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一、更新教育理念,藥用植物學(xué)教學(xué)工作應(yīng)以實(shí)踐為中心
傳統(tǒng)的教育模式一般都是先通過(guò)課堂上對(duì)教材的講解,然后再在實(shí)驗(yàn)課上聯(lián)系實(shí)踐從而完成教學(xué)任務(wù)。其實(shí)這樣不但效率不高,而且還容易造成理論和實(shí)踐脫節(jié),教學(xué)效果欠佳。藥用植物學(xué)的教學(xué)工作應(yīng)該以實(shí)踐為中心,加強(qiáng)理論和實(shí)踐的結(jié)合,讓學(xué)生邊觀察藥用植物邊掌握有關(guān)概念,在學(xué)習(xí)中使學(xué)生的觀察能力和動(dòng)手訓(xùn)練得到加強(qiáng)。教學(xué)過(guò)程中還要充分調(diào)動(dòng)學(xué)生的主觀能動(dòng)性,讓學(xué)生參與其中,例如在講藥用植物葉子的時(shí)候可以課前給學(xué)生布置任務(wù),讓學(xué)生們課下收集不同類(lèi)型的葉子帶到課堂上來(lái),然后再由老師進(jìn)行鑒別講解,這樣學(xué)生從身邊較熟悉的植物開(kāi)始進(jìn)入學(xué)習(xí)藥用植物知識(shí)的大門(mén),易于引起學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣,更加牢固的掌握相關(guān)的概念和技能,同時(shí)還鍛煉了學(xué)生的自學(xué)能力。盡量做到將實(shí)驗(yàn)室、標(biāo)本館、藥用植物園變成學(xué)生們學(xué)習(xí)藥用植物的課堂,這樣不但避免了理論課與實(shí)驗(yàn)課程內(nèi)容的重復(fù),還減少時(shí)間、資源上的浪費(fèi),同時(shí)也能培養(yǎng)出理論知識(shí)夠用,專(zhuān)業(yè)技能實(shí)用,就業(yè)途徑寬泛,適應(yīng)社會(huì)需求的可用之才。
二、完善實(shí)驗(yàn)室建設(shè),以提供先進(jìn)實(shí)驗(yàn)條件
實(shí)驗(yàn)教學(xué)對(duì)培養(yǎng)學(xué)生基本操作技能非常重要,它不僅可以培養(yǎng)學(xué)生的動(dòng)手能力、解決問(wèn)題的能力,還可以使學(xué)生的創(chuàng)新能力有所提高,引導(dǎo)他們正確的思維和嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)[2]。所以提供先進(jìn)的實(shí)驗(yàn)條件對(duì)學(xué)生綜合素質(zhì)的提高有著舉足輕重的作用。下面就藥用植物園、實(shí)驗(yàn)室設(shè)備、標(biāo)本室這三個(gè)方面應(yīng)具備的條件作簡(jiǎn)要的概述。
(一)完善實(shí)驗(yàn)室設(shè)備,加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)課改革
藥用植物實(shí)驗(yàn)室是藥用植物學(xué)實(shí)踐教學(xué)的重要場(chǎng)所,其條件的好壞直接關(guān)系到教學(xué)效果,因此藥用植物實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)條件應(yīng)該不斷加以完善。購(gòu)置一些先進(jìn)的實(shí)驗(yàn)設(shè)備,如切片機(jī)、光照培養(yǎng)箱、電子顯微鏡等。鍛煉學(xué)生自己動(dòng)手做制片,觀察藥用植物細(xì)胞、組織、器官的結(jié)構(gòu)特征,組織形態(tài),并進(jìn)行區(qū)別比較,教師在旁邊進(jìn)行指導(dǎo)及糾錯(cuò);使學(xué)生掌握粉末制片、徒手切片等制片、染色、裝片和生物繪畫(huà)等方法和技術(shù);實(shí)驗(yàn)室除了固定的實(shí)驗(yàn)課時(shí)間外還應(yīng)該做到對(duì)學(xué)生定期開(kāi)放,使學(xué)生們有更多的機(jī)會(huì)自主學(xué)習(xí)鍛煉,通過(guò)平時(shí)反復(fù)練習(xí),加強(qiáng)實(shí)踐能力,以能夠勝任將來(lái)的工作。更外也應(yīng)該多做一些設(shè)計(jì)性綜合實(shí)驗(yàn),有利于學(xué)生實(shí)踐能力的提高[3]。
(二)擴(kuò)大藥用植物園規(guī)模
2009年開(kāi)始,藥用植物教研室在校園內(nèi)建了一個(gè)小型的藥用植物園,目前已采集并成功栽培了甘草、薄荷、桔梗、防風(fēng)等20種藥用植物,使學(xué)生從種到收都可以親身體驗(yàn),而且可以隨時(shí)觀察各種藥用植物的生長(zhǎng)狀況,熟悉它們的生長(zhǎng)習(xí)性,為藥用植物實(shí)踐教學(xué)創(chuàng)造了條件,但是藥用植物園規(guī)模較小,我們計(jì)劃擴(kuò)大其規(guī)模,引進(jìn)新品種,使其達(dá)到容納100種藥用植物,更好的為藥用植物實(shí)踐教學(xué)服務(wù)。
(三)加強(qiáng)標(biāo)本室建設(shè)
加強(qiáng)標(biāo)本室建設(shè),盡可能多的采集樣品,制成標(biāo)本,全天對(duì)學(xué)生開(kāi)放,這樣學(xué)生就能在最便利的條件下學(xué)習(xí)很多的藥用植物的知識(shí),與此同時(shí)也能夠多次使用檢索表從而提高鑒別植物的能力。
三、積極開(kāi)辟野外實(shí)習(xí)基地,以提高實(shí)習(xí)效果
藥用植物學(xué)野外教學(xué)實(shí)習(xí)環(huán)節(jié)對(duì)提高教學(xué)質(zhì)量起著至關(guān)重要的作用[4]。在野外實(shí)習(xí)教學(xué)中,應(yīng)用GPS定位儀和數(shù)碼相機(jī)等現(xiàn)代教育技術(shù),可以將所觀察植物定位,實(shí)現(xiàn)地標(biāo)化和數(shù)字化,從而激發(fā)學(xué)生的興趣,提高他們的實(shí)踐能力;并用植物分類(lèi)檢索表來(lái)查找科屬間的特點(diǎn),藥材特征,寫(xiě)出調(diào)查報(bào)告,充分帶動(dòng)了學(xué)生自主學(xué)習(xí),發(fā)揮個(gè)性?xún)?yōu)點(diǎn),提高學(xué)生專(zhuān)業(yè)實(shí)踐運(yùn)用能力。
四、改進(jìn)考試考核,培養(yǎng):“高分高能型”專(zhuān)業(yè)人才
傳統(tǒng)的考試考核只注重理論知識(shí)的掌握,而忽略了實(shí)踐能力的重要性,從而導(dǎo)致了“高分低能”的現(xiàn)象的發(fā)生,具體的原因很多,主要之一就是舊的考核辦法有缺陷,無(wú)法實(shí)現(xiàn)理論與實(shí)踐的相結(jié)合,使學(xué)生們只能紙上談兵,無(wú)法真正考核學(xué)生的真實(shí)水平,而且容易誤導(dǎo)學(xué)生只注重對(duì)課本的死記硬背,不重視課程實(shí)踐環(huán)節(jié)。因此應(yīng)該致力于建立客觀、公平的綜合評(píng)價(jià)體系,使學(xué)生教育真正走向“以能力為中心、以素質(zhì)為導(dǎo)向”的軌道,打破單一考卷模式,逐步向多元化職業(yè)素質(zhì)模式轉(zhuǎn)變。對(duì)學(xué)生的考核不應(yīng)全部集中于期末的考試成績(jī),而是應(yīng)該合理安排更偏重于實(shí)踐的應(yīng)用上。如藥用植物特征描述占25%,顯微特征占25%,植物檢索表的使用占10%,野外實(shí)習(xí)對(duì)植物的鑒別10%,期末理論考試占30%。
以上是我對(duì)藥用植物學(xué)課程改革的一些體會(huì),但仍存在許多亟待探索和解決的課題,對(duì)于改革經(jīng)費(fèi)不足、野外實(shí)習(xí)基地路線(xiàn)的不成熟,藥用植物園植物種類(lèi)較少,本課程內(nèi)容及與相關(guān)專(zhuān)業(yè)課合并的改革等問(wèn)題也許會(huì)使改革在較長(zhǎng)時(shí)間之后才能夠進(jìn)行。
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【摘要】野外實(shí)習(xí)是藥用植物學(xué)課程實(shí)踐教學(xué)的重要環(huán)節(jié),合適的教學(xué)方法是獲得良好教學(xué)效果的重要前提。以往的教學(xué)環(huán)節(jié)設(shè)置存在以下五方面的問(wèn)題:1)小組劃分過(guò)大;2)重點(diǎn)不突出;3)教學(xué)方式過(guò)于簡(jiǎn)單;4)理論與實(shí)際結(jié)合不緊密;5)考核方式單一。針對(duì)以上問(wèn)題,學(xué)院提出了針對(duì)性的解決策略,具體包括:1)細(xì)化實(shí)習(xí)小組,規(guī)范標(biāo)本的采集與制作,實(shí)習(xí)后開(kāi)展標(biāo)本評(píng)展。2)精簡(jiǎn)實(shí)習(xí)內(nèi)容,突出實(shí)習(xí)重點(diǎn)。3)充分利用好工具書(shū)和教材,發(fā)掘?qū)W生自身學(xué)習(xí)潛力,調(diào)動(dòng)學(xué)生學(xué)習(xí)積極性。4)注重生態(tài)環(huán)境考察,有目的地要求學(xué)生練習(xí)使用藥用植物學(xué)專(zhuān)門(mén)術(shù)語(yǔ)來(lái)描述植物的性狀。5)根據(jù)教學(xué)內(nèi)容設(shè)計(jì)多角度、全方位的考核方式。通過(guò)以上改進(jìn),藥用植物學(xué)野外實(shí)習(xí)教學(xué)環(huán)節(jié)取得了更好的效果。
【關(guān)鍵詞】植物學(xué)課程實(shí)習(xí)環(huán);問(wèn)題分析;對(duì)策探討
繼承和發(fā)揚(yáng)民族傳統(tǒng)醫(yī)藥是中南民族大學(xué)藥學(xué)院的重要特色之一,故藥用植物學(xué)便成為我院各專(zhuān)業(yè)學(xué)生的一門(mén)必修專(zhuān)業(yè)基礎(chǔ)課程。該課程以具有醫(yī)療保健作用的藥用植物為研究對(duì)象,講授它們的組織形態(tài)、生理功能、分類(lèi)鑒定以及資源合理開(kāi)發(fā)利用,具有很強(qiáng)的理論性和實(shí)踐性。通過(guò)學(xué)習(xí)該課程,學(xué)生應(yīng)該能夠?qū)σ韵聨c(diǎn)有初步的認(rèn)識(shí):1)常見(jiàn)藥用植物的鑒別要點(diǎn);2)常見(jiàn)藥用植物的資源分布;3)常見(jiàn)藥用植物的分類(lèi)地位及親緣物種;4)現(xiàn)代藥用植物研究新技術(shù)。該課程是我院學(xué)生在高年級(jí)學(xué)習(xí)生藥學(xué)、天然藥物化學(xué)等主干專(zhuān)業(yè)課程的先修課程,具有非同尋常的重要意義。該課程講授的知識(shí)盡管并不晦澀難懂,但內(nèi)容相對(duì)繁雜枯燥、缺乏系統(tǒng)性。學(xué)生普遍反映藥用植物學(xué)是知識(shí)點(diǎn)多而雜、學(xué)習(xí)主要靠考試前突擊死記硬背的課程。而野外實(shí)習(xí)正是解決這些問(wèn)題的重要手段。野外實(shí)習(xí)可以幫助學(xué)生把理論知識(shí)和實(shí)際情況結(jié)合起來(lái),將教材上死的東西變成生活中活的范例,從而激發(fā)學(xué)生的專(zhuān)業(yè)興趣,提高學(xué)生的綜合素質(zhì),因此是藥用植物學(xué)課程教學(xué)的重要組成部分。
我校目前以湖北省京山縣綠林鎮(zhèn)風(fēng)景區(qū)和太子山林場(chǎng)為實(shí)習(xí)基地,于每年8月底舉行為期一周的藥用植物學(xué)野外實(shí)習(xí)教學(xué),取得了不少成績(jī)。然而,從近年藥用植物學(xué)野外實(shí)習(xí)教學(xué)實(shí)踐情況看,一些問(wèn)題依然存在,具體來(lái)說(shuō)主要有以下幾個(gè)方面:1)實(shí)習(xí)小組劃分過(guò)大,每組包括約18名學(xué)生,這樣就不能使每位學(xué)生都獲得充分參與的機(jī)會(huì);2)目標(biāo)不夠明確。藥用植物學(xué)野外實(shí)習(xí)本應(yīng)以具有藥用價(jià)值的植物為主要研究對(duì)象,通過(guò)野外實(shí)地考察,了解它們的性狀鑒別要點(diǎn)、野外生長(zhǎng)狀況以及植物資源分布情況。但由于實(shí)習(xí)點(diǎn)內(nèi)的植物不全是藥用植物。根據(jù)現(xiàn)有的實(shí)習(xí)安排,在學(xué)生采集的標(biāo)本中往往混有大量的非藥用植物。這樣就導(dǎo)致在實(shí)習(xí)過(guò)程中,教師不得不抽出相當(dāng)部分的時(shí)間精力向?qū)W生講解這些非藥用的植物,這樣就沖淡了實(shí)習(xí)主題,影響了實(shí)習(xí)收獲。3)教學(xué)方法過(guò)于簡(jiǎn)單。學(xué)生遇到不能辨認(rèn)的植物時(shí),不是求助于工具書(shū)和文獻(xiàn),而是直接詢(xún)問(wèn)教師。教師也會(huì)直接告訴該植物的科屬和定種,而不是引導(dǎo)學(xué)生自己從工具書(shū)中尋求答案。這種教學(xué)方法不能充分調(diào)動(dòng)學(xué)生的積極性并鍛煉學(xué)生的思維,反過(guò)來(lái)容易助長(zhǎng)學(xué)生以瞬時(shí)記憶和應(yīng)付考試為目的的學(xué)習(xí)模式。4)理論和實(shí)踐結(jié)合不緊密,觀察植物走馬觀花,不夠認(rèn)真細(xì)致。學(xué)生機(jī)械記憶,不能真正掌握各科屬植物的鑒別要點(diǎn)。5)考核方式單一,主要以實(shí)習(xí)報(bào)告為依據(jù)來(lái)確定學(xué)生的成績(jī),難以取得最佳的教學(xué)效果。
對(duì)于這些問(wèn)題,經(jīng)反復(fù)研究,結(jié)合我院實(shí)際情況,我們有針對(duì)性地提出了以下對(duì)策:
1)細(xì)化實(shí)習(xí)小組,規(guī)范標(biāo)本的采集與制作,實(shí)習(xí)后開(kāi)展標(biāo)本評(píng)展。在實(shí)習(xí)活動(dòng)中,教師應(yīng)對(duì)實(shí)習(xí)小組進(jìn)行細(xì)化,將一個(gè)大組細(xì)化為5個(gè)小組,每組4人左右,每個(gè)小組的成員應(yīng)該有明確的分工,這樣便能使更多的學(xué)生有親身實(shí)踐的機(jī)會(huì)。同時(shí)還要求學(xué)生在采集植物時(shí)注意標(biāo)本相關(guān)信息的記錄,如標(biāo)本的典型性、完整性、采集時(shí)間、生長(zhǎng)環(huán)境、重要形態(tài)特征等。這些信息對(duì)后續(xù)的標(biāo)本鑒定和研究無(wú)疑有很大的幫助。為了狠抓每個(gè)小組標(biāo)本采集的落實(shí)情況,我們?cè)趯?shí)習(xí)后還將開(kāi)展標(biāo)本評(píng)展工作,將各個(gè)同學(xué)的標(biāo)本制作技能和原始記錄的詳盡規(guī)范程度納入實(shí)習(xí)量化考核中。同時(shí),還要將學(xué)生制作的優(yōu)秀標(biāo)本作為教師將來(lái)開(kāi)展理論教學(xué)的實(shí)證標(biāo)本。
2)精簡(jiǎn)實(shí)習(xí)內(nèi)容,突出實(shí)習(xí)重點(diǎn)。在以往的教學(xué)模式中,教師帶領(lǐng)學(xué)生去野外,走到哪里講到哪里。這樣,一部分比較典型,對(duì)教材上知識(shí)結(jié)構(gòu)具有極大的支撐作用的藥用植物,就有可能因?yàn)樵诳疾斓倪^(guò)程中沒(méi)有遇見(jiàn)而無(wú)法向?qū)W生講授。為了改進(jìn)這一缺陷,實(shí)習(xí)前,教師首先根據(jù)當(dāng)?shù)貙?shí)際情況,挑選出一些形態(tài)結(jié)構(gòu)典型、分類(lèi)地位明確的常用中藥,對(duì)這些中藥的各方面特性有一個(gè)總體性的把握。到達(dá)實(shí)習(xí)地點(diǎn)但尚未開(kāi)始野外實(shí)習(xí)前,教師分組向同學(xué)們講解這些植物的基本情況,要求每組學(xué)生必須能夠采到這些植物,完全掌握這些植物的性狀鑒別要點(diǎn)及分類(lèi)地位。實(shí)習(xí)結(jié)束后的藥用植物辨認(rèn)考試中,這些植物也會(huì)占有相當(dāng)?shù)谋壤?。通過(guò)采取以上措施,學(xué)生明確了實(shí)習(xí)要點(diǎn),同時(shí)可以達(dá)到利用重點(diǎn)掌握一兩種植物帶動(dòng)理解一科植物的辨析要點(diǎn)的效果。
3)充分利用好檢索表和教材,發(fā)掘?qū)W生自身學(xué)習(xí)潛力,調(diào)動(dòng)學(xué)生學(xué)習(xí)積極性。單純簡(jiǎn)單地識(shí)記藥用植物的科屬不應(yīng)是藥用植物學(xué)野外實(shí)習(xí)的主要目標(biāo)。比較起來(lái),提高對(duì)藥用植物識(shí)別能力是其中更重要的一項(xiàng)訓(xùn)練內(nèi)容。植物的各級(jí)分類(lèi)檢索表是藥用植物鑒定的基本工具書(shū),教師應(yīng)對(duì)檢索表使用和編制方法進(jìn)行詳盡的專(zhuān)題講解。這樣,一方面學(xué)生可以將工具書(shū)作為工作以后可以終身依靠的啞巴老師,利用檢索表對(duì)無(wú)法辨認(rèn)的植物名稱(chēng)及其科屬分類(lèi)進(jìn)行確定,提高獨(dú)立工作能力。另一方面,學(xué)生可以反過(guò)來(lái)根據(jù)實(shí)習(xí)地點(diǎn)常見(jiàn)的藥用植物編寫(xiě)檢索表,這一定有利于他們掌握植物親緣關(guān)系辨別及分類(lèi)理論,提高綜合分析問(wèn)題與解決問(wèn)題的能力,加深對(duì)藥用植物學(xué)理論知識(shí)的全面理解。同時(shí)還應(yīng)注重教材在實(shí)習(xí)教學(xué)中的地位。盡管有植物志和檢索表這樣準(zhǔn)確全面詳實(shí)的工具書(shū),但是這些工具書(shū)信息過(guò)于龐雜,且體積巨大、攜帶不方便。學(xué)生很難在短時(shí)間內(nèi)熟練地掌握。相比較而言,教材知識(shí)精煉、突出藥用植物學(xué)的基本知識(shí)與主干概念。教師要充分運(yùn)用教材,有意針對(duì)教材的內(nèi)容,結(jié)合實(shí)習(xí)地點(diǎn)的實(shí)際情況,設(shè)計(jì)以加強(qiáng)對(duì)教材內(nèi)容的理解為目的的實(shí)習(xí)內(nèi)容,讓學(xué)生充分開(kāi)展落實(shí),最后達(dá)到加深對(duì)教材內(nèi)容的理解與掌握的目的。
4)注重生態(tài)環(huán)境考察,有意練習(xí)使用藥用植物學(xué)專(zhuān)門(mén)術(shù)語(yǔ)來(lái)描述植物的性狀。藥用植物的生長(zhǎng)繁衍必須依賴(lài)一定的外部環(huán)境。反過(guò)來(lái),植物對(duì)其所處環(huán)境也有一定影響。 因此,十分必要加強(qiáng)對(duì)藥用植物的生長(zhǎng)環(huán)境考察與分析。具體地說(shuō),首先要掌握各種生態(tài)類(lèi)型和群落類(lèi)型的特點(diǎn)以及植物種群、群落之間的聯(lián)系;其次要了解植物與環(huán)境因素的相互關(guān)系,如氣候、土壤、地形、其他生物和人類(lèi)活動(dòng)等各種因子對(duì)藥用植物分布的影響,為資源調(diào)查提供依據(jù)。對(duì)藥用植物術(shù)語(yǔ)的熟練運(yùn)用也是野外實(shí)習(xí)的重要訓(xùn)練目標(biāo)之一,為了落實(shí)這一點(diǎn),應(yīng)強(qiáng)化室內(nèi)實(shí)習(xí)環(huán)節(jié)。教師應(yīng)把藥用植物學(xué)野外實(shí)習(xí)作為教學(xué)、科研的一個(gè)重要環(huán)節(jié),結(jié)合藥典收錄的藥用植物以及實(shí)習(xí)基地藥材植物分布情況,設(shè)計(jì)一系列實(shí)習(xí)專(zhuān)題,讓學(xué)生進(jìn)行實(shí)習(xí)地植物資源調(diào)查。實(shí)習(xí)前應(yīng)先引導(dǎo)學(xué)生,查閱文獻(xiàn)資料了解專(zhuān)題涉及的藥用植物的資源分布、生長(zhǎng)環(huán)境、植物鑒定性狀和藥用價(jià)值等信息。調(diào)查采集完畢后,進(jìn)入室內(nèi)實(shí)習(xí)環(huán)節(jié),這一環(huán)節(jié)要求學(xué)生進(jìn)行室內(nèi)標(biāo)本制作、溫習(xí)描述植物形態(tài)的常見(jiàn)術(shù)語(yǔ)、整理實(shí)習(xí)資料、編制定種檢索表。對(duì)于學(xué)有余力的同學(xué),可以引導(dǎo)他們繼續(xù)查閱文獻(xiàn),寫(xiě)出藥物有效化學(xué)成分、藥理作用機(jī)理、臨床應(yīng)用和資源開(kāi)發(fā)的綜述報(bào)告。這樣也就培養(yǎng)和訓(xùn)練了學(xué)生的自學(xué)能力和科技論文寫(xiě)作能力。教師還可以進(jìn)一步指導(dǎo)學(xué)生進(jìn)行獨(dú)立的校園藥用植物資源調(diào)查,編制校園藥用植物檢索表;或者假期讓學(xué)生調(diào)查家鄉(xiāng)的藥用以及珍稀瀕危植物等,并用植物分類(lèi)檢索表查找其科屬特點(diǎn),對(duì)藥用植物學(xué)野外實(shí)習(xí)的內(nèi)容進(jìn)行加深拓寬。
[關(guān)鍵詞] 比較;教學(xué);藥用植物學(xué);應(yīng)用
[中圖分類(lèi)號(hào)] G623[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] C[文章編號(hào)] 1673-7210(2012)03(a)-0139-02
《藥用植物學(xué)》是中醫(yī)藥院校中藥學(xué)相關(guān)專(zhuān)業(yè)的重要專(zhuān)業(yè)基礎(chǔ)課程,是一門(mén)實(shí)踐性很強(qiáng)的學(xué)科,學(xué)好這門(mén)課程對(duì)于中藥學(xué)、天然藥物化學(xué)、中藥鑒定學(xué)、生藥學(xué)、中藥資源學(xué)和中藥栽培學(xué)等相關(guān)課程的學(xué)習(xí)及研究具有十分重要的意義。
在課堂及野外實(shí)踐教學(xué)過(guò)程中,教者適時(shí)、適度地引用“比較式教學(xué)法”,可使學(xué)生更容易抓住藥用植物的主要識(shí)別特征,加深理解。另外還可以鼓勵(lì)學(xué)生從其他角度進(jìn)行橫向或縱向比較,培養(yǎng)學(xué)生的發(fā)散思維和創(chuàng)新能力。
1 概念及方法
“比”即為比較,是在教學(xué)活動(dòng)中將兩個(gè)或兩個(gè)以上的認(rèn)識(shí)對(duì)象放在一定的條件下,按照同一標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行對(duì)照比較,從而確定認(rèn)識(shí)對(duì)象屬性的同異、地位的主次、作用的大小、性能的優(yōu)劣、問(wèn)題的難易或認(rèn)識(shí)的正誤深淺,以達(dá)到辨識(shí)、了解和把握認(rèn)識(shí)對(duì)象之目的的一種方法[1]。
1.1 橫向比較法
橫向比較是將兩個(gè)或兩個(gè)以上處于同一層次或同一類(lèi)別或相類(lèi)似的事物加以比較的方法,即對(duì)同一時(shí)期的同類(lèi)事物,或同一事物內(nèi)部存在的各個(gè)方面進(jìn)行比較。對(duì)于同一科屬的藥用植物適用此法。
1.2 縱向比較法
縱向比較是對(duì)不同歷史時(shí)期內(nèi)屬于同類(lèi)的不同事物,或同一事物在不同發(fā)展階段的不同情況進(jìn)行比較。任何事物都在不斷發(fā)展變化[2]。此法適用于不同科屬藥用植物的比較。
1.3 縱橫結(jié)合比較法
縱橫結(jié)合比較法或在橫向比較中夾帶著縱向比較,或在縱向比較中夾帶橫向比較,兩者結(jié)合比較。任何事物不是孤立存在,也不是靜止不動(dòng),既與其他事物同存,其本身又在發(fā)展變化[3]。多角度、全方位對(duì)比同一科屬或不同科屬藥用植物的區(qū)別點(diǎn)更適用這種縱橫結(jié)合的方法。
2 實(shí)施的必要性
河南藥用植物資源豐富,不同的氣候、不同的環(huán)境,造就了豐富多彩的藥用植物。據(jù)全國(guó)中藥資源普查,全省擁有中藥材品種總數(shù)2 302種,其中植物類(lèi)1 963種,動(dòng)物類(lèi)270種,礦物類(lèi)44種,其他25種。由于藥用植物種類(lèi)繁多,分科瑣細(xì),且該課程內(nèi)容涵蓋面廣,知識(shí)點(diǎn)多,需要記憶和理解的內(nèi)容多,使得課堂教學(xué)十分枯燥,學(xué)生對(duì)知識(shí)的掌握有一定困難,教學(xué)效果往往不盡如人意。授課過(guò)程中通過(guò)比較植物之間的異同點(diǎn),特別是對(duì)于名稱(chēng)、形態(tài)和功效上容易混淆的藥用植物,采用實(shí)物對(duì)比講解的方式,可以使學(xué)生思考、分析和解決問(wèn)題的能力有所提高[4],學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣也會(huì)明顯增強(qiáng)。
3 在藥用植物學(xué)教學(xué)中的應(yīng)用
3.1 同一科屬的橫向?qū)Ρ?/p>
河南四大懷藥的山藥與穿山龍為薯蕷科植物,地上部分形態(tài)相似,但山藥根莖在地下直走,穿山龍根莖地下橫向生長(zhǎng)。東北道地藥材人參和西洋參形似,但西洋參小葉片的葉脈上面幾乎無(wú)剛毛,葉緣的鋸齒不規(guī)則且較粗大,容易區(qū)分。車(chē)前和平車(chē)前均為車(chē)前科,地上形態(tài)極為相似,都是匙形葉,穗狀花序,但車(chē)前為須根系,平車(chē)前為直根系,挖出后觀察根系類(lèi)型可予區(qū)分。玉蘭和廣玉蘭同為木蘭科木蘭屬植物,學(xué)生在識(shí)別的時(shí)候總是容易混淆,比較二者葉后不難發(fā)現(xiàn),廣玉蘭為革質(zhì)葉且為常綠植物,玉蘭為草質(zhì)的落葉植物。木蘭科北五味子和南五味子也存在類(lèi)似現(xiàn)象,二者功效不同,不能同作五味子入藥,需準(zhǔn)確把其分類(lèi),比較果實(shí)后發(fā)現(xiàn):北五味子果序?yàn)樗霠?,而南五味子果序?yàn)榍驙睢C倒迮c月季是同科同屬不同種的姊妹花,市場(chǎng)上賣(mài)的鮮花許多都是月季的變種,如何區(qū)別玫瑰和月季,見(jiàn)表1。牡丹與芍藥在觀賞價(jià)值方面絕不遜于玫瑰和月季,雖同為芍藥科,花形花色有相似之處,但牡丹屬于小灌木,而芍藥屬于草本,二者通過(guò)莖質(zhì)地的對(duì)比就能輕而易舉地區(qū)分開(kāi)。石菖蒲與水菖蒲同為天南星科,僅一字之差,植物學(xué)特征又非常相似,葉劍狀條形,兩列狀密生于短莖上,全緣,先端漸尖,有光澤;但中脈不明顯者為石菖蒲,若中脈明顯即為水菖蒲。通過(guò)葉脈鑒別的還有傘形科柴胡屬植物柴胡、狹葉柴胡和大葉柴胡,差別之大,比對(duì)即見(jiàn),見(jiàn)表2、圖1~2。
3.2 不同科屬的縱向?qū)Ρ?/p>
北沙參屬于傘形科珊瑚菜的根,花序?yàn)閺?fù)傘形。南沙參屬于桔梗科四葉沙參或輪葉沙參等植物的根,有乳汁。另就二者質(zhì)地而論,北沙參堅(jiān)實(shí),南沙參空疏。半邊蓮與半枝蓮:半邊蓮屬于桔梗科植物,有乳汁,花冠紅紫色,裂片偏向一側(cè),故名,而半枝蓮屬于唇形科,無(wú)乳汁,葉對(duì)生,莖四棱,兩朵小花對(duì)生,總狀花序排列在枝頂一側(cè)而得名。金錢(qián)草與連錢(qián)草分屬于報(bào)春花科植物過(guò)路黃和唇形科植物連錢(qián)草,二者親緣關(guān)系較遠(yuǎn),自然形態(tài)學(xué)差異較大。海棠與秋海棠:海棠為薔薇科木本植物,秋海棠為秋海棠科草本植物。絞股藍(lán)和烏斂梅:絞股藍(lán)是多年生草質(zhì)藤本植物,素有“南方人參”之稱(chēng),國(guó)內(nèi)外的研究一致表明,絞股藍(lán)具有抑制腫瘤細(xì)胞繁殖、抗疲勞、保肝、抗胃潰瘍、調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝等藥理作用。烏斂梅(葡萄科)與絞股藍(lán)在植物形態(tài)上很相似,以致許多人誤將烏斂梅當(dāng)絞股藍(lán)入藥、飲用,烏斂梅卷須二分叉與葉片對(duì)生,絞股藍(lán)的卷須不分叉,生于葉腋,并與葉柄呈180度角。五味子與五倍子十分容易混為一談,五味子為木蘭科植物,五味子的果實(shí)入藥,而五倍子為寄生在漆樹(shù)科植物鹽膚木(有乳汁)上面的蟲(chóng)癭,差異較大。白首烏與何首烏雖同為首烏,能補(bǔ)肝腎、益精血、強(qiáng)筋骨,但二者非同一科屬,區(qū)別顯而易見(jiàn)。見(jiàn)表3。
3.3 縱橫結(jié)合的對(duì)比
縱橫結(jié)合法即縱向穿線(xiàn)、橫向結(jié)網(wǎng),縱橫交織,構(gòu)成立體知識(shí)綜合體。講述多種易混淆藥用植物時(shí),可先縱向聯(lián)系,讓學(xué)生對(duì)所有易混淆植物所屬的科屬、主要區(qū)別點(diǎn)進(jìn)行明了的比較;然后再橫向聯(lián)系每一個(gè)植物自身具有的典型特征,進(jìn)行分析、歸納和梳理。如表4所列。中藥材來(lái)源廣泛,品種繁多[5],命名一般具有一定的意義,可以顧名思義,利用中藥的“形”來(lái)分類(lèi),這是提高學(xué)習(xí)能力的重要手段之一。通過(guò)以上的“比較式”教學(xué),對(duì)相似、易混淆的藥用植物有了清晰的認(rèn)識(shí),既找到了聯(lián)系,又把握了區(qū)別。這樣的例子數(shù)不勝數(shù),筆者重在掌握和實(shí)際應(yīng)用這種對(duì)比的教學(xué)方法。
4 總結(jié)與討論
在對(duì)《藥用植物學(xué)》課程多年的創(chuàng)新性改革和實(shí)踐中發(fā)現(xiàn),“比較式教學(xué)法”能夠培養(yǎng)學(xué)生發(fā)現(xiàn)問(wèn)題、整合知識(shí)、科學(xué)思維、靈活運(yùn)用所學(xué)知識(shí)解決問(wèn)題的能力,開(kāi)闊了學(xué)生的視野,可使課堂氣氛更為活躍,知識(shí)點(diǎn)掌握得更加牢固,同時(shí)對(duì)于提高學(xué)生的整體素質(zhì)方面也起到了積極的推動(dòng)作用[6]。
當(dāng)然,教學(xué)方法是多種多樣的。在教學(xué)實(shí)踐中,還應(yīng)根據(jù)學(xué)科、課程、教材、教學(xué)對(duì)象的特點(diǎn)和內(nèi)在規(guī)律,采百家之長(zhǎng),靈活選用不同的教學(xué)方法,以求取得最佳的教學(xué)效果??傊?,在《藥用植物學(xué)》這門(mén)課程的教學(xué)中,教師應(yīng)不斷探索、改革,提高教學(xué)質(zhì)量,使學(xué)生學(xué)以致用,使課堂更加生動(dòng)、有趣,為培養(yǎng)更多、更優(yōu)秀的中醫(yī)藥人才而努力奮斗。
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[關(guān)鍵詞] 《藥用植物學(xué)》 網(wǎng)絡(luò)課件 課件設(shè)計(jì)
隨著計(jì)算機(jī)的不斷普及和網(wǎng)絡(luò)建設(shè)的飛速發(fā)展,網(wǎng)上教學(xué)已經(jīng)成為不可逆轉(zhuǎn)的潮流。網(wǎng)上教學(xué)通過(guò)網(wǎng)絡(luò)連線(xiàn)的遠(yuǎn)程教育系統(tǒng)和多媒體設(shè)施,為學(xué)習(xí)者提供一種全新的學(xué)習(xí)方式。我國(guó)的網(wǎng)上教學(xué)建設(shè)正在飛速地發(fā)展。要想搞好網(wǎng)上教學(xué),教學(xué)軟件的開(kāi)發(fā)是關(guān)鍵。筆者根據(jù)自行制作《藥用植物學(xué)》網(wǎng)絡(luò)課件所感,對(duì)網(wǎng)絡(luò)課件的設(shè)計(jì)問(wèn)題談幾點(diǎn)認(rèn)識(shí)。
一、多媒體網(wǎng)絡(luò)課件的概念
多媒體網(wǎng)絡(luò)課件是指為了達(dá)到既定教學(xué)目標(biāo),依托信息網(wǎng)絡(luò),綜合運(yùn)用多種媒體手段來(lái)展示相對(duì)獨(dú)立或完整的教學(xué)內(nèi)容的應(yīng)用軟件。多媒體網(wǎng)絡(luò)課件應(yīng)具有網(wǎng)絡(luò)交互性、相對(duì)完整性和媒體多樣性等特征。與傳統(tǒng)的計(jì)算機(jī)輔助教學(xué)課件所不同的是,網(wǎng)絡(luò)多媒體教學(xué)課件需要服務(wù)器的支持,其不僅要適合教師現(xiàn)場(chǎng)教學(xué)使用,更要適合學(xué)習(xí)者在網(wǎng)絡(luò)終端自行操作學(xué)習(xí);其不僅要有多媒體的外觀效果,而且更應(yīng)該具有強(qiáng)大的功能,要從教學(xué)過(guò)程固定、單一的“演示多媒體”向教學(xué)過(guò)程可以隨意調(diào)整的“模擬多媒體”轉(zhuǎn)化。
二、用創(chuàng)新教育理論宏觀指導(dǎo)課件的開(kāi)發(fā)
教學(xué)課件的開(kāi)發(fā)設(shè)計(jì)要以先進(jìn)的教育思想作指導(dǎo)。當(dāng)今世界,知識(shí)經(jīng)濟(jì)已見(jiàn)端倪,知識(shí)經(jīng)濟(jì)的核心是創(chuàng)新,知識(shí)經(jīng)濟(jì)呼喚創(chuàng)新人才,創(chuàng)新人才的培養(yǎng)要依靠創(chuàng)新教育。我國(guó)教育理論正不斷發(fā)展,以適應(yīng)經(jīng)濟(jì)時(shí)代和創(chuàng)新人才培養(yǎng)的需要。創(chuàng)造性教育理論逐漸被人們所接受,其目標(biāo)是開(kāi)發(fā)學(xué)生的創(chuàng)造力。顯然,培養(yǎng)和造就一批高素質(zhì)的創(chuàng)造性人才是院校教育的首要任務(wù)。網(wǎng)上教學(xué)同樣要以培養(yǎng)創(chuàng)造性人才為出發(fā)點(diǎn)。面向21世紀(jì)網(wǎng)絡(luò)教學(xué),我們要更新傳統(tǒng)的課件設(shè)計(jì)思路,在課件中應(yīng)該設(shè)置有利于學(xué)習(xí)者發(fā)展創(chuàng)造能力、解決問(wèn)題能力的“情境”,為學(xué)習(xí)者設(shè)計(jì)出多個(gè)學(xué)習(xí)流程供其選擇,要使課件具有更好的即時(shí)交互功能。
三、課件設(shè)計(jì)要根據(jù)教育對(duì)象制定明確的教學(xué)目標(biāo)
多媒體網(wǎng)絡(luò)課件的設(shè)計(jì)和其他教學(xué)設(shè)計(jì)一樣,也要制定明確的教學(xué)目標(biāo)。設(shè)計(jì)者必須事先規(guī)劃好課件進(jìn)程中的各個(gè)環(huán)節(jié),在每個(gè)環(huán)節(jié)中都要制定明確的目標(biāo)細(xì)節(jié),并使這些目標(biāo)都能很好地為課件總體目標(biāo)服務(wù),可以通過(guò)設(shè)置教學(xué)模塊來(lái)凸顯教學(xué)設(shè)計(jì),如《藥用植物學(xué)》網(wǎng)絡(luò)課件就包括課程介紹、教學(xué)大綱、學(xué)習(xí)資料、教學(xué)日歷、教案、課程學(xué)習(xí)、影音視頻、聯(lián)系方式等八個(gè)模塊。設(shè)計(jì)者在制定每個(gè)具體目標(biāo)時(shí)都要考慮到教育對(duì)象群體的年齡、基礎(chǔ)、層次及接受能力等因素,使目標(biāo)定得恰到好處、難易適度。只有這樣設(shè)計(jì)教學(xué)目標(biāo)才能改變傳統(tǒng)上以“教”為中心的教學(xué)模式,從而真正實(shí)現(xiàn)以“學(xué)”為中心,充分發(fā)揮學(xué)習(xí)者的主動(dòng)性和創(chuàng)造性。
四、課件設(shè)計(jì)要精心選材,重點(diǎn)突出
一個(gè)好的多媒體課件可以增強(qiáng)學(xué)習(xí)者的學(xué)習(xí)興趣、提高學(xué)習(xí)效率,使其在輕松自由的環(huán)境中接受知識(shí)、提高能力。但是并非所有的學(xué)科、所有的課程都適合采用課件形式進(jìn)行教學(xué),對(duì)于那些只需學(xué)生自行閱讀教材便可以掌握的淺顯內(nèi)容,就不需要花費(fèi)大量精力開(kāi)發(fā)課件;對(duì)于那些通過(guò)單一媒體便可實(shí)現(xiàn)教學(xué)目標(biāo)的內(nèi)容也不需要制作多媒體課件,只有那些用單一的語(yǔ)言或文字無(wú)法表達(dá)或難以揭示相關(guān)規(guī)律的內(nèi)容,才適合采用多媒體手段進(jìn)行教學(xué)。比如,《藥用植物學(xué)》課中“根的初生構(gòu)造向次生構(gòu)造的轉(zhuǎn)變”“冬蟲(chóng)夏草的形成過(guò)程”等內(nèi)容,用傳統(tǒng)的講述法或簡(jiǎn)單的圖形就難以說(shuō)明問(wèn)題,采用動(dòng)態(tài)的flash演示就能夠直觀地揭示初生構(gòu)造與次生構(gòu)造之間和冬蟲(chóng)夏草形成的復(fù)雜過(guò)程,使學(xué)生容易于接受、易于理解。只有選材適當(dāng),有所側(cè)重,才能充分發(fā)揮多媒體的功效,在教學(xué)中起到事半功倍的作用。反之,則會(huì)畫(huà)蛇添足,浪費(fèi)時(shí)間和精力。
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在改革探索中,我們首先在教學(xué)計(jì)劃中增加以中醫(yī)臨床常用中藥來(lái)源植物識(shí)別及栽培的《中藥植物學(xué)》課程,從而從制度上保證課程的正常開(kāi)設(shè)。在教學(xué)改革方面,我們主要從實(shí)踐教學(xué)的課時(shí)安排、教材補(bǔ)充、藥用植物園原植物識(shí)別、中藥標(biāo)本室植物標(biāo)本及中藥飲片識(shí)別、中藥采收及收獲中藥的實(shí)驗(yàn)室觀察等方面嘗試改革,現(xiàn)總結(jié)如下。
1.1實(shí)踐教學(xué)課時(shí)的安排:
實(shí)踐教學(xué)課程一般與理論教學(xué)安排在同一學(xué)期,并且實(shí)踐教學(xué)內(nèi)容通常在相應(yīng)的理論教學(xué)結(jié)束后進(jìn)行。為了保證學(xué)生全面學(xué)習(xí)中藥植物的生長(zhǎng)發(fā)育全過(guò)程,中藥植物學(xué)課程分設(shè)在第二及第三學(xué)期。其中,第二學(xué)期主要進(jìn)行中藥植物學(xué)及栽培學(xué)基礎(chǔ)知識(shí)、中藥植物園幼苗及開(kāi)花期原植物識(shí)別的教學(xué)活動(dòng),第三學(xué)期進(jìn)行中藥植物園果期原植物識(shí)別、中藥標(biāo)本室植物標(biāo)本及中藥飲片識(shí)別、中藥采收及收獲中藥的實(shí)驗(yàn)室觀察的教學(xué)活動(dòng)。近幾年的教學(xué)實(shí)踐證明,通過(guò)合理安排教學(xué)內(nèi)容,我們將課時(shí)安排做這樣的改變可以使學(xué)生在學(xué)習(xí)的過(guò)程中系統(tǒng)地了解中藥原植物從幼苗到收獲的全過(guò)程;并且,由于《中藥學(xué)》安排在第三學(xué)期,因此,學(xué)生在學(xué)習(xí)《中藥學(xué)》之前就已經(jīng)進(jìn)行了《中藥植物學(xué)》的學(xué)習(xí),有利于提高學(xué)生學(xué)習(xí)中藥學(xué)的興趣,同時(shí),感性認(rèn)識(shí)的積累對(duì)學(xué)生以后學(xué)習(xí)理論知識(shí)也具有積極的作用。
1.2補(bǔ)充知識(shí)點(diǎn),編寫(xiě)教材,完善學(xué)生的知識(shí)體系:
為了使學(xué)生能夠更好地認(rèn)識(shí)、鑒別中藥原植物,我們結(jié)合多年教學(xué)經(jīng)驗(yàn)編寫(xiě),并由中國(guó)醫(yī)藥科技出版社出版了《中藥植物學(xué)》教材,以中醫(yī)臨床常用中藥材為對(duì)象,介紹其來(lái)源,包括植物的形態(tài)、生理功能、分類(lèi)鑒定及栽培基礎(chǔ)理論,并首次提出“中藥植物學(xué)”概念。全書(shū)分為緒論、中藥植物學(xué)形態(tài)及分類(lèi)、中藥植物栽培、各論四大部分。在各論部分,詳細(xì)介紹每一味中藥材的來(lái)源、藥性、功能主治、采集加工、栽培及植物形態(tài),使學(xué)生可以系統(tǒng)掌握中藥從栽培到采集加工及臨床應(yīng)用的相關(guān)知識(shí),豐富并完善學(xué)生的知識(shí)體系。
1.3中藥原植物識(shí)別與藥材的采收:
采取中藥植物園原植物識(shí)別和標(biāo)本室臘葉標(biāo)本觀察相結(jié)合的方法,帶領(lǐng)學(xué)生識(shí)別中藥的基原植物。為了讓學(xué)生能夠更加直觀地觀察生活狀態(tài)下的植物,我院在校園內(nèi)建設(shè)占地40畝的中藥植物園,園內(nèi)按照一至兩年生草本區(qū)、多年生草本區(qū)、喬灌木區(qū)和藤本植物區(qū)四個(gè)大區(qū)規(guī)劃種植中藥400余種,其中,300余種為全國(guó)高等中醫(yī)藥院校規(guī)劃教材《中藥學(xué)》中所載的大部分常用藥材,其余品種為當(dāng)?shù)爻S盟幉?。在植物的營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)期,根據(jù)植物開(kāi)花的先后次序,盡量將具有相同功效的中藥原植物歸類(lèi)講解,并重點(diǎn)注意讓學(xué)生識(shí)別易混淆植物,如金鐘花、迎春花和連翹的區(qū)別,白玉蘭、廣玉蘭、望春玉蘭、辛夷、二喬玉蘭的區(qū)別,木犀科丁香和桃金娘科丁香的區(qū)別等;同一植物的不同入藥部位,如板藍(lán)根和大青葉,枸杞和地骨皮,蘇子和蘇葉,半夏和掌葉半夏,桑葉、桑枝、桑白皮和桑椹等,以便開(kāi)拓學(xué)生的視野,為以后理論課的學(xué)習(xí)打下基礎(chǔ)。在中藥材的收獲期,帶領(lǐng)學(xué)生采收中藥。為了保護(hù)中藥資源以及增加學(xué)生對(duì)中藥材的資源保護(hù)意識(shí),我們主要采收種子、葉類(lèi)和花類(lèi)藥材以及部分需要更新的根類(lèi)藥材,讓學(xué)生從采收、晾曬到簡(jiǎn)單的炮制過(guò)程全程參與,在此過(guò)程中學(xué)生們不僅能夠了解生藥及中藥炮制的知識(shí),也能夠培養(yǎng)學(xué)生對(duì)動(dòng)植物資源的保護(hù)以及合理用藥的意識(shí)。此外,學(xué)院標(biāo)本室也保存了部分亞熱帶、熱帶植物標(biāo)本,以彌補(bǔ)藥用植物園缺少此類(lèi)植物的不足。
1.4中藥飲片的識(shí)別:
結(jié)合理論課的講授以及藥用植物園收獲的藥材,讓學(xué)生在實(shí)驗(yàn)室觀察中藥飲片,重點(diǎn)講解飲片的色澤、氣味、鑒別特征,比如,杜仲斷面有膠狀的細(xì)絲粘連、大血藤有棕紅色放射狀排列的髓射線(xiàn)等。在課堂上,引導(dǎo)學(xué)生調(diào)動(dòng)視覺(jué)、觸覺(jué)、嗅覺(jué)與味覺(jué)等感官進(jìn)行觀察,加深學(xué)生對(duì)中藥形、色、氣、味等的感性認(rèn)識(shí),并與中藥學(xué)理論知識(shí)以及以后中藥藥理學(xué)的學(xué)習(xí)相結(jié)合,更好地掌握中藥的藥性理論。此外,學(xué)院的中藥標(biāo)本室中也存有近500種中藥標(biāo)本,按照中藥的功效進(jìn)行分區(qū)存放,其中,每一味中藥都配備相應(yīng)的圖文介紹,包括中藥的基原植物、入藥部位、采收時(shí)間、炮制方法、功效及用法用量等。學(xué)生在課余時(shí)間可以充分利用標(biāo)本室的資源,以鞏固加深在理論及實(shí)踐課上所學(xué)到的知識(shí)。
2結(jié)語(yǔ)
[關(guān)鍵詞]微衛(wèi)星;群體遺傳學(xué);道地藥材;遺傳成因;栽培起源;產(chǎn)地鑒別
[收稿日期]2013-07-01
[基金項(xiàng)目]國(guó)家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(81274027);國(guó)家自然科學(xué)基金重點(diǎn)項(xiàng)目(81130070);中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所基本科研業(yè)務(wù)費(fèi)自主選題項(xiàng)目(2011ZDXK-01);北京市共建項(xiàng)目專(zhuān)項(xiàng)
[通信作者]袁慶軍,Tel:(010)64014411-2956,E-mail: 中藥的道地性是自古延用至今評(píng)價(jià)中藥材質(zhì)量的一項(xiàng)獨(dú)特標(biāo)準(zhǔn),道地藥材就是指在特定自然條件、生態(tài)環(huán)境的地域內(nèi)所產(chǎn)的藥材,且生產(chǎn)較為集中,栽培技術(shù)、采收加工也都有一定的講究,以致較同種藥材在其他地區(qū)所產(chǎn)者品質(zhì)佳、療效好、為世所公認(rèn)而久負(fù)盛名者稱(chēng)之[1]。黃璐琦等指出道地藥材的生物學(xué)本質(zhì)是同種異地,即同一物種因其具有一定的空間結(jié)構(gòu),能在不同的地點(diǎn)上形成大大小小的群體單元,如果其中某一群體單元產(chǎn)生質(zhì)優(yōu)效佳的藥材,即為道地藥材[2]。這個(gè)同一物種在不同地點(diǎn)上形成的群體單元,在生物學(xué)上稱(chēng)為居群。因此,道地藥材在生物學(xué)上就是指某一物種的特定居群,是在特定時(shí)間和空間里生長(zhǎng)的自然或人為的同種個(gè)體群,居群水平的遺傳分化是道地藥材形成的遺傳基礎(chǔ),遺傳分化越明顯,道地藥材與同種其他居群藥材的差異越明顯[3],由此他對(duì)道地藥材的形成機(jī)制提出了“道地性越明顯,其基因特化越明顯”的模式假說(shuō)[4]。
目前關(guān)于道地藥材遺傳基礎(chǔ)的研究多停留在遺傳多樣性的基本分析和描述,難以揭示道地藥材遺傳分化和遺傳成因的深層次問(wèn)題,如①道地藥材居群是如何進(jìn)化形成的,與非道地藥材居群的遺傳分化程度有多大?這種遺傳分化與道地性的形成是否相關(guān)?②道地栽培居群是否起源于道地野生居群,它們的種質(zhì)是否存在差異?這種差異是否產(chǎn)生種質(zhì)混雜而引起遠(yuǎn)交衰退最終影響藥材的道地性?③道地藥材是否可能實(shí)現(xiàn)產(chǎn)地的分子鑒別(種內(nèi)鑒別)?如何篩選道地藥材的分子地理標(biāo)識(shí)?這些問(wèn)題的解決必須深入了解道地居群形成的進(jìn)化歷史,掌握影響道地居群遺傳分化的現(xiàn)代因素(如基因流、自然選擇或人工選擇等)和歷史性事件(如片斷化、快速擴(kuò)展和拓殖現(xiàn)象等),這些屬于群體遺傳學(xué)范疇,需要將群體遺傳學(xué)的理論和方法引入道地藥材的研究。
群體遺傳學(xué)(population genetics)又稱(chēng)種群遺傳學(xué),是根據(jù)遺傳學(xué)原理,采用數(shù)學(xué)、統(tǒng)計(jì)或其他方法研究生物居群的遺傳結(jié)構(gòu)及其演化規(guī)律的一門(mén)學(xué)科,即研究種內(nèi)進(jìn)化(微進(jìn)化microevolution)的科學(xué)。種內(nèi)進(jìn)化促成了等位基因在居群水平的空間分布和不斷改變,從而引起居群間的遺傳分化。20世紀(jì)90年代以來(lái),隨著PCR技術(shù)的廣泛應(yīng)用,RAPD,RFLP,AFLP等指紋技術(shù)[5]為群體遺傳學(xué)的研究提供了有效手段,而微衛(wèi)星與這些指紋技術(shù)相比又具有突出的優(yōu)勢(shì)。由于微衛(wèi)星具有高度多態(tài)性、在基因組中含量豐富且分布均勻等優(yōu)點(diǎn),這一技術(shù)很快便發(fā)展為一種分子標(biāo)記,成為群體遺傳學(xué)研究的有力工具,本文旨在介紹微衛(wèi)星群體遺傳學(xué)基本理論和研究方法的基礎(chǔ)上,將其引入道地藥材的研究,為賦予道地藥材現(xiàn)代科學(xué)內(nèi)涵提供新的研究手段。
1微衛(wèi)星的概念、分布及優(yōu)點(diǎn)
1.1微衛(wèi)星的概念及在真核生物基因組中的分布
微衛(wèi)星(microsatellites),又稱(chēng)簡(jiǎn)單序列重復(fù)(simple sequence repeats,SSR),是指以少數(shù)幾個(gè)核苷酸(一般為1~6個(gè))為重復(fù)單位組成的簡(jiǎn)單的串聯(lián)重復(fù)序列,由于重復(fù)的次數(shù)不同以及重復(fù)的程度不一致而造成這些序列的多態(tài)性[6]。微衛(wèi)星上不同長(zhǎng)度的等位基因按簡(jiǎn)單的孟德?tīng)柗绞竭z傳。
微衛(wèi)星序列普遍存在于大多數(shù)真核生物的核基因組中。據(jù)估計(jì),人類(lèi)基因組中每6 kb就存在一個(gè)微衛(wèi)星位點(diǎn)[7]。在不同分類(lèi)群的物種之間以及同一分類(lèi)群的不同物種之間微衛(wèi)星的平均密度差異很大,例如,植物基因組中的微衛(wèi)星約比動(dòng)物基因組中的少5倍[8],而鳥(niǎo)類(lèi)約比人類(lèi)少6~7倍[9],目前尚無(wú)法解釋這種現(xiàn)象[10]。微衛(wèi)星的重復(fù)單位以1~2個(gè)核苷酸為主,也有一些微衛(wèi)星的重復(fù)單位為3個(gè)核苷酸,極少數(shù)為4個(gè)或4個(gè)以上核苷酸[8]。在以雙核苷酸為重復(fù)單位的微衛(wèi)星中,人和動(dòng)物 (CA)n含量最高[7],植物中(尤其是作物中)以 (GA)n和 (AC)n為主[11]。
1.2微衛(wèi)星作為遺傳標(biāo)記的優(yōu)點(diǎn)
用微衛(wèi)星作為遺傳標(biāo)記與其他DNA分子標(biāo)記(如RAPD,RFLP,AFLP,小衛(wèi)星DNA等)相比具有以下優(yōu)點(diǎn):①作為一種高度多態(tài)性的分子標(biāo)記,微衛(wèi)星DNA具有豐度高、共顯性標(biāo)記、選擇中性的特點(diǎn);②微衛(wèi)星采用單位點(diǎn)DNA指紋技術(shù),檢測(cè)容易,重復(fù)性較好;③微衛(wèi)星DNA擴(kuò)大了取樣范圍,減輕了取樣工作的困難和對(duì)研究對(duì)象的影響;④微衛(wèi)星DNA的出現(xiàn)為群體遺傳學(xué)家提供了空前豐富的遺傳信息資料,同時(shí)也促進(jìn)了相應(yīng)的統(tǒng)計(jì)分析方法的發(fā)展[12],包括最大似然性法(maximum likelihood)、凝聚法(coalescent methods)和bayesian法(bayesian methods)。
2微衛(wèi)星在群體遺傳學(xué)研究中的應(yīng)用
2.1居群遺傳多樣性和遺傳結(jié)構(gòu)分析
居群的遺傳多樣性是長(zhǎng)期進(jìn)化的產(chǎn)物,也是種質(zhì)資源創(chuàng)新和品種改良的物質(zhì)基礎(chǔ)。一個(gè)居群遺傳多樣性越高或遺傳變異越豐富, 對(duì)環(huán)境變化的適應(yīng)能力就越強(qiáng), 越容易擴(kuò)展其分布范圍和開(kāi)拓新的環(huán)境。物種的遺傳多樣性往往與物種本身的特性相關(guān),如生活史的長(zhǎng)短、系統(tǒng)和繁殖方式、地理分布及遺傳變異水平高低等[13-15]。遺傳結(jié)構(gòu)是指基因或基因型在空間和時(shí)間上的非隨機(jī)分布,居群的遺傳結(jié)構(gòu)包括居群內(nèi)的遺傳變異和居群間的遺傳分化。對(duì)遺傳結(jié)構(gòu)及其影響因子的研究是探討生物適應(yīng)意義、物種形成過(guò)程及其進(jìn)化機(jī)制的基礎(chǔ),也是保護(hù)生物學(xué)的核心之一。一個(gè)物種的遺傳結(jié)構(gòu)是長(zhǎng)期進(jìn)化的產(chǎn)物,許多物種獨(dú)特的遺傳結(jié)構(gòu)反映了進(jìn)化歷史上的一些特殊事件[16-17]。生物多樣性保護(hù)的關(guān)鍵之一是保護(hù)物種,更具體地說(shuō)就是保護(hù)物種的遺傳多樣性或進(jìn)化潛力,制定有效的保護(hù)策略和措施必須建立在對(duì)遺傳結(jié)構(gòu)充分了解的基礎(chǔ)上。微衛(wèi)星是進(jìn)行居群遺傳多樣性和遺傳結(jié)構(gòu)研究的有效分子標(biāo)記,目前已對(duì)草本植物[18-19]、花卉[20]、樹(shù)木[21-24]等進(jìn)行了研究,而對(duì)藥用植物,特別是道地藥材遺傳多樣性和遺傳結(jié)構(gòu)的深入研究還很缺乏。
2.2基因流分析
基因流是指生物個(gè)體從其發(fā)生地分散出去而導(dǎo)致不同居群之間基因交流的過(guò)程。植物的基因流主要靠花粉和種子的傳播來(lái)完成[25-29],基因流的大小直接影響著居群間遺傳物質(zhì)是否均質(zhì)化以及遺傳分化的程度,因此基因流是決定居群遺傳結(jié)構(gòu)的重要因素[30],通過(guò)基因流可以了解居群過(guò)去的進(jìn)化歷史、掌握居群現(xiàn)在的遺傳結(jié)構(gòu)并預(yù)測(cè)居群將來(lái)的演化趨勢(shì),由此作出保護(hù)和可持續(xù)利用的有效策略?;蛄鞯膫鹘y(tǒng)測(cè)定方法是通過(guò)收集器或染色跟蹤花粉和種子的運(yùn)動(dòng),但這些方法常常低估居群的基因流,而且也無(wú)法計(jì)算有效基因流的大小[31]?;蛄骺梢酝ㄟ^(guò)親本分析來(lái)測(cè)定[32],采用親本分析方法確定種子或幼苗的雙親之后,可以根據(jù)雙親之間的距離精確地測(cè)定花粉的傳播距離,幼苗與母本間的距離(雌雄異株)或種子與雙親之間的平均距離(雌雄同株)即為種子散布距離。當(dāng)花粉或種子從一個(gè)居群擴(kuò)散到另一個(gè)居群,就形成居群間基因流,這種基因流是阻止居群遺傳分化的重要進(jìn)化因子。在后代的親本分析中,有些后代的親本不能由居群內(nèi)的個(gè)體形成,根據(jù)這些后代的比率可以估算出居群間基因流與居群內(nèi)基因流的相對(duì)強(qiáng)度。微衛(wèi)星高度的多態(tài)性、共顯性等特點(diǎn),在親本分析中具有突出的優(yōu)勢(shì),目前利用微衛(wèi)星對(duì)基因流進(jìn)行的研究有很多[33-34],但對(duì)藥用植物基因流的研究基本沒(méi)有,特別是藥用植物在栽培過(guò)程中人為引起基因流改變而影響其進(jìn)化潛能的研究還屬空白,這直接關(guān)系到中藥資源是否能可持續(xù)利用。
2.3進(jìn)化顯著單元ESU的劃分
進(jìn)化顯著單元(evolutionarily significant unit,簡(jiǎn)稱(chēng)ESU)是地理上離散的、歷史上被隔離的居群組,因而具有獨(dú)特的進(jìn)化潛力。定義ESU的遺傳標(biāo)準(zhǔn)包括由遺傳距離反映的等位基因頻率的顯著分化和基于某些基因的系統(tǒng)分化程度。定義ESU的主要目的是要確保進(jìn)化的產(chǎn)物被認(rèn)識(shí)并受到保護(hù)和有效利用,使不同ESU固有的進(jìn)化潛能得以保持[35],最終真正達(dá)到保護(hù)物種和可持續(xù)利用的目的。1986年,Ryder首次提出了進(jìn)化顯著單元的概念,用作保持生物遺傳完整性和進(jìn)化潛能的一種可操作方法,對(duì)地理上有顯著變異的居群組進(jìn)行分別管理[36]。然而,正如物種的概念一樣,ESU在定義它的組成和界定它所要求的變異類(lèi)型也還存在爭(zhēng)議[35]。Moritz(1994)定義ESU為歷史上被隔離的且獨(dú)立進(jìn)化的居群組[35],這些居群組在動(dòng)物中線(xiàn)粒體DNA(mtDNA)或植物葉綠體DNA(cpDNA)等位基因表現(xiàn)為交互單系,并在核等位基因上有顯著分化。根據(jù)這一定義,在獲取具有正確拓樸結(jié)構(gòu)系統(tǒng)樹(shù)的基礎(chǔ)上可確定ESU。對(duì)于有顯著遺傳分化、同時(shí)在線(xiàn)粒體或葉綠體基因組和核基因組上都是單系的居群,應(yīng)屬獨(dú)立的ESU。而對(duì)于與其他居群遺傳分歧度并非很高、在線(xiàn)粒體或葉綠體基因組上又是單系的居群,如果其核等位基因的頻率與其他居群有顯著的差異,也應(yīng)視為一個(gè)ESU;相反,如果其核等位基因的頻率與其他居群沒(méi)有顯著的差異,則不能視為一個(gè)獨(dú)立的ESU[37]。微衛(wèi)星作為一種多態(tài)性很高的核基因分子標(biāo)記,在界定顯著遺傳結(jié)構(gòu)和定義進(jìn)化顯著單元具有其他分子標(biāo)記不可替代的優(yōu)勢(shì)。進(jìn)化顯著單元ESU的研究目前主要集中在動(dòng)物的保護(hù)遺傳學(xué)研究[38],在植物中也開(kāi)始借鑒動(dòng)物的研究方法進(jìn)行一些進(jìn)化顯著單元的劃分[39],而在道地藥材的保護(hù)、分子鑒定和可持續(xù)利用的研究中尚未深入到進(jìn)化顯著單元的劃分。
3微衛(wèi)星在道地藥材群體遺傳學(xué)研究中的應(yīng)用展望
3.1微衛(wèi)星在道地藥材群體遺傳學(xué)研究中的應(yīng)用
近年來(lái)微衛(wèi)星群體遺傳學(xué)被生物科學(xué)界所重視,對(duì)于道地藥材的研究主要集中在遺傳結(jié)構(gòu)和遺傳多樣性方面。如Chen等利用微衛(wèi)星群體遺傳學(xué)對(duì)唐古特大黃進(jìn)行了遺傳多樣性和遺傳結(jié)構(gòu)分析,闡明了其瀕危機(jī)制[40];肖冬長(zhǎng)等利用研究了鐵皮石的遺傳結(jié)構(gòu),揭示了品種間的親緣關(guān)系[41];郭銀萍等研究了22份薏苡種質(zhì)的遺傳多樣性,反映了供試材料的親緣關(guān)系,從而為薏苡種質(zhì)改良提供理論依據(jù)[42];閆伯前等研究發(fā)現(xiàn)華中五味子具有較高的遺傳多樣性水平和較豐富的等位基因,可作為人工種植時(shí)優(yōu)先選用的種質(zhì)資源[43]。陳子易等應(yīng)用微衛(wèi)星標(biāo)記實(shí)現(xiàn)了人參與西洋參的種間鑒別[44]。這些研究初步揭示了微衛(wèi)星群體遺傳學(xué)在道地藥材研究中的優(yōu)勢(shì),但前人的研究?jī)H僅停留在遺傳多樣性和遺傳結(jié)構(gòu)方面,未能從根本解釋道地藥材的遺傳變異和形成機(jī)制等問(wèn)題,亟待在理論和方法上有所突破。
3.2微衛(wèi)星在道地藥材群體遺傳學(xué)研究中的展望
3.2.1道地藥材的遺傳成因研究生物的表型是由遺傳因素和環(huán)境因共同決定的,然而對(duì)于同一性狀中的控制可能只是其中某一因素占主導(dǎo)作用引起的,比如歐洲人的平均身高要高于亞洲人是由遺傳決定的,而中國(guó)北方人高于南方人的平均身高是由環(huán)境引起的。那么,道地藥材的優(yōu)質(zhì)性究竟是由遺傳因素還是環(huán)境因素所決定呢?這一直是道地藥材研究爭(zhēng)論的焦點(diǎn)。黃璐琦等提出了道地性形成的“邊緣效應(yīng)” [4],他認(rèn)為物種分布區(qū)邊緣的極端環(huán)境有利于次生代謝產(chǎn)物的積累,因而物種分布區(qū)的邊緣往往成為道地產(chǎn)區(qū)。其他的一些研究也表明次生代謝產(chǎn)物(如黃酮)含量的差異取決于藥材的地理來(lái)源[45]。同時(shí)黃璐琦等又提出了“道地性越明顯,其遺傳分化越明顯”的模式假說(shuō)[4],認(rèn)為道地藥材的生物學(xué)本質(zhì)是同一物種特定居群與其他居群由于地理上的隔離而發(fā)生遺傳分化的結(jié)果。這些爭(zhēng)論一直沒(méi)有直接的科學(xué)證據(jù),使道地藥材的生產(chǎn)和質(zhì)量控制缺乏明確的標(biāo)準(zhǔn)。
在植物居群中,影響居群遺傳變異地理分布的重要因素是基因流或溯祖關(guān)系[46]。植物的基因流是靠種子和花粉的傳播來(lái)完成的,不同植物由于種子和花粉傳播方式不同而各自具有獨(dú)特的基因流模式,其順暢與否,直接影響居群間的分化程度及遺傳物質(zhì)是否均質(zhì)化[47-49]。溯祖關(guān)系是建立譜系分選(lineage sorting)現(xiàn)象的學(xué)說(shuō)[50],即祖先居群原始的基因型多態(tài)性由于遺傳漂變逐漸消失,最終居群內(nèi)僅存單一基因型而形成單系群,不同的單系群在相互隔離的情況下基因會(huì)因突變的積累而逐漸發(fā)生遺傳分化。因此,現(xiàn)代基因流和譜系分選歷史決定了一個(gè)物種居群的遺傳結(jié)構(gòu),不同的遺傳結(jié)構(gòu)決定了居群表型(包括化學(xué)表型)的地理變異程度,從而在藥材上反映出道地性的明顯程度。因此,應(yīng)用微衛(wèi)星群體遺傳學(xué)對(duì)居群遺傳結(jié)構(gòu)的研究,對(duì)道地居群與非道地居群間的遺傳分化程度能夠作出定量判斷,結(jié)合化學(xué)表型地理變異進(jìn)行相關(guān)性分析,能有效揭示遺傳因素對(duì)道地性的影響程度,如果道地居群與非道地居群存在顯著的隔離分化,那么道地性很可能是由遺傳的因素所引起;反之則可能是由環(huán)境的因素所決定。
3.2.2道地藥材的栽培起源研究藥用植物的栽培是滿(mǎn)足人們目前和將來(lái)對(duì)藥用植物需求、緩解野生藥用植物資源壓力的有效途徑,同時(shí)某些栽培方式,如傳統(tǒng)小規(guī)模的就地引種,能夠很好地保存植物的遺傳多樣性[51-52]。然而,栽培對(duì)藥用植物資源的保護(hù)作用要從多方面來(lái)理解[53],通過(guò)栽培而進(jìn)行大規(guī)模的藥用植物生產(chǎn),對(duì)藥用植物資源的保護(hù)也可能帶來(lái)負(fù)面影響[54],例如,奠基者效應(yīng)和為了高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)而進(jìn)行的人工選擇可能導(dǎo)致栽培藥用植物狹窄的遺傳背景,出現(xiàn)類(lèi)似農(nóng)作物馴化過(guò)程中出現(xiàn)的遺傳瓶頸現(xiàn)象[55]。同時(shí),在現(xiàn)代條件下的藥用植物栽培,由于高度發(fā)達(dá)的交通和藥材貿(mào)易市場(chǎng),使得不同產(chǎn)地之間藥用植物種子的交流變得更加容易,種子從原產(chǎn)地流入其他環(huán)境可能導(dǎo)致栽培藥用植物遠(yuǎn)交衰退[56],衰退的基因流可能從栽培居群流入附近的野生居群,從而引起野生居群對(duì)本地環(huán)境適應(yīng)性的下降[57]。
栽培起源研究能夠有效揭示栽培馴化過(guò)程中居群動(dòng)態(tài)和遺傳結(jié)構(gòu)發(fā)生改變的過(guò)程,是當(dāng)今國(guó)際上群體遺傳學(xué)研究的熱點(diǎn)之一。栽培植物和它們的野生祖先常常形成野生-栽培復(fù)合體并構(gòu)成植物繁演的重要遺傳資源[58-62]。伴隨著農(nóng)業(yè)上將植物從野生變?yōu)檫m合栽培和人類(lèi)利用的引種馴化過(guò)程的開(kāi)始,圍繞著野生-栽培復(fù)合體的基礎(chǔ)理論研究[60](作為一種植物進(jìn)化的模式)和應(yīng)用研究也開(kāi)始興起,例如,確定馴化植物的地理起源或評(píng)價(jià)作物進(jìn)化的居群動(dòng)態(tài)可以為合理利用和管理遺傳資源提供科學(xué)指導(dǎo)[61]。其中對(duì)野生和馴化兩種形式下表型分化的遺傳潛力研究尤為受到關(guān)注[62],近來(lái)開(kāi)始探測(cè)栽培的野生植物對(duì)附近自然居群的基因流[63]。所有這些研究是彼此相關(guān)的,例如,對(duì)居群進(jìn)化歷史的研究是分析人工選擇作用[64]或基因流模式的前提[65]。目前栽培起源的研究多集中在對(duì)主要農(nóng)作物的研究,如水稻、玉米、大豆等[66-68],而藥用植物的栽培起源研究基本上沒(méi)有涉及,將微衛(wèi)星群體遺傳學(xué)引入道地藥材的栽培起源研究,能有效揭示道地栽培居群是否起源于道地野生居群,并進(jìn)一步比較它們的品質(zhì)差異,最終闡明道地藥材的栽培是否只有道地野生居群就地引種才能保持道地性、道地野生居群在非道地產(chǎn)區(qū)或非道地野生居群在道地產(chǎn)區(qū)異地引種對(duì)道地性的影響程度有多大、異地引種栽培居群的基因流對(duì)本地原生野生居群的種質(zhì)可能產(chǎn)生的影響等科學(xué)問(wèn)題,這些問(wèn)題的解決必將把道地藥材的栽培起源研究引向深入,充分掌握處于引種馴化初期的道地藥材在人類(lèi)干預(yù)下遺傳演變的規(guī)律,為道地藥材遺傳資源的管理和合理利用及品種選育提供科學(xué)指導(dǎo),避免在作物馴化過(guò)程中已經(jīng)發(fā)生的不利于人類(lèi)利用和植物進(jìn)化的過(guò)程重演,有效地進(jìn)行科學(xué)引種。
3.2.3道地藥材的產(chǎn)地鑒別產(chǎn)地鑒別是指對(duì)不同產(chǎn)地的同一藥材進(jìn)行鑒別,道地藥材具有特定的地域,尋找反映道地藥材地域特征的鑒定評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)一直是道地藥材研究的關(guān)注點(diǎn),然而道地藥材的產(chǎn)地鑒別一直是藥材鑒別的一大難題:一方面不同產(chǎn)地藥材形態(tài)和組織差異很小,傳統(tǒng)的經(jīng)驗(yàn)鑒別和顯微鑒別無(wú)能為力;另一方面不同產(chǎn)地藥材的有效成分差異難以達(dá)到質(zhì)的差別,同時(shí)受生長(zhǎng)年限和取樣時(shí)間等的影響,也很難勾畫(huà)出同種藥材不同產(chǎn)地的化學(xué)特征。那么,DNA分子鑒別能否解決這一難題呢?關(guān)于道地藥材的DNA分子鑒定,肖小河等指出“目前DNA分子遺傳標(biāo)記技術(shù)在道地藥材鑒定中受到2個(gè)方面的局限:一是來(lái)自技術(shù)本身的,如目標(biāo)基因的真實(shí)性與DNA同源性,DNA分子標(biāo)記結(jié)果的重現(xiàn)性和穩(wěn)定性;二是來(lái)自研究對(duì)象的,不是所有的道地藥材形成都會(huì)留下DNA差異‘烙印’,同時(shí)這種DNA差異也不見(jiàn)得與道地性的形成有直接或內(nèi)在的相關(guān)”[69]。近來(lái)迅速發(fā)展的DNA條形碼技術(shù)很好地解決了第一方面的局限,而無(wú)法解決第二方面的局限,其主要集中在物種水平的分類(lèi)和鑒定,在藥材鑒定方面的應(yīng)用只能作真?zhèn)纹返蔫b別,其所依據(jù)的理論是分子系統(tǒng)學(xué)(phylogeny),所選用的DN段相對(duì)保守,實(shí)驗(yàn)也證明DNA條形碼對(duì)當(dāng)歸這類(lèi)藥材的產(chǎn)地鑒別是無(wú)效的[70]。
道地藥材的產(chǎn)地鑒別實(shí)質(zhì)上是生物種下居群水平的遺傳分化問(wèn)題,所依據(jù)的理論是分子譜系地理學(xué)(phylogeography)和群體遺傳學(xué),所選用的DN段相對(duì)于用于物種水平鑒別的DNA條形碼具有更快的進(jìn)化速率。目前很多研究表明,葉綠體基因間序列在許多植物類(lèi)群中已經(jīng)顯示了充分的變異,可用于植物分子譜系地理分析和進(jìn)化顯著單元的確定[71-72],在藥用植物的道地居群和非道地居群間也存在顯著分化,具有道地居群特有的單倍型可用于產(chǎn)地鑒別[70, 73]。葉綠體分子譜系地理分析反映了居群間種子流的大小和母系遺傳DNA的分化程度,而控制化學(xué)表型的功能基因存在于核基因中,其分化程度與道地性的相關(guān)性更大。核基因在居群間通過(guò)花粉流傳遞,為雙親遺傳。然而由于功能基因多存在高度保守、多拷貝、雜合等特點(diǎn),直接利用功能基因進(jìn)行群體遺傳學(xué)分析難度較大,沒(méi)有可操作性。微衛(wèi)星特有的優(yōu)勢(shì)全面反映了核基因組的遺傳信息,用于群體遺傳學(xué)分析能有效闡明居群間花粉流的大小、核基因的分化程度、基因型純合或雜合程度等,從而揭示核基因的居群遺傳結(jié)構(gòu)。只有同時(shí)考慮葉綠體DNA和核基因的居群遺傳結(jié)構(gòu),才能正確劃分進(jìn)化顯著單元,由此判斷道地居群和非道地居群是否存在隔離分化或基因流,也即道地藥材的形成是否留下了DNA差異的‘烙印’,最終闡明道地藥材能否實(shí)現(xiàn)產(chǎn)地鑒別。對(duì)于沒(méi)有DNA差異‘烙印’的道地藥材不能實(shí)現(xiàn)產(chǎn)地鑒別;對(duì)于存在DNA差異‘烙印’的道地藥材,根據(jù)分子譜系地理學(xué)和微衛(wèi)星群體遺傳學(xué)分析的結(jié)果建立道地藥材的分子地理標(biāo)識(shí),從而實(shí)現(xiàn)道地藥材的產(chǎn)地鑒別。
4結(jié)語(yǔ)
目前道地藥材形成規(guī)律的研究已取得階段性成果,但在道地藥材形成的演化規(guī)律以及人工馴化過(guò)程人為影響道地藥材進(jìn)化潛能等方面的研究需要進(jìn)行種內(nèi)進(jìn)化(微進(jìn)化)的深入研究,將微衛(wèi)星群體遺傳學(xué)引入道地藥材研究,突破了道地藥材遺傳成因研究長(zhǎng)期在理論和方法上的局限以及藥材分子鑒別停留在真?zhèn)舞b別(種間鑒別)的瓶頸,有效填補(bǔ)道地藥材栽培起源研究的空白,為揭示道地藥材的遺傳成因、實(shí)現(xiàn)道地藥材栽培科學(xué)的引種和產(chǎn)地鑒別(種內(nèi)鑒別)提供新的理論和方法。
雖然微衛(wèi)星是研究道地藥材非常理想的遺傳標(biāo)記,但在實(shí)際的應(yīng)用中仍有不足之處,除了一些已知大量序列信息的研究對(duì)象以外(如人類(lèi),常規(guī)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和一些農(nóng)作物),對(duì)于一個(gè)序列信息完全未知的新種,必須首先建立基因文庫(kù)并篩選微衛(wèi)星位點(diǎn),實(shí)驗(yàn)工作繁瑣且耗時(shí)費(fèi)力。微衛(wèi)星位于非編碼區(qū)的概率比編碼區(qū)高,因此在某些情況下不能反應(yīng)出功能基因組范圍內(nèi)的遺傳水平??傊?,隨著實(shí)驗(yàn)技術(shù)的改進(jìn),統(tǒng)計(jì)分析方法和檢驗(yàn)手段的日趨完善,微衛(wèi)星群體遺傳學(xué)將在道地藥材研究中發(fā)揮更大的作用,在具體科研中應(yīng)該針對(duì)需要解決的問(wèn)題,選擇合適的分子標(biāo)記和分析方法,才能更好的解釋道地藥材的本質(zhì)。
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蚊子,人人得而誅之!因?yàn)楸晃米右Я损W難忍,因?yàn)槲宋说穆曇魯_人美夢(mèng)。事實(shí)上,蚊子的最大罪狀還是傳播疾病。蚊子是傳播傳染病的媒介昆蟲(chóng)之一,它傳播的傳染病主要有流行性乙型腦炎、瘧疾、絲蟲(chóng)病、登革熱等。因此,滅蚊、驅(qū)蚊勢(shì)在必行。但驅(qū)蚊方法和“武器”眾多,哪些確確實(shí)實(shí)有效?哪些是商家的忽悠呢?
驅(qū)蚊“武器”:手機(jī)驅(qū)蚊APP
驅(qū)蚊指數(shù):
隨著手機(jī)軟件的發(fā)展,各類(lèi)功能性APP層出不窮,其中有一種驅(qū)蚊軟件近年來(lái)也冒出來(lái)很多品種,隨便一搜便能有多達(dá)十幾個(gè)類(lèi)似的軟件,原理都是通過(guò)發(fā)出一種聲波來(lái)驅(qū)趕蚊子。但現(xiàn)實(shí)是,這種方法根本無(wú)法阻止外出覓食的雌蚊子。
早在智能手機(jī)普及前,聲波驅(qū)蚊就標(biāo)榜著可以替代局部驅(qū)蚊劑和蚊香。不過(guò)沒(méi)有任何證據(jù)表明這種產(chǎn)品能起作用。事實(shí)證明,這類(lèi)產(chǎn)品的發(fā)明者選錯(cuò)了對(duì)象。蚊子的確會(huì)對(duì)聲音產(chǎn)生反應(yīng),但通常只有雄性蚊子在尋找伴侶時(shí)才會(huì)這么做。而即使防住了它們也沒(méi)有任何作用,因?yàn)樾坌晕米痈静灰恕?/p>
驅(qū)蚊“武器”:肥皂水
驅(qū)蚊指數(shù):
近年來(lái)還冒出一種肥皂水驅(qū)蚊法,吸引蚊子在水面產(chǎn)卵,利用肥皂水的張力“捉住”蚊子。不過(guò)在滅蚊試驗(yàn)中,這種方法并沒(méi)有體現(xiàn)效果,有的蚊子能停在水面上再“輕盈”飛走,放置5分鐘,只有1只蚊子不慎落入水中,以500只蚊子的數(shù)目來(lái)說(shuō),實(shí)在不算有效。
驅(qū)蚊武器:驅(qū)蚊植物
驅(qū)蚊指數(shù):
夏天,如七里香、食蟲(chóng)草、夜來(lái)香、薄荷、天竺葵、薰衣草、豬籠草等被認(rèn)為有驅(qū)蚊功效的驅(qū)蚊植物特別受人青睞,價(jià)格不貴,不僅可以美化環(huán)境還有驅(qū)蚊功效,甚至有人認(rèn)為這是一種比較健康的驅(qū)蚊方法。驅(qū)蚊植物到底能不能驅(qū)蚊?家中放驅(qū)蚊植物,對(duì)人體有害嗎?
植物學(xué)上無(wú)“驅(qū)蚊植物”分類(lèi)
中山植物園花卉博士李梅稱(chēng),“植物學(xué)上有藥用植物、觀賞植物和經(jīng)濟(jì)植物,并沒(méi)有驅(qū)蚊植物這種分類(lèi)。”像薄荷、天竺葵、薰衣草這些品種,在植物學(xué)上稱(chēng)為“芳香植物”。
李梅說(shuō),“芳香植物是具有香氣和可供提取芳香油的藥用植物和香料植物的總稱(chēng),可以提取出這些植物中芳香成分用以制作精油,也是凈化空氣的最佳綠色產(chǎn)品?!边@些植物的葉子中含有精油成分,能夠散發(fā)出蚊子不喜歡的味道,達(dá)到驅(qū)蚊目的。
芳香植物殺不死蚊子
花市上出售的“驅(qū)蚊植物”真的能殺死蚊子嗎?南京林業(yè)大學(xué)植物學(xué)教授湯庚國(guó)說(shuō),“像花椒、薄荷這樣的芳香植物都是可以食用的,既然人可以吃,那就沒(méi)有毒性,無(wú)毒怎么殺死蚊子?”湯庚國(guó)教授分析,這些驅(qū)蚊植物之所以這么廣受歡迎,是因?yàn)槿说男睦碓谄鹱饔谩K^的驅(qū)蚊功效并非是把蚊子殺死,像薄荷是含薄荷醇、薄荷酮等藥用成分,蚊蟲(chóng)聞了會(huì)暈眩。
李梅博士說(shuō),“從理論上講,蚊子的種類(lèi)也很多,可能某些植物對(duì)第一代蚊子能夠產(chǎn)生影響,到了第二代蚊子就產(chǎn)生抗藥性了,都是有可能的?!蔽米右彩怯袀€(gè)體差異的,情況很復(fù)雜,不可以一概而論。最后,李梅博士表示,“一些芳香植物會(huì)有驅(qū)趕蚊子的目的,但也不是那么高效,像豬籠草就沒(méi)有大家想象的那樣積極去捉蚊,不能完全依賴(lài)植物驅(qū)蚊?!?/p>
植物燃燒時(shí)有驅(qū)蚊效果
不過(guò),一盆活的植物驅(qū)蚊效果不好,但將某些植物點(diǎn)燃后所行成的煙可以驅(qū)蚊。比如點(diǎn)燃艾草形成的天然蚊香就有不錯(cuò)的效果,青蒿類(lèi)植物點(diǎn)燃后都有驅(qū)蚊效果。試驗(yàn)對(duì)比下來(lái),夜來(lái)香的效果最好,米蘭和艾草其次。
蚊“武器”:驅(qū)蚊手環(huán)、驅(qū)蚊貼
驅(qū)蚊指數(shù):
孩子防蚊一直是不少家長(zhǎng)關(guān)心的話(huà)題,驅(qū)蚊貼、驅(qū)蚊手環(huán)等各種看起來(lái)環(huán)保、造型卡通的驅(qū)蚊產(chǎn)品頗受歡迎。
實(shí)驗(yàn)者先用一種日本進(jìn)口的驅(qū)蚊貼進(jìn)行試驗(yàn),將數(shù)片驅(qū)蚊貼貼在手上伸進(jìn)蚊籠,不過(guò)蚊子看起來(lái)很不給面子,不僅沒(méi)有減少,反而有不少蚊子大搖大擺停留在驅(qū)蚊貼上。測(cè)試中另外兩款驅(qū)蚊手環(huán)的效果要好一些,戴在手腕處伸進(jìn)蚊籠,周?chē)黠@沒(méi)有蚊子停留了。不過(guò)也發(fā)現(xiàn)驅(qū)蚊手環(huán)受到空間影響比較大,戴在手腕時(shí),蚊子可以停在指尖上,而手環(huán)抓在手中時(shí),手臂上又會(huì)有蚊子停留。試驗(yàn)證明,固體揮發(fā)類(lèi)的驅(qū)蚊產(chǎn)品即便有效,作用也非常有限,若是出門(mén)在外想靠驅(qū)蚊手環(huán)防蚊,可能需要四肢上都多戴幾個(gè)了。
值得注意的在購(gòu)買(mǎi)驅(qū)蚊手環(huán)時(shí)要防止不良商家的有害手環(huán)。曾經(jīng)有媒體報(bào)道,湖北有29名小學(xué)生在接觸驅(qū)蚊手環(huán)后竟出現(xiàn)中毒癥狀。原來(lái),部分商家為了追求氣味持續(xù)性,在驅(qū)蚊手環(huán)內(nèi)放入濃度極高的化學(xué)成分。長(zhǎng)期佩戴可導(dǎo)致兒童患上接觸性皮炎、過(guò)敏性結(jié)膜炎、過(guò)敏性咽喉炎,引起咳嗽,個(gè)別對(duì)薄荷過(guò)敏的話(huà)還可以引起哮喘。
驅(qū)蚊“武器”:防蚊香囊
驅(qū)蚊指數(shù):
南京市中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院兒科主任邊遜介紹說(shuō),香囊是一種很寬泛的概念,但是驅(qū)蚊香囊卻有比較嚴(yán)格的定義。很多香囊聞上去很香,但是這些香味不是來(lái)源于中藥,如果是一些類(lèi)似香水的芳香制劑,反而佩戴后更容易招蚊子。這就好比愛(ài)化妝的人比較招蚊子一樣,蚊子一般會(huì)“聞香咬人”。
“真正的驅(qū)蚊香囊,遠(yuǎn)不止艾葉一味中藥?!边呥d介紹,還要有廣藿香、薄荷、陳皮、公丁香等,“幾元錢(qián)的香囊如果真的有這么多中藥,成本都不夠,更不用談所謂的驅(qū)蚊效果了!”兒童將香囊懸掛在胸口、蚊帳附近,可以驅(qū)蚊,還可以幫助預(yù)防流感。此外,這樣的香囊放在汽車(chē)和衣櫥內(nèi),都能有較好的驅(qū)蚊蟲(chóng)作用。
但是,香囊的使用人群也有講究,比如孕婦和過(guò)敏體質(zhì)人群要慎用。
驅(qū)蚊“武器”:寬松衣褲
驅(qū)蚊指數(shù):
如果我們出門(mén)游玩,一定要避免在黎明和黃昏時(shí)接近濕地或是灌木叢,因?yàn)槲米釉谶@兩個(gè)時(shí)段最為活躍。
長(zhǎng)袖長(zhǎng)褲是防蚊的基本款。淺色衣褲雖然不能讓蚊子躲著你飛,但是能減少你的吸引力。另外,寬松的衣褲可以抵擋蚊子的叮咬,因?yàn)檫@讓它們不容易接觸到你的皮膚。所以,當(dāng)你下次計(jì)劃去徒步或者釣魚(yú)的時(shí)候,三思一下著裝再出門(mén),最好收起你的緊身衣褲。當(dāng)然你也可以在衣服上噴殺蟲(chóng)劑,為自己再增加一道防護(hù)。
驅(qū)蚊“武器”:驅(qū)蚊液
驅(qū)蚊指數(shù):
在一個(gè)滅蚊實(shí)驗(yàn)中,實(shí)驗(yàn)者首先在手背上噴灑寶寶驅(qū)蚊液、六神驅(qū)蚊液等產(chǎn)品,然后戴上試驗(yàn)用的橡膠手套,在手背上剪出4厘米見(jiàn)方的區(qū)域,露出涂有防蚊液的皮膚。實(shí)驗(yàn)中可以很明顯發(fā)現(xiàn),被橡膠手套遮蓋的區(qū)域都有蚊子停留,反而露出的皮膚蚊子都畏而避之,效果非常明顯,且長(zhǎng)時(shí)間有效。
這些驅(qū)蚊產(chǎn)品之所以有效,是因?yàn)槠渲泻序?qū)蚊的化學(xué)成分。目前較為常見(jiàn)的4種驅(qū)蚊成分包括:避蚊胺、驅(qū)蚊酯、埃卡瑞丁、檸檬桉葉油。買(mǎi)驅(qū)蚊產(chǎn)品首先要看一下成分,不少驅(qū)蚊產(chǎn)品都用的檸檬桉葉油提取物,另外目前最為有效的化學(xué)成分就是DEET也就是避蚊胺,高濃度情況下野外防蚊可達(dá)到近10個(gè)小時(shí),包裝上一般都有含量注明。
購(gòu)買(mǎi)產(chǎn)品除了查看是否含有驅(qū)蚊成分,還要看一下是否有農(nóng)業(yè)部的認(rèn)證。我國(guó)標(biāo)準(zhǔn)是驅(qū)蚊效果達(dá)到4~6小時(shí),不過(guò)目前能達(dá)到這種效果的產(chǎn)品還非常少,一般2小時(shí)以上就認(rèn)為有效了。另外嬰兒(3個(gè)月以上的孩子也可以使用)使用DEET成分和檸檬桉葉油成分驅(qū)蟲(chóng)劑都需要注意年齡限制。
值得注意的是,花露水作為常見(jiàn)的驅(qū)蚊液,因?yàn)楹休^高量的酒精,一般大品牌的花露水酒精含量在50%,有些小品牌的廠家花露水可能達(dá)到75%,酒精含量達(dá)到50%的花露水用火柴點(diǎn),能點(diǎn)著。因此,使用時(shí)要注意防火。
驅(qū)蚊“武器”:蚊香
驅(qū)蚊指數(shù):
蚊香也是驅(qū)蚊必備品,但是種類(lèi)琳瑯滿(mǎn)目,如何選擇也得注意?!拔孟惴譃閭鹘y(tǒng)的盤(pán)式蚊香、電蚊香片和液體蚊香,不管哪種蚊香,它們的毒性都很低,可以放心使用?!边@是濟(jì)南市疾控中心病媒生物防治所所長(zhǎng)辛正在經(jīng)歷過(guò)無(wú)數(shù)次實(shí)驗(yàn)之后的結(jié)果,他認(rèn)為這幾種蚊香各有利弊,可以結(jié)合使用。
盤(pán)式蚊香
最傳統(tǒng)的一種蚊香,點(diǎn)燃之后產(chǎn)生的煙霧驅(qū)蚊。這種蚊香有煙,有灰,沒(méi)有電的時(shí)候用起來(lái)很方便,很多老年人習(xí)慣用這種蚊香,單獨(dú)購(gòu)買(mǎi)的價(jià)格比較便宜,操作簡(jiǎn)單,驅(qū)蚊的效果也不錯(cuò),不過(guò)對(duì)煙味兒敏感的人群不太適合,價(jià)格上來(lái)看長(zhǎng)期使用并不實(shí)惠,還有一定的火災(zāi)隱患。
電蚊香片
這種蚊香是在老式蚊香的基礎(chǔ)上改進(jìn)的,將驅(qū)蚊劑添加到蚊香片上,插電加熱之后,驅(qū)蚊劑揮發(fā)以達(dá)到驅(qū)蚊的目的。這種蚊香的好處是沒(méi)有明顯的煙霧,也沒(méi)有明火,省去了火災(zāi)的危險(xiǎn),驅(qū)蚊的效果也不錯(cuò),缺點(diǎn)是要在有電的情況下使用,室外不方便使用。
液體蚊香
就是將液體的驅(qū)蚊劑插電加熱之后,噴出來(lái)驅(qū)蚊。這種蚊香味道不刺激,一瓶液體蚊香可以用一個(gè)月,省時(shí)省力,插上之后就可以不用管了。缺點(diǎn)也是需要用電,長(zhǎng)期使用的話(huà),更顯經(jīng)濟(jì)實(shí)惠。
辛正說(shuō):“我自己的經(jīng)驗(yàn)是吃了晚飯,點(diǎn)上電蚊香,關(guān)上窗戶(hù),然后帶著孩子一起到外邊玩一兩個(gè)小時(shí)?;氐郊抑苯雨P(guān)了蚊香,打開(kāi)窗戶(hù)通風(fēng),準(zhǔn)備睡覺(jué),晚上就很少有蚊子騷擾。”不過(guò),這個(gè)方法的前提是家里的紗窗要密封好,而且沒(méi)有漏洞,一旦紗窗出現(xiàn)破洞,就容易有蚊子成為漏網(wǎng)之魚(yú),那可能就要多點(diǎn)會(huì)兒蚊香了。
驅(qū)蚊“武器”:滅蚊燈
驅(qū)蚊指數(shù):
廣東省昆蟲(chóng)所城市害蟲(chóng)研究專(zhuān)家夏傳國(guó)認(rèn)為,驅(qū)蚊效果最好的應(yīng)屬“燈光法”。也就是我們平時(shí)用的滅蚊燈。因?yàn)槲米幼钕矏?ài)365納米短波長(zhǎng)光,滅蚊燈正是利用蚊子的這個(gè)喜好制作成的專(zhuān)用燈,搭配上電網(wǎng)或粘膠,達(dá)到消滅蚊子的效果。
不過(guò),滅蚊燈不能長(zhǎng)時(shí)間在寶寶視線(xiàn)范圍內(nèi)使用,光線(xiàn)對(duì)眼有一定刺激。
驅(qū)蚊“武器”:蚊帳
驅(qū)蚊指數(shù):
“其實(shí)最管用的方法,有時(shí)候也是最原始的方法,對(duì)于驅(qū)蚊來(lái)說(shuō),掛蚊帳就是我們老祖先流傳下來(lái)的好方法。用蚊帳不僅無(wú)毒無(wú)味兒,還環(huán)保低碳,推薦老年人和有孩子的家庭使用蚊帳。”辛正說(shuō),最早的時(shí)候,很多人家里都有吊蚊帳的鐵鉤子或是竹竿,但現(xiàn)在城里人很少有這種東西了,有人覺(jué)得蚊帳掛不起來(lái)了,實(shí)際上科學(xué)發(fā)展到今天,什么樣的蚊帳都有了。
“有那種像帳篷一樣的蚊帳,桿子一截截的,可以連接起來(lái),將蚊帳吊起來(lái),直接安在床上,然后將床單或涼席鋪到蚊帳的底面上,就可以了。”不過(guò)帳篷蚊帳的缺點(diǎn)是有些矮,高個(gè)子睡在里面會(huì)不舒服?,F(xiàn)在有那種帶鋼管的蚊帳,模仿最原始的撐蚊帳方法,高度有了,只是鋼管需要固定在床上。“蚊帳最環(huán)保有效,只要睡覺(jué)前將蚊帳內(nèi)的蚊子趕出去,就可以不受干擾。當(dāng)然,要是經(jīng)常起夜可能會(huì)帶進(jìn)蚊子,但是在M出的時(shí)候注意一下還是不容易有蚊子進(jìn)入蚊帳。”
驅(qū)蚊“武器”:環(huán)境滅蚊法
驅(qū)蚊指數(shù):
1.破壞生存環(huán)境法:
清除房前屋后各種可能積水的容器;
清除盆景、噴水池、養(yǎng)魚(yú)池等室外景觀水體內(nèi)的垃圾漂浮物并經(jīng)常換水;
檢查地下室,及時(shí)排除積水;
疏通居民樓天臺(tái)等處排水孔及管道,雨后應(yīng)及時(shí)清疏。
2.斬草除根法:
噴泉、水池等不能排放的大型水體采用生物滅蚊方式,飼養(yǎng)如柳條魚(yú)、金魚(yú)、鯉魚(yú)、鯉鯽魚(yú)、中華斗魚(yú)、非洲鯽魚(yú)等能夠吞食蚊幼蟲(chóng)的魚(yú)種,達(dá)到滅蚊目的;
對(duì)室內(nèi)外無(wú)法清除的小型積水或水體,投放滅蚊幼劑殺滅蚊幼蟲(chóng);
作者:劉基柱 嚴(yán)寒靜 張宏意
【摘要】 目的 觀察葎草莖葉的表面細(xì)微結(jié)構(gòu)。方法 取新鮮葎草的莖葉進(jìn)行掃描電鏡觀察。結(jié)果 葎草莖葉表面有腺鱗和3種類(lèi)型的非腺毛分布,氣孔器無(wú)規(guī)則型。結(jié)論 葎草莖葉表面細(xì)微結(jié)構(gòu)為藥材的鑒別提供了新的依據(jù)。
【關(guān)鍵詞】 葎草;葉表面; 掃描電鏡;細(xì)微結(jié)構(gòu)
Abstract:Objective To study the ultrastructural characteristics of the leaf and stem epidermis of Humulus scandens.Methods The leaf and stem epidermis of Humulus scandens were observed by scanning electron microscope.Result There were three types of nonglandular hair and glandular scale in the surface of leaf and stem. The stomata apparatus is anomocytic type. Conclusion It provides the new reference to discriminate Humulus scandens.
Key words:Humulus scandens; leaf epidermis; scanning electron microscope
葎草為桑科植物葎草Humulus scandens (Lour.) merr.的干燥全草[1],具清熱解毒、利尿消腫等功效,用于肺結(jié)核潮熱、胃腸炎、痢疾、淋癥痔瘡等癥。葎草揮發(fā)油主要含α、β酸類(lèi)成分[2]。葉片作為植物與外界的屏障,其表皮和被毛特征已成為分類(lèi)和鑒定的有力證據(jù)[3]。隨著掃描電鏡(SEM)的應(yīng)用,這些特征更廣泛地應(yīng)用于不同的分類(lèi)群的區(qū)分,在藥用植物的鑒別中也備受關(guān)注[4-6]。國(guó)內(nèi)尚無(wú)葎草新鮮莖葉表皮細(xì)微特征的報(bào)道。本文采用掃描電鏡觀察葎草莖葉表皮的細(xì)微結(jié)構(gòu)特征,為藥材的鑒別提供依據(jù)。
1 材料與方法
1.1 材料
葎草采自廣東藥學(xué)院藥用植物園,并經(jīng)作者鑒定。
1.2 方法
取從莖頂端往下數(shù)第5枚葉,在葉片近中脈處取約0.2 cm2的葉片樣品。莖樣品取第4與第5枚葉之間的莖。掃描電鏡樣品制備[5]:把剪下的樣品放入裝有2.5%戊二醛固定液(預(yù)冷)的青霉素小瓶?jī)?nèi),用針筒抽氣直至樣品下沉,再放入4 ℃冰箱中固定6 h;吸除固定液,加入0.1 mol/L磷酸緩沖液(pH7.2),搖動(dòng),漂洗6次,每次20 min;吸除緩沖液,用體積分?jǐn)?shù)為30%、50%、70%、90%的乙醇進(jìn)行逐級(jí)脫水,每次15 min;吸除乙醇,再用體積分?jǐn)?shù)100%丙酮(加無(wú)水CaCl2)脫水3次,每次15 min;醋酸異戊酯(加無(wú)水CaCl2)置換2次,每次15 min。把樣品取出進(jìn)行臨界點(diǎn)干燥。用雙面膠粘在觀察臺(tái)上,經(jīng)噴鍍金膜后,置日本日立公司S520型掃描電鏡下觀察和照相。
關(guān)于文中所用的葉表皮術(shù)語(yǔ),參照Dicher [7] 和王宇飛[8]等的報(bào)道。
2 結(jié) 果
2.1 葉上表面
整體上凹凸不平,細(xì)胞輪廓清晰,形狀不規(guī)則,非腺毛眾多,氣孔較少,存在于副衛(wèi)細(xì)胞凹陷處。表皮細(xì)胞形態(tài)不規(guī)則,多樣,大小差別??;垂周壁較下表皮表皮細(xì)胞垂周壁光滑,細(xì)胞向上隆起成龍骨狀,表面有角質(zhì)紋飾,角質(zhì)加厚不均勻。有大量單細(xì)胞非腺毛,較小,基部圓球形,上端多數(shù)銳尖,毛細(xì)胞表面有疣狀突起,毛基部有1圈表皮細(xì)胞呈環(huán)狀排列,這些表皮細(xì)胞表面有清晰的棱條形角質(zhì)紋飾。其結(jié)構(gòu)見(jiàn)圖1A。
2.2 葉下表面
表皮細(xì)胞輪廓清晰,性狀不規(guī)則,多樣,大小差別較大,細(xì)胞結(jié)合緊密,無(wú)細(xì)胞間隙;垂周壁波浪狀,細(xì)胞中間向上隆起,表面有清晰的角質(zhì)加厚,加厚不均勻,邊緣有條形紋飾。單細(xì)胞非腺毛兩種,一種呈圓錐狀,較長(zhǎng),基部膨大成圓球形,毛上有疣狀突起,非腺毛底部的表皮細(xì)胞突出表面與其他細(xì)胞區(qū)別明顯(見(jiàn)圖1D);另一種先端彎曲或鉤狀,堅(jiān)硬,多存在于脈上,表面無(wú)疣狀突起(見(jiàn)圖1E)。有小腺毛零星分布,單細(xì)胞或兩個(gè)細(xì)胞頭部,柄部2個(gè)或2列4個(gè)細(xì)胞(見(jiàn)圖1B)。腺鱗較多,頭部突出表皮細(xì)胞表面,呈橢圓形平頂狀,基部的表皮細(xì)胞向下凹陷(見(jiàn)圖1C)。氣孔器隨機(jī)單個(gè)分散在下表皮上,氣孔器類(lèi)型根據(jù)Dilcher[6]的概念屬于無(wú)規(guī)則性(Anomocytic type),與保衛(wèi)細(xì)胞相鄰的幾個(gè)細(xì)胞(副衛(wèi)細(xì)胞)與其周?chē)谋砥ぜ?xì)胞無(wú)區(qū)別。氣孔橢圓形,外拱蓋單層,內(nèi)緣較平滑;保衛(wèi)細(xì)胞兩極不具“T”型加厚。其結(jié)構(gòu)見(jiàn)圖1B。
SEM of stem and leaf epidermis of Humulus scandens
2.3 莖
多角形,表皮細(xì)胞長(zhǎng)條形。單細(xì)胞非腺毛兩種,一種與葉脈上相同,另一種為丁字形,表面有疣狀突起,毛基部有1~2圈表皮細(xì)胞呈環(huán)狀排列。其結(jié)構(gòu)見(jiàn)圖1F。
3 討 論
葎草表面有3種類(lèi)型的單細(xì)胞非腺毛分布:葉的上下表面主要分布的是圓錐狀、基部球形的非腺毛,不同之處在于下表面的非腺毛遠(yuǎn)較上表面的非腺毛長(zhǎng);鉤狀非腺毛多分布于葉脈和莖表面;丁字形單細(xì)胞非腺毛分布于莖表面。以上結(jié)果在《中華本草》中沒(méi)有記載。此外,本文結(jié)果顯示,葎草葉的下表面有眾多腺鱗分布,這在國(guó)內(nèi)尚未見(jiàn)有報(bào)道;未見(jiàn)《中華本草》所記載的含鐘乳體的晶細(xì)胞及非腺毛。本文結(jié)果與用光學(xué)顯微鏡觀察的結(jié)果一致[9],為葎草的鑒別提供了新的依據(jù)。
經(jīng)典的中藥鑒定學(xué)對(duì)葎草的描述僅限于葉的表面是否被毛,而對(duì)于上下表面被毛的差異并沒(méi)有明確說(shuō)明,作者認(rèn)為對(duì)葉片被毛情況的觀察,特別是對(duì)于表皮毛的表面特征如疣狀突起、角質(zhì)層等方面,電子顯微鏡的使用顯示出了明顯的優(yōu)勢(shì)。組織形態(tài)學(xué)與細(xì)微形態(tài)二者相互進(jìn)行印證,將更加有助于推動(dòng)中藥鑒定學(xué)的發(fā)展。
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關(guān)鍵詞:茄尼醇 煙草毛狀根 進(jìn)展與展望
中圖分類(lèi)號(hào):S567.239 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A 文章編號(hào):1674-098X(2017)02(b)-0253-02
1 茄尼醇
茄尼醇(solanesol)是一種天然化合物,主要存在于茄科、桑科植物中,煙葉中含量最為顯著,可達(dá)到0.3%~3%[1]。1956年,Rowland等[2]首次從煙薰煙葉中分離得到。茄尼醇化學(xué)名稱(chēng)為九聚異戊二烯醇,是一個(gè)四倍半烯萜醇,分子式C45H74O,分子量為631.07,茄尼醇粗品在常溫下呈棕黑色糊狀,加熱后呈粘稠性的液狀,有芳香味,純品為白色粉狀固體[3]。目前茄尼醇主要從煙葉中提取并進(jìn)行純化,純度可達(dá)到95%以上。
茄尼醇本身具有較強(qiáng)的抗生物活性如抗氧化能力、消炎殺菌能力、抗輻射能力等,用于治療壞血病、胃潰瘍及十二指腸潰瘍、壞死性牙周炎等,有凝血作用,可用于止血;還可治療亞急性肝壞死、急慢性肝炎等[4]。茄尼醇由于其本身特殊的分子結(jié)構(gòu),可以用于合成多種醫(yī)藥中間體,在醫(yī)藥領(lǐng)域有著極其重要的作用,例如可以合成治療腫瘤藥物、抗艾滋病病毒藥物、抗?jié)兯幬?、泛醌?lèi)化合物如輔酶Q10和維生素K2等[5],尤其是近些年發(fā)達(dá)國(guó)家對(duì)輔酶Q10的生產(chǎn)和廣泛應(yīng)用,使得茄尼醇的經(jīng)濟(jì)價(jià)值也迅猛攀升。茄尼醇是一種具有高科技含量和高附加值的應(yīng)用型化合物,相信在今后相當(dāng)長(zhǎng)的一段時(shí)間內(nèi),都會(huì)是市場(chǎng)的熱點(diǎn)。
2 毛狀根
毛狀根(hairy root)又稱(chēng)發(fā)根、發(fā)狀根,是由Smih和Townsend于1907年發(fā)現(xiàn)并提出此概念,他們發(fā)現(xiàn)用發(fā)根農(nóng)桿菌侵染植物外植體能誘導(dǎo)產(chǎn)生毛狀根;Riker等于1930年再次闡述了該現(xiàn)象;1982年Chilton報(bào)道發(fā)根農(nóng)桿菌侵染植物產(chǎn)生發(fā)狀根的機(jī)理;到現(xiàn)在為止,已獲得了300多種植物的毛狀根體系。毛狀根具有生長(zhǎng)速度快、遺傳性能穩(wěn)定的特點(diǎn),并且能夠合成具有該植物特征的次生代謝產(chǎn)物,利用此特點(diǎn),可以解決藥用植物野生資源短缺、受自然環(huán)境因素影響大、栽培條件受限、人工栽培年限長(zhǎng)、人力成本大、藥用成分含量低及含量不穩(wěn)定等問(wèn)題,為人工利用生物技術(shù)生產(chǎn)合成有效藥用成分提供了一條新途徑。近些年,通過(guò)國(guó)內(nèi)外專(zhuān)家、學(xué)者的不斷研究探索,有一些毛狀根已經(jīng)進(jìn)入大規(guī)模生產(chǎn)研究階段,例如黃芪的毛狀根培養(yǎng)[6];紫草、人參、長(zhǎng)春花等植物的毛狀根已能進(jìn)行工業(yè)化生產(chǎn)[7]。另一方面,通過(guò)對(duì)毛狀根的誘導(dǎo),可以產(chǎn)生再生植株,為分子育種、培養(yǎng)新的種子資源提供了可能。
到目前為止,利用發(fā)根農(nóng)桿菌誘導(dǎo)產(chǎn)生毛狀根,主要集中在雙子葉植物中,現(xiàn)已誘導(dǎo)的毛狀根多集中在茄科、菊科、十字花科、傘形科、五加科、豆科、蓼科等科,主要是草本植物。單子葉植物誘導(dǎo)產(chǎn)生毛狀根的報(bào)道較少見(jiàn),僅見(jiàn)周立剛等[8]從鴨趾草科植物露水草中誘導(dǎo)形成毛狀根的報(bào)道。
研究發(fā)根農(nóng)桿菌誘導(dǎo)產(chǎn)生毛狀根的主要目的是利用毛狀根產(chǎn)生次生代謝產(chǎn)物,便于進(jìn)一步用于醫(yī)藥、化工、食品等領(lǐng)域的研究和生產(chǎn)。而次生代謝物的含量積累又與毛狀根的生長(zhǎng)量密不可分。目前研究發(fā)現(xiàn),影響毛狀根生長(zhǎng)的因素主要有兩方面,一是物理因素,主要包括溫度、pH值、光照、通風(fēng)量、培養(yǎng)容器及方法等。二是化學(xué)因素和生物技術(shù),主要包括碳源、外源激素、前體物質(zhì)、誘導(dǎo)子等[7]。
毛狀根的擴(kuò)大培養(yǎng)和規(guī)?;a(chǎn),目前主要利用生物反應(yīng)器來(lái)進(jìn)行,多種植物已可以利用生物反應(yīng)器生產(chǎn)產(chǎn)品,但由于技術(shù)水平、工藝和成本等原因,僅少數(shù)植物產(chǎn)品,如人參皂苷、紫草寧、紫衫醇等,在美國(guó)、日本、德國(guó)等國(guó)家實(shí)現(xiàn)了商業(yè)化應(yīng)用[7]。
3 煙草毛狀根中茄尼醇研究進(jìn)展
目前,關(guān)于煙草毛狀根中茄尼醇的研究較少,國(guó)內(nèi)較全面的有王英娟等[9]的相關(guān)報(bào)道。王英娟等研究發(fā)現(xiàn),MS液體培養(yǎng)基培養(yǎng)出的煙草毛狀根含量更高,但仍比廢棄煙葉中的茄尼醇含量低43.2%。煙草毛狀根中茄尼醇的研究主要圍繞茄尼醇含量展開(kāi)研究工作,研究?jī)?nèi)容主要包括以下幾方面:
一是篩選更適合誘導(dǎo)煙草毛狀根的農(nóng)桿菌菌株和培養(yǎng)基。
二是篩選并培養(yǎng)更適合茄尼醇含量積累的煙草品種,作為外植體,以便進(jìn)一步誘導(dǎo)產(chǎn)生毛狀根。
三是研究適合煙草毛狀根誘導(dǎo)和培養(yǎng)的方法;目前常用的方法有葉盤(pán)轉(zhuǎn)化法、莖稈(或葉柄)涂抹法、原生質(zhì)體共培養(yǎng)法等[3]。
四是研究更適合煙草毛狀根次生代謝物茄尼醇積累的條件因子。影響次生代謝物積累的條件因子主要有化學(xué)條件因子、物理?xiàng)l件因子和生物技術(shù)條件因子[10]。化學(xué)條件因子包括激素的有無(wú)和激素的種類(lèi),培養(yǎng)基成分的影響等;物理?xiàng)l件因子包括光照的強(qiáng)度、時(shí)間,單色光的種類(lèi)、溫度與濕度等;生物技術(shù)常用的有反義技術(shù)、兩步培養(yǎng)法、前體化合物飼養(yǎng)以及誘導(dǎo)子的添加等。其中,誘導(dǎo)子的種類(lèi)、濃度、添加時(shí)間以及混合誘導(dǎo)子的應(yīng)用等都可以影響次生代謝物的積累。
五是篩選茄尼醇含量積累更高的煙草毛狀根根系,并進(jìn)一步培養(yǎng)出人工種子和再生植株,進(jìn)而培育出茄尼醇含量更高的煙草新品種。
煙草毛狀根中茄尼醇的研究中存在的問(wèn)題主要是茄尼醇含量偏低和茄尼醇含量的穩(wěn)定性問(wèn)題,由于毛狀根誘導(dǎo)與培養(yǎng)過(guò)程中存在較為復(fù)雜的影響因子,致使不同的毛狀根根系間茄尼醇含量的不穩(wěn)定性增加。
4 煙草毛狀根中茄尼醇研究展望
諸多條件因子的復(fù)雜影響導(dǎo)致了煙草毛狀根中茄尼醇含量的最大積累較為困難,但是通過(guò)改變各種物理、化學(xué)條件因子,通過(guò)先進(jìn)生物技術(shù)的不斷應(yīng)用和改進(jìn),提高煙草毛狀根中茄尼醇的含量和穩(wěn)定性是可以實(shí)現(xiàn)的;同時(shí),通過(guò)設(shè)計(jì)和不斷改進(jìn)生物反應(yīng)器,煙草毛狀根的擴(kuò)大化生產(chǎn)和工廠規(guī)?;a(chǎn)也可期待,用以代替?zhèn)鹘y(tǒng)煙草種植為茄尼醇來(lái)源的途徑。因此,研究提高煙草毛狀根中次生代謝物茄尼醇含量和穩(wěn)定性的方法和技術(shù),對(duì)茄尼醇在醫(yī)療保健、醫(yī)藥化工、美容、食品等方面的應(yīng)用具有及其重要的意義。
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