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總部很多很好的資源我們并沒有真正利用起來,也有很多更好的操作方式并沒有為我們所了解,我們應該和他們建立更為緊密的聯(lián)系,系統(tǒng)學習、貫徹執(zhí)行,直至無論從哪個方面看,我們都和總部完全一致,甚至在個別方面,我們優(yōu)于他們,那么我們才能真正與他們并駕齊驅(qū),并能在接下來堅持和不斷總結的過程中逐漸形成自己的管理模式、經(jīng)營模式、商業(yè)模式,為誕生公司自己的品牌而努力。
二、人才穩(wěn)定和培養(yǎng)工作:
其實所有經(jīng)營管理中出現(xiàn)的大多數(shù)問題,歸結到最后都是“人”的問題,故今年人才的招聘、培養(yǎng)和穩(wěn)定的工作,是今年營運工作的重中之重,是其他工作順利開展和執(zhí)行的基礎:
1、營運工作的基礎是要擁有一個高度責任心對企業(yè)深度認同的核心團隊,這樣各項工作指令和規(guī)劃布署才能順利執(zhí)行,此核心團隊應該具有采購、質(zhì)檢、門店管理、人事、財務、培訓等功能,而營運總監(jiān)在這其中起到的最大的作用是和諧地動作這個團隊,使各個版塊各司其職,高度自律,合作無間。
2、在每個店各崗位(如廚房、吧臺、前廳)進行人才儲備工作,主要培養(yǎng)三種人才:管理型、技術型、實用型,這部分人員將來可以成為公司的儲備力量,將為運營和拓張起到重要的作用,并且也會增強現(xiàn)有員工的危機意識,提高其工作積極性。
3、重視培訓和訓練工作,切實提高員工的工作能力:此項工作各個崗位(前廳、廚房、吧臺)都要進行規(guī)劃和執(zhí)行,在做培訓和訓練的同時,要讓員工有機會多多體驗南京總部直營店高標準、嚴要求的工作內(nèi)容,有機會參觀海底撈、真功夫等行業(yè)皎皎者的運營實務,讓其比較后了解到差距,從而增強其上升意識,再經(jīng)過訓練和督導:改變其工作習慣,真正提高其工作能力。
三、整頓現(xiàn)有問題、整合現(xiàn)有資源:
1、管理好兩店廚房、穩(wěn)定控制餐品質(zhì)量及速度、優(yōu)化運作模式:
悠仙美地年運作近大半年以來,廚房出現(xiàn)最多的問題無外乎是餐品質(zhì)量投訴和出餐太慢等問題,在一次又一次的總結之后,問題仍然沒有得到徹底解決,其實根據(jù)業(yè)績及客勤量的增長,我們是到了需要考慮優(yōu)化運作模式的時候了,建立完善的管理和運作模式的好處是:不僅能提高工作效率、顧客滿意度,還能幫助公司培養(yǎng)人才,為今年三店開業(yè)服務。
2、完善采購和質(zhì)檢、財務包括一線運作部門之間的配合流程,規(guī)范制度,做好成本核算工作,根據(jù)數(shù)據(jù)分析經(jīng)營問題,從而能制定出合理有效的成本控制模式。
3、產(chǎn)品的研發(fā)和推陳出新工作:
①可充分利用公司資源,同步南京產(chǎn)品:可關鍵問題是如何保證“同步不走樣”,這是值得我們思考的問題。我個人以為可由每次南京來人過來指導,變?yōu)橹鲃映鰮?,在同步出新品時,派人去南京學習,對菜肴的形、色、味、制作方式、注意事項逐一進行系統(tǒng)觀摩,并實際體驗操作過程,多問、多學,直至完全一致方可。
②吧臺和廚房負責人可根據(jù)本地地方特點,應時、應季推出一些新品上市,此項工作可落實為制度,如此除了對經(jīng)營特色大有好處外,還能提高員工的創(chuàng)新能力和工作積極性。
③對每月、每季統(tǒng)計出的餐品和飲品銷售數(shù)據(jù)進行分析、結合到客人的意見反饋,可對適度產(chǎn)品進行淘汰和撤換安排。
4、軟實力品牌打造,加深悠仙美地特色服務和細節(jié)服務在消費者心目中的印象:
服務品牌的打造,無需做過多經(jīng)濟方面的投入,卻能獲得豐厚的回報,是值得公司領導重視的一項重要的工作。今年若我們想要將服務做成令客人印象深刻的一項產(chǎn)品,需要從以下四個方面著手:
①服務技能
廚房的多項管理制度和紀律制度都使每個員工嚴格要求自己,在制度的要求下,每個員工的工作水平和個人素質(zhì)都有了提高,廚房的衛(wèi)生在員工辛勤勞動下,都做得干干凈凈,在各個方面都有了規(guī)范化的管理,業(yè)務技能較去年有了一定的提高,但是還尚缺穩(wěn)定性。能夠積極地執(zhí)行各位領導下達的各項任務,配合各部門之間的日常工作
能夠加強出品的穩(wěn)定性,注重細節(jié)。不斷完善自己,使自己能夠跟隨企業(yè)的發(fā)展而發(fā)展,讓自己的人生有一個飛躍:
一.在思想上,我一直就抱著“合作、奉獻”的態(tài)度,積極向組織靠攏,認真學習、領會上級傳達的思想,團結、互助、親密、友愛同志,盈造和諧團對;盡心做好自己的本職工作。
二.在工作中,對照相關標準,嚴以律己,較好的完成各項工作任務。本年度主要完成了如下工作:
1.在酒店加入戴斯集團的工作中做出了自己應有貢獻。
2.在評定優(yōu)秀廚房的工作中做出了自己貢應有貢獻。
3.在本年度中不段推出了新的菜品,如:健將五彩絲、寒江雪魚片、山椒老胡豆、米椒浸白碗等等。
4.還常常利用自己的休息時間給廚房的學工們講菜品理論知識和食品雕刻技法等等。
5.還為高檔宴會的擺臺制作泡沫雕塑,如:人人重慶、人民英雄紀念碑。
6.還不段創(chuàng)作食品雕刻作品:如:鳳飛九天、鯉魚戲水、壽星老人。
【活動名稱】:大家一起來,我要我精彩.
【活動主題】:我的青春,我做主—班級聯(lián)誼活動
【活動時間】:待定
【活動地點】:戶外燒烤場所/多媒體教室/草地
【活動形式】:將兩個班的同學分為若干小組,每個小組保證各有一半成員來自不同的班級,從而達到聯(lián)誼的目的
【活動內(nèi)容】:
一、燒烤活動
1. 建議班委開會決定是否舉辦,需要同學交一定的燒烤費用,但費用不會很高,如果決定可以,可以自帶食物燒烤,也可以到燒烤場購買。
2.如果決定不去燒烤,只想簡單的一個聯(lián)誼晚會,那么可以省去此環(huán)節(jié),聯(lián)誼活動可以在一個多媒體教室或者在一個比較開闊的草地上舉辦。
二、主持人致活動開幕詞,活動開始.
三、娛樂游戲環(huán)節(jié)
注:節(jié)目的選取和順序可以根據(jù)具體情況作出相應的調(diào)整
節(jié)目一:隊名大比拼(破冰節(jié)目)
目的:破冰,讓組員相互了解熟悉,并提高組員的爭強斗勝之心及捍衛(wèi)團隊榮譽使命感
時間:5分鐘
道具:大白紙,大水筆(寫隊名用),獎品
規(guī)則:1.各組想好一個具有代表性的隊名,并選好隊長,負責該組的帶頭指揮
2.由隊長告訴主持人本隊的隊名。
3.主持人主持,各組投票選出最好的隊名,并給該組發(fā)放獎品。
節(jié)目二:腦筋急轉(zhuǎn)彎有獎大搶答 (動腦合作節(jié)目)
目的:點燃氣氛,讓各組成員活躍起來,并考驗他們的團隊合作精神,增進組員的凝聚力
對象:各小組成員
道具:腦筋急轉(zhuǎn)彎問題,獎品
游戲規(guī)則:
1. 平均每組有兩到三個問題。
2. 主持人提問,各組搶答,第一個搶到的組派代表回答。
3. 回答錯誤的謎題可以再度作答。
4. 每組答對問題,主持人發(fā)放獎品。
節(jié)目三:心心相印,我來比你來猜 (動腦動手合作型節(jié)目)
道具:紙和筆、準備一些能夠用手語表達的動物,人物,成語或者物品
人數(shù):兩人一組,可多組參加
游戲規(guī)則:游戲開始表演的一組兩人先要面對面(一人為表演動策劃,一人為猜測者),然后由主持人會把要猜的成語或詞語寫在一張紙上,讓表演動作者做給猜測者看,當表演者表演完,猜測者能猜出表演者所做動作的成語或詞語時,就算過關.(注意:動作者可以用語言來解釋,但不能說出動作中的字)(左右為難、無孔不入、金雞獨立、狗急跳墻、東張西望、無中生有、眉開眼笑、胸有成竹、雞飛蛋打、低聲下氣)。需要裁判數(shù)名,現(xiàn)場自愿報名
節(jié)目四:合力吹氣球(動手合作節(jié)目)
目的:溝通配合能力,借著分工合作來完成任務
人數(shù):每組限六人
道具:主持人準備每組各六張簽,上寫:嘴巴;手(二張);屁股;腳(二張) 汽球(每組一個)
游戲規(guī)則:
1. 分兩組,但每組必須要有六人。
2. 主持人請每組每人抽簽。
3. 首先,抽到嘴巴的必須借著抽到手的兩人幫助來把汽球給吹起(抽到嘴巴的人 不能用手自已吹起汽球);然后二個抽到腳的人抬起抽到屁股的人去把汽球給坐破.
節(jié)目五:其他常規(guī)娛樂節(jié)目 (大學生獨有才藝表演節(jié)目)
事先找好一些有才藝表演經(jīng)驗的同學,準備好娛樂節(jié)目,例如:吉他,口琴,街舞,獨唱等。
節(jié)目六:七拼八湊
此游戲適合晚會最后,掀起。
要求:參加人數(shù)30人-50人為佳,分成4-5組道具:托盤、背景disco音樂、獎品一份可以是精美的糖果(可以分的)
主持人要求大家分組坐好(一定要有男有女)
將游戲規(guī)則告知大家每組先選出一名接收者,手持托盤站在舞臺上。
其它小組人員按照主持人的要求提供物品放到托盤中。最先集齊物品的小組獲勝。
背景音樂起,主持人開始宣讀物品,每一個相隔一定時間給隊員準備,慢慢加快。
采集物品來自日常的例如:眼鏡、手表、皮帶、襪子、口紅、錢等,一定要有比較難的放在最后如藥片、糖果、一毛錢
聰明的主持人還可以臨時選擇一些東西。
其他備用游戲節(jié)目:
1:多人多足
目的:配合協(xié)調(diào)能力
道具:普通紅繩子,秒表一個,哨子一個。(一名裁判)
人數(shù):4組,每組8人
游戲規(guī)則:以隊伍為單位參加,全隊站成一排。用繩子綁在腳上,從場地的一邊走到另一邊。每組派8人參加,四組同時進行。沒參加游戲的組員要幫忙綁繩子。最后以時間最短的隊伍勝出。四組隊伍最后到達終點的一隊每人將表演一個小節(jié)目。
2:踩汽球
目的:活躍氣氛,增進協(xié)調(diào)性和協(xié)作能力。
人數(shù):人數(shù)為十名,男女各半,一男一女組成一組,共五組。
游戲規(guī)則:當場選出十名人,男女各半,一男一女搭配,左右腳捆綁三至四個汽球,在活動開始后,互相踩對方的汽球,并保持自已的汽球不破,或破得最少,則勝出 (勝出的一方可以向輸?shù)囊环教岢鲆粋€問題,(注:不能太過分)
3:集體兔子舞(需多媒體支持)
目的:培養(yǎng)同學們的感情以及增進彼此的了解,讓他們體會溝通與合作的妙處
人數(shù):兩個/三個小組組成一隊,一隊大概16人
場地:空曠的平地
道具:兔子舞歌曲,mp3/筆記本電腦,音響
游戲規(guī)則:
難忘的2011年,注定要成為殘疾人事業(yè)劃時代的一個時間節(jié)點。
這一年里,我們攜手社會各界,頻頻奏響殘聯(lián)工作的強音;
這一年里,我們看到了一個個愛心奇跡,感染著我們,感染著許許多多捧出愛心的人群。
收獲的2011,必將以殘疾人民生的保障年,殘疾人事業(yè)的發(fā)展年,殘聯(lián)工作的創(chuàng)新年載入市殘聯(lián)發(fā)展的歷史:
在社會保障與公共服務方面:
我們堅持高位統(tǒng)籌,殘疾人保障格局已經(jīng)由以往的社會救濟為主轉(zhuǎn)變?yōu)檎娜婷裆U希?/p>
我們堅持廣開財路,殘疾人服務資源正在由過分依靠財政投入轉(zhuǎn)變?yōu)槎喾介_發(fā)、融匯社會資源;
我們堅持關愛與救助并重,殘疾人的服務內(nèi)容逐步由單純的物質(zhì)救助轉(zhuǎn)變?yōu)閺V泛的社會關懷。
在殘聯(lián)工作和自身建設方面:
我們牢牢把握“喊破嗓子不如做出樣子”,懷大愛之心成大德之行。殘聯(lián)工作狀態(tài)由被動跟進轉(zhuǎn)變?yōu)橹鲃幼鳛?;由推動落實轉(zhuǎn)變?yōu)槭痉兑I;由帶著任務抓落實,轉(zhuǎn)變?yōu)閹е星榍蟀l(fā)展;由相對邊緣化的社會組織轉(zhuǎn)變?yōu)槿遮呏鲗偷墓ぷ鳈C構,被市長譽為民生工作的“主力部隊”,社會建設的“正規(guī)軍”。殘疾人工作的領導環(huán)境已經(jīng)由殘聯(lián)出題目、政府給答案轉(zhuǎn)變?yōu)辄h政、殘聯(lián)共同出題目、求答案。
我們始終堅持密切與殘疾人的聯(lián)系,向殘疾人問需、問苦、問計,積極推進體制創(chuàng)新、組織創(chuàng)新、理念創(chuàng)新、機制創(chuàng)新、載體創(chuàng)新、服務方式與活動方式創(chuàng)新,努力把工作做到51萬殘疾人及其300萬親友的心坎上。殘疾人事業(yè)發(fā)展局面已經(jīng)由殘聯(lián)的“單出頭”、殘聯(lián)與政府的“二人轉(zhuǎn)”轉(zhuǎn)變?yōu)槠髽I(yè)、政府、社會的“拉場戲”、扶殘助殘的“大合唱”。
惜別2011,我們無愧歷史,無愧殘疾人!
展望2011年,殘聯(lián)工作前景美好,任務繁重,使命光榮!
【關鍵詞】 氣質(zhì)聯(lián)用技術;食品;農(nóng)藥殘留
作者單位:100071 聯(lián)勤部藥品儀器檢驗所
1 農(nóng)藥殘留
農(nóng)藥殘留指的是在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中施用農(nóng)藥后一部分農(nóng)藥直接或間接殘存于谷物、蔬菜、果品、畜產(chǎn)品、水產(chǎn)品、中藥材以及土壤和水體中的現(xiàn)象。 20世紀50年代以來,化學合成農(nóng)藥在全世界的廣泛應用,無疑在防治病蟲害、鏟除雜草、增加農(nóng)業(yè)產(chǎn)量方面發(fā)揮舉足輕重的作用,但農(nóng)藥是一類有毒的化學物質(zhì),長期使用對環(huán)境生物安全和人體健康產(chǎn)生了較大的不利影響,特別是蔬菜、水果類食品的中毒[1]。
2 氣質(zhì)聯(lián)用技術的特點
氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(GC-MS)既具有氣相色譜高分離效能,又具有質(zhì)譜準確鑒定化合物結構的特點,可達到同時準確快速測定樣品中微量的多種農(nóng)藥殘留及衍生物,因此已被很多國家研究者開發(fā)和應用。
3 氣質(zhì)聯(lián)用技術在糧食中農(nóng)藥和除草劑檢測中的應用
3.1 于維森等[2]建立一種測定食品中有機磷、有機氯、氨基甲酸酯和除草劑農(nóng)藥殘留的氣相色譜質(zhì)譜法,采用丙酮、二氯甲烷提取,40℃水浴旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)近干,以Envi-Carb柱和Sep-pak-NH2柱凈化,以氣相色譜-質(zhì)譜選擇離子監(jiān)測方式分析檢測有機磷、有機氯、氨基甲酸酯和除草劑等32種農(nóng)藥殘留。所有農(nóng)藥均在37 min內(nèi)流出,分離良好,農(nóng)藥標準的線性范圍在0.05~1.0 μg/ml,相關系數(shù)r均在0.99以上,低、高二種濃度加標回收率均在89%~98%之間,相對標準偏差均小于10%,方法最低檢出限為0.005 mg/kg(S/N3)。
3.2 本規(guī)定[3]制定了進出口糧谷中多效唑殘留氣相色譜-質(zhì)譜測定方法。樣品用丙酮或丙酮-乙酸乙酯提取殘留的多效唑,于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器將濾液濃縮近干,凈化后供氣相色譜-質(zhì)譜測定,選擇離子監(jiān)測方式分析樣液中多效唑的含量,在保留時間10.7 min附近有峰出現(xiàn),本標準測定低限為:0.020 mg/kg,多效唑添加濃度在0.020 mg/kg~0.50 mg/kg范圍,回收率為85%~106%。
3.3 劉波靜[4]探討了糧谷中2,4,5-三氯苯氧基乙酸(2,4,5-涕)、二氯喹啉酸(快殺稗)、3-異丙基-(1H)-苯并-2,1,3-噻二嗪-4-酮-2,2-二氧化物(滅草松)、3-6-二氯-2甲樣機苯甲酸(麥草威)、2-甲基氯苯氧乙酸(2甲4氯)5種酸性除草劑殘留量的測定方法,以GC-MSD-SM方式進行分析,5種除草劑在0.01~0.50 μg/g添加范圍內(nèi)的回收率為92.59%~101.16%,相對標準偏差為0.6%~4.2%,檢出限為0.01~0.02 μg/g。
3.4 Lesueur C.等[5]認為由于殺蟲劑在農(nóng)業(yè)中的大量使用,食品中的殺蟲劑已經(jīng)成為一個重大問題。因此,必須適當控制食品中殺蟲劑的殘余量。在這項研究中,通過QuEChers方法在4個樣本中(葡萄、檸檬、洋蔥、西紅柿)提取殘留農(nóng)藥,應用GC/SQ-MS分析出含有105種殺蟲劑, 檢出限和定量限的范圍分別為0.4~48.2 μg/kg和1.2~161 μg/kg。
4 氣質(zhì)聯(lián)用技術在水果和蔬菜中農(nóng)藥殘留檢測中的應用
4.1 江德甜等[6]建立了一種用氣相色譜(GC)和離子阱質(zhì)譜儀(MS /MS)對17多種農(nóng)藥進行檢測、定量和結構確認的方法,在白菜中添加不同水平的農(nóng)藥,進行回收率測定,對于16種有機磷農(nóng)藥,回收率在70.40%~100.18%之間(敵敵畏為66.45%),雖然RSD偏大,但均在20%以下(滅菌磷為22.30%),該方法成功地檢測了含有不同濃度農(nóng)藥的實際樣品。盡管農(nóng)藥濃度不一,樣品中的農(nóng)藥譜圖都很穩(wěn)定,足以和軟件中的譜庫相匹配,進行譜庫檢索。
4.2 閆實等[7]以常見的5種蔬菜為實驗對象,應用氣相色譜/質(zhì)譜聯(lián)用方法,研究了色譜柱極性與掃描方式對測定蔬菜中7種有機磷類農(nóng)藥殘留量的影響。結果表明,使用較強極性的毛細管柱(如DB-17MS)可以降低蔬菜中有機磷類農(nóng)藥的檢出限。在確定每種有機磷類農(nóng)藥特征離子的基礎上,采用選擇離子監(jiān)控掃描(SIM),可以顯著降低蔬菜中有機磷類農(nóng)藥的檢出限,在5種蔬菜中7種有機磷類農(nóng)藥檢出限范圍在0.0425~0.820 mg/kg。用SIM的檢出限比用全掃描的檢出限降低了8.9~14.8倍。
5 小結
GC/MS聯(lián)用技術集高提取率,高分離能力,高分析能力于一體,具有對樣品當中不同種類的上百種農(nóng)藥殘留同時進行快速掃描、定性、定量的優(yōu)勢。因此使得它在農(nóng)殘檢測中顯的尤其重要。近年來我國對食品安全越來越重視, GC/ MS在農(nóng)藥殘留檢測的研究也得到了迅速發(fā)展,隨著計算機技術的飛速發(fā)展,質(zhì)譜譜庫檢索功能亦越來越強大與精準。 GC/ MS 必將更大程度上發(fā)揮能同時準確快速測定食品中微量多種農(nóng)藥殘留及代謝物的優(yōu)點而被更加廣泛地應用。
參考文獻
[1] 劉騰飛,謝修慶,劉文婷.氣相色譜及質(zhì)譜聯(lián)用在農(nóng)藥殘留分析中的應用.現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技,2010,(3):179-181.
[2] 于維森,郝文,段海平,呂曉靜.氣質(zhì)聯(lián)用選擇離子一次測定食品中32種農(nóng)藥和除草劑.中國衛(wèi)生檢驗雜志,2009,19(5):1029-1031.
[3] 中華人民共和國出入境檢驗檢疫行業(yè)標準.進出口食品中多效唑殘留量檢驗方法,SN/T 1477-2004.
[4] 劉波靜.氣質(zhì)聯(lián)用色譜法測定糧谷中五種除草劑的殘留.中國糧油學報,2008,23(1):185-188.
[5] Lesueur C. , Knittl K., Gartner M., et al ,Analysis of 140 pesticides from conventional farming foodstuff samples after extraction with the modified QuECheRS method.Food Control, 2008(19):906-914.
【關鍵詞】
凝血指標;血小板參數(shù);肝硬化
Blood coagulation index and platelet parameters in patients with cirrhosis detection of clinical value
ZHOU Yanjun,LI Pingfa,WANG Peng.Department of Clinical Laboratory,the First Affiliated Hospital of Xinxiang Medical University,Weihui 453100,China
【Abstract】 ObjectiveTo explore clinical value of cogulative function index(PT,APTT,TT)and platelet parameters(PLT,MPV)between alcohol and hepatitis queen liver cirrhosis. MethodsCheck blood PT,APTT,TT,PLT,MPV among 50 normal persons,35 second and 21 third queen liver cirrhosis,44 alcohol liver cirrhosis. ResultsLiver clrrhosis group had obviously higher levels of PT、APTT、TT than control group( P
【Key words】
Cogulative function index; Platelet parameters; Liver cirrhosis
慢性乙肝是我國肝硬化的主要原因,隨著生活方式的改變,酒精性肝硬化的發(fā)病率逐年上升,且有年輕化趨勢,已成為我國肝硬化的第二原因。肝硬化患者后期多有出血傾向,上消化道出血、顱內(nèi)出血等是重要致死原因[1]。本研究檢測100例肝硬化患者凝血指標(PT、APTT、TT)和血小板參數(shù)(PLT、MPV),探討其在肝硬化出血傾向及預后判斷中的臨床價值。
1 資料與方法
1.1 一般資料 選擇我院2009年2月至2010年3月感染科肝硬化患者100例,男60例,女40例,年齡34~72歲,平均(48.2±15.*7)歲。肝炎后肝硬化56例,酒精性肝硬化44例,符合2000年全國病毒性肝炎學術會議修訂的診斷標準[2]。正常對照組50例,男26例,女24例,年齡34~69歲,平均(46.3±13.8)歲,均為健康體檢者,肝功能正常,無肝病,各型肝炎病毒標志物均為陰性。標本采集前2周未使用影響凝血功能及血小板的藥物。
1.2 儀器與試劑 日本產(chǎn)Sysmex KX-21全自動血細胞分析儀及其配套試劑和質(zhì)控液、法國STA Compact全自動血凝儀及其配套試劑和質(zhì)控液。
1.3 方法 用Sysmex KX-21全自動血細胞分析儀檢測EDTAK2抗凝血的血小板計數(shù)(PLT)、平均血小板體積(MPV),用法國STA Compact全自動血凝儀檢測枸櫞酸鈉抗凝血的凝血酶原時間(PT)、活化部分凝血活酶時間(APTT)、凝血酶時間(TT)。按操作規(guī)程[3]2 h內(nèi)完成測定。
1.4 統(tǒng)計學處理 數(shù)據(jù)以均數(shù)±標準差( x ±s )表示,組間比較采用SNK-q檢驗,采用SPSS13.0 for Windows軟件, P
2 結果
肝硬化組PT、APTT、TT明顯高于對照組( P
注:與對照組比較a P
3 討論
肝硬化是一種慢性、進行性、彌漫性肝病,晚期脾腫大并伴有脾亢、PLT質(zhì)和量改變、凝血因子合成減少或消耗過多、原發(fā)性纖維蛋白溶解及貧血等均導致患者易有出血傾向[4]。本研究探討凝血指標及血小板參數(shù)在肝炎后肝硬化和病毒性肝硬化中的價值。
PLT指血小板計數(shù),是反映血小板生成與衰亡的指標,肝硬化患者大多存在PLT減少,與門脈高壓、脾亢及血小板生成素等有關。乙型肝炎病毒(HBV)與丙型肝炎病毒(HCV)對骨髓巨核細胞均有抑制作用[5],使其成熟不良,造成肝炎后肝硬化患者PLT減少,本研究中對照組相比,肝硬化各組均有顯著性差異( P
凝血因子除Ⅲ、Ⅳ外均在肝臟合成,肝細胞受損時維生素K嚴重缺乏或肝功能不全導致維生素K依賴因子(Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ)合成減少,凝血酶原活性出現(xiàn)不同程度下降,對肝硬化患者進行凝血功能測定,不僅可發(fā)現(xiàn)凝血障礙,還能判斷肝臟功能。PT、APTT、TT與肝受損程度及肝硬化病情的發(fā)展密切相關,其延長的程度與肝臟受損程度和肝臟合成各因子水平的減低程度呈正相關[9]。本研究中對照組相比,肝硬化各組均有顯著性差異( P
綜上所述,測定肝硬化患者凝血因子及血小板參數(shù)可監(jiān)測出血傾向,對指導臨床及時補充凝血因子、判斷預后和降低出血風險及病死率有重要的實際意義和臨床價值。
參 考 文 獻
[1]鮑淼,李孝生.肝硬化患者血小板相關參數(shù)和凝血因子檢測結果分析.山東醫(yī)藥,2009,9(25):4647.
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[3] 全國臨床檢驗操作規(guī)程第三版.
[4] 張書娥.肝硬化的診斷標準和治療方案.現(xiàn)代中西醫(yī)結合雜志,2002,11(10):953.
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[7] 胡玫,李莉,安邦權,等.肝炎后肝硬化患者的血小板參數(shù)變化的臨床意義.微量元素與健康研究,2007,24(2):1415.
【關鍵詞】 貝復舒; 愛可欣; 燒傷殘余創(chuàng)面; 臨床療效
Clinical Effect of bFGF Combined Acasintm on Treating Residual Burn Wounds/GUO Zheng-dong,LIANG Zhi,LIN Hai-bo,et al.//Medical Innovation of China,2015,12(18):023-025
【Abstract】 Objective:To analyze the clinical application value of bFGF combined acasintm on treating residual burn wounds through comparative observation the clinical effect on treating residual burn wounds.Method:64 patients with residual burn wound who were treated in our hospital from December 2013 to December 2014 were selected as the research objects.Experimental group used bFGF combined Acasintm,control group took routine treatment of residual burn wounds,the two groups’ clinical efficacy,wound healing rate and bacterial clearance rate were compared.Result:There were 64 residual wound 62 effective in 64 cases of experimental group,the total effective rate was 96.87%.There were 54 effective in 64 cases of residual burn wounds in control group,the total effective rate was 74.37%,the difference between two groups’ total efficiency were obvious,with statistical significance(P
4 d treatment compared with the shrinkage rate of the treatment of 10,16,22 d and residual wounds after retraction,with statistical significance(P
【Key words】 bFGF; Acasintm; Burn residual wound; Clinical effect
First-author’s address:The Sixth People’s Hospital of Shenzhen,Shenzhen 518000,China
doi:10.3969/j.issn.1674-4985.2015.18.008
燒傷屬于臨床比較常見的病癥,治療難度較大,尤其燒傷發(fā)展到后期可能需要使用大量的抗生素,患者長期使用會出現(xiàn)耐藥性,且可能發(fā)生細菌感染等不良反應。細菌感染會導致患者的創(chuàng)面反復感染難以控制,也可能發(fā)生創(chuàng)面起泡或皮膚破損等[1-2]。以上不良反應均會影響患者創(chuàng)面的愈合,延長愈合時間,為患者的治療增加痛苦。常見的殘余創(chuàng)面細菌感染包括金黃色葡萄球菌感染、MRSA感染、表皮葡萄球菌感染以及銅綠假單胞菌感染等,針對燒傷殘余創(chuàng)面的臨床治療尚無統(tǒng)一有效的方法[3]。本院為了研究貝復舒聯(lián)合愛可欣治療燒傷殘余創(chuàng)面的臨床效果,與常規(guī)殘余創(chuàng)面治療效果進行同體對比,現(xiàn)將對比結果總結報道如下。
1 資料與方法
1.1 一般資料 選取2013年12月-2014年12月在本院治療的燒傷殘余創(chuàng)面患者64例作為研究對象。男34例,女30例,年齡25~62歲,平均(36.48±9.21)歲。64例患者燒傷面積占體表面積的25%~65%,燒傷深度為Ⅱ~Ⅲ度,病程1~5個月。20例高溫液體燙傷,8例高溫金屬燙傷,31例火焰?zhèn)?例水泥燒傷,2例電燒傷。所有患者經(jīng)過檢查有9例合并高血壓,8例合并糖尿病,19例合并重度營養(yǎng)不良性貧血,28例合并低蛋白血癥?;颊邿齻臍堄鄤?chuàng)面為體表面積的2%~10%,平均殘余面積為(7.2±2.1)%,密集或分散在軀干以及四肢。
1.2 方法 本次研究選擇同體對照研究的方法,在每一例患者的燒傷殘余創(chuàng)面中選擇兩塊形狀規(guī)則均一、面積大小相近以及燒傷程度相似的殘余創(chuàng)面分別作為試驗組和對照組,創(chuàng)面采取不同的治療方法。對照組殘余創(chuàng)面采取常規(guī)治療方法,先清洗消毒殘余創(chuàng)面,選用洗必泰溶液。將分泌物清理干凈后用無菌紗布印干,創(chuàng)面外涂EGF(重組人類表皮細胞生長因子),稍過片刻以便EGF干燥藥液不流失即可。創(chuàng)面用無菌紗布包扎固定好,換藥2次/d,醫(yī)護人員換藥過程中注意動作要輕柔,不要損傷創(chuàng)面造成流血影響創(chuàng)面的愈合。試驗組殘余創(chuàng)面采取貝復舒聯(lián)合愛可欣治療,同樣先用洗必泰溶液清洗創(chuàng)面,再用生理鹽水沖洗殘留分泌物,徹底清除干凈后用滅菌紗布吸干創(chuàng)面。將貝復舒凝膠(重組牛堿性成纖維細胞生長因子凝膠,國藥準字S19991022,珠海億勝生物制藥有限公司生產(chǎn))均勻涂抹在殘余創(chuàng)面,劑量按照400 IU/cm2標準操作。將愛可欣凝膠(粵食藥管械(準)字2005第2640025號(更),深圳愛杰特醫(yī)藥科技有限公司生產(chǎn))均勻涂抹在殘余創(chuàng)面,劑量標準按照0.5 g/cm2。創(chuàng)面涂藥后待藥物干燥后表面用單層凡士林紗布覆蓋,再用多層滅菌敷料包扎,患者每日換藥一次或者根據(jù)患者的病情變化調(diào)整換藥次數(shù),直至傷口愈合。兩組創(chuàng)面治療時間2~4周,用藥期間注意控制患者的血壓和血糖在正常范圍,對于合并低蛋白血癥和營養(yǎng)不良性貧血的患者治療期間注意給予營養(yǎng)支持。在兩組殘余創(chuàng)面第一次換藥前和第一次換藥后10 d取創(chuàng)面分泌物作細菌培養(yǎng)進行微生物學檢查。
1.3 觀察指標 觀察兩組創(chuàng)面的愈合效果。標準如下:患者殘余創(chuàng)面完全愈合,且愈合后表面光滑、平整、美觀,不影響患者日常社會生活功能的為痊愈;患者殘余創(chuàng)面愈合達80%以上,愈合后無膿性分泌物,且不影響患者日常社會生活功能的為顯效;患者殘余創(chuàng)面愈合達30%以上,愈合后無膿性分泌物或者有少量的膿性分泌物,對患者的生活產(chǎn)生一定影響的為有效;患者殘余創(chuàng)面愈合小于30%,愈合后有膿性分泌物,創(chuàng)面出現(xiàn)膿液和膿痂,對患者日常生活影響較大的為無效。總有效率=(有效+顯效+痊愈)/殘余創(chuàng)面總數(shù)×100%。統(tǒng)計并比較兩組殘余創(chuàng)面在治療后4、10、16、22 d后的創(chuàng)面回縮率,標準為創(chuàng)面回縮率=(用藥前創(chuàng)面面積-用藥后創(chuàng)面面積)/用藥前創(chuàng)面面積×100%。計算兩組殘余創(chuàng)面愈合時間以及細菌清除率。
1.4 統(tǒng)計學處理 應用SPSS 11.5軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學分析,計數(shù)資料采用 字2檢驗,計量資料以(x±s)表示,采用t檢驗,以P
2 結果
2.1 兩組殘余創(chuàng)面的平均愈合時間比較 試驗組殘余創(chuàng)面的平均愈合時間為(18.26±3.47)d,對照組為(29.35±4.86)d,兩組平均愈合時間比較差異具有統(tǒng)計學意義(P
2.2 兩組殘余創(chuàng)面治療后的臨床療效比較 試驗組64處殘余創(chuàng)面62處有效,總有效率為96.87%;對照組治療的64處殘余創(chuàng)面54處有效,總有效率為74.37%,兩組總有效率比較差異具有統(tǒng)計學意義(P
2.3 兩組殘余創(chuàng)面治療后4、10、16、22 d后的創(chuàng)面回縮率比較 兩組殘余創(chuàng)面治療4 d后的創(chuàng)面回縮率比較差異無統(tǒng)計學意義,治療10、16、22 d后的殘余創(chuàng)面回縮率比較差異具有統(tǒng)計學意義(P
2.4 兩組殘余創(chuàng)面細菌清除率比較 細菌培養(yǎng)檢查的菌種包括金黃色葡萄球菌、MRSA、表皮葡萄球菌、銅綠假單胞菌、摩根摩銀菌、大腸桿菌以及溶血性鏈球菌。試驗組殘余創(chuàng)面細菌清除率為78%;對照組為40%,兩組細菌清除率比較差異具有統(tǒng)計學意義( 字2=5.07,P
3 討論
燒傷的治療一般包括兩個方面,創(chuàng)面修復和維持內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定,維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定為患者的創(chuàng)面修復提供良好的恢復條件。燒傷治療的最終目的是達到創(chuàng)面的修復,創(chuàng)面修復與創(chuàng)面處理得當與否有直接關系,因此創(chuàng)面的處理在燒傷修復中起到至關重要的作用。燒傷創(chuàng)面的處理原則是盡量在最短時間內(nèi)閉合創(chuàng)面,完成再上皮化,其評價標準是保證愈合速度與愈合質(zhì)量相統(tǒng)一[4-5]。維持內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定主要是針對合并糖尿病、低蛋白血癥以及營養(yǎng)不良性貧血等癥狀的患者。由于燒傷創(chuàng)面前期創(chuàng)面消耗太多,常常伴有低蛋白血癥,影響創(chuàng)面的愈合質(zhì)量與速度,因此需要給予新鮮血漿和白蛋白糾正內(nèi)環(huán)境低蛋白現(xiàn)象。燒傷患者傷后蛋白質(zhì)的合成速度加快,但分解速度更快,導致蛋白質(zhì)的流失[6-7]。同時由于對燒傷患者早期未實施靜脈內(nèi)營養(yǎng),免疫力下降,胃腸功能減退,導致患者營養(yǎng)不良,應該給予一定的營養(yǎng)支持和適時的封閉創(chuàng)面。燒傷患者早期紅細胞由于熱損傷破壞增多,容量減少,造成貧血。燒傷后期紅細胞的損失相對減少,但是由于患者在治療期間的營養(yǎng)不良,一般比較容易出現(xiàn)營養(yǎng)不良性貧血[8]。應該及時為患者補充鐵劑、維生素C、維生素B6、維生素B12等造血所需物質(zhì),必要時也可靜脈輸注紅細胞,糾正貧血,保證紅細胞及血紅蛋白恢復到正常水平。血糖控制在創(chuàng)面修復中也是比較重要的,血糖過高影響創(chuàng)面的血運,局部組織缺血缺氧,外周微血管缺血,導致末梢神經(jīng)病變[9]。有效血糖可改善白細胞功能,修復細胞增殖,縮短創(chuàng)面愈合時間,提高創(chuàng)面愈合質(zhì)量。
燒傷殘余創(chuàng)面是指深度燒傷后期由于各種原因殘留的部分創(chuàng)面,其形成原因主要包括自體皮源不足,創(chuàng)面植皮間隙過大;創(chuàng)面為深Ⅱ度燒傷或取皮較深的供皮區(qū);創(chuàng)面有皮脂腺、汗腺殘留;各種細菌導致的頑固性感染[10-11]。臨床針對燒傷殘余創(chuàng)面治療的方式較多,本院采取同體對照貝復舒聯(lián)合愛可欣與常規(guī)治療殘余創(chuàng)面的研究結果顯示,貝復舒聯(lián)合愛可欣治療燒傷殘余創(chuàng)面可縮短創(chuàng)面愈合時間,提高創(chuàng)面的愈合質(zhì)量,更有效地控制細菌感染[12]。貝復舒主要成分中可釋放出銀離子和鋅離子,愛可欣與創(chuàng)面新生肉芽組織接觸后可釋放鋅離子,濃度達到一定程度后可通過細菌外膜到達靶位,與細菌的蛋白質(zhì)結合使其變性,與細菌的DNA雙螺旋鏈中的堿基結合抑制呼吸酶系統(tǒng)的酶活性,最終達到抑制甚至殺死細菌的目的[13-14]。銀離子屬于廣譜抗菌物質(zhì),且不會產(chǎn)生耐藥性,但促進創(chuàng)面愈合的能力相對較差。鋅離子可以為患者創(chuàng)面補充流失的鋅,促進創(chuàng)面上皮生長,加快創(chuàng)面愈合。鋅離子也可以通過破壞細菌DNA結構起到抑菌殺菌作用,鋅離子和銀離子作用相結合既能有殺菌抑菌作用,又能加快創(chuàng)面愈合。外用貝復舒可通過與相應受體結合促進組織修復過程中必須物質(zhì)的合成,使毛細血管內(nèi)皮細胞、成纖維細胞等增殖,加快創(chuàng)面愈合[15]。
綜上所述,貝復舒聯(lián)合愛可欣治療燒傷殘余創(chuàng)面療效顯著,有效抑菌殺菌,明顯縮短患者創(chuàng)面愈合時間,創(chuàng)面愈合后光滑平整美觀,提高了創(chuàng)面愈合的質(zhì)量,具有一定的臨床意義。
參考文獻
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【關鍵詞】
巖舒苦參注射液;非小細胞肺癌;化療
肺癌是一種常見的惡性腫瘤,其發(fā)病率呈逐年上升趨勢,而大部分非小細胞肺癌患者發(fā)現(xiàn)較晚,手術切除的機會明顯減少。因此,Ⅲ期非小細胞肺癌患者多采用全身化療、局部化療、中醫(yī)藥治療、免疫治療及放射治療等治療方法。有研究顯示,晚期非小細胞肺癌患者化療有效率為30%~40%,總生存期和平均生存期均有不同程度提高。中醫(yī)藥對腫瘤有一定增敏作用,可以明顯改善患者的臨床癥狀和生活質(zhì)量。我科自2005年8月至2010年7月,針對Ⅲ期非小細胞肺癌,在化療同時加用巖舒苦參注射液,取得了較好的臨床效果?,F(xiàn)報告如下。
1 材料與方法
1.1 臨床資料
143例非小細胞肺癌均經(jīng)病理組織學或細胞學檢查證實,年齡45~75歲,平均59.2歲。患者知情同意分為綜合治療組和單純化療組。綜合治療組72例,其中男48例,女24例;年齡47~75歲,平均60.5歲;其中腺癌35例,鱗癌25例,腺鱗癌10例,未分化癌2例;Ⅲa期18例,Ⅲb期22例,Ⅳ期32例。單純化療組71例,其中男47例,女24例;年齡45~70歲,平均57.3歲;腺癌38例,鱗癌22例,腺鱗癌8例,未分化癌3例;Ⅲa期20例,Ⅲb期26例,Ⅳ期25例。兩組患者均有可測量的病灶,預計生存期>3個月,卡氏評分[1]≥70分。兩組患者年齡、性別、病理類型分布及疾病分期等方面無明顯差別,具有可比性。
1.2 研究方法
綜合治療組:采用NC方案化療:長春瑞濱25 mg/m2,靜脈點滴,第1,8天;卡鉑300 mg/m2,第1天,21 d為1個周期,共用4個周期,均用昂丹司瓊進行止吐治療。化療同時靜脈滴注巖舒苦參注射液(山西振東制藥有限公司生產(chǎn))20 ml,1次/d,連用14 d,休息14 d。單純化療組:采用NC方案化療:長春瑞濱25 mg/m2,靜脈點滴,第1、8天;卡鉑300 mg/m2,第1天,21 d為1個周期,共用4個周期,均用昂丹司瓊進行止吐治療。所有患者每周查1次血常規(guī),出現(xiàn)骨髓抑制時,應用重組人粒細胞集落刺激因子(金磊賽強)提升白細胞治療。
1.3 觀察指標及療效評定標準
1.3.1 療效評價 根據(jù)WHO實體瘤的療效評價標準[2]分為完全緩解(CR),部分緩解(PR),無變化(NC),進展(PD),CR+PR為有效(RR)。
1.3.2 毒副反應 根據(jù)WHO抗癌藥物急性及亞急性毒副反應標準[3],分為0~Ⅳ度。每個周期評價毒副反應。
1.4 統(tǒng)計學方法 使用SPSS 10.0統(tǒng)計軟件進行分析,計數(shù)資料采用χ2檢驗,數(shù)據(jù)資料采用t檢驗,以P
2 結果
2.1 近期療效
綜合治療組和單純化療組的有效率分別為48.6%和45.1%(P>0.05),PD率分別是6.9%和15.5%(P
2.2 毒副反應 綜合治療組和單純化療組患者在骨髓抑制、胃腸道反應、腎功能異常方面比較,差異有統(tǒng)計學意義(P
3 討論
長春瑞濱為半合成的第三代長春新堿類抗腫瘤藥物,通過阻斷微蛋白形成微管和誘導微管的解聚,使有絲分裂停留在中期而發(fā)揮抑制腫瘤細胞分裂的作用。長春瑞濱在肺中的含量較高,對非小細胞肺癌的療效也較高。長春瑞濱聯(lián)合卡鉑可使患者的骨髓抑制加重,尤其是白細胞和中性粒細胞下降幅度較大,出現(xiàn)Ⅲ,Ⅳ度骨髓抑制,限制了化療藥物的使用劑量,因此,對該化療方案的減毒增效研究具有非常重要的意義。近年來的研究已經(jīng)證實,通過中藥減毒作用可使化療充分發(fā)揮抗癌效能,增強抗癌能力,抑制腫瘤轉(zhuǎn)移[4]。
巖舒苦參注射液是從苦參,黃芪,丹參等抗癌中草藥中提取水溶液成份而成。中醫(yī)認為,苦參寒味苦,有清熱解毒,抑制腫瘤細胞生長,誘導某些腫瘤細胞向正常細胞分化和促進凋亡作用,為抗腫瘤常用中藥。氧化苦參堿可抑制細胞進入S期,從而使細胞在G1期堆積,使腫瘤細胞的增殖速度受到抑制,還可促進G2期細胞進入M期;提示該藥不宜與周期特異性藥物合用,若與周期非特異性藥物聯(lián)用,則可提高療效。氧化苦參堿能夠誘導荷瘤小鼠肝細胞微粒體細胞色素活性,提高化療藥物的活性,從而與其產(chǎn)生協(xié)同作用。經(jīng)過不同濃度氧化苦參堿作用后的肺癌細胞條件培養(yǎng)液對血管內(nèi)皮細胞增殖有不同程度的抑制作用。本研究結果表明,綜合治療組患者在胃腸道反應和血液學毒性方面,較單純化療組明顯減輕,綜合治療組KPS評分提高率和生存質(zhì)量的改善較單純化療組差異有統(tǒng)計學意義(P
總之,復方苦參注射液輔助NC方案治療Ⅲ期非小細胞肺癌,可明顯減輕患者的不良反應,提高患者的生活質(zhì)量,值得推廣應用。
參 考 文 獻
[1] 周際昌.實用腫瘤內(nèi)科學.人民衛(wèi)生出版社,2005:4548.
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【關鍵詞】結腸癌;血管生成;血管生成抑制劑;Canstatin蛋白
Efficacy of recombinant canstatin protein plus fluorouracil in treatment of colon cancer
MA YAN,WANG Li,JIAO Dong-xiao,et al.The First Affiliated Hospital of Nanhua University,Hunan421001,China
【Abstract】 Objective To study the anti-tumor effects of recombinant canstatin protein plus 5-fluorouracil(5-FU)on colon cancer in order to develop a new treatment modality.Methods Tumor xenografts were established by subcutaneous inoculation of 1×107 SW-480 colon cancer cells into the right flanks of 30 nude mice.When the tumors reached 2~3 mm in diameter,mice were randomly divided into 6 groups.All the agents were injected intraperitoneally.During the treatment,the subcutaneous tumors were measured by compasses and caliper every 3 or 4 days.At the end of the experiment,all the tumors were resected and both routine pathological and immunohistochemical staining examinations were performed to observe the drug toxicity and intratumoral microvescular density(MVD).Results ①In every treatment group tumor growth was suppressed significantly.Intraperitoneal injection of canstatin low-dose group,canstatin high-dose group,5-FU group,5-FU group+ low-dose canstatin group,5-FU group+ high-dose canstatin group resulted in a significant inhibition of the growth of SW-480 in vivo compare with that of control group(P
【Key words】Colon cancer;Angiogenesis;Angiogenesis inhibitors;Canstatin protein
結腸癌是一種嚴重危害人類健康的惡性腫瘤,全球流行病學調(diào)查結果顯示,大腸癌的發(fā)病率居肺癌、乳腺癌之后占第三位,近年各地資料顯示其發(fā)病率呈逐年上升趨勢,嚴重威脅著人們的健康與生命[1,2]。隨著分子生物學的發(fā)展,利用DNA重組和基因轉(zhuǎn)移技術的結腸癌基因治療成為極有發(fā)展前景的治療方法。在迄今發(fā)現(xiàn)的的多種抗腫瘤藥物中,血管生成抑制劑以其顯著的抗腫瘤效果吸引了眾多的研究,Canstatin是繼血管抑素和內(nèi)皮抑素后新發(fā)現(xiàn)的一種內(nèi)源性血管生成抑制劑[3-6]。 體內(nèi)外實驗表明,Canstatin具有抑制新生血管生成,抑制異種移植人前列腺癌和人腎癌的生長的作用,療效甚至強于內(nèi)皮抑素,引起人們普遍關注。但是,Canstatin對人結腸癌的作用如何,尚未見報道,其與傳統(tǒng)化療藥物聯(lián)合應用的療效亦有待闡明。筆者在既往研究中,成功克隆了Canstatin基因[7],并表達出活性重組人Canstatin蛋白,在此基礎上,筆者探討了Canstatin蛋白聯(lián)合化療藥物5-FU治療結腸癌的療效,旨在探索結腸癌治療新途徑。
1 材料和方法
1.1 試驗動物、細胞株、藥品及試劑 SPF級BALB/c裸鼠30只,4周齡,體質(zhì)量16~18 g,購自中國藥品生物制品檢定所(合格證:京質(zhì)字0052997)。SW-480結腸癌細胞系購于美國ATCC公司,南京凱基公司提供,單層貼壁生長,集落形成率為40%,裸鼠致瘤性為100%。5-FU購自江蘇南通精華制藥有限公司,CD31抗體購自北京中杉金橋生物公司。
1.2 動物模型的建立 將已培養(yǎng)好基本長滿瓶壁的SW-480結腸癌細胞棄培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,用平衡鹽溶液(PBS)沖洗培養(yǎng)瓶2次,加入體積分數(shù)為0.25的胰蛋白酶數(shù)滴消化,將消化好的細胞吸入離心管內(nèi),600 轉(zhuǎn)/min的離心機離心6 min,棄上清,加入不含小牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)基3 ml,吸管吹打混勻(取適量計數(shù)細胞)再離心,棄上清,按每只裸鼠皮下接種細胞數(shù)2.5×1019/L,再加入無血清RPMI-1640培養(yǎng)基,供裸鼠皮下接種用。準備好的SW-480細胞懸液經(jīng)臺盼藍染色活細胞數(shù)占0.95以上,按每只0.2 ml SW-480細胞懸液注射于消毒后的裸鼠皮下,觀察腫瘤移植成功率。
1.3 試驗分組 30只小鼠皮下移植處均成瘤,接種4 d后隨機分成6組(每組5只)。①對照組(生理鹽水0.3 ml/kg);②Canstatin低劑量組(1 mg/kg,用藥3周);③Canstatin高劑量組(10 mg/kg,用藥3周);④5-FU組(5-FU 12.5 mg/kg,用藥5 d);⑤聯(lián)合5-FU+Canstatin低濃度治療組(5-FU 12.5 mg/kg,用藥5 d加Canstatin 1 mg/kg,用藥3周);⑥聯(lián)合5-FU+Canstatin高濃度治療組(5-FU 12.5 mg/kg,用藥5 d加Canstatin 10 mg/kg,用藥3周),以上組別均采用隔天腹腔注射給藥,療程3周。
1.4 觀察指標和方法 用圓規(guī)和游標卡尺測量皮下移植瘤長短經(jīng)。按通用公式[V(mm3)=長×寬2×0.52]計算腫瘤體積V。計算瘤重抑制率,瘤重抑制率/%=[1-(試驗組平均瘤重/對照組平均瘤重)] ×100%。合并用藥效果根據(jù)文獻[8]提供的金氏公式求出q值進行判斷。q=Ea+b/(Ea+Eb-Ea×Eb),Ea+b為兩藥合用的抑制率,Ea和Eb為各藥單用的抑制率,若q
1.5 光鏡觀察及免疫組化 無菌條件下取出腫瘤組織,稱重,以40 g/L甲醛固定。 為觀察藥物毒性反應,同時取出實驗動物的心、肝、胃、胰腺、腸等組織以40 g/L甲醛固定。免疫組化染色采用鏈霉素抗生物素蛋白-過氧化酶法。鏡下微血管計數(shù)分級方法參照Wender等[9]的方法,先在低倍光鏡下(40倍)確定腫瘤內(nèi)新生血管最密集區(qū)作為“熱點”,進行血管計數(shù),然后在高倍鏡視野(200倍)計數(shù)5個視野,每個視野的血管平均數(shù)為該切片的MVD值。
1.6 統(tǒng)計學方法 計數(shù)資料數(shù)據(jù)采用均數(shù)±標準差(x±s)表示,采用SPSS 13.0軟件,單向方差分析(One-way ANOVA)進行樣本均數(shù)間多重比較,兩兩比較用非配對t檢驗。
2 結果
2.1 裸鼠體內(nèi)成瘤情況 自接種后第5天,所有裸鼠均可見接種部位小結節(jié),約5 mm×5 mm大小,隨后結節(jié)逐漸增大,至第10天,約7 mm× 7 mm。42只裸鼠全部成瘤,成瘤率達100%。
2.2 各組藥物對裸鼠皮下移植瘤生長的影響 試驗結束后,各用藥組瘤質(zhì)量及瘤體積明顯低于對照組(P
2.3 各組藥物對裸小鼠毒性的影響 用藥期間,各治療組小鼠均未逐漸出現(xiàn)精神不振、食欲下降、消瘦等表現(xiàn),未見明顯不良反應。療程結束時,Canstatin治療組和5-FU治療組與對照組相比較,小鼠體質(zhì)量差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),聯(lián)合治療組小鼠體質(zhì)量高于對照組,差異有統(tǒng)計學意義(P
2.4 移植瘤組織的病理形態(tài)學觀察 試驗結束后,進行移植瘤組織病理學切片,光鏡下均可見癌組織,癌細胞圓形或橢圓形,核大,核仁明顯,病理分裂核多見,癌細胞被纖維組織分割成大小不等的癌巢,其間可見腺管、腺腔樣結構。
2.5 免疫組化改變 療程結束時,病理切片經(jīng)免疫組化染色,以5個高倍視野計算,各試驗組MDV分別是:A組36.4±5.6; B組 31.2±4.0;C組28.2±3.7; D組25.0±4.8;;E組 22.6±3.6;F15.0±2.8 。見圖2。
3 討論
長期以來,對于結腸癌的治療的實驗研究,以往主要集中在對腫瘤細胞本身的抑制或殺滅作用的研究,但由于腫瘤細胞的異質(zhì)性、遺傳不穩(wěn)定性和易產(chǎn)生耐藥的特點,目前為止,尚未取得滿意效果。自1971年,Folkman[10]首次提出,腫瘤生長依賴于新生血管形成,而后大量研究證實:腫瘤生長經(jīng)歷兩個階段:血管前期和血管期,在腫瘤血管前期,腫瘤細胞主要依賴彌散作用獲取營養(yǎng),當腫瘤生長至1~2 mm3、細胞數(shù)達到107左右時,其繼續(xù)生長就必須要由新生血管來提供足夠的氧氣及營養(yǎng)物質(zhì)[11]。同時,腫瘤細胞還可通過新生血管向周圍組織浸潤和遠處轉(zhuǎn)移,在繼發(fā)部位形成轉(zhuǎn)移灶,而轉(zhuǎn)移灶的繼續(xù)生長和轉(zhuǎn)移仍然需要新生血管[12]。因此針對腫瘤血管的“抗血管生成療法”近年被廣泛應用于這一領域的研究,天然多肽類血管生成抑制劑以其高效、低毒、不易產(chǎn)生耐藥等特點成為研究熱點。
Canstatin是新近發(fā)現(xiàn)的一種內(nèi)源性血管生成抑制劑,其蛋白的相對分子量約為24 KD,它是Ⅳ型膠原α2 鏈NC1 區(qū)的功能域,最新研究表明:Canstatin作為膠原來源的內(nèi)源性血管生成抑制因子,可劑量依賴性抑制內(nèi)皮細胞管結構形成,有效抑制內(nèi)皮細胞增殖和轉(zhuǎn)移,且能誘導內(nèi)皮細胞凋亡。其抑制腫瘤生長的效力可能超過內(nèi)皮抑素[13]。李玉英等其在體外抑制血管內(nèi)皮細胞增生的半數(shù)有效劑量(ED50)是內(nèi)皮革抑素的1/3[14],顯示了其強大的抗血管生成作用。
本研究表明,Canstatin 10 mg/(kg•d),腹腔注射,治療第10天起,腫瘤體積顯著低于對照組,第21天時,抑瘤率達52.98%。 而治療期間,整個治療用藥過程中小鼠活動良好,未見脫毛、腹瀉等明顯毒副作用。而隨著Canstatin蛋白濃度的增加,抑瘤率明顯增加,由30.02%到52.98%。 Canstatin治療組小鼠體質(zhì)量與對照組相比差異無統(tǒng)計學意義。 免疫組化結果顯示,Canstatin治療組高濃度組小鼠腫瘤內(nèi)MVD顯著低于對照組(P
另外,本實驗研究結果表明,聯(lián)合治療組療效最好,自第3天起,移植瘤瘤重及體積顯著小于對照組(P
化療藥對腫瘤細胞本身具有殺傷作用,而血管生成抑制劑通過抑制腫瘤新生血管形成,切斷腫瘤繼續(xù)生長的營養(yǎng)來源產(chǎn)生抗瘤效應。 而且參照Folkman對腫瘤抗血管生成提出的 “誘導休眠”理論,抗血管生成治療使腫瘤體積縮小到一定程度,當腫瘤生長不再依賴新生血管時,腫瘤便蟄伏起來。但若和細胞毒藥物聯(lián)合使用,則有可能徹底殺死腫瘤細胞。療程結束時,聯(lián)合治療組小鼠體質(zhì)量甚至略高于對照組,經(jīng)統(tǒng)計學檢驗差異有統(tǒng)計學意義(P
總之,筆者的研究證實,重組人Canstatin蛋白能有效抑制人結腸癌生長,其作用機制是抑制腫瘤新生血管形成,與細胞毒藥物聯(lián)合應用,能顯著增強抗腫瘤效果,且不增加對機體的毒副作用,為結腸癌綜合治療開辟了新的途徑,有良好的應用前景。
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