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關鍵詞:紅細胞 白細胞 顯微鏡檢查
Doi:10.3969/j.issn.1671-8801.2014.03.547
【中圖分類號】R9 【文獻標識碼】B 【文章編號】1671-8801(2014)03-0353-01
尿液檢查是診斷腎臟疾病和泌尿道疾病的重要方法。隨著醫(yī)學技術的發(fā)展,尿干化學法因其靈敏度高、快捷、標本用量少、重復性好等優(yōu)點,已逐步在基層醫(yī)院普及。但是尿干化學法還不能完全替代顯微鏡檢查。在一些情況下,如管型、紅細胞、白細胞等可能導致假陽性或假陰性。這兩種方法均為臨床上常用的檢測方法,各有其優(yōu)點及不足。本文分別用干化學法顯微鏡檢法對180例尿樣進行檢測,以探討尿液檢驗中顯微鏡檢查尿液紅細胞、白細胞的重要性。
1 材料與方法
1.1 樣本來源。取自住院患者晨尿中段尿液樣本160份,進行尿干化學分析和顯微鏡檢。
1.2 檢測儀器。采用優(yōu)利特-500B尿液干化學分析儀和配套尿11項試紙;Olympus光學顯微鏡。
1.3 檢測方法。按照《全國臨床檢驗操作規(guī)程》第三版進行操作,用一次尿杯留取晨尿約30mL,取10mL置于特制的塑料離心管中,將試紙條浸入2s后取出,放于分析儀上作干化學檢測。完畢后將尿液于1500r/min離心5min,棄去上清,剩余0.2mL左右,混勻,先用低倍鏡觀察全片,再以高倍鏡仔細觀察,并計數(shù)每個視野內紅細胞、白細胞的數(shù)目,記錄方式為:×個細胞/HP,×個管型/LP。
1.4 參考范圍及結果判定。連續(xù)鏡檢10個視野:WBC:0~5個/HP,RBC:0~3個/HP,超出此范圍則判定為陽性。假陰性:干化學法正常,鏡檢異常。假陽性:干化學異常,鏡檢正常。
1.5 統(tǒng)計學方法。采用SPSS16.0軟件包進行統(tǒng)計學分析。組間的陽性率比較采用X2檢驗,以P
2 結果分析
對180例尿液樣本進行干化學法和顯微鏡法檢驗分析。干化學法RBC陽性94例,占58.75%,顯微鏡法陽性63例,占39.38%,差異具有統(tǒng)計學意義(X2=2.532,P
3 討論
3.1 目前,干化學法尿液分析儀以其方法簡捷、檢測快速、靈敏度高、重復性較好,一般可檢測10項及以上等優(yōu)點而被廣泛地應用。但由于干化學分析儀原理是試劑帶墊呈色反應與光、電學相結合而檢測紅細胞和白細胞,從而對有形成分的檢測具有一定局限性。由于尿液成分復雜,干化學項目繁多,其檢測原理各不相同,所以影響因素很多,易出現(xiàn)假陰性和假陽性結果;而尿沉渣鏡檢雖操作繁瑣,但標準化的顯微鏡檢查仍是尿沉渣分析的“金標準”,其通過顯微鏡的放大作用,直接將紅細胞、白細胞等有形成分直觀、真實地呈現(xiàn)于鏡下。
3.2 干化學法檢測紅細胞原理:血紅蛋白類過氧化物作用催化分解過氧化物,釋放出氧使鄰聯(lián)甲苯胺氧化而呈色。其色澤的深淺與尿中的血紅蛋白或紅細胞量呈正比。多數(shù)情況下可以真實反映尿中紅細胞的情況,但某些情況下與鏡檢結果不一致。尿路感染而出現(xiàn)的分泌物和某些氧化物的污染如次氯酸鹽可引起干化學法假陽性,一些疾患如腎病引起尿中紅細胞破壞、溶血性疾病導致血紅蛋白尿等都能產(chǎn)生假陽性。尿液pH值低、比重低、放置時間長,尿中紅細胞就會開始溶解,也會導致假陽性結果產(chǎn)生。維生素C具有還原性,可競爭性抑制反應,若尿中含有大量的維生素C,可使干化學法檢測紅細胞呈現(xiàn)假陰性。
3.3 對于白細胞的檢測而言,干化學法的檢測原理是基于中性粒細胞胞質內含有特異性酯酶,而這種酯酶在紅細胞、淋巴細胞、單核細胞、血小板、血清、腎臟及尿液中均不存在,試紙反應基質是吲哚酚羥基酸酯,在酯酶作用下將其轉變?yōu)檫胚岱樱俳?jīng)氧化而產(chǎn)生靛藍,以其顏色深淺換算成白細胞數(shù)。但這只能檢測胞質內含酯酶的粒細胞,而不與淋巴細胞和單核細胞反應。因此,當尿液中只有淋巴細胞或單核細胞時,對淋巴細胞和單核細胞會漏診,從而產(chǎn)生假陰性結果。
本文研究結果顯示,干化學法尿液白細胞陽性率為23.15%,低于顯微鏡檢尿液白細胞的35.62%,差異具有統(tǒng)計學意義(X2=3.218,P
3.4 要加強尿常規(guī)檢測的規(guī)范化和標準化,必須把干化學法和尿沉渣鏡檢結合起來,相互補充,如果兩種方法結果明顯不符,必須結合臨床綜合分析,只有這樣才能提高尿液檢測的準確性,為臨床提供準確的診斷和治療依據(jù)。通過本研究證實,兩種操作方法有各自的優(yōu)缺點,只有將兩種方法有機結合,綜合分析,才能提高尿液檢測的準確性和可靠性,為臨床提供準確的參考、診斷和治療依據(jù)。
4 結語
尿液紅細胞、白細胞的檢查對腎疾病的檢測有重要意義,是泌尿系統(tǒng)疾病必不可少的診斷手段之一。目前,無論多么先進的尿分析儀,都無法完全取代尿液的顯微鏡檢查,而只能起到篩出的作用。中華醫(yī)學會多次專家研討之后也指出:在化學試劑帶的質量合格和尿液分析儀運轉正常的情況下,實驗結果中紅細胞、白細胞、蛋白和亞硝酸鹽中若有一項結果為陽性,就必須同時進行顯微鏡檢查。這表明了顯微鏡檢查是尿常規(guī)檢查中不可或缺的,也無法替代。只有結合顯微鏡檢查,才能提高尿液檢查的準確度和靈敏度,從而為臨床診斷及治療提供準確的依據(jù)。
參考文獻
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【關鍵詞】 顯微鏡紅細胞計數(shù); 尿液分析儀潛血檢驗; 假陽性率; 假陰性率
中圖分類號 R446.12 文獻標識碼 B 文章編號 1674-6805(2016)1-0064-02
doi:10.14033/ki.cfmr.2016.1.035
患者進入醫(yī)院門診后需要進行血、尿常規(guī)的檢測,在尿常規(guī)中潛血檢查有著非常顯著的重要性。常用的潛血檢查法有如下兩種,一種是借助尿液分析儀進行潛血檢查,另一種是借助顯微鏡檢驗紅細胞計數(shù)[1]。這兩種方法各有優(yōu)缺點,尿液分析儀法的優(yōu)點是操作簡單快捷,缺點是容易受到諸多因素干擾;鏡檢RBC法可靠直觀,可以直接分辨出血尿的來源是否為腎小球,缺點是操作難度大、耗費時間長。本研究選擇尿液分析儀法和鏡檢RBC法,試探析兩者在臨床診斷中的價值表現(xiàn)。
1 資料與方法
1.1 一般資料
擇取2013年6月-2014年6月在筆者所在醫(yī)院接受尿液潛血檢驗的160例患者,其中男88例,女72例。年齡最小的11歲,年齡最大的75歲,平均(42.58±4.67)歲。所屬門診科室的分布為:兒科16例、外科32例、婦科44例、內科68例。將這160例患者按照隨機數(shù)字表法分為兩組,分別給予不同檢驗方法,借助尿液分析儀行以潛血檢驗(簡稱尿液分析儀)的80例患者歸入研究組,借助顯微鏡行以紅細胞計數(shù)(簡稱鏡檢RBC)的80例患者歸入對照組。兩組患者基線資料,年齡、所屬科室分布以及性別構成比等差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05),具有可比性。
1.2 檢測方法
研究組:采取尿液分析儀法進行潛血檢驗。取患者晨尿10 ml,將其置入干凈的試管內,取試紙,將其完全浸入患者尿液標本,1 s后將試紙取出,將其放置到尿液分析儀上進行潛血檢查。
對照組:采取鏡檢RBC法進行潛血檢驗。取患者晨尿10 ml,將其抽吸到離心試管中,并行以時長為5 min、轉速為1500 r/min的離心處理。離心后將上清液撇除,將0.2 ml的沉渣液留下,混合攪拌均勻后將其置于載玻片上,并將蓋玻片覆蓋其上。再使用顯微鏡進行紅細胞觀察。在觀察過程中,顯微鏡的倍數(shù)逐漸加大,以保證切實地觀察到標本中是否存在紅細胞。
1.3 觀察指標
統(tǒng)計兩種方法的檢測結果并進行陰性率與陽性率的對比。將鏡檢RBC法結果設為基準,對比尿液分析儀法結果的假陰性率及假陽性率。
1.4 統(tǒng)計學處理
采用SPSS 19.0軟件對所得數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析,計量資料用均數(shù)計數(shù)資料比較采用字2檢驗,P
2 結果
2.1 兩組方法檢查結果對比
研究組80例患者在行以了尿液分析儀檢驗后,其陽性率為32.50%,陰性率為67.50%。對照組80例患者在行以了鏡檢RBC的檢驗后其陽性率為25.00%,陰性率為75.00%。經(jīng)對比,尿液分析儀法陽性率更高,鏡檢RBC法陰性率更高,但綜合看來,兩種方法的檢測結果比較差異均無統(tǒng)計學意義(字2=1.10,P>0.05),具體見表1。
2.2 假陰性率及假陽性率的對比
以鏡檢RBC法的檢測結果作為基準來對比尿液分析儀法的假陰性率及假陽性率,分別為13.33%和10.00%,具體見表2。
3 討論
3.1 鏡檢RBC法
這種方法依托于顯微鏡的方法功能,對患者尿液沉渣中含有的紅細胞計數(shù)進行最為直觀的檢查。鑒于直觀這一特色,可以直接判別患者的血尿原因是否為腎小球疾病所導致。由于該方法可以實現(xiàn)對紅細胞的準確計數(shù),因此在尿液紅細胞檢測中一直為視為“金標準”,其優(yōu)越性無法被尿液分析法頂替[2]。然而,鏡檢RBC法也有著非常明顯的缺點。在進行高倍顯微觀察之前,必須經(jīng)歷復雜的離心操作與玻片制備操作,工作量較大、難度也較高。顯微鏡倍數(shù)的調節(jié)需要緩緩進行,因此所耗費的檢查時間也比較長。對于血尿病因是否為腎小球性的判斷,也必須由專業(yè)人員進行判別。若操作人員經(jīng)驗不足或專業(yè)性不夠,則很可能造成檢測結果出現(xiàn)較大的誤差,從而影響到患者的檢測結果[3]。
3.2 尿液分析儀法
本方法主要借助于對試紙的變色狀況進行分析。本研究所選用的試紙其成分包括過氧化氫茴香素,而尿中的血紅蛋白則含有亞鐵血紅素,其遇到過氧化氫酶將會出現(xiàn)活性上的變化[4]。將試紙放入尿液標本中,這兩種成分密切接觸,就會使茴香素發(fā)生分解反應,產(chǎn)生出游離氧,游離氧再與鄰甲苯胺發(fā)生氧化反應,鄰甲苯胺便會出現(xiàn)顏色變化。試紙變化后的顏色與血紅蛋白含量密切相關,血紅蛋白含量低則試紙呈黃色;血紅蛋白含量較高,則試紙呈深藍色。即隨著含量增加,試紙顏色從黃色過渡到綠色,再過渡到藍色。
本方法的優(yōu)點在于操作簡單迅速,不必進行復雜的離心操作,難度要比鏡檢RBC法低得多。操作人員也不必是專業(yè)水平非常高的醫(yī)師,要比鏡檢RBC法省時省力得多。當然,尿液分析儀法的缺點也比較顯著,即受干擾性非常高,外界的各種因素都會使得檢測結果出現(xiàn)不同。
以下幾種情況可能導致檢查結果出現(xiàn)假陽性:(1)患者發(fā)生心肌損傷或者骨骼發(fā)生嚴重傷害,血漿中肌紅蛋白水平將會明顯升高,而肌紅蛋白與尿液中的血紅蛋白一樣,遇到過氧化酶其活性將會增加,使得檢查出現(xiàn)假陽性結果。(2)患者發(fā)生尿路感染,會使尿液中的細菌產(chǎn)生氧化物,氧化物與試紙發(fā)生反應,就會使檢查結果呈現(xiàn)出假陽性。(3)第三種情況是尿液標本沒有及時送檢,存放時間超過2 h;或者標本放置的環(huán)境溫度過高,都會使?jié)撗Y果呈現(xiàn)出(假)陽性。(4)尿液標本保存不當,進入或存在一些會導致檢查結果為(假)陽性的成分。如外來的氧化物、尿液中本來就存在的無法耐受高溫的酶等。(5)試紙受到了污染或者超過使用期限,也會使檢測結果為(假)陽性。而如下兩種情況則會使檢測結果呈現(xiàn)為(假)陰性:(1)尿液中黏液成分過多,紅細胞被其包裹起來,試紙放入這樣的尿液標本中,血紅蛋白無法與試紙直接接觸,尿液將呈現(xiàn)出(假)陰性結果。(2)第二種情況是尿液中維生素C的含量過高,會對茴香素分解產(chǎn)生的游離氧進行優(yōu)先反應,鄰甲苯胺得不到游離氧的接觸,自然無法呈色,這時檢查結果就會變成(假)陰性[5]。
鑒于鏡檢RBC具有更高的準確率,本研究暫以鏡檢法結果作為基準,將尿液分析儀法的檢驗結果與其對照。通過對照可以發(fā)現(xiàn),尿液分析儀法的假陰性率和假陽性率分別為13.33%和10.00%,仍在可允許范圍內。雖然其準確率稍低于鏡檢法,但因其操作簡單的特點,可以將其用于機關單位的普通體檢。若患者需要復診或確診,則需要在尿液分析儀法的基礎上聯(lián)合使用鏡檢RBC法,這樣可以確保診斷的準確,避免誤診和漏診的情況[6]。
綜上所述,門診為患者行以尿常規(guī)的尿液潛血檢測,優(yōu)作較難的鏡檢RBC法。選操作簡單的尿液分析儀法,若患者有復診與確診的需要,則可聯(lián)合應用準確率更高但操作較難的鏡檢RBC法。
參考文獻
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【關鍵詞】 臨床免疫學; 免疫檢驗; 實踐; 探索
臨床免疫學是免疫學與臨床醫(yī)學的重要連接環(huán)節(jié)。免疫學檢驗是以免疫學原理為基礎,利用各種具有敏感特性的標記技術,對各種病理和生理的免疫學指標行特異性、超微量地分析,包括細胞的、體液的診治及預后評估[1]。就免疫學檢驗進行準確定位,是臨床醫(yī)生依據(jù)檢驗結果對疾病進行診治和防控的有效技術手段,具有非常重要的研究價值。本文就臨床免疫學和免疫檢驗的相關實施與探索進行綜述如下。
1 臨床免疫學概念
臨床免疫學屬重要的免疫學分支部分,為免疫學應用到臨床醫(yī)學的途徑。免疫學技術的發(fā)展和進步與臨床免疫學技術的發(fā)展進步有著密切相關性,為臨床及時、科學的應用免疫學新技術,在疾病的治療、監(jiān)測、確診、預后中均發(fā)揮重要的引導及參考作用[2]。隨著醫(yī)療科技的不斷進步,臨床上多種免疫學技術已被普遍開展應用,如流式細胞式和免疫細胞檢測及分類技術、血清蛋白電泳技術及各種肽類物質、激素、細胞因子、腫瘤標志的檢測技術等[3]。隨著目前檢驗項目在臨床的不斷增多,臨床醫(yī)務人員及患者自身都對臨床檢驗有更高的期待和要求,各種免疫學技術均需緊跟醫(yī)療科技發(fā)展步伐,更全面、迅速的發(fā)展,以盡快的與臨床應用適宜,進而開展臨床免疫學技術的嶄新局面。
2 臨床免疫學促進新技術發(fā)展
技術的產(chǎn)生、發(fā)展和創(chuàng)新基礎均需有相應的理論,如PCR技術、分子克隆技術等均為遺傳學或分子生物學重要的具有劃時代意義的技術。而這些技巧中,理論基礎為DNA的雙螺旋。同時免疫學的抗體理論與抗原對多種臨床免疫學新技術的產(chǎn)生也起到了推動作用,如標記技術、沉淀、凝集等的發(fā)展進展[4]。近年來,受細胞生物學、分子生物學的不斷滲透及免疫學的飛速積習難改展,使免疫學在理論上獲得了較大的突破。
3 臨床免疫學新技術發(fā)展特點分析
3.1 多學科交融 臨床免疫學經(jīng)典技術包括免疫標記技術、溶血技術、中和技術、沉淀技術、凝集技術等。以上技術為臨床免疫學基礎,在臨床免疫學傳統(tǒng)及現(xiàn)代的理論中均占有較重要的地位。以上技術或其基礎上發(fā)展創(chuàng)新的技術至今仍在科學研究和臨床檢驗中廣泛應用。但生命科學在不斷發(fā)展,不同學科間漸較難明確區(qū)分和界定,形成廣泛的滲透和交叉的局面,而遺傳學和分子生物學的適體技術、分子雜交技術、PCR技術、染色質沉淀技術等免疫學新技術,使免疫應用范圍和理論不斷拓展。另外,臨床免疫檢驗中,組織學、細胞學中的顯微鏡技術也為一項重要的技術手段。如由普通顯微鏡與免疫組織化學技術聯(lián)合對抗原進行檢測,自身抗體采用熒光顯微鏡與熒光標記技術聯(lián)合進行檢測。且電子顯微鏡對細胞間的相互作用和免疫細胞的行為可直接行動態(tài)觀察。以上技術的應用,使臨床免疫學技術得到了較大豐富,為發(fā)展提供了動力及方向[5]。同時免疫學檢測數(shù)據(jù)顯著多,用日益復雜,有效分析數(shù)據(jù)和正確應用結果顯得較為重要故臨床免疫學與生物信息學、醫(yī)學統(tǒng)計學等學科的合作與交流也漸趨深入。
3.2 高通量、智能化、自動化的免疫新技術 臨床免疫學檢測具有同步化、智能化、自動化的特點,與傳統(tǒng)手工操作有較大的區(qū)別,如微粒子酶免疫技術、電化學發(fā)學分析技術等,毛細管電泳技術也在臨床廣泛應用,目的,生物芯片技術使整個檢驗醫(yī)學檢測實現(xiàn)了大規(guī)模、平行化、高通量的要求。同時,組學技術、后基因技術、酶聯(lián)免疫斑點技術的研究也不斷深入,極大的滿足了臨床免疫學需要。
4 免疫學檢驗定義
4.1 臨床免疫學中免疫學檢驗為重要組織部分 以基礎免疫學理論作指導,臨床免疫學對免疫學方法及技術不斷創(chuàng)新,在對疾病研究,特別是自身免疫病、腫瘤、傳染病、血液病、免疫缺陷病、變態(tài)反應性疾病的病發(fā)機制、診治、預后評估中發(fā)揮著重要作用,屬免疫學分支學科,是基礎免疫學內容與臨床免疫學內容的中間環(huán)節(jié),為臨床醫(yī)師對疾病進行研究的相關技術方法。
4.2 免疫學檢驗的相關定義 依據(jù)免疫學原理,特別是抗體與抗原反應原理,對各種敏感標記進行利用,如熒光素、發(fā)光物質、放射性同位素等,特異地、超微量的對各種病理和生理免疫學指標進行分析,包括細胞的和體液應用,行疾病診治和評估的一組醫(yī)學臨床檢驗項目[6]。其要點為即對抗原抗體反應原理加以利用,又可對免疫學參數(shù)的各種內容進行檢測。
5 免疫學檢驗存在的問題
5.1 定位 目前,有一定數(shù)量的醫(yī)療單位中,尚未設立免疫學檢驗專業(yè),無專業(yè)的檢驗設備,無實驗室,無固定的專業(yè)的檢驗人員,免疫學檢驗中的一些項目被分散在微生物實驗室和生化實驗室進行檢驗,對專業(yè)的發(fā)展造成了一定影響。
5.2 質量管理分析 雖免疫學檢驗中大部分項目在各大醫(yī)學中已參加了國家衛(wèi)生部相關室間質量評估活動,但在對室內質量進行控制的環(huán)節(jié)中,仍較為薄弱。對于大部分免疫學檢驗項目,在質控品和標準品上,國內尚未做到有效統(tǒng)一,雖部分有供應,但項目不全,價格昂貴[7]。故多數(shù)試驗室質量控制不達標,導致檢驗質量不穩(wěn)定。目前,尚普遍存在試劑缺乏統(tǒng)一的現(xiàn)象,檢驗結果中的假陰性、假陽性較難杜絕,為質量管理及標準化檢查帶來了一定難度[8]。同時,專業(yè)的免疫學檢驗人員較少,缺乏高素質、高學歷的帶頭人,同時也缺乏嫻熟操作的技術人員[9]。此外,還存在研究內容與臨床缺乏有效結合等,在疾病診治中未發(fā)揮有效作用[10]。
6 發(fā)展建議
針對免疫檢驗的重要性,醫(yī)院領導和檢驗科需重視免疫學檢驗專業(yè)的設置,設備引進、項目定位和人員配備,加強培訓,建全室內質量控制[11],同時成立免疫檢驗學小組,就相關問題進行分析并制定解決方案,各級質量部分需加強參考品、質控品的管理,以提高檢驗效果,使臨床免疫學作用落到實處[12]。
7 小結
綜上,臨床檢驗為臨床免疫學的重要組成部分,各項技術的研發(fā)為臨床檢驗學發(fā)展提供了機遇,有效縮短了檢測時間,節(jié)約了樣本用量,實現(xiàn)了疾病準確、快速、無創(chuàng)的診斷。同時也需正視存在的困難,對復雜的數(shù)據(jù)行合理和有效的應用,以減輕患者負擔,控制成本。同時加強基礎研究的合作與交流,讓從業(yè)者加強各種技術的培養(yǎng)和學習,提高自身綜合素質,以滿足臨床免疫檢驗的要求。
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關鍵詞:凝聚胺技術;臨床輸血;檢驗;重要性;應用途徑
中圖分類號:R826.2+6 文獻標識碼:B 文章編號:1005-0515(2013)3-026-02
隨著臨床醫(yī)學的發(fā)展,輸血在醫(yī)學和搶救中起著極為重要的作用。輸血有治療和搶救生命的作用,同時會產(chǎn)生有害的作用,如何發(fā)揮輸血的有效治療作用,預防其有害作用,保證輸血安全,是臨床輸血的重要課題。
交叉配血試驗是輸血前必要的步驟,主要是檢查受血者血清中有無能破壞供血者紅細胞的抗體。主要目的是為了防止輸血后產(chǎn)生溶血性反應。盡可能確保對人和一個病人來說,輸了供血者的血不會引起有害反應,并且使紅細胞在輸注后能保持最長的存活時間[1]。
交叉配血實際上是檢查不配合性,使病人,獻血者血液之間沒有可測到的不相配合的抗原,抗體成分,試驗應在37°C下進行。試驗方法除作鹽水介質外,還有抗球蛋白試驗法、酶法、凝聚胺法或其改良法。在配血的任何步驟中均不產(chǎn)生溶血或凝集鮮血者的血液才能給予病人輸注[2]。
本文為了探討凝聚胺技術在臨床輸血檢驗中的重要性和應用價值,做一系列研究,現(xiàn)報告如下:
1材料和方法
1.1試劑和器材:凝聚胺試劑盒;生理鹽水;小試管;滴管;試管架;記號筆;顯微鏡;離心機。
1.2操作:供受者紅細胞用生理鹽水配成3-5%的細胞懸液。加樣量均為:血清100微升,紅細胞懸液50微升。取試管兩支,表明主側次側,主側管加受血者血清(血漿)1滴,和供血者3-5%紅細胞懸液(洗滌或不洗滌均可)1滴,次側管受血者3-5%紅細胞懸液加供血者血清(血漿)1滴。各加LIM溶液3滴,混合均勻后,再各加凝聚胺溶液1滴,并混合均勻,置室溫1分鐘或參照說明書,普通離心機1000轉離心15秒,然后把上清液倒掉,不要瀝干,讓管底殘留約0.1液體。輕輕搖動試管,目測紅細胞有無凝集,如無凝集,則必須重做。最后加入凝聚胺2滴,輕輕轉動試管混勻并同時觀察結果。
1.3結果判定:如果在30秒內(或按說明書)凝集散開,代表是由凝聚胺引起的非特異性聚集,配血結果相合;如凝集不散開,則為紅細胞抗原抗體結合的特異性反應,配血結果不想合。如反應可疑,可進一步倒在玻片上用顯微鏡觀察。
1.4注意事項:可以用EDTA抗凝血漿代替血清使用;若受血者血清含肝素,如洗腎患者,須多加4-6滴凝聚胺溶液以中和肝素;試劑使用前請放置至室溫平衡后再行操作。在冬天室溫極低的情況下進行交叉配血試驗操作,由于某些受血者血清中可能含有寒冷凝集素等因素,而導致假陽性的結果出現(xiàn),建議進行交叉配血試驗操作時室溫保持在22°C左右,不同的凝聚胺試劑盒操作方法各不相同,實驗時請嚴格按照說明書操作。離心后結果觀察注意事項,將試管呈30-45°C角拿在手上,細胞扣朝上,手腕輕輕用力,用液體去沖細胞扣,如果為陰性,則細胞成細沙狀沿試管壁流下,如果為陽性,細胞呈塊狀脫落細胞壁或呈齒狀沿試管壁留下。切不可用力使勁搖試管,那樣凝集顆粒會被搖散,弱凝集則會誤判為陰性[3]。
2結果
3討論
鹽水法原理:鹽水介質中紅細胞上的抗原決定族與相應抗體分子上的抗原結合位點結合,交叉連接形成肉眼可見的凝集塊。鹽水介質凝集試驗用于IGM抗體的檢出、鑒定、鹽水配血試驗以及用鹽水抗體鑒定的血型抗原,如ABO、MN、P等血型系統(tǒng)的抗原。當IGG抗A、抗B的濃度足夠大時,在鹽水介質里也能與相應的紅細胞發(fā)生凝集反應。
鹽水法只能檢出不相配合完全抗體,不能檢出不相配合的不完全抗體[4]。
凝聚胺交叉配血法的原理:凝聚胺分子是帶高價陽離子多聚季銨鹽,溶解后帶有很多正電荷可以中和紅細胞表面負電荷,有利于紅細胞凝聚,低離子強度溶液也能降低紅細胞的Zeta電位,可進一步增加抗原抗體間的吸引力。當血清中存在IGM或IGG類血型抗體時,與紅細胞發(fā)生緊密結合,此時加入枸櫞酸鹽解聚液以消除聚凝胺的正電荷,使IGM或IGG類血型抗體與紅細胞產(chǎn)生的凝集不散開;如果血清中不存在IGM或IGG類血型抗體,加入解聚液可使非特異性凝集消失[5]。
該法提高了凝集反應的速度,使原來在鹽水介質中不能凝集RBC的抗體發(fā)生凝集,提高反應靈敏度。用此法可以檢查出能引起溶血性輸血反應的幾乎所有規(guī)則與不規(guī)則抗體,適合于各類輸血病人的配血,目前此法已被廣泛應用,在一定程度上取代了傳統(tǒng)的鹽水測定法[6]。
通過17例標本血清抗體效價的測定,凝聚胺法的靈敏度較鹽水法的靈敏度高1-5個滴度。凝聚胺法的檢出率為70.6%,鹽水介質配血法的檢出率為52.9%,兩組對比具有統(tǒng)計學差異(P
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方法:尿分析儀法使用優(yōu)利特-300B型尿液分析儀及配套試紙條。尿沉渣鏡檢法按《全國臨床檢驗操作規(guī)程》操作。
結果:2817例尿液標本經(jīng)尿分析儀和尿沉渣鏡檢檢查結果均異常,即過篩實驗正確的例數(shù)為1180例,陽性率為42%。尿分析儀正常,尿沉渣鏡檢異常,即假陰性408例,假陰性率為14.48%;尿分析儀異常,尿沉渣鏡檢正常,即假陽性314例,假陽性率為11.15%。
結論:尿沉渣鏡檢法是診斷腎臟,泌尿系統(tǒng)相關疾病的重要指標。實驗室工作人員要認真對待,提高檢驗基本技能,降低漏檢率,為臨床診斷提供科學準確的依據(jù)。
關鍵詞:尿液分析儀法 尿沉渣鏡檢法 漏檢率
【中圖分類號】R9 【文獻標識碼】B 【文章編號】1671-8801(2013)10-0579-01
文章選取筆者所在醫(yī)院2010年2月至2013年6月2817例門診患者尿液標本經(jīng)優(yōu)力特-300B型尿液分析儀測定和尿沉渣鏡檢后,二者結果作回顧性分析,現(xiàn)總結報道如下。
1 材料與方法
1.1 標本收集。用一次性潔凈尿杯收集門診患者新鮮中段尿液,1h內完成常規(guī)檢查,并及時準確的記錄實驗結果。
1.2 儀器及試劑。
1.2.1 尿分析儀法。使用優(yōu)利特-300B型尿十一項分析儀及配套試劑帶,嚴格按儀器及試劑帶操作規(guī)程操作。
1.2.2 尿沉渣鏡檢法。按《全國臨床檢驗操作規(guī)程》操作,準確量取10ml尿液置于離心管內,1500r/min,離心5min,棄去上清液,取0.2ml沉淀物充分混勻后置于玻片上,于顯微鏡下檢測。先在低倍鏡下觀察全片,后在高倍鏡下仔細計數(shù)每一個視野下WBC、RBC的數(shù)量,一般計數(shù)10個視野即可,尿蛋白用10g/dl的磺基水楊酸測定。
1.3 結果判定標準[1]。把紅細胞大于0~3/HP,白細胞大于0~3/HP作為尿沉渣鏡檢法的陽性判斷標準;把紅細胞≥10/μL,白細胞≥25/μL,蛋白≥0.25g/L作為尿分析儀法陽性判斷標準。如果尿分析儀結果和相應的鏡檢結果都異常,就認為同一份結果沒有差異,過篩實驗正常;反之,如果尿分析儀結果正常,而相應的鏡檢結果異常,便把此視為假陰性;如果尿分析儀結果異常,而相應的鏡檢結果正常,把此視為假陽性。
2 結果
對2817例門診患者新鮮中段尿液進行常規(guī)檢查,分別用尿分析儀法,尿沉渣鏡檢法同時測定,二者結果都異常即過篩實驗正確的例數(shù)為1180例,陽性率為42%;尿分析儀結果異常,尿沉渣鏡檢結果正常,即假陽性為314例,假陽性率為11.15%;尿分析儀正常,而尿沉渣鏡檢異常,即假陰性為408例,假陰性率為14.48%。2817例尿沉渣鏡檢中發(fā)現(xiàn)管型40例,滴蟲20例,霉菌18例。尿分析儀檢查中膽紅質1+及以上者共8例,尿膽原1+及以上者共26例,酮體1+及以上者共40例,尿糖1+及以上者共84例,亞硝酸鹽還原試驗陽性者共14例。2817例中BLD,WBC,PRO的假陰性率分別為1.37%,7.21%,4.12%。單純BLD≥10/μL1427例中,有244例鏡檢紅細胞正常,假陽性率為17.1%;單純WBC≥25μL有488例,為鏡檢白細胞正常的10倍,假陽性率為10.0%;單純PRO≥0.25g/L有160例,使用磺基水楊酸法檢測19例正常,假陽性率為11.9%。其中,有159例PRO與WBC兩項指標均異常,有235例WBC與BLD兩項指標均異常,有169例的BLD與PRO兩項指標異常,有122例PRO與WBC及BLD三項指標均異常。
3 討論
本實驗中2817例尿液標本中單純WBC,RBC,PRO陽性者都在一定程度上存在著不同程度的假陽性,而結果中有兩項或三項指標異常者,假陽性的結果幾乎沒有。本研究中假陰性率結果高達14.48%,故實驗人員普遍認為尿沉渣鏡檢非常重要,每個標本都需要做鏡檢。尿液用試紙條檢測的結果常受尿液中藥物因素的干擾,如臨床用大劑量青霉素,常導致試紙條對尿蛋白的檢測出現(xiàn)假陽性結果。尿液中維生素C濃度過高會對尿液隱血、尿糖、亞硝酸鹽的試紙條測試產(chǎn)生負干擾,導致假陰性的結果。大量食入含大量色素的蔬菜、水果,如:橘子、橙子、筧菜等也會產(chǎn)生尿膽紅素致假陽性[2]。由此可見尿沉渣鏡檢結合認真詢問病史,必要時與臨床醫(yī)師及時溝通就能發(fā)現(xiàn)和糾正尿液分析儀檢測報告中的一些錯誤結果。尿液分析儀檢測易受到儀器的穩(wěn)定性、靈敏度及試紙條質量等因素的影響[3],如BLD的檢測是利用過氧化物酶的活性,氧化還原而顯色的,而顯微鏡鏡檢必須有完整的紅細胞,才能檢測到。所以當尿液中的紅細胞破裂時,尿液分析儀可以檢測到尿液中的血紅蛋白,這也給解釋了為什么運動后體檢會異常。研究還發(fā)現(xiàn)尿液污染后細菌能釋放過氧化物酶等活性物質,也可能由于細菌代謝繁殖過程中合成了觸酶,過氧化物酶而使檢測結果出現(xiàn)假陽性[4]。如發(fā)現(xiàn)亮氨酸、酪氨酸結晶,腫瘤細胞或寄生蟲(如絲蟲,陰道滴蟲)則更有診斷價值。由于上皮細胞中含有與粒細胞相似的吲哚酶,吲哚酶最終導致了分析儀檢測尿液中WBC結果呈假陽性。送檢尿液必須為中段尿,留取尿液標本必須及時送檢。這一點檢驗人員必須與患者及家屬甚至病區(qū)工勤人員講清楚,因為住院患者的尿液多由病區(qū)工勤人員直接送到檢驗科檢查。尿蛋白檢測的常用方法是蛋白誤差法,尿液pH值對此法的影響很大,當尿液pH>8時,易出現(xiàn)假陽性,當pH
參考文獻
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抗生素的誕生和發(fā)展與科學家們前赴后繼的探索密不可分。17世紀,荷蘭顯微鏡學家列文虎克首次通過自制的顯微鏡觀察微生物世界;20世紀40年代,抗生素之父塞爾曼?瓦克斯曼及其團隊發(fā)現(xiàn)鏈霉素,拯救了數(shù)百萬肺結核和其他疾病患者的生命;而今天,人類已經(jīng)生產(chǎn)出了高效的抗菌藥物――廣譜抗生素。抗生素的發(fā)現(xiàn)拯救了無數(shù)生命,它是醫(yī)學對人類的最大貢獻之一。
微生物與疾病的聯(lián)系
荷蘭人列文虎克是世界上第一個觀察到細菌和單細胞生物組成的微生物世界的人,被公認為“微生物學之父”。1670年左右,他用自制的顯微鏡發(fā)現(xiàn)了微生物。列文虎克曾是荷蘭著名的綢布商人,盡管缺少正規(guī)的科學訓練,但他在1668年左右,對布商用來檢驗布匹質量的放大鏡產(chǎn)生了及其濃厚的興趣,并且開始將磨制透鏡作為自己的一項愛好。之后,他把磨制的透鏡放在銅版的一個小孔上,組裝了自己的第一臺顯微鏡。勤勞加上天賦,他磨的透鏡越來越好,透鏡放大的倍數(shù)也越來越高。他一生共磨出了近250塊這樣的玻璃鏡片。
大約在1670年,列文虎克使用自己磨制的一塊透鏡,觀察到了微生物。他和英國皇家學會取得了聯(lián)系,通過數(shù)百封信件陸陸續(xù)續(xù)地將自己的發(fā)現(xiàn)報告給這個學會,他的很多發(fā)現(xiàn)都被發(fā)表在《皇家學會哲學學報》上。1673年,英國皇家學會發(fā)表了他用顯微鏡觀察到的蜜蜂的口器和蜇刺。1680年,列文虎克被選為該學會的會員。
1822年,法國化學家路易?巴斯德出生在法國東部小城多勒。1855年,他開始了具有劃時代意義的發(fā)酵研究。他用試驗表明,牛奶變質是因為牛奶中產(chǎn)生了乳酸。他提出假設:這是由于牛奶中有微生物。巴斯德對紅酒發(fā)酵和變酸的實驗研究表明,酵母菌的存在,使得葡萄中的糖分分解成了酒精。盡管同時代的化學家嘲笑他的研究,但是他關于微生物世界的這些見解后來被證明都是正確的。
路易?巴斯德也是第一位用實驗表明傳染病是由微生物造成的科學家。到了1862年,巴斯德通過不斷地實驗,斷言微生物是發(fā)酵和腐敗的“元兇”。在提出這一著名理論的同時,他還補充道:“關于微生物的研究給我們提供了很多的實例,表明動物和植物疾病與細菌之間有某種聯(lián)系。毫無疑問,這將會是我們對談之色變的傳染病進行更深入研究的第一步。”路易?巴斯德還是第一個表明微生物可以通過空氣傳播的科學家。他說:“經(jīng)過高溫消毒的有機物一旦接觸空氣,這種有機物就會開始腐敗變質,這都是空氣中的微生物造成的。”
這個論斷成了巴斯德提出的著名的“病原菌學說”的基礎,這個學說認為,傳染病是由微生物引起的。
德國醫(yī)學家和細菌學家羅伯特?科赫成功地從奶牛身上分離出了導致炭疽熱的炭疽桿菌,這一發(fā)現(xiàn)促使巴斯德提出一個更加大膽的設想,并且急于在實驗中加以證明。巴斯德本人對炭疽桿菌也極感興趣,因為乳品產(chǎn)業(yè)曾在法國經(jīng)濟中占有重要地位。他讓四頭奶牛感染炭疽熱,然后讓獸醫(yī)對其中的兩頭注射炭疽疫苗。然而,注射過疫苗的奶牛,一頭存活一頭死亡;另外兩頭未注射疫苗的奶牛也是一頭死亡,一頭存活。這讓對疫苗滿懷期待的巴斯德心灰意冷,稱這次實驗中他設計的“治療方法沒有任何效果”。在幾乎就要放棄實驗,承認失敗的時候,巴斯德又想到了一個新的實驗方式。他從炭疽熱病牛體內提取了最具活性的炭疽桿菌,并將這種桿菌注射進兩頭存活下來的奶牛體內,注射的劑量完全足以使健康的奶牛致命。然后他等待觀察實驗結果,令人吃驚的是,兩頭奶牛都安然無恙。
在成功地實現(xiàn)了牛炭疽熱疫苗接種后,他還用同樣的方法實現(xiàn)了雞霍亂的疫苗接種,注射疫苗的雞也全部存活了下來。在設計這個實驗的時候,他將足以致命的鮮活霍亂病菌涂在面包上,并將面包喂給雞雛吃,雞吃后并不會患霍亂。在研究炭疽疫苗和雞霍亂的疫苗的過程中,巴斯德都采用了英國醫(yī)生愛德華?詹納治療天花的牛痘接種方法的原則,并且都取得了成功。他甚至分離并培養(yǎng)了狂犬病疫苗,在眾多被瘋狼咬傷的沙俄貧農身上進行試驗,除了19例沒有取得成功外,其他的人都轉危為安。為表彰他的功勞,俄國沙皇授予他圣安妮十字勛章,并獎勵他十萬法郎,用于建立巴斯德研究所。這個研究所1888年正式開放,是世界上首個專門致力于微生物研究的實驗室。
漸漸地,巴斯德的研究得到越來越多的人認可。醫(yī)學界因此也能按照他的研究,將一種疾病的起因與某種微生物聯(lián)系起來,而尋找治療的藥物因此也有了可能。疫苗的開發(fā),使得人體自然防御機制得到增強,進而抵御疾病的侵襲。巴斯德晚年的一個宏大愿景就是為每種疾病找到有效的疫苗。
不期而遇的奇跡:發(fā)現(xiàn)青霉素
1928年8月底,在結束休假返回倫敦圣瑪麗醫(yī)院工作后,英國科學家亞歷山大?弗萊明發(fā)現(xiàn),自己實驗室中的培養(yǎng)皿里長出了一些奇怪的東西。他的同事墨林?普萊斯走進他的實驗室,和剛剛度假回來的弗萊明打招呼,順便詢問研究進展。弗萊明順手遞給普萊斯一個盆子,后者發(fā)現(xiàn),培養(yǎng)皿底部布滿了黃色的葡萄球菌,而葡萄球菌上則長滿了毛茸茸、藍綠色的真菌一樣的菌絲。當弗萊明仔細觀察時,他發(fā)現(xiàn)菌絲四周沒有任何的活的細菌,只有死亡的細胞。
1929年,亞歷山大?弗萊明把自己的這個菌絲汁液稱為“盤尼西林”,因為這種汁液是從紅色青霉(Penicillium rubrum)的菌絲中提取的。他開始了試驗這種神奇的霉菌,發(fā)現(xiàn)它不僅能殺死葡萄球菌,還能殺死造成鏈球菌感染、肺炎、梅毒、淋病、氣性壞蛆、腦膜炎和白喉的致病菌。更讓人驚奇的是,這種霉菌對人體沒有毒性。他請教同事拉圖什,這位同事將其描述為紅色青霉(Penicillium rubrum)。幾年之后,這種霉菌被定名為特異青霉(Penicillium notatum)。
弗萊明原本是想要在自己的實驗中尋找能夠抗菌的溶菌酶。因此,人類發(fā)現(xiàn)青霉素,完全可以說是一個幸運的意外。不過,他充分認識到自己這個發(fā)現(xiàn)的重大價值。他把接下去的一年時間都用在尋找有這種霉菌的樣本上,這些樣本五花八門,包括舊書籍,繪畫作品,奶酪,面包和果醬,目的就是為了更深入了解這種霉菌的抗菌效果。他甚至問朋友有沒有長時間扔在一邊不用、已經(jīng)發(fā)霉的臭鞋子。1929年2月,他把自己發(fā)現(xiàn)的這種霉菌汁液命名為青霉素(盤尼西林,Penicillin)。
盡管弗萊明是青霉素的發(fā)現(xiàn)者,但是他并不是化學家,而青霉素的任何醫(yī)療應用,還必須首先對這種霉菌進行分離、凝縮,并進行化學提純。另外由于天然狀態(tài)下的青霉菌一周之后就會死亡,因此必須采取措施確保其穩(wěn)定性。1938年,劍橋大學的科學家霍華德?佛羅里和恩斯特?錢恩攻克了這一難題,并試制出了純度極高、晶體狀的青霉素,濃度達到了弗萊明最初樣本的四萬倍以上。
1941年,佛羅里獲得了美國科研機構和制藥公司的資助,開始大規(guī)模生產(chǎn)青霉素,這些青霉素在二戰(zhàn)中發(fā)揮了重要作用。自從佛羅里從青霉菌中提純青霉素開始,科學家發(fā)現(xiàn)了許多類似青霉素的其他抗生素,這些抗生素的發(fā)現(xiàn)使得細菌感染在二十世紀下半葉極大地降低了。1945年,瑞典皇家科學院將諾貝爾醫(yī)學獎頒發(fā)給了弗萊明、錢恩和佛羅里,以表彰他們在青霉素發(fā)現(xiàn)和應用過程中的貢獻。
神奇藥物:百浪多息
1936年11月,美國總統(tǒng)羅斯福的公子患上了鏈球菌咽喉炎和急性鼻竇炎。醫(yī)生甚至推測他可能得了溶血性鏈球菌感染,而這種細菌感染一旦進入血液,病人就將時刻有生命危險。他的醫(yī)生小托比給小羅斯福注射了一針百浪多息(Prontosil),一種又稱為磺胺柯衣定的全新藥物,外加讓其口服普羅脫林(Protolyn),一種口服性的百浪多息。小羅斯福竟然奇跡般地康復,連《紐約時報》都在當年12月17日拋出頭條,盛贊這一挽救了總統(tǒng)小兒子姓名的“神奇藥物”。這一事件,以及之后媒體連篇累牘地報道,使得美國掀起了一場持久不衰的磺胺類藥物熱。
1935年,德國病理學家和細菌學家格哈德?多馬克發(fā)明了百浪多息,開啟了磺胺類藥物的未來。百浪多息,作為磺胺類藥品中的第一種藥物,是多馬克合成的。不過,它首先并不是作為抗生素使用,而是作為工業(yè)染料使用。在20世紀30年代,格哈德?多馬克是法本化學工業(yè)股份公司巴伐利亞實驗病理學研究所所長。他決心生產(chǎn)出一種能夠在殺死病菌的同時又不會對病人產(chǎn)生副作用的抗生素藥物。多馬克對能夠使細菌著色并吸附在細菌表面上的染料非常感興趣。逐漸地,他對偶氮染料產(chǎn)生了異常濃厚的興趣。在他的實驗中,他首先測試了一種紅色染料對鏈球菌的效果。鏈球菌能造成猩紅熱、風濕熱、鏈球菌性咽喉炎和肺炎。他將鏈球菌注入實驗白鼠體內,然后對白鼠注射紅色染料。結果發(fā)現(xiàn),這種紅色染料對白鼠產(chǎn)生的非洲睡眠病似乎有效果。不過,這種染料對人體的鏈球菌感染效果非常有限。在經(jīng)過上千次失敗的實驗后,1932年10月初,多馬克的同事約瑟夫?克拉雷爾將含硫的側鏈合成在染料上。這項實驗立刻取得了成功,含硫側鏈和染料合成后,立即改變了后者的效果,原來不穩(wěn)定甚至無效的藥品立刻成了高效的抗鏈球菌藥物。
就這這段時間,多馬克的小女兒患上了嚴重的鏈球菌感染,情急之下,他給女兒注射了一劑還從未在人體身上臨床試驗過的百浪多息。他女兒奇跡般地康復了。在關于這種藥物藥效的報告中,多馬克并未提及自己在女兒身上的成功試驗。一直到1935年,當其他醫(yī)生在其他病人身上進行這種藥物的臨床試驗并取得成功后,他才公布了自己在女兒身上進行的藥物試驗。隨著百浪多息以及其他磺胺類藥物的發(fā)現(xiàn),醫(yī)學界又多了一件對付傳染性疾病的有效武器。
11號實驗――鏈霉素的發(fā)現(xiàn)
1943年,烏克蘭裔美國化學家、土壤微生物學家塞耳曼?瓦克斯曼開始尋找一種化學物質,希望能借此殺滅結核分歧桿菌。這種病菌是當時死亡率幾乎百分之百的肺結核的元兇。他已經(jīng)成功地找到了鏈絲菌,一種在實驗中能有效殺滅革蘭氏陰性菌的細菌,而一般的磺胺類藥物和青霉素對革蘭氏陰性菌都是無效的。這一發(fā)現(xiàn)能幫助人類醫(yī)治諸如傷寒,兔熱癥,波狀熱等的疾病,這些疾病在此之前沒有任何藥物可以治療。
疫苗和此前的抗生素治療對付肺結核無效,是因為這些治療手段無法溶解結核桿菌的蠟質莢膜。許多科學家,包括瓦克斯曼和他的研究團隊,都一度開始質疑,他們是否真的能發(fā)明一種能穿透這種蠟質莢膜并且發(fā)揮藥效的藥物。
1943年,瓦克斯曼和他的研究團隊在新澤西的實驗室中成功地找到了可以治療肺結核的鏈霉素。他帶領研究團隊,從土壤中上萬種的微生物中找到了兩種能殺滅結核桿菌的放射菌,他將它命名為灰色鏈霉菌。一種是在泥土中找到的,另一種則是在實驗室活禽培養(yǎng)部門的一只小雞的喉嚨中提取到的。這兩種鏈霉菌對許多革蘭氏陰性菌都有明顯的抵抗作用。革蘭氏陰性菌可以導致痢疾、輕度肺炎、波狀熱、百日咳、桿菌性痢疾、野兔病、禽傷寒等疾病。更重要的是,這兩種鏈霉菌都對肺結核菌有著明顯的治療效果。
瓦克斯曼博士和他的團隊,包括從二戰(zhàn)戰(zhàn)場剛剛回來的年輕科學家阿爾伯特?薩茲,開始不斷地培養(yǎng)這兩種細菌,并展開試驗。在自己的地下實驗室中,薩茲夜以繼日,實驗室燒瓶咝咝冒著氣,瓶中液體泡沫涌動。通過不懈努力,他終于成功地分離出了10克晶末,并把它提供給了美國梅奧醫(yī)學中心的威廉?費爾德曼醫(yī)生,這就是鏈霉素的最早分離。
他讓蒸餾瓶24小時蒸餾,自己則睡在了實驗室的地板上。他甚至和實驗室的守夜人商量,如果守衛(wèi)發(fā)現(xiàn)他睡覺,而燒瓶中的液體已經(jīng)蒸發(fā)至瓶體紅色線以下,守衛(wèi)就要叫醒他。與這種曾經(jīng)殺死過數(shù)百萬人的病菌打交道極其危險,甚至有生命危險。薩茲采取了當時所有可能的預防措施,據(jù)研究團隊的另一名研究人員多麗絲?瓊斯回憶,薩茲在結束一天的工作后,甚至使用有消毒殺菌作用的消毒水漱口。工作的時候,他必須時刻與肺結核桿菌為伍,而那個時候并沒有任何的治療方法。
關于誰應該獲得“鏈霉素發(fā)現(xiàn)者”這個稱號,學界存有爭議。毋庸置疑,瓦克斯曼是發(fā)現(xiàn)這一抗生素的團隊的領導者,但是據(jù)薩茲的說法,瓦克斯曼從未踏入這個地下實驗室一步,而且還親口告訴薩茲無論如何不要將菌體帶到樓上去。薩茲提取了足夠多的鏈霉素,并且將其中的10克送到了當時的梅奧醫(yī)學中心。據(jù)薩茲的1943年8月23日的實驗日志記載,“11號實驗, 拮抗性放線菌”,用這個詞描述這種從土壤中發(fā)現(xiàn)的線狀的、能產(chǎn)生抗生素的微生物,聽來有點怪異。接下去的幾頁日志詳細記載了有關的實驗,以及他發(fā)現(xiàn)的兩株灰綠色放線菌,他自己把他們命名為“灰色鏈霉菌”。每株菌體都產(chǎn)生出了一種抗生素,并能殺死一個皮氏培養(yǎng)皿中的大腸桿菌。而且,他還發(fā)現(xiàn),這種菌體產(chǎn)生的抗生素還能殺死結核細菌。按照這一日記的記載,發(fā)現(xiàn)鏈霉素的應該是薩茲博士。
1944年1月,鏈霉素的發(fā)現(xiàn)被公之于眾。兩個月后,一批鏈霉素被送到了梅奧醫(yī)學中心,威廉?費爾德曼和H.考文?欣紹醫(yī)生開始在白鼠身上使用鏈霉素的臨床試驗。今天看來,這項試驗具有影響跨時代的歷史意義。1944年底前,這兩位醫(yī)生通過臨床證明,這種抗生素對殺滅實驗白鼠身上的結核菌有很好的效果。
到了1946年,美國國家研究委員會化學療法小組委員會了一項報告,報告了鏈霉素在最初1000個病人身上的臨床報告,而美國的醫(yī)藥公司此時已經(jīng)達到了年產(chǎn)鏈霉素兩噸的生產(chǎn)能力。鏈霉素治療革蘭氏陰性菌(如結核桿菌)的巨大成功打消了人們關于抗生素有效性的全部疑慮。青霉素可能引領人類進入了抗生素時代,而鏈霉素的發(fā)現(xiàn)則刺激了全球范圍內尋找由微生物產(chǎn)生的化學治療藥物的熱情。
廣譜抗生素
到了1950年代,科學家仍然孜孜不倦地尋找效果更好、威力更大的抗生素。其中就包括了新發(fā)現(xiàn)的金霉素,土霉素。這些抗生素殺菌效果特別好,因為比起之前的抗生素,它們能有效殺滅更多種類的細菌。醫(yī)生和科學家把這些新型抗生素稱為廣譜抗生素。勞埃德?科諾菲爾是美國輝瑞制藥的一名化學家,他發(fā)現(xiàn)金霉素和土霉素的中心有著相同的分子結構。他把這個中心分子結構稱為四環(huán)素,而輝瑞制藥也于1955年申請了四環(huán)素的專利。這一發(fā)現(xiàn)又導致了一系列以四環(huán)素為中心分子結構的全新抗生素族類的出現(xiàn)。
科學家們還發(fā)現(xiàn)青霉素也有一個中心分子結構,他們稱之為已內酰胺。通過固定中間的已內酰胺分子,并改變青霉素大分子的其他部分,他們生產(chǎn)出了全新的抗生素,如氨芐青霉素(氨芐西林)、羥氨芐青霉素(阿莫西林),這些新合成的青霉素能更好地治療更廣范圍的感染。緊隨青霉素之后,科學家又相繼發(fā)現(xiàn)了頭孢菌素類、碳青霉烯類和單環(huán)類青霉素。
事實上,頭孢菌素化合物是由意大利科學家博茲(Giuseppe Brotzu)于1940年現(xiàn)的,當時他發(fā)現(xiàn)意大利撒丁島首府卡利亞里一個污水排水口附近的海水會周期性地潔凈。他推測是污水中的某種微生物產(chǎn)生了一種抑制性的化合物,從而潔凈了水體。他后來將這種微生物命名為頭孢菌素C,并證明它能生成一種抑制細菌生成的物質。早期的頭孢菌素就是從這種菌體生成的物質合成的。
抗生素的未來
毋庸置疑,抗生素的發(fā)現(xiàn)挽救了數(shù)百萬人的生命,但是有個問題也隨之而來:當抗生素面對產(chǎn)生抗藥性的細菌不再起作用的時候,人類怎么辦?一個讓人惶惶不安的事實是,目前人類不得不面對諸如耐甲氧西林金葡菌和對多種藥物產(chǎn)生抗藥性的腸桿菌科這類可怕的致病菌。這也提醒人類一個不得不面對的事實,細菌非常“聰明”,并且能很快地適應醫(yī)生開出的處方中給病人服用的抗生素藥物。醫(yī)生把現(xiàn)代醫(yī)學開發(fā)新藥試圖解決病菌越來越強大的抗藥性的努力比喻為“伸出一個手指堵住大堤上的一個漏洞,卻發(fā)現(xiàn)更大的洪水又從其他更大的漏洞沖了出來” 。
要解決越來越嚴重的抗藥性問題,方法無非有二,一是開發(fā)全新的抗生素,二是采取全新的方法應對病菌感染問題。
科學家們當然未放棄尋找新的治療藥物。從各類抗生素發(fā)現(xiàn)的情況看,除了甲氨芐啶,其他的主要抗生素的發(fā)現(xiàn)完全是運氣使然:顯示發(fā)現(xiàn)藥物,然后才確定藥物作用的目標細菌。很多的制藥公司在尋找新藥物方面仍然遵循著這一模式,并在公司內保留著自然產(chǎn)品部門,并由該部門負責收集全球各地的土壤樣品,測試包括抗菌性的各類重要性狀。這種做法邏輯的前提是,至今為止,從自然界提取的抗生素,仍是人類制造出來的效果最好的抗生素藥物的基礎。
實驗室管理水平尚有欠缺開放性實驗室是一種全新實驗室建設模式,其管理工作涉及的范圍更廣,要求更高。目前存在的主要問題是管理工作不夠到位、登記制度執(zhí)行力度不夠以及有關文檔和技術資料收集不完全等不足,導致對本科生缺乏有效的監(jiān)控管理。
實驗室重要性認識不足1.開放性實驗室的重要性認識不足。開放性實驗室重要性的認識主要存在兩個誤區(qū):一是認為只要讓學生有場所進行相關的測試與檢測就足夠了;二是開放后增加了許多管理工作量和設備維護數(shù)量,大大提高管理的難度和復雜性,實驗中心教師存抵觸心理。2.學生及時進入實驗室開展研究的作用認識不夠充分。預防醫(yī)學專業(yè)的畢業(yè)實習需要對具體樣品進行檢測和分析,驗證課題設計所提出的問題,并根據(jù)分析和研究的結果總結出畢業(yè)論文的基本觀點,這需要一個具體的研究過程。學生依據(jù)自己所選的研究方向和指導老師的具體要求選擇是否進入開放性實驗室。目前,在畢業(yè)實習過程中會出現(xiàn)這樣的情況,一方面專業(yè)指導教師有時會抱怨實驗中心提供的實驗條件不足;另一方面是學生不良的就業(yè)心態(tài),放松了對本科生畢業(yè)實習過程的重視,等臨近提交論文時間,學生草草應付了事,甚至出現(xiàn)畢業(yè)論文不符合基本要求的現(xiàn)象。
以開放性實驗室為平臺指導畢業(yè)實習的具體改進措施
(一)提高實驗教師的專業(yè)水平、服務意識以及管理能力,保證實驗室的開放質量實驗室的開放不僅是一個時間和空間開放的問題,而是一種管理模式的改革與創(chuàng)新[4]。預防醫(yī)學開放性實驗室建立后,對實驗教師的思想素質和業(yè)務水平提出了更高的要求,實驗教師能否勝任關系到開放性實驗室的具體工作是否能順利開展。開放性實驗是學生以自身興趣和學習中的思考為出發(fā)點的自主實驗,進行實驗設計后再進入實驗室開展具體實驗。在開放性實驗中,學生可能提出更廣泛更復雜的問題,學生操作儀器時會出現(xiàn)更多問題,使用的試劑種類和用量也會相應的增加,這對指導教師和實驗教師的管理能力、指導能力和知識儲備提出了更高的要求。因此,為了提高開放性實驗室的教學和科研質量,一方面需要提高實驗教師的專業(yè)水平、服務意識和管理能力,另一方面學院應制定相應的激勵機制,以調動實驗教師的積極性和主動性。
(二)健全開放性實驗室的管理制度,保證其有效運行實驗室開放將會涉及許多新的管理問題,這就需要制定相關的管理制度對開放性實驗室的日常運行提供保障。例如:實驗室開放后,實驗試劑和耗材消耗就會增加,試劑和耗材領用與管理的問題;學生進入實驗室的治安、防火和安全檢查問題;儀器設備損壞賠償?shù)膯栴};大型精密儀器的管理和使用的問題等,都需要制定相關的規(guī)章制度來進行合理規(guī)范,為實驗室開放運行提供制度保障。此外,遵守開放性實驗室的規(guī)章制度是管理的重點,光有規(guī)章制度而不執(zhí)行,規(guī)章制度也就只是一個幌子。這就要求實驗室管理人員必須嚴格執(zhí)行各項規(guī)章制度。
(三)充分挖掘實驗室的潛力,滿足畢業(yè)實習的需求基于預防醫(yī)學專業(yè)的畢業(yè)實習階段的特點和具體要求,開放性實驗室應盡力從以下兩個方面配合畢業(yè)實習。1.開放性實驗應與本專業(yè)畢業(yè)實習內容相結合。例如我院預防醫(yī)學實驗中心近年來開設了“毒理學動物實驗設計———化學物對機體毒性作用評價”、“鉛作業(yè)人群的健康監(jiān)護”及“常見食品的營養(yǎng)與食品衛(wèi)生學測定”等8項綜合性實驗項目,綜合性實驗項目中涉及到許多較為先進的檢驗方法,這些檢驗方法可以在畢業(yè)實習中得以運用。但并不是所有的檢驗方法學生通過完成一次綜合性實驗項目就能熟練掌握,開放性實驗室的建立讓學生有機會再次進入實驗室,在實驗技術人員的指導下進一步學習和掌握那些較為先進的檢驗方法。2.加強科學管理,提供全方位服務。預防醫(yī)學專業(yè)的畢業(yè)實習階段不但項目眾多而且周期較長,學生一旦選定實驗項目,就需要實驗室全天候對其開放,從而給預防醫(yī)學專業(yè)本科生創(chuàng)造自由進入實驗室的條件。這就要求實驗中心教師不僅要付出更多時間,而且要采取更加合理且有效的管理方式,以求達到較好的效果。
(四)實驗教師與指導教師應密切配合,強化畢業(yè)實習的過程監(jiān)督預防醫(yī)學專業(yè)本科畢業(yè)實習的質量能否提高主要取決于實驗教師與指導教師之間配合是否密切。對于指導教師來說,要主動與實驗中心聯(lián)系,確定畢業(yè)實習的項目和具體實驗內容。對于實驗管理和技術人員來說,發(fā)現(xiàn)實習過程中的問題,要及時與畢業(yè)生的指導教師聯(lián)系,有效溝通,商議解決問題的方式和方法。畢業(yè)實習階段必須建立例會制,構建實習指導教師與實驗教師良好的溝通渠道,要從思想上充分重視,合理安排時間,抓好各個教學環(huán)節(jié),對畢業(yè)論文選題、開題、設計、寫作、答辯等環(huán)節(jié)進行全過程嚴格監(jiān)控[5],有效解決畢業(yè)實習中發(fā)現(xiàn)的相關問題。
以開放性實驗室為平臺指導畢業(yè)實習的成效
(一)學生對科研實驗和學習的興趣得到激發(fā)開放性實驗室的建立,為本科生提供了發(fā)揮自身才能的實驗平臺。對預防醫(yī)學專業(yè)而言,本科生可對自己學習過程以及日常生活中的疑惑和思考進行實驗探索與求證,并由此確立自己的畢業(yè)論文選題,從而激發(fā)學生對本專業(yè)的學習熱情和科研實踐的興趣。通過對2008-2012年預防醫(yī)學本科畢業(yè)實習基本情況的歸類分析,得出2008-2012年實驗研究占預防醫(yī)學本科畢業(yè)實習之比呈“U型”變化,結果見表1。產(chǎn)生上述“U型”變化的主因是我校預防醫(yī)學實驗中心自2007年開始逐步搬遷至大學城新區(qū),本科生實驗研究的條件受限,導致實驗研究占畢業(yè)實習比逐年下降。2011年預防醫(yī)學實驗中心實現(xiàn)整體搬遷后,開放性實驗室條件得到明顯改善,實驗研究占畢業(yè)實習比大幅提高,到2012年達到63.57%,體現(xiàn)了學生對科研實驗的興趣加大,實現(xiàn)了興趣驅動的目的。
The Understanding of Teaching Method Reform
about Medical Professional Courses
MAO Huajie, WANG Xiaochun
(Department of Laboratory Medicine,Xiangya Medical School, Central South University, Changsha, Hu'nan 410013)
Abstract Medical professional class has its particularity.We need to combine with clinical to reform teaching method according to its characteristics that fully mobilizing students' learning initiative and enthusiasm, encouraging students to think and analyze problems independently and enhancing students mastery of knowledge and self cognitive ability, so as to improve the teaching quality. It will receive twice the result with half the effort by adopting variety of teaching methods such as interactive, heuristic, experiential and autonomous learning method.
Key words medical; professional courses; teaching method
課堂教學是大學教學的主要組織形式,傳統(tǒng)的講授方式是老師要以教材為主“解惑授業(yè)”,因而大學課堂教學行為較單一,課堂氣氛較沉悶,只注重知識從老師向學生的傳授,忽視了對學生能力和素質的培養(yǎng)。在社會環(huán)境迅速變化的大背景下,建立“以學生為中心”的教學理念并對課堂教學模式進行改革,激發(fā)學生的學習積極性,提高教學質量,是大學教學改革的一個必然趨勢。
1 開展多種教學方法
針對學生開展多種教學方法綜合利用的學習過程,就是鼓勵學生主動獲取知識并積極發(fā)散思維的過程,而不是單一的老師向學生的灌輸過程。多種教學方法的綜合開展目的就是要提高教學質量,不僅培養(yǎng)學生具有扎實的專業(yè)知識和實踐技能,而且培養(yǎng)學生對社會各種問題的綜合判斷能力和解決問題的創(chuàng)造力,使他們成為身心健康的人才。因為學生在整個教學活動占有主體地位,其課堂活躍程度將直接對教學效果產(chǎn)生影響,所以需要依據(jù)能否有效調動學生的參與性與主動性來選擇采取哪種教學方法。醫(yī)學檢驗專業(yè)旨在培養(yǎng)品德高尚、基礎扎實、技能熟練、素質全面的德、智、體、美全面發(fā)展的應用型醫(yī)學檢驗專門人才。要求掌握醫(yī)學檢驗技術基本知識、基本理論和基本技能,以及與之關聯(lián)的基礎醫(yī)學、臨床醫(yī)學的相關知識;掌握先進醫(yī)學檢驗技術,具備初步的醫(yī)學檢驗專業(yè)能力。所以,在專業(yè)課教學中要突出與臨床緊密結合。
1.1 課堂教學
首先授課老師在課堂上按學科專業(yè)授課,在講授過程中采用多種教學方法聯(lián)合應用,這其中包括互動式教學法、啟發(fā)式教學法、研究性教學法、實踐性教學法等一些常常單一應用的方法。在綜合運用這些方法時,教師應首先對學生的基本學習情況進行全面了解,采用難易度適中的內容來激發(fā)學生的求知欲望,聯(lián)合多種教學方法使枯燥、抽象的專業(yè)課程的講授變?yōu)榻膛c學的雙向互動,不僅能夠鍛煉學生的自主學習和發(fā)散思維的能力,而且在一定程度上可以督促教師不斷進行知識的更新,從而提高講授技能。
例如:臨床生物化學檢驗:按蛋白質代謝、糖代謝、脂類代謝分類,然后按疾病的生物化學結合臨床檢測項目展開;臨床微生物學及檢驗:細菌感染的實驗室診斷、細菌的生化反應、醫(yī)院感染的監(jiān)測、細菌、病毒等內容與臨床疾病及檢測相結合。教師需要激發(fā)學生的好奇心并調動課堂氣氛,一般可以采用案例分析課與研討課的方式,學生可以高效地對教學內容進行消化,學生通過課后進一步的自學并閱讀相關文獻來完成學習內容。沒有一個良好的課堂氛圍,授課內容將難以實施,以學生感興趣的話題為基礎,讓學生放松心情盡情表達、探討,更能激發(fā)和調動他們的學習動機,鞏固所學知識。教學過程遵循參與性和主動性原則,教師的教學方法、教學資料都是圍繞怎么讓學生更好地理解掌握知識而設量采取的,在課堂上應充分調動學生學習的積極性,使學生養(yǎng)成獨立思考的習慣,鼓勵學生發(fā)表不同的見解,增強學生掌握知識的能力以及鍛煉自我認知的能力。
1.2 留課后思考題或討論題
留課后思考題或討論題主要是針對專業(yè)課階段進行的,所選題目是對所學課程的鞏固與深化。主要是讓學生與教師進行討論,學生需要查閱大量相關資料,增加了學生的閱讀量及知識面。
1.3 討論課
討論課應與課堂教學的大綱相關聯(lián),參加人數(shù)一般不超過30人,學生和教師自由地、直接地交流,其目的就是充分調動學生的學習積極性、使學生養(yǎng)成自主學習的習慣、訓練學生的口頭表達能力并增強學生的參與意識。形式可以是學生按照自己感興趣內容制作PPT報告;可以是學生提問,老師與學生一起參與討論;也可以是老師給出病例,學生需要根據(jù)所給資料進行分析,給出可能的診斷,還需要進一步做哪些相關檢查等。通過開展討論課學生可以自由結合、充分討論、表現(xiàn)自我,獲得廣泛的知識,并養(yǎng)成自主學習、綜合思考的能力。
2 “教學、實踐一體化”的教學模式
“教學、實踐一體化”教學模式是在著名教育學家陶行知先生的“教學做”教育理念的基礎上,結合了現(xiàn)代教學方法的一種新的教學模式,是一種更加有效的教學方法。專業(yè)性是醫(yī)學教育的一個重要特點,醫(yī)學生既要學文化、理論知識,更重要的是學習操作和技能,那么究竟我們應將學生置于什么樣的教學環(huán)境之中,才有可能產(chǎn)生比較理想的教學效果?最明智且最有效的做法是盡可能地讓學生置身于所學專業(yè)的職業(yè)環(huán)境中去,接觸、了解、熟悉和掌握專業(yè)知識和技能。因此,教學與實踐一體化的教學模式正是營造了這樣一種課堂氛圍,使學生經(jīng)歷了實踐、認識到再實踐、再認識內在聯(lián)系密切螺旋式上升提高過程。所謂的一體化教學模式就是不再劃分理論課和實驗課,而是變?yōu)槔碚摻虒W和實驗教學融于一體的課程教學,課程由同一教師主講,直接采用實驗室教學或醫(yī)院教學的教學方式,以完成教學目標和教學任務。這種教學方法能充分調動和激發(fā)學生學習興趣并高效地培養(yǎng)學生動手實驗能力和專業(yè)技能。一體化教學要求教學單位必須具備與相關專業(yè)相適應的硬件設備和實驗環(huán)境。醫(yī)學實驗中心應具有足夠的設備,例如:筆記本電腦、多媒體投影儀、自動生化分析儀、熒光及普通PCR儀,顯微鏡、無菌操作臺,臨床基礎檢驗和血液檢驗的教學圖片等,從設備上為一體化的教學提供可能,為教師和學生的教學過程達到理論與實踐相交替提供保障,滿足一人一崗的要求。要實施一體化教學,對教師的要求是比較高的,不僅要求教師具備檢驗醫(yī)學相關的理論功底,同時要求上課教師具備扎實的科研和實驗操作能力,更重要的是教師應具備將理論知識向實踐轉化的能力。對教師的要求不僅是傳統(tǒng)意義上的具有教學能力和工作經(jīng)驗的復合型人才,同時還要求教師具有創(chuàng)新綜合能力及科研能力,否則教師很難根據(jù)教學方案進行擴展,且難以控制教學過程,無法真正做到有問必答,融會貫通。為了增強教師的實驗操作能力,教研室專門制定了相應的教師培養(yǎng)計劃,定期組織教師參加各項培訓。定期組織教師到各大三甲醫(yī)院檢驗科進行專業(yè)實踐技能的培訓學習,同時也采取了“請進來”的模式,努力引進醫(yī)院的優(yōu)秀技術員到學校做實驗環(huán)節(jié)課程指導教師,協(xié)助開展一體化教學的教師進行相關技術實踐教學。通過一體化教學,學生在檢驗科實際工作中對醫(yī)學檢驗相關知識的運用及實驗操作能力都得到了用人單位的一致好評。實踐證明,理論與實踐相結合的一體化教學是符合醫(yī)學教育的規(guī)律和特點的,是一種適應醫(yī)學教育發(fā)展的較為成功的教學方法。
政府、社會、學校、醫(yī)院(企業(yè))等應重視醫(yī)學教育發(fā)展中的重要作用,應通過多種形式加大經(jīng)費投入。如院系可以向學校提交申請書并就實驗中心的基本情況進行介紹,經(jīng)學校審核通過,專門給院系在購置儀器設備的款項上撥款。另一方面,學校和醫(yī)院(企業(yè))可以通過建立深層次的校企合作長效機制,實現(xiàn)資源共享,互利雙贏。如可利用學生在醫(yī)院檢驗科見習的機會進行現(xiàn)場教學;醫(yī)院檢驗科在購買新的儀器設備后可以捐獻一些不再用的檢驗儀器設備給學校實驗室。學生在教師的教學過程中,一邊學一邊做,真正實現(xiàn)了理論知識和實驗操作的相互轉化。
3 教學活動的探究性原則
教學活動的探究性原則并不是什么新生事物,是由于傳統(tǒng)的“傳授型”教學方法使得其慢慢淡化了。所謂醫(yī)學專業(yè)的探究性教學,是指從醫(yī)療大環(huán)境的實際情況出發(fā),根據(jù)相應的培養(yǎng)計劃和開設的課程,選擇并確定相應的教學方法,使學生在老師的指導下,充分發(fā)揮自己的潛能并富有創(chuàng)造性地主動學習。在科技發(fā)展突飛猛進的今天,培養(yǎng)創(chuàng)新型人才就顯的至關重要,教育工作者應該重新認識探究性原則的重要性。當然,任何事物的發(fā)展都是有規(guī)律可循的,教學活動的探究性原則重新得以重視并不是簡單的重復歷史,這樣的變化反映了教育工作者對教育規(guī)律的研究是不斷深化的,充分體現(xiàn)了中與時俱進的理論品質。教學活動的探究性包含了多個層面的內容,包括觀察現(xiàn)象、找出問題、通過閱讀書籍或瀏覽網(wǎng)上資源對已知的定論進行全面了解,制定詳細的研究計劃,根據(jù)實驗數(shù)據(jù)對現(xiàn)有的結論作出系統(tǒng)評價,利用一些工具開對數(shù)據(jù)進行收集、分析和解釋,結合現(xiàn)有結論進行預測并確定假設,考慮是否有更加合適的解釋,定期進行結果的交流。
中南大學自2012年開始規(guī)定上課教師必須是副教授以上職稱,這正是體現(xiàn)了探究性教學的要求,即要求我校的年輕教師不能再像從前一樣按照一成不變的教材來完成教學任務,而是要求教師通過繼續(xù)學習和努力科研不斷地更新自己的知識結構,深刻了解相關學科的前沿發(fā)展水平,努力將自己的研究成果與教學有機地整合在一起,在向學生傳授專業(yè)知識的同時,努力培養(yǎng)學生的科研能力和創(chuàng)新能力。加快推進探究性教學模式,大力開展創(chuàng)新性教育,是當前高等教育教學改革的一個方向。經(jīng)過這種教學模式的改革,一定會引起深刻的教育變革,特別是教育管理觀念的轉變,這種改變還會對教學領域以外的多個方面產(chǎn)生影響。因此我們有理由相信,只要教育工作者大膽地去改革和實踐,新的探究式教學模式必將在創(chuàng)新型人才的培養(yǎng)中發(fā)揮著至關重要的作用。
4 展望
【關鍵詞】 檢驗科;感染;管理
檢驗科是一個醫(yī)院工作運行不可缺少的一個科室,工作人員在與患者接觸的同時,更要與患者的血液、體液、分泌物、組織和排泄物等直接接觸,導致感染幾率的增加。因此,檢驗科是個容易發(fā)生醫(yī)源性感染的科室,同時也是醫(yī)院應該加強重點管理的科室,現(xiàn)在就這些醫(yī)源性問題進行探討,分析其原因,目的在于提高檢驗科預防醫(yī)源性感染的效能,預防醫(yī)源性感染事故的發(fā)生[1]。
1 檢驗科感染的原因
1.1 醫(yī)院領導對于檢驗科的重視不夠,醫(yī)務人員認識不到位,醫(yī)院領導大多數(shù)有重檢輕防的思想,在日常的檢驗工作中缺少必要的防御常識,如很多醫(yī)務人員在工作中不佩戴口罩、帽子;在接觸感染性檢驗標本時不佩戴手套;清洗處理廢棄標本時消毒處理不甚嚴格,造成二次傳播;在實驗中,未經(jīng)清洗消毒手便接聽手機,造成傳染性微生物的傳播;更有甚者在實驗室內進食、飲水等。
1.2 防護意識跟不上,防御措施不健全。醫(yī)院為追求利潤,過度重視檢驗業(yè)務量,輕視了醫(yī)院的感染,既沒有做到切實有效的保護自己,也沒保護患者,造成醫(yī)源性感染幾率的增加。除此之外,醫(yī)院檢驗科工作室在建筑設計方面存在衛(wèi)生學上的缺陷,增加了醫(yī)院感染的幾率。
1.3 醫(yī)院規(guī)章制度不健全,存在制度上的漏洞,可以從以下幾個方面看出:科室人員出入制度;標本處理程序;消毒以及清洗制度等沒有明確而具體的規(guī)定,對于突發(fā)事件例如血液或體液的飛濺污染、細菌分離鑒定時的污染等沒有明確的消毒和監(jiān)測等處理制度。
1.4 實驗室布局不合理,患者及家屬可隨便出入實驗室,或者由于醫(yī)院房間分配不合理,造成作業(yè)流程極其不合理[2]。污染區(qū)、半污染區(qū)、清潔區(qū)不能明顯分開,增加了醫(yī)源性的感染的幾率,造成的危害很大。
1.5 檢驗人員對于感染知識的學習甚少,很多在校學習時只注重專業(yè)知識的積累,而忽視了感染知識的學習,特別是對于醫(yī)院的感染新知識、新動態(tài)了解甚少,不夠重視,對于消毒滅菌的方法以及措施、消毒液的配制使用等常識性的知識掌握不夠。
2 管理對策
2.1 規(guī)范消毒滅菌工作 通過規(guī)范的消毒滅菌,切斷檢驗科內感染的傳播途徑,是控制整個醫(yī)院內感染發(fā)生和傳播的重要措施[3]。同時,對患者分泌物、排泄物及醫(yī)療廢棄物處理應是用消毒液浸泡或高壓滅菌然后集中焚燒處理,根據(jù)細菌室反饋回來的空氣培養(yǎng)結果制定相應的措施,做到空氣消毒、地面和物體表面消毒、醫(yī)療器械及用品、被服消毒等。將使用過的試管、離心管、加樣器滴頭等一次性檢驗用品放入消毒桶內,經(jīng)過高溫高壓消毒后,再進行廢棄處理。定期對加樣器、吸耳球、顯微鏡等進行紫外線照射或者消毒液擦拭消毒。對計算機的鍵盤、鼠標、電話等進行消毒液擦拭消毒,采用計算機管理系統(tǒng),電腦打印檢驗報告單,做到申請單和報告單分開,從根本上解決檢驗報告單的消毒問題,切斷了傳播途徑。指定專門負責人負責生物安全的布置,檢查落實,包括消毒用器的領取、配制、發(fā)放,并且對消毒液進行定期更換檢查。每天對空氣、儀器設備的表面、試驗臺表面和地面進行消毒,并且定期檢測。
2.2 規(guī)范的無菌操作 在檢驗過程中,必須嚴格的遵守無菌技術的操作章程,嚴格洗手、戴口罩、佩戴無菌手套。在科室每個洗手籠頭前需要放置醫(yī)用消毒皂或者洗手液以及消毒液。
2.3 強化知識培訓,提高專業(yè)水平 定期或不定期組織全科人員學習衛(wèi)生部《醫(yī)院感染管理規(guī)范(試行)》和《消毒技術規(guī)范》等文件及管理辦法,根據(jù)科室的性質和特點,制定出切實可行的相關制度,定期監(jiān)測、檢查,杜絕工作中存在的隨意性。由于醫(yī)院感染學是一門新興學科,檢驗人員應不斷吸取新知識,而不能僅僅局限在舊的知識層次上。檢驗科在醫(yī)院感染管理中并不是處于從屬地位,而是同臨床科室一樣。具有獨立的舉足輕重的醫(yī)學地位。
2.4 提高防護設備的質量 醫(yī)院領導方面,應當加大對檢驗科的資金投入,購置一些必要的防護設備,領導需要清楚地認識到檢驗科的重要性。如:全科室安裝免提電話機,與此同時,也要對電話機進行消毒,以免因為對電話的污染造成醫(yī)源性感染。檢驗人員在結束檢驗操作后或者是檢驗同類標本后,在檢驗另一標本前應該及時洗手。同時,需要強調一點,帶醫(yī)用手套不能取代洗手,所以即使佩戴手套也要做好洗手工作。在發(fā)生意外血清飛濺入眼睛時,需要對眼部進行及時的清洗,所以,醫(yī)院需要購置安裝洗眼設備[4]。
2.5 認真開展好醫(yī)院感染的監(jiān)測工作,監(jiān)測是基礎,管理是手段,控制是目的。只有通過監(jiān)測才能取得第一手資料,才能發(fā)現(xiàn)醫(yī)院感染管理工作中的各種問題和薄弱環(huán)節(jié),為采取有效措施提供依據(jù),并通過監(jiān)測來評價各種措施的效果。
2.6 采用先進的檢測技術,協(xié)助查找傳染源,切斷傳播途徑,控制與降低醫(yī)院感染的發(fā)生 從不同感染患者同一時期分離出的同種病原菌,藥敏結果如有相同抗菌譜,初步判斷為同源性感染。利用分子生物學的理論和技術進一步證實,正確地追蹤傳染源。分子流行病學是以分子生物學地理論和技術研究流行病學的一個分支。利用的分子生物學實驗室技術,對院內感染所分離到的病原體和通過采樣所得環(huán)境中相同的細菌,除進行血清學、噬菌體、耐藥譜分型外,還進行了基因分型:如質粒圖譜、核酸內切酶圖譜、核酸探針等。以保證更穩(wěn)定、準確的追蹤傳染源,為院內感染流行病學的分析提供有利的依據(jù)。發(fā)現(xiàn)“苗頭”及時采取措施,多次杜絕了院內感染的發(fā)生。
醫(yī)院感染又稱醫(yī)院內獲得性感染或醫(yī)院內感染,是指住院患者發(fā)生的感染,包括入院時尚未發(fā)生此感染,也未處于此感染的潛伏期狀態(tài)。隨著醫(yī)院工業(yè)和醫(yī)院技術的發(fā)展,大量抗生素進入臨床,各種侵入性操作和檢查增多,醫(yī)院感染問題也日益突出,已成為醫(yī)院急需解決的公共衛(wèi)生問題。檢驗科作為一個單獨的科室,有舉足輕重的地位,因為它不僅僅是為全院的臨床服務,同時還要擔負起全院的微生物檢測工作。因此,檢驗科作為預防醫(yī)院感染的一個重要組織部門,在控制院內感染工作中,起著非常重要的作用,主要表現(xiàn)在以下幾個方面:檢驗科應當成立自己的防染小組,負責監(jiān)測各實驗室空氣消毒及無菌操作制度的落實情況,如:實驗室管理、人員防護、檢驗后的標本處理等,只有加強自身防護,個人自覺執(zhí)行,工作中認真仔細,才能有效地避免自身感染和院內交叉感染的發(fā)生,防患于末然;重點加強微生物實驗室的管理,微生物實驗室作為一個檢驗機構,要有計劃地向廣大醫(yī)務人員提供有關部門的信息,有的放矢地使用抗生素,增強廣大醫(yī)務人員預防醫(yī)院感染的意識,重視細菌培養(yǎng)和藥敏試驗,預防用藥,有根有據(jù),探索更有效地控制措施,預防醫(yī)院感染,所以,微生物實驗室在降低醫(yī)院感染發(fā)病率過程中起到舉足輕重的作用。由此總結,醫(yī)院感染的發(fā)生直接影響了患者家庭、社會以及國家的安全秩序。同時,醫(yī)院感染的防治工作也有所進展,但是仍存在許多不足,表現(xiàn)為:醫(yī)院感染教材較少;低年資住院醫(yī)師以及聘用護士的醫(yī)院感染整體知識水平較低;消毒滅菌重視不夠等。所以對醫(yī)院感染的預防和控制各級管理一定要重視,相信通過進一步完善已有的醫(yī)院感染監(jiān)控與管理體系,切實加強醫(yī)院感染教育與再教育,通過廣大醫(yī)務人員堅持不懈的努力,認真做好醫(yī)院感染防治工作,一定能把感染控制到最低水平。
參考文獻
[1] 常同欽,王秀萍,董蔽.醫(yī)院感染管理存在的問題與對策[J].中國醫(yī)院管理,2006
[2] 劉運德,樓永良.微生物學檢驗[M].人民衛(wèi)生出版社,2002