(yàn)均為陽性。
3討論
臨床上有多種原因引起新生兒溶血病(HDN),其中母嬰血型不合是非常重要的原因,以ABO血型系統(tǒng)不合最為常見,其次為Rh血型系統(tǒng),其他血型系統(tǒng)導(dǎo)致的新生兒溶血病較為少見[4],與本研究中ABO血型不合引起的新生兒溶血病者占92.68%,Rh血型不合引起的新生兒溶血?。℉DN)者占7.32%相符。在以ABO血型不合引起的新生兒溶血病(HDN)中,多為母親為O型血,所生嬰兒為A型或B型[5],本研究也印證了這一點(diǎn),這與O型血母親富含免疫性IgG抗A(B)抗體有關(guān)[6]。我國漢族人Rh血型不合引起的新生兒溶血?。℉DN)由抗D引起者占61.5%,由抗E引起者占34.4%[7],本研究與之基本相符。
在新生兒溶血病血清學(xué)檢查的"三項(xiàng)試驗(yàn)"中,直接抗人球蛋白試驗(yàn)陽性在新生兒溶血病診斷中有非常重要的作用,可以區(qū)分ABO血型系統(tǒng)所致的新生兒溶血?。┖推渌拖到y(tǒng)所致的新生兒溶血?。ˋBO血型系統(tǒng)所致的新生兒溶血病的直接抗人球蛋白試驗(yàn)有時為陰性,嚴(yán)重的ABO血型系統(tǒng)所致的新生兒溶血病的直接抗人球蛋白試驗(yàn)也只呈現(xiàn)弱的陽性反應(yīng)。其直接抗人球蛋白試驗(yàn)陽性強(qiáng)度一般≥2+[8]。因此,新生兒直接抗人球蛋白是區(qū)別ABO和Rh溶血的重要標(biāo)志[9]。放散試驗(yàn)是將患兒紅細(xì)胞上的免疫性抗體進(jìn)行放散,然后再用放散液作間接抗人球蛋白試驗(yàn)。由于放散試驗(yàn)所用患者紅細(xì)胞比直接抗人球蛋白試驗(yàn)所用患者紅細(xì)胞多得多,因此放散試驗(yàn)比直接抗人球蛋白試驗(yàn)的靈敏度高,一旦該試驗(yàn)出現(xiàn)陽性結(jié)果,就表明患者紅細(xì)胞上有免疫性抗體,即可明確診斷。本研究結(jié)果表明放散試驗(yàn)是新生兒溶血三項(xiàng)試驗(yàn)中敏感度最高的試驗(yàn),所有新生兒溶血病患者的放散試驗(yàn)均為陽性。
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關(guān)鍵詞:肝纖維化;D-二聚體;血清
肝纖維化是目前臨床常見高發(fā)疾病,致病原因與病毒、乙醇、脂肪等相關(guān),是因?yàn)楦鞣N致病因子在肝內(nèi)結(jié)締組織中異常增生,導(dǎo)致肝內(nèi)過度沉淀大量的彌漫性細(xì)胞外基質(zhì)而引發(fā)的一種肝臟疾病。目前肝纖維化在臨床上的檢測主要有病理學(xué)診斷、影象學(xué)診斷和血清指標(biāo)。通過對PT、APTT、TT、FIB、D-D和FDP的診斷,來分析檢測方法在肝纖維化患者中的應(yīng)用?,F(xiàn)報(bào)告如下。
1 資料與方法
1.1 一般資料:選取我院自2009年4月~2010年8月間收治的180例患者。其中男96例,女84例,年齡21~78歲,平均48.5歲。其中慢性肝炎輕度9O例、中度56例、重度34例,肝炎的診斷及臨床分型符合2000年第十次全國病毒性肝炎與肝病學(xué)術(shù)會議討論修訂的診斷標(biāo)準(zhǔn);另選取20例健康患者做為正常對照組。
1.2 試劑與方法:受檢對象均空腹抽血4 ml,盡快分離血清后于-20℃保存,測定PT、APTT、TT、FIB儀器和試劑來自德國BE公司,型號為compact X的凝血儀,按試劑盒要求進(jìn)行操作,采用磁珠法,以振幅的變化判定結(jié)果。D-dim采用采用免疫比濁兩點(diǎn)終點(diǎn)法。儀器使用德國羅氏全自動生化儀及羅氏診斷試劑,半定量試驗(yàn)測定P-FDP,試劑為羅氏診斷試劑。
1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理:各項(xiàng)參數(shù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差()表示,采用SPSS 13.0軟件包進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。
2 結(jié)果
檢測輕度、中度和重度肝炎患者的PT、APTT、TT、FIB和D-D值。見表1。PT值、APTT、TT、FIB值均隨著疾病嚴(yán)重程度而增加,且與正常組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。FDP在不同的含量中的陽性率,見表2,表明疾病嚴(yán)重程度加劇,則高濃度中的FDP例數(shù)增加。
表1 肝纖維化患者各項(xiàng)檢測指標(biāo)的結(jié)果() 檢測指標(biāo)
輕度肝炎
中度肝炎
重度肝炎
正常組
PT(S)
13.56±4.72①
14.34±3.22②
14.87±4.21②
12.14±2,34
APTT(S)
33.05±6.22
39.72±8.83①
44.24±7.72③
30.32±9.42
TT(S)
17.41±9.32②
18.10±11.23②
18.79±6.32③
15.46±4.72
FIB(g/S)
2.69±0.63
2.11±0.16
1.64±0.41
3.02±0.17
D-D(mg/L)
0.21±0.06①
0.42±0.02③
0.61±0.07③
0.16±0.05
注:與正常組比較,①P<0.05,②P<0.01,③P<0.001
表2 FDP陽性率及半定量含量范圍(例)組別
例數(shù)
陽性率(%)
N(μg/ml)
0~5.0
5.0~10.0
10.0~20.0
20.0~40.0
較度肝炎
90
52.2①
31
13
3
中度肝炎
56
77.1①
11
25
3
1
重度肝炎
34
88.2①
1
24
3
2
正常組
20
5
1
注:與正常組比較,①P<0.05
關(guān)鍵詞:梅毒;ELISA;TRUST;TPPA;檢驗(yàn)效果
梅毒是一種最為嚴(yán)重的性傳播疾病,梅毒螺旋體(treponema pallidum,TP)是主要的致病原因。TP會侵犯皮膚黏膜及相關(guān)神經(jīng)、心血管、骨骼等重要組織器官,進(jìn)而造成慢性病變,嚴(yán)重影響到患者的健康[1]。目前,主要依靠實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果對梅毒進(jìn)行篩查與確診。為合理選擇檢測方法,本次研究對ELISA、TRUST、TPPA三種檢測方式進(jìn)行對比研究,現(xiàn)將情況報(bào)告如下。
1 資料與方法
1.1一般資料 從2012年6月~2014年12月本院發(fā)現(xiàn)的梅毒患者中選取60例,均滿足梅毒檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)GB15974而確診。其中,男27例,女33例;年齡在25~53歲,平均年齡為(35.2±2.4)歲。將患者隨機(jī)分為三組,A組、B組、C組,每組20例。比較分析三組的一般資料,發(fā)現(xiàn)差異不大(P>0.05),可進(jìn)行比較。
1.2方法
1.2.1試劑來源 TRUST試劑為上海榮盛生物技術(shù)有限公司生產(chǎn),ELISA試劑由上??迫A生物工程股份有限公司生產(chǎn),TPPA試劑則是日本富士瑞比歐株式會社生產(chǎn)的產(chǎn)品。上述試劑均通過衛(wèi)生部部門的批檢,確認(rèn)合格后使用。
1.2.2檢驗(yàn)方法 ①A組:本組血清標(biāo)本嚴(yán)格按照ELISA試劑盒說明書進(jìn)行操作;②B組:本組采用TRUST試驗(yàn)進(jìn)行檢測,方法是把VDRL抗原與含有特制的甲苯胺紅溶液相混合,觀察是否出現(xiàn)由痛血清反應(yīng)素引起的凝集塊;③C組:采用TPPA試驗(yàn)進(jìn)行檢測,方法是在室溫條件下,在U型板上利用稀釋液將血清稀釋,并分別加入致敏與未致敏明膠顆粒,再孵育2h后確認(rèn)結(jié)果。
1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 對試驗(yàn)數(shù)據(jù)運(yùn)用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析,并利用χ2檢驗(yàn)相關(guān)計(jì)量資料。當(dāng)P
2 結(jié)果
2.1對比梅毒檢驗(yàn)結(jié)果 A組檢出17例,陽性率為85.0%;B組檢出18例,陽性率為90.0%;C組檢出20例,陽性率為100%。由此可見,TPPA對梅毒的陽性檢出率明顯高于TRUST與ELISA,差異顯著,存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P
2.2對比三種方法的敏感性與特異性 TPPA的特異性與敏感性分別是98.3%、98.9%;而TRUST的特異性與敏感性均較低,分別為88.2%、85.6%;ELISA的特異性與敏感性位于二者之間,分別為95.3%、96.4%。因此,TPPA和另兩種檢測法在特異性與敏感性方面存在明顯差異,具有一定的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。
3 討論
近年來我國梅毒發(fā)病率有明顯的升高趨勢,究其原因可能與城市流動人口增多、觀念的轉(zhuǎn)變以及血液制品的大量使用有關(guān)。梅毒的常見傳播途徑包括性傳播與血液傳播,也可通過哺乳、輸血、接吻、意外傷害等途徑染病。梅毒螺旋體(TP)是引發(fā)該病的主要致病原因。當(dāng)TP侵入人體后,人體會產(chǎn)生特異抗螺旋體類抗體(TP-Ab)與一些非特異的抗類脂質(zhì)性抗體。特異性梅毒螺旋體抗體主要有IgM與IgG兩種,一般在感染TP后3~6周后出現(xiàn)[1]。IgM抗體會伴隨著疾病的發(fā)展而逐漸消失,但I(xiàn)gG抗體會長時間留在體內(nèi),甚至終生存在。醫(yī)學(xué)界也把TP-Ab作為診斷梅毒的主要檢測手段,目前,臨床上診斷梅毒的血清學(xué)檢驗(yàn)方法種類較多,各有優(yōu)劣,下面主要介紹臨床上常用的三種檢測方法。
3.1 ELISA梅毒血清學(xué)檢測方法 伴隨著血液檢測技術(shù)的發(fā)展,形成了很多新的血清學(xué)檢測方法,包括ELISA。該檢測方法是在微孔板上包被梅毒螺旋體抗原,采用雙抗原夾心法,從而提升了對TP的特異性與敏感性。據(jù)相關(guān)研究顯示,TPPA與ELISA在敏感性與特異性方面都比較相似,均具有較好的敏感性與特異性。由于ELISA檢測法能同時檢測到IgG與IgM等特異性抗體,但隨著有效的治療后,IgG抗體仍可能被檢出,個別患者甚至終生都可檢出。因此,ELISA檢測法不能作為評定患者臨床治療效果與病情復(fù)發(fā)及再次感染的依據(jù)。此外,特異性梅毒血清學(xué)試驗(yàn)存在一定的局限性,可能會受到一些生理或病理方面的影響,導(dǎo)致假陽性率。一些老年患者在相關(guān)基礎(chǔ)疾病的影響下,機(jī)體會生成抗類脂質(zhì)抗體抗原,也可能生成梅毒螺旋體抗體的交叉抗原[2]。
3.2 TRUST梅毒血清學(xué)檢測方法 這屬于非特異性梅毒篩選試驗(yàn),具有很多優(yōu)點(diǎn),比如,價格低廉、測定效價高、操作簡單、檢測快等。其主要原理是運(yùn)用相關(guān)技術(shù)從牛心中提取出卵磷脂、膽固醇、心磷脂等,在特制的甲苯胺紅溶液中重懸這三種物質(zhì)組成的性病研究室WDRL抗原。通過檢測血清或血漿中的相關(guān)反應(yīng)素進(jìn)行判定。但伴隨著相關(guān)醫(yī)學(xué)技術(shù)的進(jìn)步,發(fā)現(xiàn)該試驗(yàn)的敏感性并不強(qiáng)。不同時期檢測得出的檢出率也存在較大的差異。另外,伴有相關(guān)疾病的患者、孕婦等人群體內(nèi)由于存在類似的類脂質(zhì)抗體,也可能檢出假陽性,又稱為低滴度生物學(xué)假陽性。但據(jù)相關(guān)研究證實(shí),TRUST試驗(yàn)滴度會受到患者病程的影響。處于疾病活動期的感染者,TRUST的滴度會相應(yīng)降低。患者感染梅毒后就會提高TRUST滴度[3]。因此,觀察滴度變化對評定梅毒是否復(fù)發(fā)或再次感染是具有較高的臨床價值的。
3.3 TPPA梅毒血清學(xué)檢測方法 該檢測方法的敏感性與特異性均很高,其檢測原理是包被致敏紅細(xì)胞與明膠顆粒的過程中使用純化的致病性螺旋體抗原進(jìn)行檢測。但該檢測方法程序過于繁瑣,并對醫(yī)師的操作水平有著嚴(yán)格的要求。另外,檢測成本較高,患者會面臨不小的經(jīng)濟(jì)壓力。由于該方法的檢測原理和ELISA比較相似,會同時檢出IgG與IgM等抗體,因此,不能作為病情復(fù)發(fā)與再次感染的判斷依據(jù)。
綜上可知,三種檢驗(yàn)方法各有優(yōu)劣,對于疑似陽性的標(biāo)本,建議采用TPPA進(jìn)行檢驗(yàn)。若需觀察治療效果及評判是非再次感染復(fù)發(fā),則宜采用TRUST試驗(yàn)法。如需進(jìn)行大批量檢驗(yàn)或篩查高危人群的時候,一般選擇ELISA法。另外,還必須考慮到患者的臨床癥狀、病情、病史等進(jìn)行診斷。
參考文獻(xiàn):
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中圖分類號:R446.6 文獻(xiàn)標(biāo)識碼:B 文章編號:1005-0515(2010)12-391-01
ABO-HDN是由于母體的IgG-抗A(B)經(jīng)胎盤進(jìn)入胎兒的血液循環(huán),包被并破壞胎兒的紅細(xì)胞,導(dǎo)致胎兒發(fā)生溶血。一般母親在孕育血型不合的胎兒以前就可能有高效價的IgG-抗A(B),據(jù)有關(guān)報(bào)道ABO-HDN約有50%發(fā)生在第一胎;其中O型母親血清中IgG-抗A(B)效價較A型母親血清中的IgG-抗B和B型母親血清中[2]的IgG-抗A效價要高,所以,發(fā)生ABO-HDN的母親往往多數(shù)是O型,又因?yàn)樘杭t細(xì)胞上的A位點(diǎn)(抗原決定簇)較B位點(diǎn)多,故發(fā)生ABO-HDN 以IgG-抗A 比IgG-抗B為多,下面就對我院近年來產(chǎn)前孕婦(丈夫血型不配合)檢測血清抗體效價IgG抗體效價進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。
1 樣本與方法
1.1 樣本 統(tǒng)計(jì)我院2005年5月---2010年8月產(chǎn)前孕婦檢測血清抗體效價IgG抗體效價的結(jié)果,年齡在20-38歲之間,產(chǎn)婦血型全部為O型,其丈夫血型為非O型,共225份樣本。
1.2 試劑和儀器 2-Me應(yīng)用液(上海血液中心),5%A型/B型紅細(xì)胞懸液(上海血液中心),抗人球蛋白試劑(上海血液生物醫(yī)藥),上海磁極離心機(jī)80-2.
1.3 方法 加等量的0.2mol/L2-Me應(yīng)用液和血清,將血清中的IgM破換,然后倍比稀釋,稀釋度分別為8、16、32、64、128、256、512、1024、2048.用鹽水法確定8稀釋度管IgM抗體已破換,用5%A型、B型紅細(xì)胞懸液,抗人球蛋白試劑做IgG-抗A(B)效價的測定.
1.4 數(shù)據(jù)處理 采用四個表x2檢驗(yàn)
2 結(jié)果
產(chǎn)前孕婦血清抗體效價IgG-抗A與IgG-抗B的效價結(jié)果統(tǒng)計(jì),如下:
血清抗體效價IgG-抗A與IgG-抗B的效價有意義率
注:x2=2.816,x2> x20.05(1),p
3 討論
孕婦測定IgG-抗A(B)對預(yù)防新生兒溶血病有重要的意義,當(dāng)母親血清中IgG-抗A(B)效價≥64時,意為此效價有臨床意義,血清效價越高對新生兒溶血病的意義就越大。新生兒溶血病大都由于夫婦血型不合,ABO血型不合引起新生兒溶血主要原因,并且隨著孕婦血清IgG-抗A(B)效價遞增,新生兒溶血病發(fā)生率增加,溶血程度加重。[3]在ABO血型中,O型母親血清中IgG-抗A(B)效價,較A型母親血清中的IgG-抗B和B型母親血清中的IgG-抗A要高,所以發(fā)ABO-HDN生ABO型新生兒溶血的患兒母親往往多數(shù)是O型;以上數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)中,IgG-抗A占效價有意義率43.47%,IgG-抗B占34.42%. p
據(jù)有關(guān)資料介紹,ABO-HDN患兒母親往往多數(shù)是O型,而且胎兒的細(xì)胞上的A位點(diǎn)(抗原決定族)較B位點(diǎn)為多。故發(fā)生ABO-HDN以患兒A型比B型多。綜合數(shù)據(jù)分析,與上述報(bào)道有相關(guān)性,ABO血型抗原是由ABO血型抗原基因編碼的特異性糖基轉(zhuǎn).[1]移酶催化合成的紅細(xì)胞膜表面的糖蛋白和糖脂。ABO抗原決定族共有5種類型,由于單糖經(jīng)轉(zhuǎn)移到特定核心多糖連的末端生成,分別決定血型抗原基礎(chǔ)物質(zhì)、H抗原、A抗原、A1抗原、以及B抗原的表現(xiàn)性,從而A型紅細(xì)胞上抗原決定簇比比B型紅細(xì)胞要多,故A 型抗原表現(xiàn)型要B型多。所以,O型母親(其夫血型不配合)在產(chǎn)前做血型抗體效價是必要的,尤其患兒為非O型,要做好早預(yù)防、早治療,有效預(yù)防新生兒溶血病發(fā)生。
參考文獻(xiàn)
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關(guān)鍵詞:肺炎支原體;血清檢查;IgM
近年來,MP肺炎已引起醫(yī)學(xué)界的廣泛關(guān)注。MP是引起支原體肺炎的主要病原體,在臨床上如若治療不及時,也有可能并發(fā)感染支氣管肺炎或其他相應(yīng)器官病變。MP感染的肺炎臨床上主要以間質(zhì)性肺炎為主,發(fā)病時臨床癥狀較輕,多以咳嗽、頭痛、發(fā)熱等常見的呼吸道癥狀為主[1]。本文對2007年12月到2012年12月我科血液檢驗(yàn)MP感染的患兒資料進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,現(xiàn)報(bào)告如下。
1資料與方法
1.1資料來源 所有資料均來自于2007年12月到2012年12月在我科進(jìn)行血液MP檢測的患兒,共308例,其中男173例,女135例,年齡為15d-12歲。所有患兒均在入院當(dāng)天或第二天做血清IgM特異性檢測。
1.2方法采集 被檢對象手指末梢血,對收集血液進(jìn)行血清分離,之后對血清進(jìn)行ELISA法檢測;MP IgM抗體檢測試劑購自美國DAI公司。
1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 所有數(shù)據(jù)均采用SPSS12.0統(tǒng)計(jì)軟件處理,檢驗(yàn)為卡方檢驗(yàn)。
2結(jié)果
2.1本次共檢出MP IgM陽性患兒為116名,檢出率為37.6%。
2.2分析不同季度MP IgM的陽性檢出率,可以較為明顯的看出,在疑似感染的人數(shù)上以及在檢出率上都以春冬季為主,春冬季的檢出率分別為43.02%和43.01%。詳見表1。
3討論
MP感染在臨床癥狀上不同于由肺炎鏈球菌所引起的典型肺炎,另MP對常規(guī)抗生素沒有反應(yīng),因此MP肺炎又被稱為“非典型肺炎”[2]。肺炎MP是能獨(dú)立生活的有單獨(dú)細(xì)胞結(jié)構(gòu)的最小微生物。由它引起的肺炎全年均可發(fā)病,但是以秋冬季多見。MP感染可以造成小范圍的流行[3],因此周圍有MP感染的患者時應(yīng)注意呼吸道隔離。
當(dāng)前隨著分子生物學(xué)技術(shù)在醫(yī)學(xué)中的廣泛應(yīng)用,MP的檢出率也在相應(yīng)的提高,一般而言,MP感染以呼吸道感染最為多見,但是也有可能引起全身各臟器損害等其他臨床癥狀[4]。在臨床中支原體肺炎的診斷方法有支原體分離培養(yǎng)、PCR、冷凝集試驗(yàn)及IgM檢測等。但是支原體分離培養(yǎng)所需時間長,不適用在醫(yī)院進(jìn)行推廣,而PCR雖然檢出率高,所需設(shè)備昂貴,在臨床也難以得到相應(yīng)普及。冷凝集試驗(yàn)雖然方法簡單,但對支原體敏感和特異性均較差,而IgM檢測無需特殊儀器設(shè)備,操作簡單,特異性較高,作為支原體肺炎實(shí)驗(yàn)室診斷有其獨(dú)特的優(yōu)勢,因此當(dāng)前在臨床檢驗(yàn)中得到廣泛應(yīng)用。
總之,MP感染的發(fā)生有其季節(jié)的特異性,一般以冬春季為主,另外以學(xué)齡期兒童為主?;純涸诨加写瞬r應(yīng)及時住院進(jìn)行檢測治療,以防感染引起其他病痛。
參考文獻(xiàn)
[1]鄭寶燕,唐書生,嘉紅云.小兒肺炎支原體肺炎136例臨床分析.廣東藥學(xué)院學(xué)報(bào),2004,20(1):74-76.
[2]李盛初.小兒肺炎支原體感染的血清學(xué)檢測.中國熱帶醫(yī)學(xué),2007,7(3):396-397.