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得到駁殼槍后,豬娃可沒少下工夫,經常去龍王寺中悄悄練槍,雖然還無法百發百中,但眼急手快開槍殺人還是做得相當到位。你知道有哪些百發百中的可以知道摘抄的好句子呢?這里給大家分享一些關于百發百中的造句，供大家參考。
一、百發百中含義百：形容多;發：發射，也指射箭;中：正對上，恰恰合上。形容射箭或射擊非常準，每次都命中目標。也比喻做事有充分把握，辦事成功，決不落空。
二、百發百中典故蘇厲是戰國時期從事政治外交活動的謀士。有一次，他聽說秦國大將白起將要帶兵攻打魏國都城大梁，而大梁一旦被秦占領，附近的西周王室就有危險。于是，蘇厲對周王說：“白起這幾年打敗過韓、趙等國，奪取了許多土地。現在他將要帶兵攻打大梁，大梁一旦被白起攻下，周王室就危險了!您應當想辦法阻止白起出兵。”于是周王派蘇厲前往秦國。
蘇厲對白起說：“從前，楚國有一個人名叫養由基，是一個射箭能手，他距離柳樹一百步放箭射擊，每箭都射中柳葉的中心，百發百中，左右看的人都說射得很好，可是一個過路的人卻說：“這個人，可以教他該怎樣射了。”養由基聽了這話，心里很不舒服，就說：“大家都說我射得好，你竟說可以教我射了，你為什么不來替我射那柳葉呢!”那個人說：“我不能教你伸直左臂持弓，彎曲右臂引弓持箭，不過你有沒有想過，你射柳葉百發百中，但是卻不善于調養氣息，等一會疲倦了，一箭射不中，就會前功盡棄。”
講完這段故事，蘇厲把話題拉回來說：“你已經打敗了韓、趙等國，取得了許多土地，功勞很大。現在，又要派你帶兵出關，經過西周王室的所在地去進攻大梁，如果這一仗不能取勝，就會前功盡棄。你不如說自己生病，不要出兵為好。”白起聽了，笑著說：“我所向披靡， 百戰百勝，怎么會不能取勝呢?”于是，他沒有被蘇厲說動，率兵攻打魏國，果然又大獲全勝，奪取了魏國的幾十座城池。
三、百發百中造句1.林強是校籃球隊隊長，他投籃幾乎是百發百中。
2.連長刻苦訓練,練就了百發百中的好槍法。
3.他是我軍有名的神,在戰場百發百中,彈無虛發。
4.她手持雙槍，左右開弓，百發百中，人稱神。
5.喝蜂蜜浸泡蘿卜的汁來治咳嗽，聽說有百發百中的效果。
6.上帝，愿我們百發百中防守緊密無縫。
7.他偷偷學習射箭，終于練成了百發百中的神箭手。
8.在奧運會的射箭比賽中，一位中國選手百發百中，成績遙遙領先。
9.古時候魏國有個著名的射手叫更羸，他射箭百發百中，大家都管他叫"神箭手"。
10.如果把射箭練到熟能生巧的程度，那你射箭準是百發百中。
11.我參加了射箭比賽，我聚精會神地瞄準箭靶，結果百發百中。
12.包你百用百靈，百發百中。
13.我急了，拿出小時候的本領，用石頭打小五弟，我還是百發百中，打的他上竄下跳的。
14.他屢獲射擊金牌，是個百發百中的神。
15.他料事如神，經常是百發百中。
16.鼠標操作，光頭警官，可是百發百中的神，現在由你來冒充他，看你夠格嗎?
17.只見他反身跳投，又進了，真是百發百中!
18.他能有百發百中的功夫，是靠他每天練投一千次籃得來的。
19.他是個百發百中的神。
20.喬丹投籃百發百中，真令人叫絕。
21.百發百中：他打靶百發百中，贏得了大家的喝彩。
22.要想在奧運拿射箭金牌，非得練成百發百中的功夫不可。
23.當兩位情場高手遇上，要一決高下，之前本是百發百中的追女捕男本領，現在都未必夠用，究竟民俊與之愿，誰能首先戰勝心魔，成為情場至尊?
24.他射箭百發百中!每一次開槍都打中了匪徒。
25.軍師妙計向來百發百中，不必懷疑。
26.看這些高手射飛鏢，幾乎都是百發百中，真令人佩服。
27.我射箭百發百中，經常一箭雙雕。
28.他的射箭技術一流，百發百中。
29.他打槍百發百中,這說明他很行.
30.屢試屢驗,百發百中,愿以此法,共諸同人。
31.二龍劍——廣寒仙子:二龍纏繞,投擲攻擊,百發百中。
32.青蛙不光吃蚊子、蒼蠅和水里的孑孓，還大量捕食蛾子、稻飛虱等農業害蟲。
只要一遇見害蟲，青蛙的舌頭就迅速翻射出口外，粘住小蟲，卷入口中，常常是百發百中，它是有名的捉蟲能手。
33.在此次專訪中，杰克師兄除了侃侃而談自己對靈修的認識與體悟之外，并與大家分享箭無虛發百發百中的秘訣。
34.他一只手背在后面都能把任何人打倒。
他要是拿起那把紫杉木弓，一英里半開外就能射中一角錢的分幣，百發百中。
35.沒過幾天小朋友們就都嘗到了滋味兒，他們還是打完我就跑，可我用石頭想砸他們哪就砸哪，因為他們跑的時候有聲音，只要能聽到聲音，我就能百發百中。
36.我不能把實情告訴姥姥，我想她肯定不會答應我這么做。
真是功夫不負有心人，我終于練就了百發百中。
2、將線一頭長一頭短的對折
3、用針的針眼這頭插入對折的圈里拉緊。
4、拉緊的針和線保持住放在兩個手指頭中間捏緊，手指頭不要松開抽出針。
5、小小的張開兩個捏緊的手指頭看一下線在什么位置，將針眼對著線，手指頭再捏緊，把針穿下去。
6、張開手指頭，拉著穿出來的一頭把線短的那頭完全拉出就好了。
2.土地要求 選擇2-3年未種植過十字花科作物的田地。要求地勢平坦，背風向陽，陽光充足，排灌方便，土質肥沃，最好為中性沙壤土。
3.育苗
苗床準備 選背風向陽處做陽畦。陽畦北墻高40-50厘米，南墻高10-15厘米，寬1.5米，東西兩墻依南北墻高度打成斜坡。北墻每隔2米長設―個通風口。―般每667米2制種田需10米長、1.5米寬的標準育苗畦2個。每畦中施入優質腐熟過篩的土糞300千克、過磷酸鈣5千克、尿素1千克，充分拌勻。播種前5天將畦面整平。再撒入復合肥1千克，與床土混合均勻后用腳踏實整平，澆水滲透。再覆蓋薄膜烤畦，提高床溫。有條件的可以在溫室育苗，只需做成育苗畦即可。
播種期確定 華北地區適播期為12月中旬―翌年1月中旬。由于播種早，可以控制幼苗的生長發育。但是，應該注意的是，對于個別冬性較弱的白菜親本，不宜播種過早。播種過早，苗齡長，幼苗在苗床內即可抽薹，不利于定植。定植后也會生長不旺，過早衰老，影響種子產量。
播種方法 可采用撒播或點播。撒播前，先把育苗畦整平并用腳踏實，然后灌大水，每標準畦撒復合肥0.5千克，待水滲下后，上面撒很少一層“穩土”，將種子與適量的細土混勻、撒種，播種后覆0.5-1厘米過篩細土。點播常用土坨育苗，方法是待水滲下后，先劃成8厘米×8厘米的方塊，再單粒播種，也可以采用營養缽或紙筒育苗。點播法雖然費工，但出苗后不必間苗。同時，單粒播種用種量少，出苗整齊，營養面積大，不易徒長，定植帶土坨緩苗輕，成苗率高。
苗床管理 ①播種后的苗床管理。溫度保持20℃- 25℃，晚上覆蓋草簾，白天揭開，保持薄膜干凈，以接受更多陽光。當幼苗2片子葉展平、心葉露出時，適當通風，將床溫降至5℃-6℃，持續4-6天，進行低溫煉苗，可防止高腳苗，增加抗寒能力。隨后適當控制通風。晴天白天床溫保持 18℃左右，夜間床溫保持10℃-12℃。可促進幼苗生長。陰天床溫可比晴天降低3℃-5℃。3-4葉期，開始放風煉苗，風口由小到大，逐漸增加，夜間最低溫度掌握在2℃以上，白天可逐漸揭開苗床薄膜，加強低溫鍛煉，保證幼苗通過春化。②分苗和分苗后的管理。撒播育苗時，如果密度太大，就要分苗，―般在幼苗長至2片真葉時進行。分苗前去雜去劣。分苗應選擇晴天進行，分苗株行距為8厘米x8厘米。分苗時注意隨栽隨蓋薄膜。緩苗期白天床溫保持20%-25%。緩苗后，晴天保持18℃左右，陰天保持10℃-12℃。定植前20天開始煉苗，主要是采取逐漸加大通風量、降低床溫的措施。使幼苗逐漸適應定植后的外界環境條件。定植前1周在苗床內澆大水。待水滲下后，用刀按株行距將苗床土割成深 10-12厘米土坨，以利于定植后緩苗。溫室育苗一般在幼苗長至4-5片葉時，將幼苗移至室外，采用白天揭膜、夜間蓋膜的方法管理，經過6-7天的低溫處理，保證幼苗通過春化。
4.定植 ①定植時期。一般定植適期為2月底―3月上旬。定植時幼苗以6-8片葉為好，少于6片的秧苗，緩苗慢，分枝數少，產量低；多于8片葉的秧苗，葉片生長旺盛，抽蓬推遲，影響產量。②定植方法。采用地膜覆蓋栽培。具體做法是：2月底前把大田澆透水，待墑情合適時施足基肥，整地做畦，畦做成高10厘米、寬1米的半高壟。定植前7-10天覆蓋地膜，提高地溫，定植時用手或鏟按株行距戳破地膜開穴定植。
5.田間管理
灌水 種株全生長期不能缺水，前期缺水會影響生長發育，后期缺水則影響種子飽滿度。開春后，氣溫比較低，為使種株快速生長，應設法提高土壤溫度。一般在種株開花之前不澆水，如果明顯缺水，也要小水澆灌。開花初期澆1次透水，直到結莢期，可以不澆水。結莢到角果開始變黃以前，控制澆水，一般不旱不澆。角果開始變黃后，一般不再澆水。
施肥 定植前，結合整地，每667平米施農家肥5000千克，并適當增施磷鉀肥。現苗抽薹時，結合灌水每667平米追施尿素10-15千克，肥力較好的地塊不必追肥。
打頂摘心 當主花莖長至5-6厘米高時，把頂芽摘掉。這樣可促進種株基部萌發新枝，增加種株的分枝數量及結莢數。
調節花期 首先通過播種期調節花期，當出現一個親本或單株開花較早時，要及時將已開的花摘除或將主花莖打頂。直到2個親本的花期一致。當一親本花期結束后，另一親本繼續開花時，也應打掉遲開的花朵。
人工放蜂 大白菜是異花授粉蟲媒花植物，利用蜜蜂授粉可以提高一代雜種的純度和產量，應保證每667平米制種田放1箱蜂。放蜂前要關箱凈身1周，以防蜂身上存留有其他可串花的十字花科花粉對制種田造成污染。
中學生美白牙齒的方法
1、酵母美白牙齒
有些美眉會通過醫學美容的手法來達到美白牙齒的目的，但是，通過醫學美容手法來美白牙齒并非是所有的美眉都能夠接受的，還是從日常的生活中來尋找合適的方法吧!酵母是我們生活中非常常見的一種食物，通常我們要吃面食都會用到它，酵母中含有蛋白質，且有分解的作用，美眉們可以在刷牙的時候，在牙刷上擠上牙膏之后，再沾一點酵母粉，再進行刷牙，這樣長期檢查，會有令牙齒變白的效果。
2、小蘇打美白牙齒
用小蘇打來美白牙齒是美眉們常用的一種方法，在牙刷上沾上一點小蘇打，然后再正常的進行刷牙，堅持使用，會讓牙齒變得潔白光亮。為什么很多美眉說用小蘇打刷牙來美白牙齒并沒有理想中的效果呢，那就因為你沒有堅持，想要令牙齒由黃變白，不是一朝一夕的，需要長期堅持哦!
3、食醋美白牙齒
食醋也可以幫助美眉們來美白牙齒，如何使用呢?首先在刷牙之前做好準備，先用食醋來漱漱口，讓食醋在牙齒的部位停留一兩分鐘的時間，然后將食醋吐出來，再繼續刷牙，你便會發現堅持一段時間，牙齒自然就變白了。雖然食醋漱口之后，再來刷牙能夠有效美白牙齒，但是此方法不宜長時間使用，否則牙齦會感覺非常不舒服，偶爾試一次還是不錯的哦!
4、花生米美白牙齒
還有一種方法可以美白牙齒，那就是利用花生米，美眉們可以拿四五粒花生，將花生粒攪碎成碎末狀，混合入少量的食鹽，然后充當牙膏來刷牙，過不了多長時間，你便會發現你對大黃牙變得潔白了哦!有些美眉也會試著用花生米攪碎在嘴巴里，然后立刻刷牙，為什么這樣的方式不能夠充分起到美白牙齒的效果呢?原因在于花生并沒有完全地攪碎，應該把花生攪碎成末狀，讓花生中的美白成分充分接觸牙齒，這樣使用起來，美白牙齒的效果會更加明顯哦!同時，配合少量的食鹽，可以有效幫助牙齒的牙縫中消炎殺菌，令牙齒更加健康。
有助于中學生美白牙齒的蔬菜水果
1、草莓。堅固牙齒,并且其中還含有漂白和清潔牙齒的成分,對于除掉牙齒表面的茶垢和咖啡污垢十分有用。因此,飯后不要忘了吃些草莓。花菜。它可以作為“磨砂膏”,美白牙齒。同時,花菜可以刺激唾液的產生,有助于阻止牙斑的形成。
2、兩杯西瓜汁可以補充人體每天所需維生素C的25%。維生素C對于牙齒和牙齦健康非常關鍵,它有助于鐵元素的吸收,還具有抗氧化功效,防止“自由基”分子氧化導致的牙齒老化。而且維c也是美白的一個要點3、橙子中的維生素C同樣會促進牙齒和牙齦健康,其中的纖維還可以使牙斑脫落。
4、嚼蘋果可以刺激口腔分泌唾液,清理和堅固牙齒,還可以減少身體對糖的吸收。
5、深色蔬菜,暗綠色葉子的蔬菜富含胡蘿卜素,它可以轉化成維生素A,有助于保持牙床堅固。
6、奶制品,酸奶中的蛋白質可以附著在牙齒上,從而保護其免受有害酸性物質的侵襲,增強牙齒健康。另外,咀嚼較硬的干酪可以促進唾液產生,從而去除食物殘渣。
7、水可以減少口腔中的污垢,讓人免受牙齒腐蝕的痛苦,使得牙齒長期堅固。平時要做到,飯間抿少量的水,飯后漱口。
8、葡萄中的清潔酶——蘋果酸,會使牙齒亮白。
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長命百歲 十種養生大法
上海中醫藥大學教授 李其忠
隨著人們自我保健意識的不斷加強，養生已成為當下最熱門的話題。什么是養生？如何養生，才能長命百歲呢？所謂養生，是指根據人體生命規律所進行的一切物質上的或精神上的心身護養活動。由此而言，養生實際上是一種健康理念，甚至是一種生活方式。養生之道，無處不在。下面，推薦10種養生大法，希望大家能夠科學養生，長命百歲。
一法 養性調神 可得天年
養生首先要養神，通過主動的修德、調志、節欲等多種途徑，保全精神健康，達到形神共養。①修德以怡神。注重修德之人，行事光明磊落，性格豁達開朗，如此則情志怡然安寧，氣血和調，臟腑功能平穩，形與神俱，可得天年。②調志以攝神。通過主動地控制和調節情志活動，可以達到寧心攝神、健康長壽的目的。③節欲以安神。人生在世，孰能無欲。但人之欲望，永無滿足。要想清心寡欲、靜養心神，就應自覺地、盡力地做到薄名利、禁聲色、廉貨財、損滋味、除妄想、去妒忌。養生保健必須保持樂觀的處世態度和豁達的心理狀態。
二法 心態年輕 老而不衰
經驗告訴我們，一個人的生命活力不僅要看生理年齡，更要看心理年齡。觀察周圍，不難看到，有些人年齡不大，卻心態消沉，由此而損及健康；有些人年齡雖大，卻心態年輕，由此而有助健康。因此，中老年人要保持年輕心態，平時要注重精神享受。交誼舞會、茶室聊天、逛街購物、老年大學、老年KTV等，中老年人都可以根據自身喜好不時而為。當然，如果經濟條件允許，也可以經常外出游玩，既得到身體上的鍛煉，又得到心理上的愉悅。若能長期堅持，永不服老的心態極有利于身心健康。
三法 勤用腦 防衰老
現今社會，生活節奏快，工作壓力大，很多人容易出現記憶力衰退，失眠多夢，理解能力差等表現。在中老年人則多表現為近期記憶力減退，本來很熟悉的人名、路名、電話號碼等往往一時想不起來，這些都是大腦衰老的表現。如何延緩和改善大腦功能？目前認為，積極用腦，維持必要的學習、交流、參與力所能及的公眾活動，是延緩腦衰老的好方法。平時，中老年人要勤用腦，勤思考，看一些有趣的腦筋急轉彎，猜一些小謎語，或者玩一些益智腦力小游戲，不排除作為娛樂活動的打牌、麻將等，不僅可以增添生活樂趣，還能有效防止大腦“生銹”。
四法 午時小憩 子時入眠
人之一生，三分之一的時間在睡眠中度過，這既是生理的需要，也是健康的保證、養生的途徑。子時，是指晚上11時至次日1時；午時，是指上午11時至下午1時。子午之時均為陰陽之氣交換之際，睡好子午覺具有重要的養生意義。午時小憩，對上班族而言，有助于消除上午工作的疲勞，也為下午高效工作積蓄精力。老年人午睡時間不宜過長，以半小時至一小時為宜。子時入眠，晚上11點至早晨6點為睡眠黃金時間，容易進入深睡眠狀態。有些年輕人平時睡得很晚，有的甚至出現“晚睡強迫癥”，長此以往，必然會影響身心健康。
五法 吃好早餐 節制晚餐
一日三餐，合理安排，是飲食養生的重要內容。現代研究認為，科學合理的膳食方式應是吃好早餐，滿足午餐，節制晚餐，并強調三餐之中，早餐最重要。早餐不僅要吃飽，而且要吃好。早餐食品既要有豐富的蛋白質，又要有足夠的碳水化合物。若有條件，早餐要有菜、有飯、有牛奶（或豆漿）。午餐要吃飽，品種要豐富。晚餐則以少而精為善，不宜過多攝入蛋白質和脂肪，以免肥胖，影響健康。研究證實，城市高血脂癥患者比例大幅度上升，與晚餐吃得過飽、過好有關。此外，不可嗜食油炸類、燒烤類等“垃圾”食品。
六法 清淡為主 葷素搭配
飲食搭配的總原則應該是葷素搭配，粗細混吃，菜譜寬廣，營養全面。膳食有辛、甘、酸、苦、咸之異。中醫養生理論認為，“謹和五味”是益壽延年的基本飲食原則。所謂“謹和五味”即是依據人體生理需要，合理調配，適度攝取膳食營養，以滋養人體臟腑氣血。現代研究認為，許多疾病的產生與不良的飲食習慣有關。偏嗜甜食，易致糖尿病、肥胖癥等；偏嗜咸味，易致高血壓、動脈硬化，或加劇水腫等；偏嗜辛辣，易致便秘、痔瘡，加劇潰瘍病等；偏嗜酸味，對于平素胃酸偏多、胃脘嘈雜吞酸的人，尤為不宜。對于陽氣不足、脾胃虛弱的人來說，更不可偏嗜苦味，因為苦味多寒，苦寒易傷陽氣。
七法 動靜結合 以靜為主
動者屬陽，靜者屬陰，動靜相宜，陰陽協調，是生命變化的內在依據。中醫學基于對動靜的哲學認識，賦予其在生命科學中的具體內涵。動以靜為前提，動以靜為基礎。運動容易，寧靜尤難。若肢體運動，心中躁動，不如不動。任何體育運動、養生功法都需要調節呼吸，排除雜念，意守一處，最終達到寧靜狀態，這是所有養生功法的基本要求和最高境界。就運動強度而言，運動后，最高脈率每分鐘應該不超過220次減去年齡。體弱者及老年人，不適于劇烈運動者，建議運動后最高脈率控制在每分鐘190次減去年齡以內。可謂動靜結合，以靜為主。
八法 戒煙無早晚 飲酒莫過量
吸煙的危害眾所周知，故戒煙無早晚，能戒則戒。一時尚未戒煙者，抽煙時最好將后三分之一的香煙掐掉，因為越往后抽，焦油含量越高，對身體損害越大。此外，酒為百藥之王，不少中藥需用酒來炮制，有些處方煎煮時尚須加入適量的酒。適量飲酒，有助于溫通經脈，暢行氣血，消除疲勞，促進睡眠。平素聚會，酒又是營造氣氛的調節劑，不可缺少。但飲酒切忌過量，過量則傷身，過量則亂性，過量則損壽，這是需要大家牢記的。
九法 善于食補 科學養生
食療、食養，對于科學養生很重要。各類人群，如兒童、老人、孕婦；各類體質，如偏寒性體質、偏熱性體質；各類病證，如腎病、肝病，飲食調補各有宜忌。因此，食療、食養時，需根據食品的調補作用合理選用。①大蒜、韭菜、雞肝、蝦、海參等，具有一定的補氣溫陽作用；②、枸杞、白蘿卜、龜板、鱉甲等，具有滋陰降火作用；③大麥、酸牛奶、蘋果、西紅柿、白菜等，具有健脾開胃作用；④蜂蜜、核桃仁、香蕉、蘋果及富含粗纖維的蔬菜，具有潤腸通便作用；⑤牛奶、蜂蜜、獼猴桃、燕窩、哈士蟆油等，具有潤膚養顏作用。
竹柏種子一周左右會發芽。竹柏別稱：椰樹、羅漢柴、欏樹、山杉、糖雞子、船家樹、寶芳、鐵甲樹、豬肝樹、大果竹柏，羅漢松科竹柏屬的喬木，高達20米，葉對生，革質，有多數并列的細脈，無中脈，種子圓球形，花期3-4月，種子10月成熟。
竹柏為古老的裸子植物，起源距今約1億5500萬年前的中生代白堊紀，被人們稱為活化石，是中國國家二級保護植物。中國浙江、福建、江西、湖南、廣東、廣西、四川等地區均有栽培，也分布于日本。
（來源：文章屋網 ）
基因提取及擴增方法
1單個核細胞（MNC）的分離
在無菌條件下采集骨髓液2mL，EDTA抗凝，用Ficoii淋巴細胞分離液（相對密度1．077）分離MNC，用1×PBS洗滌2～3次。－80℃凍存備用或直接提取RNA。
2總RNA的提取
用原平皓（天津）生物技術有限公司提供的RNApure超純總RNA離心柱式試劑盒提取RNA。經紫外線分光光度計測定RNA純度（A260／A280＞1．6），同時進行RNA定量測定。在15g／L瓊脂糖凝膠上電泳可見3條清晰亮帶，說明所提取RNA完整。
3cDNA合成
應用M－MVL逆轉錄試劑盒（Fermentas公司）合成cDNA。逆轉錄反應體系20mL，包括總RNA1μg，0．5g／L的OLigo（dT）primer1μL，使用DEPC水補充至12μL。快速瞬時離心，置65℃孵育5min，立即置于冰上；然后依次加入55×緩沖液4μL，RNase抑制劑1μL，10mmoL／LdNTPMix2μL，混勻，42℃2min；再加入逆轉錄酶（M－MLV）1μL，42℃反應30min，70℃下放置10min，冰上5min。
4PCR反應
PCR反應體系包括逆轉錄產物4μL，20μmol／L的FAK正、反義鏈引物各1μL，2×PCRMix10μL（其中包括10mmol／L的dNTPs、10×緩沖液、TaqDNA聚合酶），其余以DEPC水補足至20μL。所用引物根據GenBank提供的FAKmRNA序列，由上海生工公司設計合成。
FAK正義鏈為5′－TATTGGACCTGCGAGGGAT－TGG－3′，反義鏈為5′－GAGGCGGTTTCTTTGGT－GGAGC－3′，目的基因長度為255bp。β－actin正義鏈為5′－AAACACCCCAGCCATGTACGT－3′反義鏈為5′－GTGGTGGTGAAGCTGTAGC－3′，目的基因長度為228bp。內參照與目的基因分別擴增，PCR條件：94℃預變性2min；94℃變性30s，60℃退火30s，72℃延伸30s，40個循環；72℃再延伸5min。
5PCR產物分析
取PCR產物10μL與LoadingBuffer2μL混合，在15g／L瓊脂糖凝膠中電泳，80V恒壓電泳25min，EB染色。陽性結果可見228、255bp處各有一條亮帶，分別為β－actin和FAK。紫外線透射儀觀察并照相，照片經Meta－morphImagingSight軟件進行分析并讀取吸光度值，取FAK與β－actin曲線下面積的比值作為FAKmRNA的相對含量。
染色體的制備及R顯帶和核型分析
1染色體的制備將白血病病人骨髓細胞按（1～2）×109／L的密度接種于RPMI1640培養基中，培養24h，加入0．05mg／L秋水酰胺，37℃孵育1h。1000r／min離心10min，棄上清液，加入預溫至37℃的0．075mol／LKCl溶液8mL，37℃孵育30min進行低滲。加入1mL固定液（甲酸∶乙醇＝3∶1）輕輕混勻進行預固定，離心后再進行3次固定，將最后一次固定的標本以1000r／min離心10min，棄上清液，加入適量固定液配成細胞懸液，備用。
2染色體R顯帶采用氣干法制片，將制備好的片子晾干，放入R顯帶液中，87．5℃水浴70～80min。取出片子水洗，晾干，再加Giemsa液染色15min，水洗，干后鏡檢。
3染色體核型分析每例病人分析10～20個分裂中期細胞，觀察有無染色體異常。
統計學處理
應用SPSS11．0軟件進行統計學處理，兩組率比較用χ2檢驗和精確概率檢驗；計量數據以x珚±s表示，組間比較采用t檢驗。
結果
1FAKmRNA在AL病人骨髓MNC中的表達
AL病人FAKmRNA陽性表達率為66．0％，與正常對照組（20．0％）比較差異有顯著意義（χ2＝5．49，P＜0．05）。其中ALL和ANLL病人陽性表達率分別為71．4％和63．9％，二者差異無顯著意義（P＞0．05），但兩者均高于正常對照組（P＝0．04；χ2＝4．44，P＜0．05）。ALL和ANLL病人FAKmRNA的表達水平分別為0．75±0．12和0．65±0．17，二者差異無顯著性（P＞0．05），但與正常對照組（0．31±0．15）比較，差異有顯著意義（t＝7．98、5．60，P＜0．05）。部分病人電泳結果見圖1。
2FAKmRNA在不同時期AL病人的表達
初診組和復發組AL病人白血病細胞FAKmRNA的陽性表達率分別為80．0％、85．7％，兩組比較差異無顯著性（P＞0．05），但均高于正常對照組（χ2＝9．38，P＜0．05；P＝0．02）。初診組和復發組AL病人白血病細胞FAKmRNA表達水平分別為0．72±0．12、0．87±0．15，兩組比較差異無顯著意義（P＞0．05），但均高于正常對照組（t＝8．79、7．58，P＜0．05）。緩解組病人FAKmRNA的陽性表達率為23．1％，均明顯低于初診組和復發組，差異均有顯著意義（χ2＝10．26，P＜0．05；P＝0．02）；與正常對照組比較差異無顯著性（P＞0．05）。緩解組病人FAKmRNA表達水平為0．27±0．17，明顯低于初診組和復發組（t＝4．44、7．82，P＜0．05），與正常對照組比較差異無顯著性（P＞0．05）。
3FAKmRNA的表達與骨髓細胞染色體核型的關系
AL病人骨髓細胞染色體異常核型的檢出率為64．0％（32／50）。FAKmRNA在異常核型組的陽性表達率為78．1％，明顯高于異常核型未檢出組的44．4％（χ2＝5．82，P＜0．05）；FAKmRNA在異常核型組的表達水平為0．75±1．17，明顯高于異常核型未檢出組的0．45±0．11（t＝6．72，P＜0．05）。
討論
FAK是SCHALLER等于1992年發現的能使Src內源性蛋白酪氨酸激酶激活的主要底物，在絲氨酸轉化細胞的磷酸化蛋白中發現。FAK廣泛分布于成纖維細胞、血小板、表皮細胞、內皮細胞、TC、BC、中性粒細胞、單核細胞和滋養層細胞等的細胞質中。已知FAK有6個可以被磷酸化的酪氨酸位點，FAK主要通過這些位點的磷酸化并與含有SH2或SH3結構域的蛋白質相結合，通過整合素、FAK／Src／Pl30CAS／JNK、FAK／PI3激酶以及FAK－ROCK／RhoA等多條信號通路參與細胞多種生物學過程，并參與腫瘤發生、發展、侵襲與轉移。
白血病是遺傳學和表型上異質性疾病，為多種癌基因、抑癌基因結構或表達異常及細胞信號轉導通路調節失衡等協同作用的結果。迄今，有關FAK與白血病相關性研究報道較少。
2004年RECHER等報道，在AML中發現有FAK蛋白的高表達和過度激活，并提示FAK的高表達與白血病細胞的遷移、預后及耐藥性有關系。
本研究結果顯示，AL病人FAK基因的表達率、表達水平均明顯升高，其升高的具體機制不是十分清楚。先前有研究結果表明，FAK的磷酸化受到整合素、細胞因子、致癌基因和酪氨酸激酶受體的調節。異常整合素或細胞因子的信號通路以及Ras等致癌基因產物的表達均可以導致AML細胞中FAK的磷酸化，從而進一步導致下游一系列信號通路的持續激活。另外有研究結果顯示，在AML細胞中20％的病人有8q22－8q24染色體區域擴增，而這個區域正是FAK基因所在，因此，8q的擴增可能與FAK在ANLL細胞異常表達有關系。
FAK與血液系統中B細胞成熟過程也有關系，LE等研究顯示，FAK是CXCL12－CXCR4軸的下游信號分子，并介導細胞的黏附作用。CXCL12誘導未成熟B細胞FAK蛋白磷酸化，通過PKC等信號共同調控細胞的成熟與運動。有關FAK基因在ALL表達增高的具體機制仍需進一步探討。
本研究結果還顯示，初診組和復發組病人白血病細胞FAK基因的表達率和表達水平較正常對照組明顯升高，而緩解組則明顯降低，推測FAK基因表達與白血病的病情進展有關，是預后不良的因素之一。TARDY等最近研究顯示，AML病人白血病細胞中FAK蛋白高表達則其預后相對較差。本文結果與TARDY等的研究結果一致，說明FAK是影響白血病病人生存率的重要因素之一。
LE等采用BCR－ABL－BaF3細胞系（一種BCR－ABL基因轉染的前B淋巴細胞）研究顯示，FAK基因沉默技術使細胞的增殖和克隆形成均減少，中位生存期延長，且伊馬替尼對BCR－ABL細胞的療效增加。這表明FAK對ALL的進展具有一定的促進作用。FAK的高表達抑制腫瘤細胞失去細胞黏附后的失巢凋亡，導致癌細胞以非錨定生長方式不斷增殖，這有助于腫瘤細胞的存活和侵襲轉移。
2、時間：最適合種植百合的時間為7-9月份，但每個地區的氣候是不一樣的，所以要根據當地氣溫來進行稍加調整。這個時間的氣溫正好處于16-24℃左右，是很利于其生長的。
3、選種：挑選健康的種球，如果說它的根部有腐爛的部分，或者是已經長出新根時，需放到殺菌溶液中。浸泡大約20分鐘時間，取出后要用干凈的水沖洗干凈。
4、種植：種植時將處理好的種球放到土里，芽尖以上的部分都應埋進土里，要讓兩者充分的接觸。種植后要根據土壤的情況適當澆水，應讓土壤維持一個濕潤狀態。
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（來源：文章屋網 ）