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關(guān)鍵詞:醫(yī)學院校;定向生;主觀幸福感
中圖分類號:G641 文獻識別碼:A 文章編號:1001-828X(2016)007-000-01
因我國長期衛(wèi)生政策及城鄉(xiāng)經(jīng)濟差異,基層醫(yī)療衛(wèi)生系統(tǒng)人員缺乏。衛(wèi)計委公布統(tǒng)計數(shù)據(jù)顯示,截止2009年底,我國農(nóng)村人口中每千人中的醫(yī)生數(shù)只有0.47人,基層醫(yī)療衛(wèi)生系統(tǒng)中具有高級職稱醫(yī)療衛(wèi)生人員僅占0.8%,具有本科以上學歷醫(yī)療衛(wèi)生人員約占2.2%。為健全基層醫(yī)療衛(wèi)生體系,改善基層臨床醫(yī)療人員匱乏現(xiàn)狀,提高基層醫(yī)療衛(wèi)生人員學歷水平及臨床技能,達到提高基層醫(yī)療服務(wù)水平的目的,發(fā)改委、衛(wèi)生部、教育部等多個部門于2010年在部分醫(yī)學院校開展農(nóng)村訂單定向免費醫(yī)學生培養(yǎng)項目(以下簡稱為定向生),即定向招生、免費培養(yǎng),完成臨床醫(yī)學五年學業(yè)后按入學簽訂協(xié)議入基層醫(yī)療衛(wèi)生系統(tǒng)從業(yè)。這部分醫(yī)療人才必將改變我國基礎(chǔ)醫(yī)療衛(wèi)生體系結(jié)構(gòu),對未來基層醫(yī)療改革有深遠影響[1]。
但是,這部分學生在校期間身份特殊,在校期間心理狀態(tài)與其它醫(yī)學生存在差異。一方面,定向生入學即簽訂工作,對就業(yè)、升學等壓力體驗較少;另一方面,因定向生定向就業(yè)單位多為鄉(xiāng)鎮(zhèn)衛(wèi)生院或經(jīng)濟落后地區(qū),對未來職業(yè)發(fā)展影響較大,同時,因其定向就業(yè)單位醫(yī)療水平有限,在待遇、未來專業(yè)發(fā)展等方面存在不利因素。因此,相對于一般臨床醫(yī)學專業(yè)學生,其心理更加矛盾,心理健康程度更為復(fù)雜。而主觀幸福感是衡量心理健康得重要指標之一,相關(guān)研究表明,各類定向生主觀幸福感均低于普通大學生[2-3]。為了解醫(yī)學專業(yè)定向生與非定向生在主觀幸福感水平上是否具有差異,本研究團隊于2015年5月-6月進行相關(guān)調(diào)查研究,以期對相應(yīng)得教學改革、心理健康教育工作方案制定及知識宣傳提供參考。
一、對象與方法
1.對象
根據(jù)年級、定向與非定向的不同,從我校大一至大三每個年級抽取1-2個班級,共選取臨床醫(yī)學專業(yè)在校生600名,獲取有效被試586名,有效率97.67%,年齡18-23歲,平均年齡20.44±1.52歲。其中,定向生296名,非定向生290名;男生247名,女生339名;城市生源201名,農(nóng)村生源385名;大一學生191名,大二學生196名,大三學生199名。全部調(diào)查對象已完成或正在完成醫(yī)學基礎(chǔ)類課程,對臨床醫(yī)療實踐及我國醫(yī)療衛(wèi)生體系有一定了解,但均無臨床實踐經(jīng)驗。
2.方法
本研究采用《生活滿意度指數(shù)B》(LSIB)進行研究。量表由12道半開放式題目組成,操作方便,便于理解,得分在0分(生活滿意度最低)―23分(生活滿意度最高)之間。該量表內(nèi)部一致性系數(shù)為0.64,與LSIA的一致性為0.73,與臨床心理學專家評定的相關(guān)為0.47[4]。但是,本量表的適用對象為全體青少年且部分題目存在文化差異,因此在施測前針對部分項目在不影響施測效果前提下進修修改,如第六題“最喜歡生活在哪里”改為“是否滿意目前就讀的學校或?qū)I(yè)”,對第五題“和早期生活相比”改為“與之前的中學生活相比”等,以達到研究目的。
3.施測程序與統(tǒng)計方法
在班會、課間及班級集體活動時發(fā)放問卷,匿名施測,要求被試獨立完成,當場回收,對于自愿參與的同學進一步進行個別訪談。采用spss17.0進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計,以p
二、結(jié)果
1.總體情況
對所得數(shù)據(jù)進行處理,本次調(diào)查586名醫(yī)學生主觀幸福感量表得分為12.65±3.242分,由此可見,醫(yī)學生主觀幸福感量表得分情況從量表整體而言處于中等水平。
2.定向生與非定向生主觀幸福感差異比較
本次調(diào)查結(jié)果顯示,296名定向生主觀幸福感量表得分為12.15±3.536分,290名非定向生主觀幸福感量表得分為13.47±3.532分,差異具有統(tǒng)計學意義(t=3.263,p
三、討論
定向生是醫(yī)學院校特殊群體,其在校期間學業(yè)情況不僅影響其未來從業(yè)情況,還對我國基層醫(yī)療衛(wèi)生人才儲備有一定影響。本次調(diào)查結(jié)果表明,定向生主觀幸福感低于非定向生,與之前的研究結(jié)論類似[5]。醫(yī)學生因?qū)I(yè)自身特點、學業(yè)壓力、校園氛圍及目前醫(yī)療環(huán)境及醫(yī)患關(guān)系惡化,其主觀幸福感偏低[6],而定向生相對于一般醫(yī)學生,雖然不用面臨其他專業(yè)學生的就業(yè)、升學壓力,但因其就業(yè)單位性質(zhì)和特點,所能提供的待遇及發(fā)展平臺有限,無法通過攻讀碩士學位提升自身學歷等原因而對未來就業(yè)后發(fā)展期望較低;同時,因定向生免學費等培養(yǎng)特點,就讀學生多為農(nóng)村生源,家庭經(jīng)濟條件一般,現(xiàn)實情況與其未來選擇出現(xiàn)矛盾。另外,因定向生定向就業(yè)的特點,無論其在校期間學習成績?nèi)绾危挥绊懫渚蜆I(yè),因此,其在校期間學習動機及因取得成績所體驗的成就感均低于非定向生。有個別訪談對象在訪談中甚至表示,在校期間沒有學習動力,對未來不抱希望。本研究啟示在于,不能因為免費、沒有就業(yè)壓力就認為定向生主觀幸福感水平較高。因此,在未來定向生培養(yǎng)過程中,除需要進一步建立完善的保障體系、加大獎學金等資金投入力度、關(guān)注其心理健康和學習動機、強化幸福感教育外,還需要重視其職業(yè)生涯規(guī)劃,如組織參觀鄉(xiāng)鎮(zhèn)衛(wèi)生院、中心醫(yī)院等基層醫(yī)療機構(gòu),開展相應(yīng)的實踐教學與臨床見習,增強其對基層衛(wèi)生現(xiàn)況的認識,提高工作適應(yīng)能力,強化學習動機,達到培養(yǎng)目的。
參考文獻:
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1.數(shù)學題中有大量的選擇題,而這種題在解決時,我們的思維一定要全面,請看下面這道例題
例1:在直線AB上任取一點O,過點O作射線OC、OD,使OCOD,當∠AOC=30°時,∠BOD的度數(shù)是( )。
A、60° B、120°
C、60°或90°D、60°或120° 答案:(D)
解答:關(guān)于這一道題有以下兩種情況:
(1)射線OC、OD在直線AB的同一側(cè)時(如下圖):
在這一種情況下容易求出∠BOD=60°。
(2)射線OC、OD在直線AB的兩側(cè)時(如下圖):
在這一種情況下容易求出∠BOD=120°。
綜上所述,該題應(yīng)選D,而不應(yīng)選A或B。
【點評】由上面解答過程可以看出,我們在解答選擇題時,只有思維全面,考慮到問題的所有情況,才能把問題做對。
2.數(shù)學題中有大量的填空題,我們在做這種題時,也要注意思維的全面性,請看下面這道例題
例2:已知二次函數(shù)的圖像經(jīng)過原點及點(-1/2,-1/4),且圖像與x軸的另一個交點到原點的距離為1,則該二次函數(shù)的解析式為。
答案:y=x2+x或y=-1/3x2+1/3x。
解答:關(guān)于這一道題有以下兩種情況:
(1)當拋物線的開口向上時,因為拋物線與x軸的另一個交點到原點的距離為1,所以拋物線與x軸的兩個交點的坐標分別為(-1,0)、(0,0)(如右圖)
所以此時該拋物線就經(jīng)過(0,0)、(-1/2,-1/4)、(-1,0)這三點,利用待定系數(shù)法就可以求出在這一種情況下拋物線的解析式為y=x2+x。
(2)當拋物線的開口向下時,由于拋物線與x軸的另一個交點到原點的距離為1,所以拋物線與x軸的兩個交點的坐標分別為(0,0)、(1,0)(圖形如下):
所以此時該拋物線就經(jīng)過(0,0)、(1,0)、(-1/2,-1/4)這三點,利用待定系數(shù)法就可以求出在這一種情況下拋物線的解析式為y=-1/3x2+1/3x.
綜上分析,該題應(yīng)該填:y=x2+x或y=-1/3x2+1/3x。
【點評】由以上解答過程可以看出,我們在解答填空題時,思維也要全面,要想到問題的所有情況,只有這樣,才能把填空題做對。
3.解答題是數(shù)學題中一種基本的題型,對于這種題型的解答,我們的思維一定要全面,請看下面這道例題
例3:如圖,已知點A、B是線段MN上的兩點,MN=4,MA=1,MB>1,以點A為中心順時針旋轉(zhuǎn)點M,以點B為中心逆時針旋轉(zhuǎn)點N,使M、N兩點重合成一點C,構(gòu)成ABC,設(shè)AB=x。
(1)求x的取值范圍;
(2)若ABC為直角三角形,求x的值。
解答:(1)AB=x,則AC=MA=1,BC=BN=3-x。
據(jù)三角形三條邊之間的關(guān)系有:
1+3-x>x
1+x>3-x
x+3-x>1
解此不等式組得1
x的取值范圍為1
(2)若ABC是直角三角形,就有以下三種情況:
①若邊AC為斜邊時,
在RtABC中,AC=1應(yīng)是最長的邊。
又AB=x,而1
1AC。
連云港中醫(yī)藥高等職業(yè)技術(shù)學校繼續(xù)教育處,江蘇連云港 222007
[摘要] 目的 研究抗人肝癌免疫毫微粒的制備以及對靶細胞的殺傷作用。 方法 使用異型雙工能SPDP對人肝癌以及載阿霉素(ADR)和人血清蛋白微粒進行偶聯(lián),通過實驗對其的免疫特性進行測試。檢測的方法使用MTT法,這種方法的檢測對免疫毫微粒是否能夠?qū)w外具備殺傷的作用十分有效。檢測后在人肝癌老鼠模型上使用HAb18-HSA(ADM)-NS、HSA(ADM)-NS 和ADM, 來測試其對肝癌的抑制情況。結(jié)果 HAb18抗體可以偶聯(lián)到毫微粒上,對體外殺傷的細胞值為45.5 μg/mL,與ADM的366.1 μg/mL比較下,明顯了降低。免疫毫微粒能夠和靶細胞結(jié)合并且對靶細胞具有殺傷和選擇功能。 結(jié)論 偶聯(lián)的方法適用制備肝癌免疫毫微粒,并且免疫毫微粒在對抗肝癌治療上有著明顯的效果,值得推廣使用。
關(guān)鍵詞 人肝癌;免疫毫微粒;制備;免疫鑒定
[中圖分類號] R4 [文獻標識碼] A [文章編號] 1674-0742(2014)06(c)-0180-02
[作者簡介] 蘇瓊(1969.6-),男,江蘇宿遷人,本科,講師,主要從事微生物免疫學教育科研工作。
在我國每年發(fā)生肝癌致命的病例有很多,肝癌導致死亡的概率列居腫瘤致死忘總概率的第二。可想而知,肝癌對于人類產(chǎn)生的危害是巨大的,給患者和醫(yī)師帶來了很多困擾。關(guān)于治療肝癌的免疫毫微粒很多專家開始進行研究。具有免疫性的毫微粒具有很大的載藥性,而且這種微粒還具有緩釋藥物,不需要進行偶聯(lián)的特點,另外,毫微粒在病位進行藥物治療時還具有選擇性,因此得到很多專家醫(yī)生的青睞[1],選取2012年3月—5月間50只裸鼠為研究對象,現(xiàn)報道如下。
1 資料與方法
1.1 一般資料
收集了50只實驗裸鼠,鼠齡在4~8歲之間,裸鼠為BALB/C型老鼠,50只裸鼠是有江西某以醫(yī)學院提供的。從人肝癌細胞中提取細胞株,ADM-NS的含量控制在34%左右,平均直徑在300 nm,需要被保存于溫度為5 ℃的環(huán)境下。使用濃度為21 mmolPL的異型雙功能交聯(lián)劑實現(xiàn)偶聯(lián),
1.2 方法
使用異型雙工能SPDP對人肝癌以及載阿霉素(ADR)和人血清蛋白微粒進行偶聯(lián),通過實驗對其的免疫特性進行測試。檢測的方法使用MTT法,這種方法的檢測對免疫毫微粒是否能夠?qū)w外具備殺傷的作用十分有效[2]。檢測后在人肝癌老鼠模型上使用HAb18-HSA(ADM)-NS、HSA(ADM)-NS 和ADM,來測試其對肝癌的抑制情況。選用的ADM主要從江蘇某制藥廠調(diào)購過來,抗人體肝癌的抗體由軍醫(yī)院提供。
使用9 mL的單抗經(jīng)0.04 mol pL,PH值為7.6,在單抗經(jīng)中加速SPDP10L1,在常溫下進行攪拌,攪拌的事件控制在0.5 h,然后使用PBS進行洗脫。免疫毫粒選用29 mg,進行超生均勻化,和單抗經(jīng)一樣加上同量的SPDP,并且進行30 min的攪拌,然后用醋酸溶解液進行清洗,清洗后留下的沉淀就是NP=PDP,把沉淀混入到醋酸液水中放于常溫下的室內(nèi),這樣是為了還原NP-PDP。還原后使用離心洗滌劑進行清洗剩余下來的NP-PDP-SH和Ab-PDP混合,在常溫下的室內(nèi)進行振蕩,振蕩20 h左右后,使用PBS進行多次洗滌,最后剩余的沉淀就是免疫毫微粒[3]。
1.3 主要儀器
制備免疫毫微粒的儀器主要是第二代LXJ離心機,該儀器是由上海某醫(yī)用工廠生產(chǎn)的;制備過程中使用的攪拌機時由浙江某儀表工產(chǎn)生產(chǎn)的D40-2F電動型攪拌機;觀察實驗效果采用的顯微鏡是型號為PM-VBAD的熒光和倒置顯微鏡,該型號的顯微鏡是由日本公司生產(chǎn)的;自動定標器是由我國北京某儀器廠生產(chǎn)的型號為FH463A;活度器由CII公司生產(chǎn)的型號為CRC-15R活度儀;最后使用的光度儀是由上海分析儀器廠生產(chǎn)的型號為751的紫外線外分光光度計[4]。
1.4 免疫毫微粒免疫性的鑒定
鑒定 HAb18-HSA (ADM)-NS 時使用的是間接凝結(jié)實驗,具體做法如下:首先在選用的載波試驗片上滴上濃度為505 μg/mL的 HAb18-HSA (ADM)-NS,然后加入選擇的裸鼠的抗血清,加入血清后要不間斷的進行振蕩,同時在光鏡下觀察其變化情況;免疫熒光:使用502 μg/mL、101 μL的HAb18-HSAADM)-NS和IgGh混合,在30 min的4 ℃溫度下進行染色,使用離心洗滌后觀察其變化,觀察時使用的是前面使用的PM-VBAD的熒光顯微鏡[5];鑒定體外和細胞活性:在SMMC-7721 中加入HAb18-HAS (ADM)-NS和 HAS (ADM)-NS ,加入的兩種HAb18-HAS (ADM)-NS,HAS (ADM)-NS濃度均為 500 μg/mL,并且同上在4℃的室內(nèi)進行30 min反應(yīng),然后觀察變化;使用掃描電鏡觀察:取500 μg/mL的HAb18-HAS (ADM)-NS和 SMMC-7721,進行混合,混合后的結(jié)合物使用掃描電鏡觀察。
1.5 統(tǒng)計方法
用統(tǒng)計學軟件 spss 13.0 對所得數(shù)據(jù)進行處理分析,計量資料以均數(shù)±標準差(x±s)示,進行 t 檢驗,計數(shù)資料采用χ2檢驗。
2 結(jié)果
通過上述制備免疫毫微粒和鑒定其免疫性質(zhì)得出結(jié)果如下:
首先,對HAb18-HSA(ADM)-NS 的載藥量以及其微粒的直徑鑒定時發(fā)現(xiàn)HAb18-HSA(ADM)-NS 的載藥量達到了34%之多,而且在使用掃描電鏡觀察HAb18-HSA(ADM)-NS 形態(tài)時發(fā)現(xiàn)其表面十分光滑,形狀斯球體,而且各個大小很均勻。調(diào)查發(fā)現(xiàn)HAb18-HSA(ADM)-NS微粒的平均直徑為300 nm,圖一是其形態(tài)。
其次,是單抗體和免疫毫微粒的偶聯(lián)情況。我們選用的50只裸鼠中,采用裸鼠的抗血清加入到毫微粒后發(fā)現(xiàn),原本分散的毫微粒在加入裸鼠的IgG血清后開始凝集,而沒有加入IgG的裸鼠抗血清則是均勻的分散。在加入FITC二抗后,原本光滑的免疫毫微粒的表面開始呈現(xiàn)色度明亮的黃綠色,而沒有加入FITC二抗的免疫毫微粒則沒有出現(xiàn)熒光色。由此可以看出使用單抗體和毫微粒進行偶聯(lián)結(jié)果是成功的。
另外,關(guān)于HAb18-HSA(ADM)-NS的免疫性反應(yīng)結(jié)果如下:在HAb18-HSA(ADM)-NS中加入裸鼠的血清后,HAb18-HSA(ADM)-NS形成顆粒。HAb18-HSA(ADM)-NS和肝癌細胞的結(jié)合則出現(xiàn)大量不可散離的HAb18-HSA(ADM)-NS,HAb18-HSA(ADM)-NS可以和肝癌靶細胞能夠結(jié)合。
最后,HAb18-HSA(ADM)-NS對肝癌體外靶細胞的殺傷性結(jié)果:從 SMMC-7721 細胞在使用各種藥物后的反應(yīng)變化來看,要殺傷一半的體外細胞必須使用濃度在55的ADM,而且 ,HAb18-HSA(ADM)-NS應(yīng)該控制在454μg/mL, HSA(ADM)-NS 為 345 μg/mL,ADM 為365 μg/mL。可見,HAb18-HSA(ADM)-NS對肝癌細胞的殺傷性是強大的。見表1。
3 討論
通過藥物來殺傷腫瘤的研究發(fā)現(xiàn),雖然藥物可以達到殺傷腫瘤的效果,但是這些藥物的不良反應(yīng)很大。那么對于怎么增加靶細胞藥物的濃度同時降低正常組織的藥物濃度是目前研究的熱點。
現(xiàn)在制備免疫毫微粒的材料也有很多。毫微粒是一種由天然或者合成的高分子形成的顆粒,這種顆粒可以由毛細血管來攜帶藥物進行緩釋的作用[6]。人血清白蛋白毫微粒含有大量游離的羥基及氨基便于交聯(lián), 且結(jié)構(gòu)清楚, 生物性能穩(wěn)定, 為人體自身白蛋白, 不會增加過敏反應(yīng), 為人體理想的藥物載體[7]。通過人肝癌以及載阿霉素(ADR)和人血清蛋白微粒進行偶聯(lián)是近幾年提出的效果顯著的方法。在該研究中通過使用SDPP制備免疫毫微粒的結(jié)果表明使用SDPP有利于實現(xiàn)單抗體和毫微粒的偶聯(lián)以制備出免疫的毫微粒[8]。如今已經(jīng)有專家在使用SDPP制備免疫毫微粒上取得了巨大的成功。而通過這種方法制備的免疫性毫微粒在殺傷腫瘤時不僅不會給患者帶來副作用或者過敏現(xiàn)象,而且能夠保證患者身體機能的穩(wěn)定在這個基礎(chǔ)上,使用SDPP的反應(yīng)來產(chǎn)生NP-PD,然后使用DTT來還原Ab-PDP。該研究在使用化療性的藥物治療癌癥時可以通過加大藥物的劑量達到該目的,然后大量的使用化療藥物來殺傷腫瘤以達到治療目的很容易給患者帶來不良反應(yīng)。那么如何在減少藥物的劑量的情況下實現(xiàn)腫瘤治療效果,很多專家都在進行研究。
通過實驗證明HAb18-HAS(ADM)-NS對靶細胞還具有選擇性的殺傷力這是ADM以及其他治療腫瘤藥物所不能比擬的。所以在今后治療肝癌中,可以采用以上制備免疫毫微粒的方法進行,免疫毫微粒將是有效治療肝癌的藥劑,值得在臨床上推廣。
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提高學習效率是一個很重要的問題。許多學生學習成績不佳,往往起因于學習效率不高。學習效率不高往往由多因素造成。
1、明白自己的首要任務(wù)是什么,按事情重要性程度來安排做事的順序;
2、算一算能支配的有效率的時間總量,做完所有的事情需要多少時間,有沒有基本的休息娛樂時間;
3、制定計劃,哪些事情是不可能完成的或者不太重要的或者能夠拖延而不帶來多大負面影響的,不要列入計劃;
4、修訂計劃,主要是看看計劃是不是太滿,萬一中途有別的事情干擾,計劃就不可能完成了,按前面的步驟修訂,要留有余地;
5、平時注意自己潛力的發(fā)揮,看看能不能統(tǒng)籌安排時間,提高時間利用效率。例如,在頭腦最清醒的時候安排學習,精神勞累時參加體育運動;再有就是減少“跑趟子”的事情,不過很重要的事情不可以過于簡化程序;
6、千萬千萬要經(jīng)常審視自己的良心和責任心。如果你自己將來要父母親或者自己的愛人孩子養(yǎng)活,那么你是否可以想一想他們憑什么養(yǎng)活你而你卻不養(yǎng)活他們,你道德嗎?能力是道德實現(xiàn)的重要基礎(chǔ)。要是敢于放棄自己的娛樂休息時間。有所放棄才能有所收獲,戰(zhàn)勝自己才能征服世界。
7、切忌盲目比較,目標要以自己目前的真實狀況為前提,要承認某些方面確實不如人,循序漸進才能趕上,不過太慢了就有可能錯過很多機會,包括讓父母享更大的福的機會。
其他:
學習問題自我評價
每一個學習不良者并不一定真的了解自己的問題之所在,要想對癥下藥,解決問題,對學習問題進行自我評價便尤其顯得重要了。對學習問題可主要從如下幾方面進行自我評價:
l.時間安排問題
學習不良者應(yīng)該反省下列幾個問題: (1)是否很少在學習前確定明確的目標,比如要在多少時間里完成多少內(nèi)容。(2)學習是否常常沒有固定的時間安排。(3)是否常拖延時間以至于作業(yè)都無法按時完成。(4)學習計劃是否是從來都只能在開頭的幾天有效。(5)一周學習時間是否不滿10小時。(6)是否把所有的時問都花在學習上了。
2.注意力問題
(1)注意力完全集中的狀態(tài)是否只能保持10至15分鐘。(2)學習時,身旁是否常有小說、雜志等使我分心的東西。(3)學習時是否常有想入非非的體驗。(4)是否常與人邊聊天邊學習。
3.學習興趣問題
(1)是否一見書本頭就發(fā)脹。(2)是否只喜歡文科,而不喜歡理科。(3)是否常需要強迫自己學習。(4)是否從未有意識地強化自己的學習行為。
4.學習方法問題
(1)是否經(jīng)常采用題海戰(zhàn)來提高解題能力。(2)是否經(jīng)常采用機械記憶法。(3)是否從未向?qū)W習好的同學討教過學習方法。(4)是否從不向老師請教問題。(5)是否很少主動鉆研課外輔助讀物。
【關(guān)鍵詞】化學發(fā)光免疫分析法 甲狀腺激素 臨床意義
【中圖分類號】R541.4 【文獻標識碼】A 【文章編號】1004-7484(2013)06-0348-01
1 對象與方法
1.1 對象:2012年1月至2012年12月來本單位就診的410例患者。
1.2 方法:化學發(fā)光免疫分析法及配套試劑(安圖生物)測定血清T3、T4、FT3、FT4、TSH。T3水平正常值參考范圍為0.8-1.9ng/ml;T4水平正常值參考范圍為5.0-13.0ug/dl; FT3水平正常值參考范圍為 3.5-6.5pmol/L ;FT4水平正常值參考范圍為8.5-22.5pmol/L;TSH水平正常值參考范圍為 0.35-5.29uIU/ml 。
1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計處理
1)性別比例;2)正常和異常結(jié)果的例數(shù)比;3)異常結(jié)果的類型和比例4)采用SPSS13.0版軟件,對每種統(tǒng)計內(nèi)容進行分析,以P〈0.01為差異有統(tǒng)計學意義。
2 結(jié)果
依據(jù)患者性別、激素水平、異常類型等資料統(tǒng)計結(jié)果。
討論以最后報告結(jié)果為準:1)410例患者男女比例為:17.32%(81/410)和82.68%(329/410),男女差異有統(tǒng)計學意義;2)正常和異常例數(shù)分別為54.39%(223例)和45.61%(187例)兩者差異有統(tǒng)計學意義(P
3 討論
甲狀腺是人體最大的內(nèi)分泌腺,能分泌三碘甲狀腺原胺酸(T3)、甲狀腺激素(T4)等。它的分泌活動受下丘腦、垂體、甲狀腺激素水平的調(diào)節(jié),以維持血循環(huán)中的動態(tài)平衡,其生理功能包括體內(nèi)的氧化生熱作用、促進機體生長發(fā)育和促進蛋白質(zhì)合成等作用。甲狀腺功能亢進和甲狀腺功能減退是現(xiàn)普遍存在的兩種甲狀腺疾病。
3.1 甲狀腺功能亢進 一般為T3、T4、FT3、FT4升高,而TSH略低或重度降低。各指標對甲狀腺功能亢進的診斷價值依次為FT3>FT4>T3>T4。其中T3型甲狀腺功能亢進為T3、FT3升高而T4、FT4正常、TSH降低。T4型甲狀腺功能亢進表現(xiàn)為T3、FT3正常,而FT4、T4升高,TSH降低。垂體性甲狀腺功能亢進則上述指標全部升高,尤其是TSH也升高。
3.2 甲狀腺功能減退 一般為T3、T4、FT3、FT4降低,TSH升高。在診斷甲狀腺功能減低方面,TSH,F(xiàn)T4、FT3是靈敏指標,各指標的價值依次為TSH=FT4>T4>FT3>T3。除T4、FT4降低外,輕型或部分中型原發(fā)性甲狀腺功能減低患者T3濃度不會維持在正常水平,而垂體性甲低患者T3、FT3則正常,TSH也下降或正常及升高。
3.3 非甲狀腺疾病 也可引起各甲狀腺功能指標的改變,以低T3和低T3T4綜合征表現(xiàn)較為明顯,一般引起此類綜合征的疾病有惡性腫瘤、慢性腎衰、心肌梗死、糖尿病、嚴重感染等;其發(fā)生與機體的代謝狀態(tài),基礎(chǔ)疾病的性質(zhì)和嚴重程度及外來因素有關(guān),當病情好轉(zhuǎn),機體恢復(fù)正常時,T3及T4可恢復(fù)至正常。
綜上所述:隨著社會的發(fā)展,人們生活水平的不斷提高,甲狀腺疾病已嚴重威脅到人類健康,成為內(nèi)分泌領(lǐng)域的第二大疾病,尤其是女性患甲狀腺疾病不斷攀升,依據(jù)本文統(tǒng)計結(jié)果也可見,從性別分布,女性多于男性,約4:1。因此加強預(yù)防保健意識,尤其是女性定期體檢甲狀腺激素水平,對于甲狀腺疾病及非甲狀腺疾病的預(yù)防、鑒別診斷和治療都具有十分重要的意義。
參考文獻:
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[摘要]目的:制備抗阿爾茨海默病的重組蛋白疫苗。方法:將β淀粉樣蛋白42肽N端表位Aβ115基因,通過來源于破傷風毒素的輔T細胞表位多肽TTP基因片段,與大腸桿菌L門冬酰胺酶Ⅱ(AnsB)基因的C末端融合,構(gòu)建表達質(zhì)粒pET28aAnsBTTPAβ115。轉(zhuǎn)化至E. coli BL21,TBYE培養(yǎng)基(Kanr)培養(yǎng),乳糖誘導表達,通過滲透休克、DEAE52cellulose和Sephadex G-100柱層析制備融合蛋白rAnsBTTPAβ115,通過酶活力和抗原性測定鑒定融合蛋白。結(jié)果:獲得的融合蛋白rAnsBTTPAβ115保留了AnsB 71%的催化活力,具有與抗Aβ142抗體特異性結(jié)合的能力。結(jié)論:獲得了在AnsB多聚酶分子表面呈現(xiàn)有Aβ115表位的融合蛋白rAnsBTTPAβ115,為抗阿爾茨海默病疫苗研究奠定了基礎(chǔ)。
[關(guān)鍵詞]阿爾茨海默病;重組疫苗;表位;表面呈現(xiàn);抗原性
阿爾茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)是一種神經(jīng)退行性疾病[1],缺乏行之有效的治療方法[2]。神經(jīng)病理研究表明,β淀粉樣蛋白42肽(Aβ142)的形成和聚集以及以其為核心形成的老年斑是AD發(fā)病的關(guān)鍵[2]。用人Aβ142肽免疫轉(zhuǎn)基因小鼠模型引發(fā)的針對Aβ的自身免疫反應(yīng)能有效減輕腦內(nèi)Aβ的沉積,阻止老年斑的形成,明顯改善記憶、認知和行為能力[3]。其臨床研究也顯示出良好的療效,但有受試者出現(xiàn)中樞神經(jīng)炎癥狀。Leverone等[4]證明N端15肽(Aβ115, DAEFRHDSGYEVHHQ)是Aβ142的B細胞表位,以其作為免疫原能夠避免全肽免疫導致的不良反應(yīng),但是其免疫原性很弱,不利于誘導老年患者產(chǎn)生保護性免疫反應(yīng)。提高B細胞表位的免疫原性是AD疫苗設(shè)計的關(guān)鍵[5]。大腸桿菌L門冬酰胺酶Ⅱ(LasparaginaseⅡ,Ans B)是由4個相同亞基組成的蛋白酶。我們曾用來源于破傷風毒素的輔T細胞表位多肽(tetanus toxin peptide, TTP; QYIKANSKFIGITELIYSYFPSVI)作為空間連接肽將人膽固醇脂轉(zhuǎn)移蛋白C端的表位CETPC融合表達在AnsB的C端下游,發(fā)現(xiàn)AnsB能夠作為表位多肽的呈現(xiàn)載體[6]。本研究試圖獲得表面呈現(xiàn)有Aβ115的重組嵌合酶融合蛋白AnsBTTPAβ115,利用AnsB的多聚化傾向[7]和TTP的免疫輔助功能來提高Aβ115的免疫原性,以期免疫后能夠產(chǎn)生較強的體液免疫,進而達到安全有效防治AD的目的。
1 材料與方法
1.1 材料質(zhì)粒載體pET28aAnsBTTPCETPC為本室構(gòu)建保存,pET28a購自TaKaRa公司;大腸桿菌BL21(DE3)為本室保存;PCR純化試劑盒、DNA膠回收試劑盒購自華舜生物工程公司;DEAE52cellulose購自Watman;Sephadex G100 為Pharmacia產(chǎn)品;兔抗Aβ115多克隆抗體為Serotec產(chǎn)品;HRP標記的羊抗兔IgG二抗購自博士德公司;各種限制性內(nèi)切酶和連接酶均購自TaKaRa公司;AnsB純品為本室制備保存;其他試劑均為進口分裝或國產(chǎn)分析純。
1.2 表達載體的構(gòu)建引物序列見表1。以質(zhì)粒pET28aAnsBTTPCETPC為PCR模板,使用上游引物p1和下游引物pAβ11521進行第1次加端PCR反應(yīng)。循環(huán)條件為:94℃預(yù)變性5min;94℃變性1min,60℃退火1min,72℃延伸2min,共30個循環(huán);72℃延伸10min。取5μl進行瓊脂糖電泳檢測,然后用膠回收試劑盒回收,純化獲得相應(yīng)長度的PCR擴增片段;取1μl作為第2次PCR加端擴增的模板,用上游引物p1和下游引物pAβ11522進行PCR反應(yīng),反應(yīng)條件同上,試劑盒純化產(chǎn)物,經(jīng)NcoⅠ/HindⅢ雙酶切,T4 DNA連接酶連接于經(jīng)NcoⅠ/HindⅢ雙酶切的pET28a表達載體,轉(zhuǎn)化宿主菌BL21(DE3),由于融合蛋白保留了AnsB全基因,可以通過檢測酶活力篩選重組子,測序鑒定陽性重組子。
表1 構(gòu)建表達載體pET28aAnsBTTPAβ115使用的引物(略)
Tab 1 Primer design of constructs of pET28aAnsBTTPAβ115 plasmids
1.3 工程菌的誘導表達陽性克隆接種于含卡那霉素50μg?ml-1的LB固體培養(yǎng)基上,37℃培養(yǎng)16 h,挑取單菌落接種于TBYE培養(yǎng)基(含1% tryptone, 0.5% yeast extract和0.5% NaCl, 卡那霉素50μg?ml-1,使用前加入葡萄糖至終濃度為0.2%)中,37℃振搖培養(yǎng)12~14 h,按1.2%比例接種到同樣培養(yǎng)基中,30℃振搖培養(yǎng),當OD600 nm達到0.6~0.8時,加乳糖至終濃度5mmol?L-1慢速誘導,并于誘導后1、3、5、7、9、11、15 h分別取培養(yǎng)菌液,定量檢測AnsB酶活性,分析融合蛋白rAnsBTTPAβ115的表達情況。收集菌體。
1.4 融合蛋白的制備用蒸餾水懸浮洗滌新鮮菌體,離心棄上清,加入滲透休克溶液Ⅰ(OSⅠ: 30mmol?L-1 TrisHCl 含1mmol?L-1 EDTA和30%蔗糖),充分懸浮菌體,室溫下緩慢攪動20min, 然后4℃條件下離心棄上清,加入滲透休克溶液Ⅱ(OSⅡ:30mmol?L-1 TrisHCl,pH 8.0,含1mmol?L-1 EDTA),在冰浴中緩慢攪拌10min,相同條件離心收集上清。留樣OSⅡ休克獲得的上清液,15%SDSPAGE分析滲透休克情況。OSⅡ處理獲得的上清液直接上DEAE52cellulose離子交換層析柱。用含有0~350mmol?L-1 NaCl的平衡緩沖液梯度洗脫。收集具有AnsB酶催化活力的洗脫峰,透析脫鹽,凍干濃縮。而后通過Sephadex G100分子篩凝膠層析進一步純化,最后收集具有AnsB酶催化活力的洗脫峰,透析,脫鹽,凍干,-20℃冷凍保存。15%SDSPAGE電泳檢測制備的嵌合酶rAnsBTTPAβ115。
1.5 融合蛋白的鑒定
1.5.1 AnsB酶活力測定 樣品稀釋至1mg?ml-1,吸取5μl加入到1ml硼酸緩沖液和1ml反應(yīng)底物溶液(0.04mmol?L-1 Lasaparagine)的混合體系中,37℃反應(yīng)15min后,加入1ml的反應(yīng)終止液(15%三氯乙酸)終止反應(yīng)。取0.5ml上述反應(yīng)液與1ml Nessler混合液和3.5 ml蒸餾水混合,測定OD500 nm。對照標準曲線查算出酶活力,計算酶比活(IU?mg-1)。
1.5.2 抗原性檢測 用已獲得的融合蛋白作為包被抗原,用含2%BSA的PBS(pH 7.4)溶液按1∶100比例稀釋兔抗Aβ142抗體作為一抗,以HRP標記的羊抗小鼠IgG為二抗,采用間接ELISA法檢測每孔的OD450 nm。同時設(shè)置生理鹽水(NS)和AnsB對照組。
2 結(jié)果
2.1 表達載體pET28aAnsBTTPAβ115的構(gòu)建
測序鑒定表明表達載體構(gòu)建成功。此表達載體轉(zhuǎn)化至大腸桿菌BL21(DE3)指導融合蛋白rAnsBTTPAβ115的表達(圖1)。
2.2 融合蛋白的表達和純化加入乳糖誘導后取樣測算酶比活,結(jié)果表明誘導8~10h后有酶活性的融合蛋白rAnsBTTPAβ115表達量達到最高(圖2)。SDSPAGE結(jié)果顯示OSⅡ休克菌體沉淀獲得的上清液中含有大量的目的融合蛋白,酶活力檢測顯示具有AnsB活力,表明表達的嵌合酶rAnsBTTPAβ115能夠定位分泌到周質(zhì)腔中,進而折疊成具有酶活力的可溶性嵌合酶。經(jīng)離子交換樹脂和分子篩凝膠,獲得了純化的rAnsBTTPAβ115(圖3)。
2.3 融合蛋白的AnsB酶活力測定定量檢測酶活力,結(jié)果顯示AnsB酶比活為240 IU?mg-1,嵌合酶rAnsBTTPAβ115酶比活約為170 IU?mg-1,保持了71%的酶活力。
2.4 融合蛋白抗原性驗證結(jié)果ELISA結(jié)果顯示,融合蛋白在體外能夠與抗Aβ142抗體特異性結(jié)合(圖4)。結(jié)果表明,融合蛋白能夠?qū)β115呈現(xiàn)在AnsB的多聚酶分子表面,并且保留了表位原有的可及性和免疫反應(yīng)性。
圖1 表達載體pET28aAnsBTTPAβ115 模式圖(略)
Fig 1 Construction schematic presentation of the fusion enzyme of AnsBTTPAβ115.
rAnsBTTPAβ115 fusion protein was expressed in E. coli using the pET28a vector under the direction of the T7 promoter. The T7 promoter is represented in black arrowhead box, the AnsB gene is represented by black points box, the tetanus toxin 831-854 fragments (TTP) is represented in black box, and the Aβ115 gene is represented by opened box. In addition, the TTP, linker and the Aβ115 are represented by singleletter codes.
圖2 嵌合酶表達曲線(略)
Fig 2 Expression curve of E.Coli BL21/pET28aAnsBTTPAβ115
圖3 嵌合酶AnsBTTPAβ115的表達和純化(略)
Fig 3 Expression and purification of fusion enzyme of AnsBTTPAβ115.
Periplasm expression and purification of AnsBTTPAβ115 were analyzed in 15% SDSPAGE gel stained with Coomassie blue. Lane 1. Molecular weight markers; Lane 2. Total cell proteins of E. coli BL21 (DE3) induced by lactose; Lane 3. Total cell proteins of E. coli BL21 (DE3) containing pET28-AnsBTTPAβ115 induced by lactose; Lane 4. The supernatant of osmoticsolutionII released from the periplasm of the bacteria; Lane 5. Purified rAnsBTTPAβ115; Lane 6. native Lasparaginase B.
圖4 融合蛋白抗原性鑒定(略)
Fig 4 Antigenicity analysis of fusion protein of AnsBAβ115
3 討論
提高自身抗原免疫原性,一般可通過添加輔T細胞表位(如破傷風毒素等)[8],或通過融合載體分子(如結(jié)核分枝桿菌HSP65)[9],以及使用免疫佐劑等方法來實現(xiàn)。本研究為提高Aβ115的免疫原性,選擇AnsB作為載體分子,并加入TTP作為輔T細胞表位。AnsB已用于臨床[10],作為載體分子是安全的。AnsB由4個相同亞基組成,在體內(nèi)、外均能發(fā)生解聚和聚合,只有聚集體才具有催化活性。酶活性測定結(jié)果顯示,融合蛋白保留了70%以上的AnsB酶活力,表明融合蛋白的rAnsBTTPAβ115仍然保持了AnsB原有的空間構(gòu)象和聚集形式。抗原性檢測結(jié)果顯示,融合蛋白能夠與抗Aβ142抗體異性結(jié)合。考慮到抗原是由其具有表面呈現(xiàn)性、可及性、柔性的表位與抗體呈現(xiàn)“凹槽”結(jié)構(gòu)模式的對位(paratope)結(jié)構(gòu)域通過疏水鍵和范德華力等短程非共價鍵結(jié)合形成特異性識別和作用的,結(jié)合上述融合蛋白酶活力檢測結(jié)果,可以認為融合蛋白rAnsBTTPAβ115確實能夠?qū)β115表位多肽呈現(xiàn)在多聚酶分子的表面,并且在很大程度上保持了表位的可及性和柔性,保留了其原有的免疫學性質(zhì)。這種每個至少能夠呈現(xiàn)有4個表位的酶多聚體易于被抗原遞呈細胞所識別并呈遞給免疫細胞,同時每個酶多聚體融合至少4個TTP輔T細胞表位,能夠有效地輔助機體產(chǎn)生強大的針對Aβ142的免疫反應(yīng)。由上可見,在TTP和Aβ115多肽之間插入了由5個氨基酸殘基組成的柔性連接肽(圖1),能夠提高呈現(xiàn)表位的可及性。融合蛋白聚集體的形成和酶活力的維持對于Aβ115多肽的呈現(xiàn)和免疫原性的提高至關(guān)重要。T7強啟動子的采用,容易使插入的基因片段以包含體形式表達,采用的低溫、慢速誘導,添加葡萄糖等抑制包含體形成的工程菌表達策略有效地提高具有酶活性的融合蛋白的表達,為相關(guān)抗阿爾茨海默病重組亞單位疫苗的研究奠定了基礎(chǔ)。
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目的: 研制人血清中促甲狀腺素(tsh)的化學發(fā)光免疫檢測試劑盒。方法: 采用辣根過氧化物酶標記的抗tshβ亞單位特異性單克隆抗體(mab), 與固相包被的抗tshα亞單位的另一mab配對, 以魯米諾作為底物, 采用兩步法建立了雙位點夾心法人血清tsh的化學發(fā)光免疫定量分析法。結(jié)果: 該方法靈敏度為0.0788 miu/l, 批內(nèi)cv平均為4.7%, 批間cv平均為8.4%, 平均回收率為93.05%。該檢測與lh、 fsh和hcg無交叉反應(yīng)。部分實驗樣品的測試結(jié)果顯示該試劑與國外同類試劑(雅培architect i2000)的測定結(jié)果明顯相關(guān)(r=0.984)。結(jié)論: 該方法具有較高的靈敏度、 重復(fù)性和準確度, 與其他同類產(chǎn)品相比簡便、 快捷、 成本低, 適于臨床檢測和科研應(yīng)用。
【關(guān)鍵詞】 促甲狀腺激素(tsh) 化學發(fā)光免疫分析法 試劑盒
促甲狀腺激素(thyroid stimulating hormone, thyrotropin, tsh)是一種由垂體前葉分泌的糖蛋白激素, 由α和β2個亞基組成, 相對分子質(zhì)量(mr)為28000[1]。tsh本身受下丘腦分泌的tsh釋放激素trh的調(diào)控, tsh的主要生理作用是調(diào)節(jié)甲狀腺激素的合成與分泌, 血液中甲狀腺激素水平與腺垂體分泌tsh的量之間有負反饋抑制關(guān)系[2]。WWw.133229.CoM甲狀腺功能改變時, tsh的波動較甲狀腺激素更迅速且明顯, 是反映下丘腦垂體甲狀腺軸功能的敏感指標, 因此采用靈敏度高的tsh免疫分析法具有重要的意義。化學發(fā)光免疫分析(chemiluminescent immunoassay, clia)是一種靈敏的免疫分析方法, 在免疫診斷試劑研制中已得到了廣泛的應(yīng)用[3]。本研究根據(jù)化學發(fā)光免疫分析法的原理研制了血清tsh的檢測試劑盒, 與國內(nèi)外同類產(chǎn)品相比具有簡便、 快捷、 成本低等優(yōu)點。
1 材料和方法
1.1 材料 tsh單克隆抗體(mab)、 tsh標準品抗原和辣根過氧化物酶(hrp)為sigma公司產(chǎn)品, 光免板為thermo electron公司產(chǎn)品, 化學發(fā)光底物為biorad公司產(chǎn)品。
1.2 方法
1.2.1 標準品的配制 將tsh抗原標定后溶于小牛血清中, 配制成含0.1, 1, 5, 20, 100 miu/l的標準溶液。
1.2.2 抗體包被板的制備 將100μl含tsh mab(0.5mg/l)的ph9.6碳酸鹽緩沖液加至包被板中, 37℃包被2 h, 再用含10 mg/l bsa的0.01 mol/l ph7.4磷酸鹽緩沖液于37℃封閉2 h后晾干備用。
1.2.3 酶標記物的制備 tsh的酶標記物采用過碘酸鈉法制備, 然后經(jīng)0.01 mol/l ph7.4磷酸鹽緩沖液透析過夜后, 加入等量的甘油于-20℃保存?zhèn)溆谩?/p>
1.2.4 檢測方法 將50 μl待測樣品或標準品加入包被tsh的光免板中, 37℃溫育30 min, 棄反應(yīng)液, 用洗滌液(含0.5 mg/l tween20的0.01 mol/l ph7.4磷酸鹽緩沖液)洗5次, 加酶標記物50 μl, 37℃溫育30 min后同樣用洗滌液洗5次, 然后加入發(fā)光底物于5~10 min內(nèi)測定各孔的發(fā)光值rlu。樣本中的tsh濃度依據(jù)由標準品tsh濃度和對應(yīng)的rlu建立的數(shù)學模型進行定量。
2 結(jié)果
2.1 動力學性質(zhì) 在hrp魯米諾h2o2發(fā)光體系中, 將不同量的免疫復(fù)合物加入發(fā)光液中, 發(fā)光強度(rlu)隨反應(yīng)時間而變化。10 min后rlu接近峰值, 在5~15 min內(nèi)rlu較為穩(wěn)定, 隨后開始緩慢下降。
2.2 反應(yīng)條件優(yōu)化
2.2.1 加樣量對rlu的影響 樣本和酶標記物的加樣量分別為50 μl和100 μl考查標準品(0、 0.1、 1、 5、 20、 100 miu/l)rlu, 發(fā)現(xiàn)加樣量為100 μl與50 μl rlu相差不大, 說明50 μl的加樣量反應(yīng)能達到平衡(圖1)。
圖1 加樣量對rlu的影響(略)
2.2.2 反應(yīng)模式對rlu的影響 采用二步法。第一步: 加入標準品和待測樣品后, 將反應(yīng)體系在37℃分別溫育15、 30、 45、 60 min; 第二步: 加入酶標記抗體后, 將反應(yīng)體系在37℃分別溫育15、 30、 45、 60 min。結(jié)果表明溫育時間為30 min時反應(yīng)皆能達到平衡(圖2)。
圖2 溫育時間對rlu的影響(略)
a: 第一步溫育時間對rlu的影響; b: 第二步溫育時間對rlu的影響.
2.3 穩(wěn)定性 將試劑盒放置于37℃ 6 d后, 比較與放置前參考標準品各點rlu值, 參考標準品各點rlu值未見明顯降低, 且本底發(fā)光值無明顯升高, 表明試劑盒標準曲線無明顯漂移, 滿足穩(wěn)定性要求。
2.4 方法學評價
2.4.1 標準曲線與靈敏度 在設(shè)定的免疫反應(yīng)和發(fā)光條件下, 以標準血清的濃度(0~100 miu/l)制作的標準曲線見圖3。同時測定20個零標準, 用零標準均值加上2倍標準差, 計算出此方法的靈敏度為0.0788 miu/l。
圖3 tsh標準曲線(略)
2.4.2 精密度 取低(4.44 miu/l)、 中(19.45 miu/l)和高(79.23 miu/l)3種tsh濃度各重復(fù)測定10次, 測定批內(nèi)cv分別為6.2%、 3.3%和4.6%, 平均為4.7%。隔日分別進行5次獨立試驗, 測批間cv分別為8.3%、 7.6%和9.3%, 平均為8.4%。
2.4.3 準確性 在已知tsh濃度的血清中加入3種不同濃度的標準血清,測定加入回收率為93.05%。將tsh濃度為44.42 miu/l的血清用標準零血清分別按1/2、 1/4、 1/8、 1/16稀釋, 測量各稀釋濃度的tsh含量, 測定稀釋回收率為99.86%。
2.4.4 特異性 在已知濃度的血清樣品中加入不同濃度的lh、 fsh和hcg后, 對tsh的測定無干擾。
2.4.5 與進口試劑的比較 將研制的tsh clia定量檢測試劑盒與abbott architect i2000全自動化學發(fā)光系統(tǒng)共同對30例正常人、 20例甲亢及80例甲低臨床標本進行檢測, 通過數(shù)據(jù)分析, 得出兩個檢測系統(tǒng)所得數(shù)值具有明顯相關(guān)性(圖4)。
圖4 與abbott全自動化學發(fā)光系統(tǒng)相關(guān)性曲線(略)
3 討論
血清促甲狀腺素定量檢測的方法主要有放射免疫法、 酶聯(lián)免疫法、 時間分辨熒光免疫法和化學發(fā)光免疫法等幾種[4]。考慮到目前化學發(fā)光和時間分辨熒光分析儀器幾乎全部為國外廠商生產(chǎn), 而絕大多數(shù)廠商采用儀器加試劑盒捆綁銷售的壟斷模式, 并在儀器中人為設(shè)置排它性檢測程序, 從而抬高了配套試劑盒價格, 增加了檢測成本, 所以本工作旨在開發(fā)國產(chǎn)低價、 穩(wěn)定、 通用的人血tsh clia試劑盒。首先對讀數(shù)時間進行了動力學研究, 發(fā)現(xiàn)其在5~15 min內(nèi)rlu處于平臺期,反應(yīng)時間選擇10 min。其次對反應(yīng)條件進行了實驗摸索, 在不同的溫育時間和加樣量的條件下, 各rlu值相差不大, 因此選擇了50 μl的加樣量與兩步共1 h的反應(yīng)時間。
我們研制的tsh化學發(fā)光免疫測定試劑盒通過方法學鑒定表明無論是靈敏度、 準確性、 特異性等技術(shù)指標均達到了臨床診斷的要求[5]; 同時該方法具有操作方便, 反應(yīng)時間短和成本低等優(yōu)點, 具有較廣闊的市場應(yīng)用前景。
【參考文獻】
[1] hay id, bayer mf, kaplan mm, et al. american thyroid association assessment of current free thyroid hormone and thyrotropin measurements and guidelines for future clinical assays[j]. clin chem, 1991, 37(11): 2002-2008.
[2] 尹東光, 賀佑豐, 劉一兵, 等. 促甲狀腺激素化學發(fā)光免疫分析的研究[j]. 分析化學研究報告, 2004, 7(32): 893-896.
[3] 葉成果. 促黃體生成素化學發(fā)光免疫定量檢測試劑盒的研制[j]. 河南科技大學學報, 2004, 22(2): 83-84.
(江蘇省鹽城中學,224005)
教師的教學價值取向,是教師在長期的教學實踐中形成的,通過教學內(nèi)容的取舍、教學過程的設(shè)計、教學活動的組織、教學語言的運用等途徑透射出的教學目標一貫的指向性。在新課程改革的背景下,教師的教學價值取向反映了教師對新課程理念的理解和認同,驅(qū)動著教師對“教什么及如何教”的落實和執(zhí)行,并表現(xiàn)出巨大的差異性。
筆者最近在一所高中隨堂觀摩了多位數(shù)學教師所上的《直線與平面垂直》一課。其中,三位教師的教學導入使用了同樣的素材,但呈現(xiàn)出的過程卻并不相同,透射出的價值取向也存在較大的差異。下面,筆者重點整理他們的導入設(shè)計,來比較分析他們的教學價值取向,并反思新課程理念的落實和執(zhí)行狀況。
【教師甲】
問題1:直線和平面有幾種位置關(guān)系?
問題2:對直線和平面平行,主要學習了哪些內(nèi)容?
問題3:直線和平面相交中,最特殊的一種位置關(guān)系是什么?
演示1:用幻燈片展示圖1(旗桿與地面)、圖2(橋柱與水面)。
問題4:我們應(yīng)該研究直線與平面垂直的哪些知識以及如何來研究?
問題5:如何定義直線與平面垂直?
演示2:用幻燈片演示直角三角形繞一直角邊旋轉(zhuǎn)形成圓錐的過程。
問題6:圓錐的軸線與底面圓所在平面上的任意一條直線是什么關(guān)系?
問題7:根據(jù)剛才的觀察和分析,你能概括出直線與平面垂直的定義嗎?
問題8:能否把直線與平面垂直定義中的“任意”改成“無數(shù)”?
活動1:請大家將筆在桌面上擺放,觀察直線與平面的垂直關(guān)系。
演示3:把三角板的一條直角邊貼在桌面上并傾斜三角板,說明另一條直角邊跟桌面上的多條直線垂直。
教師甲的引入,先在引領(lǐng)學生復(fù)習“直線與平面平行”的主要知識的基礎(chǔ)上,提出研究“直線與平面垂直”的教學目標,意在運用“線面平行”的學習過程和方法類比學習“線面垂直”;再運用圓錐的形成過程引領(lǐng)學生感知和理解直線與平面垂直的本質(zhì)屬性,并讓學生對筆在桌面的擺放進行觀察以概括并完善線面垂直的定義。而且,教師甲在整節(jié)課中,不斷地把線面垂直與線面平行進行類比,并給學生較多的時間進行思考、實驗、表達和討論,只留一小段時間對“線面垂直”作簡單的應(yīng)用訓練。
可見,教師甲的教學價值取向是:發(fā)揮學生在課堂學習中的主動性,既注重引領(lǐng)學生進行知識建構(gòu),也注重讓學生體驗和應(yīng)用解決問題的思想和方法,同時強調(diào)對學生思維能力、實踐能力、表達能力以及數(shù)學素養(yǎng)的長期、漸進的培養(yǎng)。當然,秉持這樣的教學風格,會對部分學生短期之內(nèi)運用知識解題的能力有一定的不利影響——因為解題訓練不足。
【教師乙】
表述1:前面我們學習了直線與平面平行,今天我們來學習直線與平面的相交中的一種特殊位置關(guān)系——直線與平面垂直。 演示1:用幻燈片展示圖1(旗桿與地面)、圖2(橋柱與水面)。
問題1:旗桿與地面,橋柱與水面都給了我們直線與平面垂直的形象,我們還可以舉出一些直線與平面垂直的形象嗎?
表述2:如何定義直線與平面垂直?我們可以觀察圓錐的軸線和底面的關(guān)系。
演示2:用幻燈片展示已畫出軸截面的圓錐直觀圖。
問題2:……由圓錐的形成過程,我們可以看到圓錐的軸線與底面上任意一條直徑所在的直線垂直,那么軸線是否和底面上的任意一條直線垂直呢?
問題3:誰能由剛才所觀察的圓錐軸線和底面的關(guān)系概括出直線與平面垂直的定義?
問題4:能否把直線與平面垂直定義中的“任意”改成“無數(shù)”?
演示3:把三角板的一條直角邊貼在桌面上并傾斜三角板。
問題5:誰能說明另一條直角邊跟桌面上的多條直線垂直?
教師乙的引入,直接明確教學的知識目標,在通過實例感知“線面垂直”后再運用圓錐的特征進一步分析線面垂直的本質(zhì)屬性,運用三角板和桌面演示完善線面垂直的定義。而且,教師乙在整節(jié)課中,提出問題后,往往只給學生較短的時間思考,就自行回答或讓學生集體回答,這使教學內(nèi)容推進比較快,為后面的知識運用環(huán)節(jié)節(jié)省了一定的時間;在知識應(yīng)用的環(huán)節(jié),除了讓學生練習了幾道“線面垂直”判斷題之外,還講解了一道“線面垂直”證明題、一道“異面直線垂直”證明題,這使“線面垂直”的主要應(yīng)用得到了比較全面的展現(xiàn)。
可見,教師乙的教學價值取向是:注重讓學生系統(tǒng)地理解和接受數(shù)學知識,強調(diào)讓學生能較快地應(yīng)用所學知識解決問題,即在“知識建構(gòu)”和“解題能力”之間采取平衡的態(tài)度。秉持這樣的教學風格,能讓部分基礎(chǔ)薄弱的學生在課堂上得到比較充足的解題訓練,從而盡快提升他們的解題能力,增強他們學習數(shù)學的信心。
【教師丙】
演示1:用幻燈片展示圖1(旗桿與地面)、圖2(橋柱與水面)。
問題1:請同學們觀察圖片,說出旗桿與地面、橋柱與水面是什么位置關(guān)系?你能舉出一些類似的例子嗎?
問題2:旗桿與地面、橋柱與水面都給了我們直線與平面垂直的形象,那么直線與平面垂直的定義是什么呢?
表述1:直線與平面垂直的定義是……
表述2:一條直線能和一個平面內(nèi)的任意一條直線都垂直嗎?我們一起來觀察圓錐軸線和底面的關(guān)系。
演示2:用幻燈片展示已畫出軸截面的圓錐直觀圖。
表述3:……圓錐軸線和底面上的任意一條直線垂直。
問題3:能否把直線與平面垂直定義中的“任意”改成“無數(shù)”?
演示3:把三角板的一條直角邊貼在桌面上并傾斜三角板,說明另一條直角邊跟桌面上的多條直線垂直。
教師丙的引入,直接由實例得到“線面垂直”的概念,給出“線面垂直”的定義,然后再運用圓錐的特征解釋“線面垂直”的本質(zhì)屬性,運用三角板和桌面演示解釋定義表達的精確性。而且,教師丙在后續(xù)的教學中,把“線面垂直”和平面上的“線線垂直”進行了適當?shù)念惐龋⒔Y(jié)合幻燈片的運用,進一步加快了教學內(nèi)容推進的速度,為知識應(yīng)用的環(huán)節(jié)留下了更多的時間,從而比教師乙多講解了一道轉(zhuǎn)化次數(shù)較多的“線面垂直”問題。
可見,教師丙的教學價值取向是:注重讓學生在理解的基礎(chǔ)上,盡快地接受數(shù)學知識,建立主要的知識結(jié)構(gòu),而不需要面面俱到,強調(diào)讓學生能盡快地應(yīng)用所學知識解決問題,并重點對學生進行解題訓練。秉持這樣的教學風格,能讓學生盡快地接觸到考試中與所學知識相關(guān)的典型問題,明確知識的主要應(yīng)用方向,以便學生后續(xù)的自我訓練更有目的性,從而在短期內(nèi)提高學生的考試成績。
關(guān)鍵詞 成長導師 定向培養(yǎng) 醫(yī)學生
本科生成長導師制是目前我國高校探索育人的新途徑和新模式, 本科生成長導師制是一種親情化、個性化的柔性培養(yǎng)機制, 是導師對學生的思想、學習、心理及生活等各方面進行個別指導的教育教學一體化管理制度。贛南醫(yī)學院自2007年開始,在免費醫(yī)學定向生中全面實施成長導師制,取得了良好效果。
一、成長導師制概述
導師制起源于英國,早出現(xiàn)于英國牛津大學的“新學院”(興建于1379年),當時新生被錄取后到某一學院報到時,學院當局就給他指定一位導師。本科生的導師稱Tutor,研究生的導師稱Supervisor。導師制就是為一組學生確定一名導師,在導師和學生之間建立起“師徒”關(guān)系。導師是學生所選科目的學者,他負責指導學生的學業(yè)和品行,協(xié)助學生安排學習計劃,指導他如何進行深入學習。學生在學習期間每周必須到導師那里去至少一次,每次半小時以上,導師與學生這種談話叫Tutorial(個別輔導)。導師制教學促使學生對所學科目進行創(chuàng)造性思維,這是牛津教學體系中最值得稱道的地方。
“成長導師制”中的“導師”有別于傳統(tǒng)意義上的“指導人學習、進修、寫作論文”的人,而其出發(fā)點在于關(guān)注學生的整體成長發(fā)展,關(guān)注學生的精神生活質(zhì)量與個性化學習需要,對學生進行個別指導,特別注意不同學生的能力、心理結(jié)構(gòu)特征及個人的興趣、動機和要求上的差異,進行因材施教,加強學生的自主學習,培養(yǎng)他們的個性特征。通過個性化和親情化教育,導師從思想上引導、學業(yè)上輔導、心理上疏導、生活上指導,使學生個個受到關(guān)愛,培養(yǎng)能在當代社會中主動、健康發(fā)展的一代新人。
二、“成長導師制”在免費醫(yī)學定向生教育中的意義
“成長導師制”從實質(zhì)上講,就是遵從學生個體發(fā)展的需要和規(guī)律,引導學生正確認識自我、增強學習自信心和提高學習能力水平為目的的一種個體化的教育管理形式。它在指導免費醫(yī)學定向生如何學會生活、學會合作、學會學習、學會認識發(fā)展自己,堅定“服務(wù)基層,服務(wù)農(nóng)村”的信念中表現(xiàn)出了強大的生命力與活力。
1.實行成長導師制教學有助于醫(yī)學生的個性化發(fā)展
本科生導師制要求在本科生教育管理中聘用在醫(yī)、教、研方面具備一定水平的教師擔任學生的導師,而且每個導師一般指導幾名學生,因此,導師就有條件可以根據(jù)學生的具體情況進行因材施教。由于這是一種面對面的個別教學形式,老師能及時發(fā)現(xiàn)學生在學習過程中出現(xiàn)的問題,有的放矢地針對學生的個別差異進行輔導教學,尤其是教學體制改革的實施,學生更需要細致和個別的指導,這種教學方式貫穿于學生實習的整個過程,因此,本科生導師制有助于按照學生的個性和經(jīng)歷幫助其實現(xiàn)全面發(fā)展。
2.成長導師的幫助了學生全面成長,即作為指導學生在校期間的修養(yǎng)、學習、生活、成長的全面性導師
醫(yī)學院校專業(yè)性強,學科多,學生只能被動適應(yīng)學校教學計劃的安排來完成實習,對學科的認識和自身的發(fā)展定位有一定的模糊性和不確定性,實行本科生導師制,導師可以在學生學好基礎(chǔ)課的前提下,結(jié)合學生的興趣和志向,定點定人進行因材施教,以提高學生的思想道德素質(zhì)、文化素質(zhì)、專業(yè)素質(zhì)和分析問題、解決問題的能力,更好地完成醫(yī)學生的臨床實習任務(wù)。
3.實行成長導師制有助于醫(yī)學生身心發(fā)展,提高醫(yī)學生的全面素質(zhì),有利于提高醫(yī)學生的臨床及科研創(chuàng)新能力
臨床實習是醫(yī)學生從學生走向臨床醫(yī)師的過渡階段,導師可幫助學生實現(xiàn)順利過渡。對于學生來說,進入臨床實習是一個全新的環(huán)境,是在校學習期間沒有遇到過的,包括適應(yīng)當前形勢下復(fù)雜的醫(yī)患關(guān)系、理論與實踐的結(jié)合、科研能力的初步掌握等。導師制可以通過一對一的雙向交流,建立密切的師生關(guān)系,不但能幫助學生解決學習、生活、思想上的疑難問題,還能使教學更具針對性,從而達到教書育人的目的。導師參與對學生的教育,了解和指導思想處于形成期的臨床實習生,對他們健康成長很有裨益,許多學生將發(fā)現(xiàn)導師在他們的學術(shù)和專業(yè)發(fā)展過程中扮演著重要的角色。
三、成長導師制在免費醫(yī)學定向生培養(yǎng)中的應(yīng)用――以贛南醫(yī)學院為例
根據(jù)導師制的相關(guān)理念,贛南醫(yī)學院在免費醫(yī)學定向生培養(yǎng)中實施了成長導師制,經(jīng)過幾年的理論探索與實踐運用,成長導生制在醫(yī)學生的育人模式中發(fā)揮了獨特的魅力。
1.導有所依:制定完善的選拔考核制度
“導師制”,說到底是因材施教的具體化方略、關(guān)注學生差異的個性化教育。這就要求導師必須具備高品行、高素質(zhì)。贛南醫(yī)學院選拔導師的標準是政治立場堅定,熱愛和忠誠黨的教育事業(yè),熱心做學生工作;有強烈的事業(yè)心和責任感,品行端正,具有奉獻精神;具備副高職稱以上的在職專任教師及熟悉教育教學規(guī)律的管理干部(正科級以上)擔任學生班級導師。導師的主要職責是教育學生樹立堅定正確的政治方向,加強思想品德修養(yǎng),不斷提高綜合素質(zhì),有針對性地對學生進行學習目的、學習態(tài)度和專業(yè)思想等方面的教育,幫助學生掌握科學的學習方法。為學生解決專業(yè)問題、人生成長和心理情感以及交際娛樂等方面的重大問題提供面對面的交流機會,讓學生受到班級導師的精神熏陶,感受班級導師的人格魅力。
2.導之以術(shù):培養(yǎng)學生的自學能力
大學的專業(yè)教育主要以學生自學為主,教師主要是幫助和引導學生學會學習,學會求知。贛南醫(yī)學院的導師們在幫助學生穩(wěn)固專業(yè)思想的同時,主要引導學生找到自己的學習方法,培養(yǎng)學生的自學能力。他們通過各類講座、論壇以及班會等場合,分享自己在專業(yè)上的學習方法和心得,他們通過校友成功人士的個案,分析自學成才的重要性及學習專業(yè)的方法,并有針對性地對那些學習有困難的同學,鼓勵他們在學習上持之以恒,不斷探索適合自己的學習方法。
3.導之以立:幫助學生做好職業(yè)準備和職業(yè)規(guī)劃
大學期間對自己將來所要從事的職業(yè)做一個比較詳細切實的規(guī)劃,必能為以后的生活增色添彩,使其更有針對性和方向感,減少走彎路的次數(shù)。贛南醫(yī)學院導師們在新生剛開學就舉辦穩(wěn)固專業(yè)思想的講座,加強學生對專業(yè)和未來職業(yè)的全面認識。其次,導師利用“未來,為我而來”等主題班會,幫助學生了解自己,制定長短計劃,認真填寫完備的職業(yè)生涯規(guī)劃書,并定期檢查監(jiān)督學生的完成情況。
4.導之以恒:完善學生人格,堅定服務(wù)基層信念
人格是一個人素質(zhì)的重要組成部分,也是一個人心理面貌的集中反映。適應(yīng)未來社會需要的人才,不僅要有健康的體魄,高尚的思想道德素質(zhì),扎實的科學文化知識,而且還要有健全的人格。導師的工作,其著力點就是要根據(jù)大學生的身心發(fā)展特點,充分體現(xiàn)以人為本的教育理念,引導學生關(guān)注自己的人格狀況,積極主動地塑造自己,逐步使自己的人格走向健康、完善,使教育管理工作達到事半功倍的工作效果。導師結(jié)合學生專業(yè)特色,利用各種場合培養(yǎng)和提高學生的醫(yī)德和社會責任感,有些導師還把班級帶出去,參加社會實踐,讓更多的同學走出校門,了解基層,服務(wù)基層,從而增強社會責任感和歷史使命感。
總之,“成長導師”能最大程度上實現(xiàn)“以人為本,挖掘?qū)W生潛力,發(fā)展學生特長,提升學生整體素質(zhì),為學生健康成長導航"的管理理念,能較好的發(fā)揮教師本身教育資源的優(yōu)勢,發(fā)揮教師的“育人”功能,值得廣大院校共同探討與研究。
參考文獻:
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[3]李偉揚等.本科生成長導師制的探索[J]. 牡丹江醫(yī)學院學報, 2010,10.
基金項目:
本文系國家教師科研基金“十二五”規(guī)劃重點課題《成長導師制在免費醫(yī)學定向生教育中的研究與應(yīng)用》階段性成果。
作者簡介:
鄧壽群(1975-),男,江西石城人,贛南醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院,管理學碩士,講師,畢業(yè)于福建師范大學,研究方向為教育經(jīng)濟與管理。
陳S琪(1973-),男,贛南醫(yī)學院人文學院,講師,研究方向,行政管理理論與實踐。