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關(guān)鍵詞:水產(chǎn)養(yǎng)殖;電化學(xué)氧化;光催化;臭氧氧化
20世紀(jì)70年代開始,我國(guó)的水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)開始迅速發(fā)展[1]。至今為止,我國(guó)水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)已經(jīng)在規(guī)模和產(chǎn)量上有了巨大的飛躍。然而,在經(jīng)濟(jì)利益發(fā)展和生活便利的同時(shí),問(wèn)題也接踵而來(lái)。水產(chǎn)養(yǎng)殖所排放的廢水日漸增多,養(yǎng)殖密度過(guò)高、餌料投喂過(guò)量、藥物投加等問(wèn)題使水產(chǎn)養(yǎng)殖廢水中的污染物含量越來(lái)越高,排放之后嚴(yán)重影響人們的日常生活。高級(jí)氧化技術(shù)是近年來(lái)水處理領(lǐng)域的研究熱點(diǎn),已經(jīng)被廣泛用于飲用水消毒和各種不同水質(zhì)的污廢水處理。高級(jí)氧化工藝是在傳統(tǒng)水處理技術(shù)上演變而來(lái)的,是能將水中污染物轉(zhuǎn)化成CO2和H2O以及無(wú)機(jī)物的化學(xué)反應(yīng)過(guò)程[2],主要有電化學(xué)氧化、光催化氧化、臭氧氧化等,具有氧化高效、徹底、不會(huì)產(chǎn)生二次污染,運(yùn)用范圍廣等優(yōu)點(diǎn)[3]。現(xiàn)在,已經(jīng)有多位學(xué)者將高級(jí)氧化技術(shù)應(yīng)用于處理水產(chǎn)養(yǎng)殖廢水,并在該領(lǐng)域不斷創(chuàng)新和探究。
1水產(chǎn)養(yǎng)殖廢水
1.1水產(chǎn)養(yǎng)殖廢水的污染來(lái)源
水產(chǎn)養(yǎng)殖廢水的污染來(lái)源是多方面的,主要包括物理污染、化學(xué)污染以及生活污水和工業(yè)廢水的排放污染[1]。物理污染是指在水產(chǎn)養(yǎng)殖過(guò)程中,養(yǎng)殖人員投入了大量的餌料,餌料殘?jiān)c水生物的排泄物和尸體非常容易造成水體的富營(yíng)養(yǎng)化,提高水質(zhì)濁度,降低水中溶解氧含量[4]?;瘜W(xué)污染是指在水產(chǎn)養(yǎng)殖過(guò)程中,養(yǎng)殖戶為提高水產(chǎn)品的效益和防止魚類疾病會(huì)添加一些激素藥物或殺菌劑[5],這些物質(zhì)會(huì)在水中溶解破壞水環(huán)境平衡,嚴(yán)重影響水質(zhì)。水產(chǎn)養(yǎng)殖廢水中還會(huì)有生活污水的摻雜,甚至附近工廠企業(yè)工業(yè)廢水的摻雜。
1.2水產(chǎn)養(yǎng)殖廢水的危害
水產(chǎn)養(yǎng)殖廢水中的污染物主要有NH4+-N、磷、亞硝酸鹽、懸浮顆粒物、有機(jī)物等[6]。這些污染物的長(zhǎng)期存在會(huì)影響水生物生長(zhǎng)和水環(huán)境平衡。有些養(yǎng)殖戶在養(yǎng)殖水體中加入的藥物也會(huì)影響水生物的正常生長(zhǎng)[7],其中某些藥物所含的重金屬和水中的亞硝酸鹽在水產(chǎn)品中積累,人類食用之后會(huì)嚴(yán)重?fù)p害身體健康甚至中毒死亡[5]。水產(chǎn)養(yǎng)殖廢水的排放量大、污染濃度低、影響范圍廣,因此處理的難度也相對(duì)較大,是水處理領(lǐng)域的一個(gè)難點(diǎn)問(wèn)題。
1.3我國(guó)水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展及現(xiàn)狀
我國(guó)的水產(chǎn)行業(yè)發(fā)展迅速,水產(chǎn)養(yǎng)殖量已經(jīng)遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過(guò)了水產(chǎn)捕撈量。據(jù)統(tǒng)計(jì),2016年我國(guó)水產(chǎn)養(yǎng)殖產(chǎn)量已經(jīng)達(dá)到了5142萬(wàn)t[5],占全世界水產(chǎn)養(yǎng)殖總量的70%,經(jīng)過(guò)短短兩年的發(fā)展,到2018年,我國(guó)水產(chǎn)養(yǎng)殖產(chǎn)量占到了全世界水產(chǎn)養(yǎng)殖量的77.29%。與此同時(shí),我國(guó)每年排放的水產(chǎn)養(yǎng)殖廢水已經(jīng)遠(yuǎn)超3億m,對(duì)我國(guó)水環(huán)境和人們?nèi)粘I疃荚斐闪司薮蟮挠绊憽?jù)統(tǒng)計(jì),我國(guó)長(zhǎng)江、黃河、珠江、淮河等七大水系有50%的水體不符合漁業(yè)水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)[8],海洋污染也十分嚴(yán)重。水環(huán)境的污染如果不及時(shí)控制會(huì)嚴(yán)重阻礙我國(guó)水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的可持續(xù)發(fā)展。
2高級(jí)氧化技術(shù)處理養(yǎng)殖廢水
2.1電化學(xué)氧化法
電化學(xué)氧化法是在外加電場(chǎng)的作用下發(fā)生電解反應(yīng),產(chǎn)生大量的羥基自由基等強(qiáng)氧化性物質(zhì)有效的處理水中重金屬,有機(jī)物等污染物,還能起到很好的殺滅細(xì)菌的效果[9]。電化學(xué)氧化法具有處理效率高,無(wú)二次污染,設(shè)備體積小的優(yōu)點(diǎn),目前已經(jīng)被很多國(guó)內(nèi)外的學(xué)者研究和應(yīng)用于水產(chǎn)養(yǎng)殖廢水的處理中。殷小亞等[10]采用DAS電極,研究電化學(xué)氧化技術(shù)對(duì)海水工廠化養(yǎng)殖尾水的殺菌作用。結(jié)果表明,在試驗(yàn)設(shè)定中,電化學(xué)氧化技術(shù)都表現(xiàn)出很高的殺菌作用,對(duì)弧菌的滅菌率最高可達(dá)百分之百,并且還具有能耗低的特點(diǎn)。Lang等[11]驗(yàn)證了電化學(xué)氧化法對(duì)海水養(yǎng)殖廢水中的氨氮、NO2--N、磷、COD和抗生素的處理效果。結(jié)果證明,該工藝對(duì)氨氮和NO2--N的去除率都達(dá)到了90%以上,磷去除率為72%,COD去除率為48%,同時(shí)具有很好的殺菌效果。對(duì)于試驗(yàn)中海水養(yǎng)殖廢水中的抗生素(磺胺二甲嘧啶和莫諾氟沙星)的去除率也達(dá)到了100%。
2.2臭氧氧化法
臭氧作為一種氧化性僅次于氟的氣體,具有很高的氧化性能[12]。臭氧能夠快速地和有機(jī)污染物發(fā)生氧化還原反應(yīng),將難降解有機(jī)物分解為毒性較低或無(wú)毒性的小分子物質(zhì)。臭氧氧化法分為臭氧直接反應(yīng)和臭氧間接反應(yīng)兩種,臭氧氧化法具有提高水體可生化性,不產(chǎn)生二次污染,易于控制,占地面積小,適用范圍廣的特點(diǎn)[9]。同時(shí)也存在氧化能力不足,臭氧利用率低,能耗大的問(wèn)題。因此,研究者們通過(guò)使用催化劑促進(jìn)臭氧更多、更快地產(chǎn)生羥基自由基,從而提高臭氧的氧化效率,也就形成了臭氧催化氧化技術(shù)。凌威[13]研究了臭氧催化氧化技術(shù)對(duì)某海參育苗基地廢水中抗生素的去除效果。結(jié)果顯示,在試驗(yàn)設(shè)定條件下,對(duì)氟苯尼考的去除率達(dá)到100%,對(duì)四環(huán)素的去除率達(dá)到86.2%,同時(shí)對(duì)氨氮也有明顯的去除效果,處理后的水質(zhì)符合海參育苗水質(zhì)的安全要求。李嘯林[14]研究了臭氧對(duì)于封閉式循環(huán)養(yǎng)殖水體的消毒處理效果。結(jié)果顯示,臭氧的加入使養(yǎng)殖水體中的氨氮、亞硝酸鹽、CODMn等污染物含量都有明顯的下降。其中亞硝酸鹽含量的下降幅度最大,試驗(yàn)環(huán)境最佳的一組殺菌率達(dá)到了99.6%。
2.3光催化氧化法
光催化氧化法是利用半導(dǎo)體(最常用的是TiO2)為催化劑,在光能作用下產(chǎn)生活性極強(qiáng)的羥基自由基,然后利用羥基自由基的強(qiáng)氧化性與有機(jī)物發(fā)生反應(yīng),將有機(jī)物分解成CO2、H2O等物質(zhì)[9]。光催化氧化法具有較好利用光能、反應(yīng)時(shí)間短、反應(yīng)條件溫和、無(wú)毒性、易于其他高級(jí)氧化技術(shù)聯(lián)用的優(yōu)點(diǎn)。李晨等[15]制備了Y3+/TiO2光催化劑并研究了其對(duì)養(yǎng)蝦廢水的處理效果。結(jié)果表明,采用純TiO2為催化劑的對(duì)照組在可見(jiàn)光和紫外光照射下CODCr去除率分別為14.7%、26.9%。在同樣的控制條件下,Y3+/TiO2光催化劑組的CODCr去除率分別達(dá)到了18.8%和37.5%,有明顯提升。于曉彩等[16]制備了CaF2(Tm3+)/TiO2光催化劑,研究了其對(duì)模擬海水養(yǎng)殖廢水中氨氮的去除效果。條件結(jié)果顯示,CaF2(Tm3+)/TiO2光催化劑的光催化效率明顯高于純TiO2,在規(guī)定下氨氮的去除率達(dá)到了90%。朱婉婷等[17]通過(guò)自制復(fù)合光催化劑CuO/ZnO探究其對(duì)水養(yǎng)殖廢水中的鹽酸四環(huán)素的降解效果。結(jié)果顯示,在試驗(yàn)設(shè)定的最佳環(huán)境下,鹽酸四環(huán)素的去除率達(dá)到了93.01%。
關(guān)鍵詞:水產(chǎn)養(yǎng)殖; 病害; 防治思路
隨著水產(chǎn)養(yǎng)殖病害的種類越來(lái)越多,爆發(fā)的頻率越來(lái)越快,給水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展帶來(lái)巨大的沖擊,使許多養(yǎng)殖企業(yè)和個(gè)人喪失信心。筆者將重點(diǎn)分析幾種較為流行的病害,并提出防治措施。
1 病害的流行趨勢(shì)
1.1 病害種類多 水產(chǎn)養(yǎng)殖中的病害有許多種,而且隨著環(huán)境污染的加劇,病害的種類也在逐年增加,例如,鯉魚普遍流行的出血病、三代蟲病等;草魚的常見(jiàn)病有赤皮病、爛鰓病等;蝦類的常見(jiàn)病有細(xì)菌病、寄生蟲病、紅腿病等。
1.2 耐藥性強(qiáng) 耐藥性的增加給病害防治工作造成了很大的困難,而且會(huì)加大魚病防治的公害化程度。從車輪蟲病到中華鳋病;從細(xì)菌性腸炎病、赤皮病到敗血癥。相同的病害,由于具有了耐藥性,而導(dǎo)致用藥量加大、用藥時(shí)間長(zhǎng),同時(shí)還需要根據(jù)病害的實(shí)際情況不斷更換藥品,然而治療效果還不是非常明顯。
1.3 流行范圍廣 由于水是流動(dòng)的,所以病害具有很強(qiáng)的傳播性,而導(dǎo)致流行范圍非常廣泛。許多病害從過(guò)去的季節(jié)性流行演變成了多季節(jié)性甚至是全年性的病害,而且流行的間隔時(shí)間越來(lái)越短。
2 常見(jiàn)病害的主要類型
2.1 細(xì)菌性敗血癥 對(duì)于細(xì)菌性敗血癥,不同地區(qū)的稱呼也是不一樣的,其發(fā)病原因是由溫和氣單胞菌、嗜水氣單胞菌、河弧菌生物變種等多種革蘭氏陰性桿菌感染引起的。主要分為以下幾種:腹水病 出血性腹水病、溶血性腹水病、淡水養(yǎng)殖魚類暴發(fā)性流行病等,是魚類病害中常見(jiàn)的疾病。
2.2 亞硝酸鹽 通過(guò)呼吸作用,亞硝酸鹽經(jīng)魚的鰓絲進(jìn)入血液,降低魚的紅細(xì)胞數(shù)量和血紅蛋白數(shù)量,從而減弱了血液的載氧能力。導(dǎo)致魚的攝食量有所減少,出現(xiàn)組織性缺氧,而且鰓組織出現(xiàn)病變而對(duì)呼吸產(chǎn)生嚴(yán)重的影響、缺乏平衡能力,這時(shí)魚的血液為紅褐色或者黑紫色,甚至于內(nèi)臟器官皮膜的通透性也發(fā)生了改變,滲透條件能力降低,造成充血,其癥狀與出血病相似。
2.3 瓜蟲病 瓜蟲病是一種寄生蟲性原蟲病,是淡水魚類中的一種常見(jiàn)病害。幾乎在所有的淡水魚類養(yǎng)殖中都出現(xiàn)過(guò)瓜蟲病,導(dǎo)致大量的魚種、魚苗死亡。淡水小瓜蟲病多是由多子小瓜蟲引起的。隨著水溫的變化,小瓜蟲生存的時(shí)間也發(fā)生著變化,在20~25℃或者1℃時(shí),蟲體最易感染宿主魚;而當(dāng)水溫在30℃以上時(shí),蟲體不能發(fā)育,所以在炎熱的夏天,瓜蟲病不會(huì)發(fā)生。瓜蟲病的病征表現(xiàn)是染病魚體表面或鰓上出現(xiàn)白色小點(diǎn),因此瓜蟲病又稱為白點(diǎn)病。
3 病害的防治措施
只有推行健康的養(yǎng)殖模式,才能從根本上解決水產(chǎn)養(yǎng)殖中的病害問(wèn)題,堅(jiān)持“以防為主,防止結(jié)合”的原則,加強(qiáng)養(yǎng)殖生產(chǎn)管理,保護(hù)養(yǎng)殖環(huán)境。
3.1 細(xì)菌性病害的防治措施 細(xì)菌性魚病主要有出血病、爛鰓病、赤皮病、腸炎病以及細(xì)菌性敗血癥等,引起病變的細(xì)菌主要是水氣單胞菌、黏球菌、弧菌、假單細(xì)胞菌等。當(dāng)水質(zhì)惡化,而且有適宜的溫度調(diào)節(jié),這些病菌通過(guò)魚的呼吸經(jīng)鰓到達(dá)魚的體內(nèi),生成病灶。所以保證水的質(zhì)量,控制好水溫是完全可以避免此類魚病的發(fā)生。
3.2 病毒性病害的防治措施 水產(chǎn)養(yǎng)殖病害中最嚴(yán)重的類型之一是病毒性病害,這是導(dǎo)致魚類死亡的最主要原因。主要的水產(chǎn)病有河蟹抖抖病、蝦類肌肉白濁病等。主要預(yù)防措施有,首先是徹底清塘后,在將魚放入池塘的7 d前,用精碘再進(jìn)行一次消毒。這種方式對(duì)病毒性病害有很好的防治效果。其次,在發(fā)病季節(jié)到來(lái)之前,增加2次精碘的使用;如果已經(jīng)發(fā)生病害,使用內(nèi)服藥,以防止病害的擴(kuò)散。
4 水產(chǎn)養(yǎng)殖病害防治基本思路及對(duì)策
從水產(chǎn)養(yǎng)殖的實(shí)際情況出發(fā),我國(guó)水生物病害防治的基本原則是“預(yù)防為主、 防治結(jié)合”,以實(shí)現(xiàn)水產(chǎn)品質(zhì)量的安全性。
積極爭(zhēng)取財(cái)政補(bǔ)貼,加快水生動(dòng)物基本防治的技術(shù)開發(fā),同時(shí)逐步完善相關(guān)的配套設(shè)施。使得水生動(dòng)物疾病的診斷技術(shù)產(chǎn)品快速的推陳出新,并加速漁藥的研發(fā)。
加大健康養(yǎng)殖技術(shù)的推廣力度,實(shí)現(xiàn)以預(yù)防為重點(diǎn)的生態(tài)養(yǎng)殖。首先,要加強(qiáng)“養(yǎng)魚就是養(yǎng)水”這個(gè)理念的宣傳。第二,實(shí)現(xiàn)規(guī)?;B(yǎng)殖,通過(guò)財(cái)政補(bǔ)貼的方式積極推廣芽孢桿菌制劑、以乳酸菌為主導(dǎo)菌的EM菌劑等微生態(tài)制劑,逐步淘汰以化學(xué)成分為主的水質(zhì)凈化消毒劑,從而形成健康的生態(tài)養(yǎng)殖環(huán)境。第三,利用財(cái)政補(bǔ)貼等手段,以草魚出血病滅活疫苗,同時(shí)推廣、普及工侑四是以水產(chǎn)品出口基地為重點(diǎn),建設(shè)標(biāo)準(zhǔn)化養(yǎng)殖示范區(qū)。
對(duì)于從事水產(chǎn)養(yǎng)殖的企業(yè)和個(gè)人來(lái)說(shuō),病害的防治是關(guān)系著生存與發(fā)展的大問(wèn)題,應(yīng)采取積極有效的方式防止或解決病害發(fā)生或擴(kuò)散,保證水生動(dòng)物的水環(huán)境,保證水的溫度,實(shí)現(xiàn)健康養(yǎng)殖。
參考文獻(xiàn)
[1] 朱麗婭,普家勇. 水產(chǎn)養(yǎng)殖病害綜述. 漁業(yè)致富指南,2005(1):49- 50.
中草藥飼料添加劑又稱綠色飼料添加劑,在我國(guó)水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)中常用的中草藥飼料添加劑按配方組成來(lái)分,有單味飼料添加劑、中西結(jié)合飼料添加劑和復(fù)方飼料添加劑之分。按作用來(lái)分,有營(yíng)養(yǎng)性和非營(yíng)養(yǎng)性之分;按來(lái)源來(lái)看,中草藥飼料添加劑的種類有動(dòng)物、植物和礦物飼料添加劑之分。其中,水產(chǎn)養(yǎng)殖中常用的植物類中草藥飼料添加劑有大蒜、松針、甘草、艾葉、茯苓、槐葉和蜂花粉;常用的礦物類中草藥飼料添加劑有麥飯石、滑石、沸石。中草藥飼料添加劑具有天然性、低毒性、無(wú)抗藥性、多功能性等特點(diǎn)。許多中草藥飼料添加劑都是來(lái)自動(dòng)物、植物、礦物質(zhì)等其他自然事物中的純天然物質(zhì),都保留了藥物的自然狀態(tài)和生物活性。中草藥飼料添加劑的低毒性指經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期的實(shí)踐篩選和科學(xué)搭配,中草藥對(duì)人體無(wú)害而又最容易被接受的外源凈化物質(zhì)被保留下來(lái),能給水生物帶來(lái)營(yíng)養(yǎng)又無(wú)任何毒副作用。中草藥飼料添加劑的多功能性指成分復(fù)雜、種類繁多的中草藥,都是在中醫(yī)藥理論和傳統(tǒng)方法原則指導(dǎo)下搭配而成的,其功能也更加多樣,如沸石不但能降低魚類死亡率,還能改善魚類肉質(zhì)。
2.中草藥飼料添加劑在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的具體應(yīng)用
2.1促進(jìn)飼料轉(zhuǎn)化和生長(zhǎng)
一些中草藥中除含有豐富的蛋白質(zhì)、糖和脂肪等營(yíng)養(yǎng)元素外,還含有豐富的氨基酸、維生素和礦物質(zhì)等微量元素,將之應(yīng)用到水產(chǎn)養(yǎng)殖中,不但可以增加水產(chǎn)飼料的營(yíng)養(yǎng),還可以增強(qiáng)飼料中消化酶的活力,加快營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收和合成代謝,提高飼料利用率和水產(chǎn)生物的生長(zhǎng)發(fā)育速度。如在鯉魚基礎(chǔ)飼料中添加佩蘭、丹皮和靈芝等中草藥,可有效改善鯉魚肝胰臟的蛋白酶活性;在斜帶石斑魚飼料中加入1%的復(fù)方中草藥,可以提高石斑魚的消化酶活力,改善石斑魚的生產(chǎn)性能。
2.2提高水產(chǎn)品的攝食率
水生物與其他動(dòng)植物一樣,都喜歡那些符合自己味覺(jué)需求的色、香、味俱全的食物。將一些中草藥制成有符合水產(chǎn)動(dòng)物進(jìn)食嗜好的誘食劑,可以有效提高水產(chǎn)生物進(jìn)食量,提高飼料利用率。如根據(jù)錦鯉嗜好揮發(fā)性低分子有機(jī)物散發(fā)的氣味,在錦鯉飼料中加入火棘、滸苔、海星,可以有效提高錦鯉進(jìn)食量,減少多余的飼料對(duì)水體的污染;同理,在淡水蝦、黃鱔、對(duì)蝦飼料中加入草木犀和阿魏提取物,也可以對(duì)這些水生動(dòng)植物起到誘食作用。
2.3改善水產(chǎn)動(dòng)物質(zhì)量
一些中草藥中的成分能有效改善水產(chǎn)動(dòng)物的生化組成,改善水產(chǎn)物品的食用品味。因此,在水產(chǎn)養(yǎng)殖中,人們常常用一些中草藥飼料添加劑來(lái)提高養(yǎng)殖動(dòng)物的肉質(zhì)。一般來(lái)說(shuō),魚類的蛋白質(zhì)和脂肪非常高,改善魚類肌肉中的蛋白質(zhì)和脂肪含量,可以有效改善魚類質(zhì)量,因此,人們常用一些中草藥飼料來(lái)改善魚類肉質(zhì)。如將杜仲葉烘干磨成粉末投入魚飼料中,可以有效減少魚類體內(nèi)不必要的脂肪和膽固醇,使魚肉更富彈性,魚兒的肉質(zhì)也更加鮮美。同樣,將山楂、麥芽等中草藥成分加入到銀鯽飼料中,也可以減少魚體水分,改善鯽魚的肉質(zhì)。
2.4消毒驅(qū)蟲及疾病預(yù)防
許多中草藥如斑斕分、金錢花、穿心蓮、野、石榴皮、使君子、紫花地丁等都具有消毒殺菌、驅(qū)蟲抗病作用,將之應(yīng)用到水產(chǎn)養(yǎng)殖中去,可以有效改善機(jī)體免疫功能,提高水生動(dòng)物的免疫功能和抗病能力。如黃連水提取物在淡水魚細(xì)菌防治中效果最好,因此,人們常將黃連水提取物加入到淡水魚飼料中去。同樣,人們發(fā)現(xiàn),大蒜油和從其他草藥中提取的皂苷類天然活性物質(zhì)一起制成的復(fù)方制劑,能有效提高對(duì)蝦血細(xì)胞的吞噬率、殺傷率,所以,在對(duì)蝦飼養(yǎng)中,這種復(fù)方制劑的使用范圍也極廣。
2.5提高水產(chǎn)動(dòng)物的抗應(yīng)激能力和成活率
水產(chǎn)動(dòng)物的應(yīng)激能力指水產(chǎn)動(dòng)物抗外界環(huán)境因素中的不良因子的能力。在集約化養(yǎng)殖中,尤其是在長(zhǎng)途運(yùn)輸和苗種移植中,水產(chǎn)動(dòng)物常常會(huì)受到各種不良因素的影響,這對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物的抗應(yīng)激能力來(lái)說(shuō),是個(gè)嚴(yán)重的挑戰(zhàn)。將中草藥一些能激發(fā)機(jī)體應(yīng)激能力的藥物如藿香、蒼術(shù)、厚樸等用到水產(chǎn)養(yǎng)殖中,可以提高動(dòng)物對(duì)低壓缺氧環(huán)境和中毒性缺氧的耐受力,能保護(hù)細(xì)胞膜和亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)的完整性。因此,人們常用中草藥飼料添加劑來(lái)提高動(dòng)物體的抗應(yīng)激能力。
3.中草藥飼料添加劑在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的應(yīng)用前景
3.1中草藥應(yīng)用研究
隨著人們健康消費(fèi)意識(shí)的不斷提高,綠色水產(chǎn)養(yǎng)殖也受到人們的廣泛關(guān)注。結(jié)合現(xiàn)代醫(yī)藥學(xué)、營(yíng)養(yǎng)學(xué)知識(shí)來(lái)研究中草藥有效成分的作用機(jī)理,就中草藥飼料在水養(yǎng)動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)代謝、免疫和激素分泌調(diào)控中的作用進(jìn)行深入研究,是今后中草藥研究關(guān)注的重要問(wèn)題。
3.2多樣加工和利用
隨著社會(huì)工業(yè)生產(chǎn)工藝的改進(jìn),中草藥配制、提取也朝著微量化、系列化、專業(yè)化方向不斷發(fā)展。利用現(xiàn)代植物化學(xué)儀器和分析手段,提取、分離和堅(jiān)定中草藥中的有效成分,將其制成各類融粉劑、口服液、包衣微囊劑等,是水產(chǎn)養(yǎng)殖飼料工業(yè)現(xiàn)代化新的的發(fā)展趨勢(shì)。
3.3中草藥制作標(biāo)準(zhǔn)化規(guī)范化
關(guān)鍵詞: 工廠化養(yǎng)殖模式 “水產(chǎn)動(dòng)物病病防治” 實(shí)驗(yàn)教學(xué)改革
海洋是人類生命的搖籃,“人類從海洋中走來(lái),又向海洋中走去”,這是自然變遷和生產(chǎn)發(fā)展的必然規(guī)律。隨著人口激增、資源衰退和環(huán)境惡化問(wèn)題日漸突出,為了持續(xù)利用生物資源,人類積極進(jìn)軍海洋?!皳窈6B(yǎng)”,堅(jiān)持走健康的海水養(yǎng)殖之路,已經(jīng)成為當(dāng)今世界的共識(shí)和發(fā)展方向。隨著我國(guó)工廠化水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的快速發(fā)展,養(yǎng)殖規(guī)模、養(yǎng)殖密度不斷加大,由病原細(xì)菌及其他病原微生物所引起的傳染病時(shí)有發(fā)生,實(shí)踐中諸多難題有待于魚病學(xué)及病原微生物學(xué)科技人員從事大量研究工作,以促進(jìn)魚病學(xué)整體水平的提高及有效控制傳染病的發(fā)生與流行,提高工廠化水產(chǎn)養(yǎng)殖的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益。在現(xiàn)代工廠化養(yǎng)殖模式的指導(dǎo)下,高等院校水產(chǎn)動(dòng)物病病防治教育如何順應(yīng)現(xiàn)代工廠化水產(chǎn)養(yǎng)殖模式進(jìn)行教學(xué)改革,培養(yǎng)學(xué)生的創(chuàng)新精神和創(chuàng)新能力,全面提高水產(chǎn)養(yǎng)殖人才的素質(zhì),以適應(yīng)社會(huì)的需求和市場(chǎng)經(jīng)濟(jì)發(fā)展的需要,已成為亟待解決的問(wèn)題。
一、用現(xiàn)代工廠化養(yǎng)殖模式透視現(xiàn)行的“水產(chǎn)動(dòng)物病病防治”課程的實(shí)驗(yàn)教學(xué)
“水產(chǎn)動(dòng)物病病防治”是高等水產(chǎn)院校水產(chǎn)養(yǎng)殖專業(yè)的主要專業(yè)課之一,本課程主要介紹水產(chǎn)動(dòng)物病害發(fā)生的病因、致病機(jī)理、流行規(guī)律以及診斷技術(shù)、預(yù)防措施和治療方法的科學(xué),它是一門理論性和實(shí)踐性都很強(qiáng)的科學(xué)。目前,本課程的教育特點(diǎn)是課時(shí)少,教學(xué)內(nèi)容多,尤其是細(xì)菌性疾病和病毒性疾病。因現(xiàn)代水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)向集約型工廠化養(yǎng)殖方向發(fā)展,工廠化養(yǎng)殖規(guī)模及密度日漸加大,養(yǎng)殖動(dòng)物的環(huán)境條件、種群密度、飼料質(zhì)量等往往與生活在天然環(huán)境中有較大差別,很難完全滿足這些動(dòng)物的需要,降低了水產(chǎn)養(yǎng)殖動(dòng)物對(duì)疾病的抵抗力。這些對(duì)養(yǎng)殖動(dòng)物不利的條件卻對(duì)某些病原的增殖和傳播很有利,再加上捕撈和運(yùn)輸過(guò)程中的人工操作,常使動(dòng)物身體受傷,病原乘機(jī)侵入,所以養(yǎng)殖動(dòng)物比在天然環(huán)境下容易生病。因此,水產(chǎn)動(dòng)物在育苗和養(yǎng)成過(guò)程中,疾病往往成為生產(chǎn)成敗的關(guān)鍵問(wèn)題之一。但各高等院校該課程的實(shí)驗(yàn)教學(xué)內(nèi)容及教學(xué)方式方法均與現(xiàn)代工廠化養(yǎng)殖模式不相適應(yīng)。在產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)、人口結(jié)構(gòu)、生態(tài)環(huán)境、社會(huì)因素急速變化的今天,為了適應(yīng)水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展的需要,高等院校“水產(chǎn)動(dòng)物病病防治”課程的實(shí)驗(yàn)教學(xué)必須通過(guò)教學(xué)改革加強(qiáng)和補(bǔ)充新的教學(xué)內(nèi)容。
二、按照現(xiàn)代工廠化養(yǎng)殖模式修訂“水產(chǎn)動(dòng)物病病防治”課程的實(shí)驗(yàn)教學(xué)目的與要求
參照教育部就高等水產(chǎn)養(yǎng)殖專業(yè)制定的指導(dǎo)性教學(xué)大綱的培養(yǎng)目標(biāo)與要求,結(jié)合自身特點(diǎn),我校制定了水產(chǎn)養(yǎng)殖專業(yè)“水產(chǎn)動(dòng)物病病防治”教學(xué)大綱。其教學(xué)目的要求為:通過(guò)講授和實(shí)踐教學(xué),使學(xué)生掌握水產(chǎn)動(dòng)物疾病的發(fā)生原因、病理機(jī)制、流行規(guī)律以及診斷、預(yù)防和治療方法,使學(xué)生不僅深刻領(lǐng)會(huì)和理解所學(xué)課程的內(nèi)容和基本理論、基本概念、基本方法,更注重實(shí)用知識(shí)和操作技能,在“全面預(yù)防、積極治療”的原則指導(dǎo)下為提高水產(chǎn)養(yǎng)殖生產(chǎn)和自然資源增殖服務(wù)。
現(xiàn)行的教學(xué)大綱為高等院校水產(chǎn)專業(yè)“水產(chǎn)動(dòng)物病病防治”教學(xué)起到了重要的指導(dǎo)作用。同時(shí)在現(xiàn)代工廠化養(yǎng)殖模式的映射下,也暴露出相應(yīng)的缺陷和不足,不能順應(yīng)水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)大發(fā)展的需要。因此,必須對(duì)現(xiàn)行的“水產(chǎn)動(dòng)物病病防治”實(shí)驗(yàn)教學(xué)大綱中的目的要求進(jìn)行修訂,以培養(yǎng)具有創(chuàng)新精神和創(chuàng)新能力及較強(qiáng)動(dòng)手能力的水產(chǎn)科技人才,適應(yīng)社會(huì)的需求。修訂新的實(shí)驗(yàn)教學(xué)大綱必須考慮到:(1)順應(yīng)現(xiàn)代工廠化養(yǎng)殖模式;(2)以高等院校水產(chǎn)養(yǎng)殖教育培養(yǎng)人才的總體目標(biāo)為原則;(3)以水產(chǎn)養(yǎng)殖教育本科層次為水準(zhǔn);(4)與高等水產(chǎn)科技人才的知識(shí)結(jié)構(gòu)相吻合;(5)有利于培養(yǎng)學(xué)生的創(chuàng)新精神和創(chuàng)新能力及動(dòng)手能力;(6)促進(jìn)教師不斷研究教學(xué)方法提高教學(xué)質(zhì)量。教學(xué)目的要求不是單純要求教師“教什么”,不僅要求學(xué)生通過(guò)“水產(chǎn)動(dòng)物病病防治”的實(shí)驗(yàn)教學(xué)“掌握什么、熟悉什么、了解什么”,而且對(duì)教師的教學(xué)手段、方式方法提出要求,使教師不僅知道“教什么”,還要研究“怎樣教”。
三、順應(yīng)現(xiàn)代工廠化養(yǎng)殖模式改革“水產(chǎn)動(dòng)物病病防治”的實(shí)驗(yàn)教學(xué)內(nèi)容
現(xiàn)行的高等水產(chǎn)養(yǎng)殖專業(yè)課程“水產(chǎn)動(dòng)物病病防治”的實(shí)驗(yàn)教學(xué)內(nèi)容,其特點(diǎn)為課時(shí)少,教學(xué)內(nèi)容多,在教材內(nèi)容中注重追求水產(chǎn)動(dòng)物病害學(xué)科范圍知識(shí)的系統(tǒng)性。在現(xiàn)代工廠化養(yǎng)殖模式的指導(dǎo)下,在教學(xué)過(guò)程中要有所創(chuàng)新,打破面面俱到、小而全的教學(xué)內(nèi)容。
1.更新教學(xué)內(nèi)容,擴(kuò)展對(duì)新知識(shí)、新技術(shù)的吸納與傳授。
隨著生物技術(shù)在醫(yī)藥衛(wèi)生、農(nóng)林牧漁、輕工、食品、化工和能源等領(lǐng)域的廣泛應(yīng)用,水產(chǎn)養(yǎng)殖學(xué)科領(lǐng)域知識(shí)更新的頻率、速率在逐漸加快?!八a(chǎn)動(dòng)物病病防治”的實(shí)驗(yàn)教學(xué)改革,要注意跟蹤學(xué)科領(lǐng)域前沿發(fā)展變化的動(dòng)態(tài),將生物技術(shù)新的知識(shí)增長(zhǎng)點(diǎn)和新技術(shù)及時(shí)吸納融合到教學(xué)中來(lái),讓學(xué)生熟悉和掌握學(xué)科前沿的新的理論知識(shí)和操作技術(shù),為他們將來(lái)從事水產(chǎn)養(yǎng)殖工作及深入研究打下良好基礎(chǔ)。
2.理論教學(xué)與實(shí)踐教學(xué)并重,注重對(duì)學(xué)生能力的培養(yǎng)。
在教學(xué)改革過(guò)程中,把重點(diǎn)放在啟發(fā)誘導(dǎo)學(xué)生獨(dú)立思考問(wèn)題,培養(yǎng)學(xué)生將所學(xué)知識(shí)應(yīng)用到實(shí)際解決問(wèn)題的能力上。以臨床病例為引導(dǎo)來(lái)進(jìn)行討論分析的教學(xué)模式,使學(xué)生能夠把所學(xué)理論知識(shí)應(yīng)用到解決實(shí)際問(wèn)題中。實(shí)踐教學(xué)中,注重培養(yǎng)學(xué)生實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)的綜合能力,即自學(xué)能力、分析能力、設(shè)計(jì)能力、動(dòng)手能力等。實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目包括病魚的檢驗(yàn)、病原菌的分離培養(yǎng)與鑒定、病原菌的致病性、細(xì)菌對(duì)藥物的敏感性試驗(yàn)等。
3.教學(xué)、科研相促進(jìn)。
自20世紀(jì)70年代以來(lái),世界海水養(yǎng)殖技術(shù)突飛猛進(jìn),養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)空前發(fā)展,在眾多的海水養(yǎng)殖行業(yè)中,海洋經(jīng)濟(jì)魚類的養(yǎng)殖與開發(fā)歷來(lái)受到世界各國(guó)的特別關(guān)注。但目前尚存在養(yǎng)殖設(shè)施水平較低、管理不甚規(guī)范、魚種和成魚頻繁交易、大環(huán)境逐日惡化等問(wèn)題,以致病害日趨嚴(yán)重,并已構(gòu)成制約其人工養(yǎng)殖發(fā)展的重大障礙,給養(yǎng)殖生產(chǎn)造成了很大的經(jīng)濟(jì)損失,病害防治問(wèn)題,已成為當(dāng)前產(chǎn)業(yè)持續(xù)、健康、穩(wěn)定發(fā)展的重要課題而受到養(yǎng)殖界的特別關(guān)注。研究揭示病原種屬,建立相應(yīng)的檢驗(yàn)技術(shù),明確感染癥的高效防治方法,無(wú)疑將對(duì)提高人工養(yǎng)殖的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益都是至關(guān)重要的。因此,教學(xué)科研互動(dòng),使學(xué)生以多種形式參與教師科研,形成濃厚的學(xué)術(shù)氣氛,既豐富了科研工作內(nèi)容,又豐富了教學(xué)內(nèi)容,形成了以學(xué)生為主體,科研為動(dòng)力,教學(xué)內(nèi)容深入拓展的模式。
4.開設(shè)綜合性、設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目,培養(yǎng)學(xué)生分析問(wèn)題與解決問(wèn)題的能力。
在“水產(chǎn)動(dòng)物病病防治”的實(shí)驗(yàn)教學(xué)改革中,增開綜合性、設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目,突出學(xué)科專業(yè)的特點(diǎn)。綜合性實(shí)驗(yàn)是學(xué)生在具有一定的知識(shí)和技能的基礎(chǔ)上,運(yùn)用某一門課程的綜合知識(shí)或多門課程的相關(guān)知識(shí)對(duì)實(shí)驗(yàn)技能和方法進(jìn)行綜合訓(xùn)練的一種復(fù)合型實(shí)驗(yàn)。綜合性實(shí)驗(yàn)內(nèi)容應(yīng)滿足:涉及一門課程的三個(gè)以上知識(shí)點(diǎn);或涉及多門課程的知識(shí)點(diǎn);或一門課程多項(xiàng)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容的有機(jī)綜合。設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)要求學(xué)生綜合多門學(xué)科的知識(shí)和各種實(shí)驗(yàn)原理來(lái)設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案,而且要求學(xué)生能充分運(yùn)用已學(xué)的知識(shí)去發(fā)現(xiàn)問(wèn)題、解決問(wèn)題。開設(shè)設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖亲寣W(xué)生在實(shí)踐中將相關(guān)的基礎(chǔ)知識(shí)及基本理論得以實(shí)踐、融會(huì)貫通,培養(yǎng)其獨(dú)立發(fā)現(xiàn)問(wèn)題、解決問(wèn)題的能力,以最大限度發(fā)揮學(xué)生學(xué)習(xí)的主動(dòng)性。設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)內(nèi)容應(yīng)滿足:教師給定實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、方案,學(xué)生自己選擇儀器設(shè)備,擬定實(shí)驗(yàn)步驟加以實(shí)現(xiàn);或教師擬定實(shí)驗(yàn)題目和要求,學(xué)生自行設(shè)計(jì)方案加以實(shí)現(xiàn);或根據(jù)相關(guān)課程或理論的特點(diǎn),學(xué)生自主選題,自主設(shè)計(jì),在教師指導(dǎo)下得以實(shí)現(xiàn)。
綜合性、設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目的開設(shè),使學(xué)生不僅加深對(duì)所學(xué)知識(shí)的理解,牢固掌握專業(yè)知識(shí)及基本理論、基本概念、基本技能,而且提高了學(xué)生實(shí)際動(dòng)手能力及分析問(wèn)題與解決問(wèn)題的能力,同時(shí)使學(xué)生初步了解與感知科學(xué)研究和科學(xué)實(shí)驗(yàn)的基本步驟與方法,加強(qiáng)了學(xué)生創(chuàng)新能力和綜合素質(zhì)的培養(yǎng)。
參考文獻(xiàn):
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在水產(chǎn)養(yǎng)殖的水體中,由于水池內(nèi)很多有機(jī)物的發(fā)酵反映,會(huì)讓水體中生成許多的還原性中間產(chǎn)物,例如硫化氫、亞硝酸鹽以及氨氮等等,這些產(chǎn)物對(duì)于很多養(yǎng)殖魚類來(lái)說(shuō)會(huì)產(chǎn)生較大的不良影響,同時(shí)在水體中存在很多水生生物,特別是一些微生物如細(xì)菌或寄生蟲,這些相對(duì)來(lái)說(shuō)容易造成危害的微生物絕大部分是條件致病菌,在水體稍微惡化的情況之下,很多魚類產(chǎn)品由于自身抵抗能力降低會(huì)導(dǎo)致致病菌的毒性左右更大,從而對(duì)水產(chǎn)品形成更大的傷害。因此我們必須要控制好水體中的有毒物質(zhì)。解決對(duì)策:第一,要對(duì)養(yǎng)殖區(qū)域進(jìn)行定期換水,適當(dāng)?shù)募幼⑿滤坏诙?,要有?jì)劃的科學(xué)的進(jìn)行施肥或者投餌,合理的使用藥物,避免水體自身形成污染;第三,盡量多選擇使用微生物藥劑,例如光合細(xì)菌和芽孢桿菌,利用微生物的特性將水體中的各種有害物質(zhì)進(jìn)行分解,從而起到凈化水體的作用,需要注意的是,在使用微生物藥劑的同時(shí)必須注意避免使用殺菌藥物,以免同時(shí)將微生物殺死,減少其使用效果;第四,對(duì)老化的養(yǎng)殖池塘進(jìn)行適度的改良,可以在每個(gè)生產(chǎn)周期之間的冬閑時(shí)候,將水體中多余的淤泥進(jìn)行清除,同時(shí)對(duì)池塘進(jìn)行消毒,將殘留在淤泥中的有害物質(zhì)消滅;第五,對(duì)水體直接進(jìn)行消毒,進(jìn)排水渠道必須分開,建造蓄水池,通過(guò)一些過(guò)濾消毒等步驟,讓水體能夠達(dá)到相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)。
二、PH值高低的影響及解決對(duì)策
一方面,PH值太高或者太低對(duì)養(yǎng)殖魚類會(huì)產(chǎn)生極大的危害,甚至造成魚類成批死亡;當(dāng)PH值偏低時(shí),水體為酸性,這時(shí)養(yǎng)殖魚類的血液PH值會(huì)隨之降低,魚類的載氧能力不足,容易導(dǎo)致生理缺氧,雖然水體并不缺氧,但是還會(huì)看見(jiàn)魚類浮頭的現(xiàn)象,耗氧量降低會(huì)讓魚類的新陳代謝速度減緩,雖然提供了充足的事物,但是魚類始終保持在饑餓的狀態(tài);另一方面,當(dāng)水體中PH值過(guò)高或者過(guò)低,對(duì)于水體的水質(zhì)會(huì)產(chǎn)生很大的影響,當(dāng)水體中PH值小于6時(shí),水體中大約有90%左右的硫化物以硫化氫的形式存在,這樣就加強(qiáng)了硫化物的毒性,而當(dāng)PH值超過(guò)8點(diǎn)之后,很多氨離子會(huì)產(chǎn)生有毒的氨氣,不利于魚類成長(zhǎng)。總之,如果不好好控制PH值,那么其對(duì)水產(chǎn)養(yǎng)殖的造成的損失是非常大的。解決對(duì)策:首先是PH值過(guò)低的解決對(duì)策,在水體內(nèi)要盡量避免使用漂白粉,而是選擇使用生石灰來(lái)提升水體的PH值,用量大約是平均水深1米使用生石灰1.5到2kg左右;此外還可以選擇將生石灰進(jìn)行定期播撒,以改變水體PH值不平衡的現(xiàn)象,此方法每次使用生石灰的量大約是每平方米200到300克左右。其次是解決PH值過(guò)高的解決對(duì)策,當(dāng)水體中PH值過(guò)高時(shí)就不能使用生石灰來(lái)處理,而是應(yīng)該選擇漂白粉或者醋酸等來(lái)降低水體PH值。此外,對(duì)于水體PH值過(guò)高的情況,必須經(jīng)常注入新水,還應(yīng)該及時(shí)定期的對(duì)水體的PH值進(jìn)行檢測(cè)。
三、藍(lán)藻對(duì)水產(chǎn)養(yǎng)殖的影響及解決對(duì)策
到水產(chǎn)養(yǎng)殖的中后期,水體中藍(lán)藻增多是普遍存在的現(xiàn)象,這一問(wèn)題的解決必須要從藍(lán)藻不同的生產(chǎn)階段來(lái)進(jìn)行治理。藍(lán)藻喜歡在溫度較高、偏堿性和含有較多有機(jī)質(zhì)的水體中生長(zhǎng)。藍(lán)藻的生命周期通常會(huì)達(dá)到30天,其中分為生長(zhǎng)期、高峰期及老化期。如果水體中藍(lán)藻過(guò)多會(huì)讓水體呈現(xiàn)出藍(lán)綠色,當(dāng)藍(lán)藻泛濫時(shí)水塘的四邊會(huì)形成一層淺綠色的油膜,讓水體變得更加清瘦,遇到天氣突然變化時(shí)會(huì)造成水質(zhì)更加惡化,嚴(yán)重時(shí)導(dǎo)致水產(chǎn)成批死亡。解決對(duì)策:首先是藍(lán)藻的生長(zhǎng)期,在這一階段藍(lán)藻是很難被發(fā)現(xiàn)的,但是遇到高溫的天氣時(shí),水體的透明度如果比平時(shí)低,那么藍(lán)藻就可能會(huì)大量爆發(fā),這一階段要特別注意放養(yǎng)的密度,最大限度的降低水體中有機(jī)物的殘量,或者可以使用微生物藥劑讓有機(jī)物加快分解;其次是藍(lán)藻的高峰期,這一階段會(huì)導(dǎo)致水體更加惡化,造成魚類死亡,而唯一的處理方式就是潑灑硫酸銅、強(qiáng)氧化劑,再配合增氧氣機(jī)雙管齊下,同時(shí)注意觀察水體的變化;最后是藍(lán)藻的老化期,在這一階段,池塘中的水體會(huì)呈現(xiàn)暗黑色,在下風(fēng)口產(chǎn)生黑綠色油膜。這時(shí)藍(lán)藻正處在新老交替的過(guò)程中,其活性不高,可以選擇加注新水或者噴灑微生物藥劑來(lái)進(jìn)行處理。
關(guān)鍵詞 脫氮硫桿菌;自養(yǎng)反硝化;水產(chǎn)養(yǎng)殖;分子生態(tài)學(xué)
中圖分類號(hào) S949 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 1007-5739(2012)14-0252-03水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)是我國(guó)發(fā)展最為迅速的行業(yè)之一,對(duì)我國(guó)漁業(yè)經(jīng)濟(jì)的貢獻(xiàn)很大。隨著高密度、規(guī)?;乃a(chǎn)養(yǎng)殖的蓬勃發(fā)展,養(yǎng)殖生態(tài)環(huán)境質(zhì)量日益下降,養(yǎng)殖環(huán)境污染不容忽視。一些傳統(tǒng)的通過(guò)投加化學(xué)物質(zhì)來(lái)控制養(yǎng)殖環(huán)境中的硫化物以及亞硝酸鹽含量的方法收效甚微,且可引來(lái)諸如蓄積殘留等更多的環(huán)境問(wèn)題。近年來(lái),人們開始嘗試在養(yǎng)殖水體中使用生物降解轉(zhuǎn)化方法來(lái)改善養(yǎng)殖水體的生態(tài)環(huán)境,以達(dá)到健康養(yǎng)殖的目標(biāo)。因脫氮硫桿菌具有脫氮和脫硫的雙重特殊性質(zhì),同時(shí)又是嚴(yán)格自養(yǎng)兼性厭氧型微生物,所以近年來(lái)受到了更多的關(guān)注。
1 養(yǎng)殖水體中的主要有害物質(zhì)及控制
1.1 亞硝酸鹽
氮在水體中以氮?dú)狻⒂坞x氨、離子銨、亞硝酸鹽、硝酸鹽和有機(jī)氮的形式存在??偟涂偭滓恢北徽J(rèn)為是引起水體富營(yíng)養(yǎng)化的重要因子,而氨氮和亞硝酸鹽氮是養(yǎng)殖過(guò)程中引起魚類疾病的關(guān)鍵環(huán)境因子,尤其是亞硝酸鹽濃度的超標(biāo)(亞硝酸鹽向硝酸鹽轉(zhuǎn)化不完全),是近年來(lái)魚病發(fā)生的不可忽視的原因之一。養(yǎng)殖中發(fā)現(xiàn),魚類易患“棕血病”,這是因?yàn)閬喯跛嵬ㄟ^(guò)魚類鰓和體表進(jìn)入到血液,與血紅蛋白結(jié)合生成高鐵血紅蛋白,失去攜氧能力,血液成棕色。作為強(qiáng)氧化劑,亞硝酸鹽進(jìn)入血液后擾亂氮排泄,降低氧合血紅蛋白水平使各組織缺氧,低濃度時(shí)可使抵抗力下降,易患各種疾病[1];我國(guó)淡水漁業(yè)用水標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定,養(yǎng)殖水體中亞硝酸鹽含量應(yīng)控制在0.2 mg/L以下,集約化養(yǎng)殖技術(shù)能夠成功的關(guān)鍵就在于對(duì)水體中亞硝態(tài)氮的控制[2]。目前用生物降解轉(zhuǎn)化法降低養(yǎng)殖水體亞硝酸鹽含量是頗為有效的方法。
1.2 硫化物
養(yǎng)殖水體中,大量殘餌、死藻、養(yǎng)殖生物排泄物等沉到水底增加了底部有機(jī)物含量,從而增加了硫化物的含量。硫化物作為重要污染物之一,同時(shí)也是監(jiān)測(cè)養(yǎng)殖水環(huán)境的重要化學(xué)指標(biāo),對(duì)魚蝦類的生長(zhǎng)危害較為嚴(yán)重,毒性很大。水體中硫化物包括溶解性的H2S、HS-、S2-,以及存在于懸浮物中的可溶性硫化物和酸可溶性金屬硫化物[3]。硫化物可與養(yǎng)殖生物血液中的血紅蛋白結(jié)合產(chǎn)生硫血紅蛋白,降低了機(jī)體中血液的攜氧能力。同時(shí),硫化物對(duì)養(yǎng)殖生物的鰓組織具有很強(qiáng)的刺激和腐蝕作用,可使組織產(chǎn)生凝血性壞死,引起生物呼吸困難,血液、腎中硫代硫酸鹽水平增加,大于2 mg/L可致養(yǎng)殖生物死亡。故我國(guó)漁業(yè)水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定其在水質(zhì)中含量不得超過(guò)0.2 mg/L。管越強(qiáng)等[4]發(fā)現(xiàn)日本沼蝦中超氧化物歧化酶(SOD)和過(guò)氧化氫酶(CAT)活力隨硫化物濃度的升高而增強(qiáng),其免疫系統(tǒng)對(duì)硫化物有一定的耐受力,而當(dāng)硫化物濃度過(guò)高時(shí),沼蝦的免疫能力降低,對(duì)機(jī)體抗氧化系統(tǒng)產(chǎn)生顯著的影響。余 靜等[5]以過(guò)氧化物酶(POD)和酚氧化酶(PPO)作為指標(biāo),研究了硫化氫脅迫對(duì)羅氏沼蝦的影響,結(jié)果發(fā)現(xiàn)POD和PPO酶在低濃度硫化氫處理下的活性顯著提高,可能是對(duì)蝦體內(nèi)免疫系統(tǒng)應(yīng)激反應(yīng)的表現(xiàn),當(dāng)硫化氫濃度超過(guò)耐受范圍后,細(xì)胞就會(huì)造成嚴(yán)重?fù)p傷,POD和PPO酶活力降低,這與管越強(qiáng)試驗(yàn)研究結(jié)果相似。
1.3 養(yǎng)殖水體中主要有害物質(zhì)的控制
目前控制養(yǎng)殖水體中亞硝酸鹽氮和硫化物的方法很多,水培植物(如浮床栽培空心菜[6]、鳳眼蓮、水花生、萵苣等)異養(yǎng)反硝化、自養(yǎng)反硝化、異養(yǎng)和自養(yǎng)相結(jié)合的方法等均有報(bào)導(dǎo)。不足的是水培植物的脫氮效率很低,譚洪新等[7]在研究水栽培蔬菜對(duì)養(yǎng)魚廢水的水質(zhì)凈化效果時(shí)發(fā)現(xiàn),水培蔬菜對(duì)硝氮的去除率只有3.7%;吳 偉等[8]通過(guò)在池塘水體中栽種以輪葉黑藻(Hydrilla verticillata)為主的水生植物,并添加活菌含量大于108 g/L微生物制劑,構(gòu)建了水生植物—微生物強(qiáng)化系統(tǒng),研究該系統(tǒng)對(duì)日本沼蝦(Macrobrachium nipponense)養(yǎng)殖水體的生物凈化效果。研究表明,當(dāng)水體中添加的微生物質(zhì)量濃度為1.0 mg/L時(shí),適宜的水生植物覆蓋率為40%,水生植物—微生物強(qiáng)化系統(tǒng)是一種良好的日本沼蝦養(yǎng)殖水體生物凈化系統(tǒng)。而水生植物與微生物相結(jié)合凈化水體,效果雖然較為顯著,但水生植物的栽培占面積較大,依然不是最理想的選擇。故利用高效的具有反硝化脫硫功能的微生物凈化養(yǎng)殖水質(zhì)、控制亞硝酸鹽和硫化物顯得尤其重要。
由于水產(chǎn)養(yǎng)殖需要保持充足的溶氧量,所以厭氧反硝化菌脫氮無(wú)法發(fā)揮正常的作用。具有一定溶氧量的養(yǎng)殖水體更有利于好養(yǎng)或兼性反硝化菌發(fā)揮作用。好養(yǎng)或兼性反硝化菌將硝酸鹽和亞硝酸鹽轉(zhuǎn)化成氣態(tài)氮,且可將氨在好氧條件下直接轉(zhuǎn)化成氣態(tài)產(chǎn)物。
2 脫氮硫桿菌的性質(zhì)和作用原理
2.1 脫氮硫桿菌的生長(zhǎng)特性
1904年,Beijerinck首先分離得到脫氮硫桿菌(Thioba-cillus denitrificans),其屬于硫桿菌屬;具有代表性的硫桿菌屬有排硫桿菌(Thiobacillus thioparus)、氧化硫桿菌(Thiobac-illus thiooxidans)、脫氮硫桿菌(Thiobacillus denitrificans)和新型硫桿菌(Thiobacillus novellus)。脫氮硫桿菌廣泛存在于土壤、底泥、淡水和海洋沉積物、礦山排水、工廠、污水處理池和消化池;對(duì)溫度和pH值的變化敏感,最適生長(zhǎng)條件pH值為6.5~8.0,最適溫度28~30 ℃。脫氮硫桿菌為革蘭氏陰性化能自養(yǎng)細(xì)菌,電鏡觀察,菌細(xì)胞短桿狀、單個(gè)、成對(duì)或短鏈狀排列,具有單根極生鞭毛,無(wú)芽孢,菌體大小約為0.3~0.8 μm×0.8~3.0 μm。能在好氧和厭氧條件下以硫代硫酸鹽和 S2-作為能源、以CO2作為碳源進(jìn)行生長(zhǎng),厭氧條件下可以硝酸鹽作為電子受體還原為N2。該菌生長(zhǎng)緩慢,無(wú)明顯的穩(wěn)定期且穩(wěn)定期持續(xù)時(shí)間較短,隨后進(jìn)入衰亡期[9-10]。
2.2 脫氮硫桿菌反硝化原理
脫氮硫桿菌能在好氧和厭氧條件下以硫代硫酸鹽和S2-作為能源、以CO2作為碳源進(jìn)行生長(zhǎng),厭氧(兼性厭氧)條件下可以硝酸鹽作為電子受體還原為N2。正因?yàn)槊摰驐U菌以二氧化碳為碳源,對(duì)魚類有害的亞硝酸鹽、硫化氫等均可被氧化為無(wú)毒的物質(zhì),同時(shí)減低了水體中的生物消耗量和化學(xué)耗氧量。其反硝化過(guò)程如下:脫氮硫桿菌胞內(nèi)含1,5-二磷酸核酮糖羧化酶和5-磷酸核酮糖激酶,可通過(guò)卡爾文循環(huán)途徑來(lái)固定CO2。脫氮硫桿菌以還原態(tài)硫作為電子供體,同時(shí)以硝酸鹽作為電子受體,將其還原為N2,完成自養(yǎng)反硝化過(guò)程[11]。厭氧條件下,脫氮硫桿菌氧化硫的反硝化過(guò)程具體如下:
1.1 S+0.4 CO2+NO3-+0.76 H2O+0.08 NH4+0.08 C5H7O2N+0.5 N2+1.1 SO42-+1.28 H+ (1)
0.844 S2O32-+NO3-+0.347 CO2+0.434 H2O+0.086 NH4++0.086 HCO3-0.086 C5H7O2N+0.5 N2+1.689 SO42-+0.697 H+(2)
0.421H2S+0.421HS-+0.346 CO2+0.086 NH4++0.086 HCO3-+NO3-0.086 C5H7O2N+0.5 N2+0.842 SO42-+0.434 H2O+0.262 H+ (3)
從NO3-還原到N2,經(jīng)一系列連續(xù)的4步反應(yīng)完成:NO3-NO2-NON2ON2,分別由以下酶進(jìn)行催化:硝酸鹽還原酶、亞硝酸鹽還原酶、一氧化氮還原酶、一氧化二氮還原酶。通常細(xì)菌能否用于脫硫工藝的一個(gè)重要影響因素在于細(xì)菌產(chǎn)生的硫是積累在細(xì)胞內(nèi)還是在細(xì)胞外。如果積累在細(xì)胞內(nèi),必然會(huì)產(chǎn)生大量的含硫細(xì)胞。這樣硫的分離就比較困難,為此必須選擇在細(xì)胞外形成硫的細(xì)菌,而脫氮硫桿菌即是具有這種特征的細(xì)菌。脫氮硫桿菌的優(yōu)點(diǎn):一是嚴(yán)格自養(yǎng),不需要投放有機(jī)物作為碳源,節(jié)省開支,同時(shí)也不會(huì)引入額外的有機(jī)物,避免水體的二次污染;二是產(chǎn)生極少量的污泥,能將污泥處理量降低到最小[12];三是不僅能在厭氧條件下生長(zhǎng),還可以利用硫化物。
3 脫氮硫桿菌的應(yīng)用研究
鑒于脫氮硫桿菌具有脫氮和脫硫的特殊性質(zhì),近年來(lái)對(duì)脫氮硫桿菌的應(yīng)用研究十分活躍。脫氮硫桿菌是典型的硫自養(yǎng)反硝化菌,有關(guān)研究主要集中在防腐應(yīng)用、油田廢水處理領(lǐng)域。作為微生物腐蝕的主要菌種之一的硫酸鹽還原菌(SRB),脫氮硫桿菌能夠與SRB共存,以氮源反硝化作用,抑制腐蝕性產(chǎn)物硫化物的產(chǎn)生,同時(shí)也在一定程度上抑制了SRB的生長(zhǎng),起到一定的防腐作用。汪梅芳等[13]利用靜態(tài)掛片以及交流阻抗法(EIS)研究了脫氮硫桿菌對(duì)碳鋼微生物的腐蝕影響,研究發(fā)現(xiàn)T. denitrificans的胞外高聚物增加了生物膜的致密性,阻礙了電荷傳遞過(guò)程,也降低了SRB的腐蝕。秦 雙等[14]將脫氮硫桿菌經(jīng)培養(yǎng)活化后用于抑制老化油儲(chǔ)油罐污水及油田廢水中微生物腐蝕及脫除硫化物,發(fā)現(xiàn)加入TD生物制劑后,污水中FeS的去除率可達(dá)42.85%;污水中無(wú)機(jī)硫化物的總量去除率可達(dá)91.05%。脫氮硫桿菌的加入降低了污水中腐蝕性硫化物的含量,進(jìn)而減緩油水界面層對(duì)基體材料的腐蝕破壞,同時(shí)降低界面附近SRB的生長(zhǎng)及活性硫化物的產(chǎn)生,從而抑制了惡臭污染物硫化亞鐵對(duì)環(huán)境的危害。
近年來(lái),利用脫氮硫桿菌來(lái)處理地下水和飲用水這一自養(yǎng)反硝化工藝也得到了廣泛應(yīng)用。Koenig等[15]在1997年進(jìn)行了用脫氮硫桿菌處理垃圾填埋場(chǎng)滲濾污水,在填充不同粒徑硫磺的固定床反應(yīng)器系統(tǒng)來(lái)處理硝酸鹽濃度高達(dá)400 mg/L的污水,為以后高濃度硝酸鹽污水處理提供了可行的依據(jù)。張承中等[16]利用脫氮硫桿菌接種至生物滴濾塔用于凈化硫化氫氣體濃度高達(dá)2 000~3 000 mg/m3,對(duì)硫化氫的脫除率高達(dá)92%,為工業(yè)化應(yīng)用中處理高濃度的硫化氫氣體提供了依據(jù)。
同時(shí)脫氮硫桿菌在礦體地下水以及礦體圍巖地下水中活動(dòng)性強(qiáng),而在一般巖石或松散沉積物的地下水中活動(dòng)較弱。因此,脫氮硫桿菌可以作為指示性微生物,作為礦化的直接指標(biāo)。
4 脫氮硫桿菌篩選馴化以及分子生態(tài)學(xué)水平上的研究
因脫氮硫桿菌生長(zhǎng)緩慢,對(duì)溫度以及鹽度的耐受性不強(qiáng)等限制了其應(yīng)用,對(duì)于養(yǎng)殖水體而言,從養(yǎng)殖水體污泥中有效的篩選、培養(yǎng)和馴化脫氮硫桿菌,因溫度、pH值等是脫氮硫桿菌生長(zhǎng)的主要影響因素,因而可通過(guò)建立溫度、pH值梯度進(jìn)行穩(wěn)定性馴化培養(yǎng)。采用添加特殊指示劑的培養(yǎng)基對(duì)脫氮硫桿菌也可以進(jìn)行初步篩選,通過(guò)反硝化過(guò)程堿度變化,相應(yīng)指示劑顏色變化,即可在篩選平板上出現(xiàn)特殊顏色的菌落。牛建敏等[17]從湖水、底泥、土壤、厭氧污泥等不同環(huán)境中采集菌種從培養(yǎng)、分離得到10種脫氮硫桿菌菌株,不同環(huán)境中脫氮硫桿菌在生理生化上存在差異,通過(guò)比較它們的硝酸鹽氮去除速率,以期獲得活性更強(qiáng)以及工程應(yīng)用價(jià)值最大的菌株。同時(shí),深入探討脫氮硫桿菌的基因組學(xué)、蛋白組學(xué)技術(shù),利用基因重組、基因改組等分子生物學(xué)技術(shù)構(gòu)建高效基因工程菌,從而提高其生物脫氮的效率,是行之有效的方法。
養(yǎng)殖水體單靠脫氮硫桿菌單一菌株想達(dá)到高效率的脫氮除硫效果,還是有很大困難的,如若將脫氮硫桿菌與其他具有不同凈水功能的微生物菌株復(fù)合使用,根據(jù)治理對(duì)象的不同以及各種菌生理功能的差異,進(jìn)行組合并采用多種工藝手段,以期達(dá)到治理大面積養(yǎng)殖水域的目的。目前,養(yǎng)殖水體中微生態(tài)制劑所涉及的微生物包括光合細(xì)菌、芽孢桿菌、硝化細(xì)菌、反硝化細(xì)菌等[18-20]。如養(yǎng)殖水體凈化有關(guān)研究[21],從富營(yíng)養(yǎng)化的養(yǎng)殖水體中分離篩選得到具有不同生理功能的污染物治理菌株,如硫化細(xì)菌、硝化細(xì)菌、反硝化細(xì)菌、光合細(xì)菌、生物絮凝菌等,經(jīng)優(yōu)化配伍成性能優(yōu)良的復(fù)合功能菌,因它們?cè)谏L(zhǎng)過(guò)程中能產(chǎn)生的有用物質(zhì)及分泌物質(zhì)成為相互或各自的生長(zhǎng)基質(zhì),形成一種共生增殖關(guān)系,從而達(dá)到有效凈化養(yǎng)殖水體的目的。徐軍祥等[22]首先從高鹽高硫廢水中活性污泥中獲取脫氮硫桿菌,在不同濃度梯度下進(jìn)行耐鹽能力穩(wěn)定性馴化培養(yǎng),以獲得耐鹽脫氮硫桿菌,并與硝化菌混合培養(yǎng)形成復(fù)合菌劑,采用生物強(qiáng)化技術(shù)原理投加至廢水。結(jié)果發(fā)現(xiàn)投加復(fù)合菌能加快COD降解速度,增強(qiáng)耐負(fù)荷沖擊能力,提高COD、NH3-N和硫代硫酸鹽(THS)的去除率。所謂的生物強(qiáng)化技術(shù)(bioaugmentation)即是為了提高原系統(tǒng)的廢水處理能力,向原系統(tǒng)中投加從自然界中馴化篩選的優(yōu)勢(shì)菌種或通過(guò)基因重組技術(shù)產(chǎn)生的復(fù)合菌,以去除某一種或多種有害物質(zhì)的方法。該技術(shù)自20 世紀(jì)80年代以來(lái)被廣泛研究。
近年來(lái),固定化微生物脫氮技術(shù)在養(yǎng)殖水質(zhì)的控制上應(yīng)用廣泛,其優(yōu)點(diǎn)包括在污廢水脫氮治理中能夠長(zhǎng)期保持活性;可重復(fù)使用,節(jié)省投資;易于固液分離;有利于屏蔽或減少土著微生物、毒性物質(zhì)及外界環(huán)境變化的干擾,可使含氮污水達(dá)到更好的修復(fù)效果[23]。因此,嘗試將脫氮硫桿菌固定化投放到養(yǎng)殖廢水中以便高效利用也是未來(lái)研究工作中所要努力的方向。也有研究將脫氮硫桿菌與形成絮凝體的異養(yǎng)細(xì)菌一起培養(yǎng)使脫氮硫桿菌得到固定化,從而形成性能良好的絮凝物以除去H2S。
據(jù)統(tǒng)計(jì),目前人們能夠培養(yǎng)的微生物不足環(huán)境微生物總量的3%。近些年來(lái),分子微生態(tài)學(xué)和現(xiàn)代生物化學(xué)的迅速發(fā)展推動(dòng)著養(yǎng)殖水體微生物學(xué)的發(fā)展,人們逐漸通過(guò)分子生態(tài)學(xué)技術(shù)深入研究環(huán)境微生物如RLP技術(shù)用于研究環(huán)境微生物多樣性;用DGGE 技術(shù)研究反硝化微生物基因多樣性,車 軒等[24]PCR-DGGE技術(shù)從總DNA中擴(kuò)增出目標(biāo)16 S rDN斷,再對(duì)擴(kuò)增的16 S rDNA進(jìn)行DGGE分析,對(duì)凝膠染色并進(jìn)行條帶統(tǒng)計(jì)分析和切膠測(cè)序,使用序列數(shù)據(jù)進(jìn)行同源性分析并建立了系統(tǒng)發(fā)育樹。其中,RT-PCR及實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)研究環(huán)境反硝化微生物種群的定量研究。因?yàn)榱驐U菌屬種類較多,種間差異不大,因而用分子生物學(xué)手段對(duì)其進(jìn)行分類鑒定,如運(yùn)用16 S rDNA分析來(lái)鑒定脫氮硫桿菌,是更具優(yōu)勢(shì)的也是較普遍的一種方法。
脫氮硫桿菌作為氮素循環(huán)的重要微生物,其分子生態(tài)學(xué)上的研究不是很深入,因此提出了脫氮硫桿菌專一性PCR引物和探針,已經(jīng)成為微生物生態(tài)學(xué)的迫切要求。趙陽(yáng)國(guó)等[25]研究設(shè)計(jì)了脫氮硫桿菌在種級(jí)水平的專一性PCR引物/探針。脫氮硫桿菌專一性引物/探針的提出,將為不同生態(tài)環(huán)境中該種微生物的時(shí)空分布、結(jié)構(gòu)動(dòng)態(tài)以及實(shí)時(shí)定量等研究提供分子生物學(xué)工具。Robert S運(yùn)用外源DNA探針從質(zhì)粒庫(kù)中分離出來(lái)2種轉(zhuǎn)錄脫氮硫桿菌1,5-二磷酸核酮糖的基因,并運(yùn)用限制性酶分析2種基因的長(zhǎng)度大小。此次研究也為脫氮硫桿菌在分子水平上的研究及應(yīng)用奠定了一定的基礎(chǔ)。
5 脫氮硫桿菌在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的應(yīng)用前景與展望
目前對(duì)自養(yǎng)反硝化菌脫氮硫桿菌的應(yīng)用研究主要集中于飲用水、地下水、廢水處理、防腐應(yīng)用,而對(duì)養(yǎng)殖水處理的研究報(bào)道則較少。因循環(huán)水養(yǎng)殖系統(tǒng)具有節(jié)省空間、節(jié)約水資源、高產(chǎn)、高回報(bào)效益的優(yōu)點(diǎn)的,作為我國(guó)水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)現(xiàn)代化的支撐技術(shù)力量,該體系為工業(yè)化水產(chǎn)養(yǎng)殖提供了很好的技術(shù)模式。鑒于自養(yǎng)反硝化菌的諸多優(yōu)點(diǎn),有研究試著將脫氮硫桿菌運(yùn)用到循環(huán)水養(yǎng)殖系統(tǒng)。自養(yǎng)反硝化過(guò)程會(huì)消耗一定的堿度,并且RAS系統(tǒng)水是循環(huán)使用的,所以長(zhǎng)期下去可能有硫酸根的積累,而隨著硫酸根濃度的升高反過(guò)來(lái)又會(huì)抑制脫氮速率。車 軒[26]綜述了在循環(huán)水養(yǎng)殖系統(tǒng)(RAS)中運(yùn)用脫氮硫桿菌除硝酸鹽的可行性,他提出將產(chǎn)生堿度的異養(yǎng)反硝化與自養(yǎng)反硝化進(jìn)行集成,具有極大的潛力。將二者集成的脫氮方法具有兩大優(yōu)勢(shì):一方面碳源的消耗遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于完全異養(yǎng)反硝化脫氮;另一方面使硫酸鹽濃度得到有效控制。因此,在養(yǎng)殖水處理的實(shí)際應(yīng)用中具有極強(qiáng)的可行性。有研究采用硫酸鹽還原菌、脫氮硫桿菌和異養(yǎng)反硝化菌在生物滴濾塔中的填料表面進(jìn)行掛膜,進(jìn)行同步脫除SO2和NO試驗(yàn),通過(guò)不同菌種的協(xié)同作用,SO2氣體平均去除率達(dá)到了97.6%,而NO氣體的平均去除率達(dá)到了51.4%。
而Sora運(yùn)用MSC(modified spent caustic)即改良的廢堿液投加到以硫?yàn)殡娮庸w自養(yǎng)反硝化過(guò)程中去以補(bǔ)充消耗的堿度,使反硝化進(jìn)程能持續(xù)的進(jìn)行;同時(shí)SC的應(yīng)用證實(shí)了污水脫氮的高效性,即COD/N的比值較低。若COD和TN含量過(guò)高的話,還要考慮到SC的添加劑量問(wèn)題。
6 小結(jié)
自養(yǎng)反硝化技術(shù)對(duì)養(yǎng)殖水體凈化的應(yīng)用方面較小。有關(guān)耐鹽、耐高低溫的脫氮硫桿菌菌株的篩選馴化研究還需進(jìn)一步加強(qiáng),對(duì)脫氮硫桿菌尤其是分子水平的研究還不夠深入。目前,硫自養(yǎng)反硝化技術(shù)還處于實(shí)驗(yàn)室研究及中試階段,如果考慮將脫氮硫桿菌等反硝化細(xì)菌應(yīng)用于河流、湖泊、魚蝦等養(yǎng)殖水體或自然水體中,其在實(shí)際應(yīng)用中的功能是否穩(wěn)定將有待探討,目前相關(guān)研究已經(jīng)證明脫氮硫桿菌對(duì)養(yǎng)殖水體生物無(wú)害,但是否影響水體中其他有益微生物的生態(tài)位,還有待探討未來(lái)致力于脫氮硫桿菌上的研究還很多,任務(wù)更繁重。
7 參考文獻(xiàn)
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關(guān)鍵詞 淡水魚致病菌;中草藥;抗生素;藥敏試驗(yàn)
中圖分類號(hào) S948 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 1007-5739(2012)19-0254-02
近年來(lái),隨著水產(chǎn)養(yǎng)殖規(guī)模的擴(kuò)大和集約化程度的提高,養(yǎng)殖環(huán)境日益惡化,近年來(lái)水產(chǎn)養(yǎng)殖病害發(fā)病率越來(lái)越高。細(xì)菌性疾病是水產(chǎn)養(yǎng)殖動(dòng)物最重要的疾病之一,2005年以來(lái)暴發(fā)的生物源性疾病中,細(xì)菌性疾病所占比例超過(guò)55%,嚴(yán)重制約了水產(chǎn)業(yè)的發(fā)展[1]。由于漁民缺乏基本的藥理知識(shí),存在濫用抗生素類藥物的現(xiàn)象,導(dǎo)致耐藥菌株的產(chǎn)生,給細(xì)菌病的防治帶來(lái)了很大的困難。選取了遲緩愛(ài)德華氏菌、嗜水氣單胞菌、金黃色葡萄球菌、嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌和藤黃微球菌5種常見(jiàn)淡水魚的致病菌進(jìn)行體外中西藥抑菌試驗(yàn),旨在為淡水魚細(xì)菌病防治提供依據(jù),減少致病菌耐藥菌株的產(chǎn)生。
金黃色葡萄球菌、嗜水氣單胞菌、遲緩愛(ài)德華氏菌、嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌和藤黃微球菌,均是淡水養(yǎng)殖動(dòng)物最常見(jiàn)的致病菌,它們的大量繁殖給淡水魚類養(yǎng)殖業(yè)帶來(lái)巨大威脅。其中金黃色葡萄球菌是毒力最強(qiáng)的引起化膿性疾病的化膿菌,可以產(chǎn)生溶血毒素、腸毒素、血漿凝固酶等毒素和酶,引起水生動(dòng)物外傷化膿死亡[2]。嗜水氣單胞菌通常能夠引起的疾病多為暴發(fā)性傳染病,患病水生動(dòng)物死亡率較高,通常導(dǎo)致魚、鱉、鰻、牛蛙及蚌等水生動(dòng)物的敗血癥及局部感染[3]。藤黃微球菌是黃鱔出血病的主要病原,黃鱔感染后出現(xiàn)體表彌散性出血、紅腫外翻、肝臟腫大出血等癥狀并造成高死亡率[4]。嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌是近年來(lái)引起斑點(diǎn)叉尾鮰高致死性、傳染性疾病的主要病原之一,發(fā)病魚主要出現(xiàn)體表褪色斑、脫肛、嚴(yán)重腸炎和腹水等病征,并以腸套疊為主要病理特征,其發(fā)病率和死亡率均在90%以上,造成的經(jīng)濟(jì)損失極其嚴(yán)重[5]。遲緩愛(ài)德華氏菌能引起黃顙魚食欲減退、離群緩游、反應(yīng)遲鈍,后期魚嘴周邊及各鰭充血斑,下頜皮膚破損出血呈圓形孔洞[6]。
1 材料與方法
1.1 供試菌株
供試菌株為遲緩愛(ài)德華氏菌、嗜水氣單胞菌、金黃色葡萄球菌、嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌和藤黃微球菌,均由湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)水產(chǎn)微生物實(shí)驗(yàn)室提供。將菌轉(zhuǎn)接到30 mL液體培養(yǎng)基中,30 ℃振蕩培養(yǎng)24 h,離心取菌體,用無(wú)菌生理鹽水稀釋成5.0×107個(gè)/mL菌懸液備用。
1.2 試液與試紙制備
1.2.1 中草藥有效成分的提取。供試中藥材五倍子、大黃、金銀花、黃芩、陳皮、黃連、板藍(lán)根、黃柏、連翹、黃梅購(gòu)于湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)養(yǎng)天和大藥房。采用水煎煮法,每種中草藥分別取5 g,加水50 mL,浸泡30 min,煎煮沸騰后文火煮30 min,過(guò)濾煎液,將藥物殘?jiān)^續(xù)煎煮,共煎煮3次,合并濾液,濃縮至5 mL,使含藥量為1 g/mL,于4 ℃下保存(48 h內(nèi)使用)。
1.2.2 抗生素藥液的配置??股厮幤窂?qiáng)力霉素、鹽酸左氧氟沙星、諾氟沙星、紅霉素、甲硝唑、土霉素、氟苯尼考、氟強(qiáng)先鋒、呋喃妥因分別按照一定的濃度配成藥液,于4 ℃下保存?zhèn)溆谩?/p>
1.2.3 聯(lián)合藥敏試驗(yàn)藥敏紙片制備。將新華1號(hào)定性濾紙用打孔器打成直徑為6 mm的紙片,于121 ℃下滅菌30 min,再于100 ℃下烘干;將滅菌后的紙片放于藥液中浸泡并翻動(dòng)30 min;然后將紙片在無(wú)菌干燥培養(yǎng)皿中攤開,吹干,再置于無(wú)菌加塞小瓶中,最后置于干燥器中或者冷凍保存?zhèn)溆谩?/p>
1.3 體外藥敏紙片抑菌試驗(yàn)方法
接常規(guī)方法用滅菌棉簽蘸取菌液,均勻涂布于營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板表面,靜置5~10 min,在無(wú)菌條件下,用無(wú)菌的眼科鑷子取各種藥物紙片放置于培養(yǎng)基表面,每個(gè)平板4~5片,并輕輕按壓,使其緊貼其上,正放5~10 min,待干后,輕輕倒置于28 ℃溫箱內(nèi)培養(yǎng)24 h,取出,測(cè)各藥物紙片周圍抑菌圈的直徑,參照一般抗菌藥物判定標(biāo)準(zhǔn)及文獻(xiàn)介紹新藥標(biāo)準(zhǔn)[7](表1)進(jìn)行綜合判定。
2 結(jié)果與分析
2.1 抗生素抑菌效果
從抗生素的抑菌效果(表2)可知,5株致病菌對(duì)強(qiáng)力霉素、諾氟沙星、紅霉素、甲硝銼、氟苯尼考、呋喃妥因敏感,其中強(qiáng)力霉素、紅霉素、氟苯尼考、甲硝銼的抑菌效果最好,抑菌圈的直徑均達(dá)到20 mm以上。遲緩愛(ài)德華氏菌、嗜水氣單胞菌、金黃色葡萄球菌、嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌對(duì)氟強(qiáng)先鋒中度敏感,而藤黃微球菌對(duì)氟強(qiáng)先鋒則表現(xiàn)出耐藥性。這5株菌對(duì)鹽酸左氧氟沙星均不敏感。
2.2 中草藥抑菌效果
從中草藥抑菌效果(表3)可知,五倍子、大黃對(duì)5株菌的抑菌效果最佳,黃芩次之;金銀花對(duì)藤黃微球菌、嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌的抑菌效果很好,抑菌圈的直徑分別為23 mm和20 mm,而對(duì)其他菌株不敏感;黃梅、板藍(lán)根、連翹、陳皮對(duì)5株菌不敏感,中西藥對(duì)5株常見(jiàn)水產(chǎn)動(dòng)物疾病致病菌的抑菌效果分別見(jiàn)圖1~圖5。
3 結(jié)論與討論
長(zhǎng)期用藥,特別是不合理的使用抗生素,使得大量的病原微生物產(chǎn)生了耐藥性,許多疾病得不到及時(shí)有效的治療;藥物的壽命縮短,造成了極大的損失。因此,如何正確、科學(xué)使用藥物,延長(zhǎng)藥物的使用壽命;找到合適中草藥替代抗生素是目前的重要任務(wù)。藥敏試驗(yàn)方便快捷,可在短時(shí)間內(nèi)篩
選出最佳的治療藥物和最佳劑量,為臨床用藥提供依據(jù),進(jìn)行針對(duì)性治療,能及時(shí)有效地控制疾病的感染,降低漁民的損失;利用中草藥替代抗生素,能有效緩解因?yàn)檫^(guò)量或者濫用抗生素引起的耐藥性。由試驗(yàn)結(jié)果可知,中草藥中五倍子和大黃對(duì)各類致病菌的抑菌效果最佳,在生產(chǎn)實(shí)踐中,可以用五倍子和大黃代替抗生素治療淡水魚病,也能取得較好的療效。
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2、致病原因
1、從微生態(tài)學(xué)角度講,魚類氣單胞菌感染的發(fā)生是魚、細(xì)菌和生態(tài)環(huán)境綜合作用的結(jié)果。常態(tài)下,3者處于動(dòng)態(tài)平衡,單胞菌不呈致病作用。當(dāng)生態(tài)環(huán)境突變(如水溫升高、有機(jī)質(zhì)濃度增加)或受到污染時(shí),動(dòng)態(tài)平衡遭到破壞,處于“靜態(tài)”的條件致病菌被“激活”,迅速大量生長(zhǎng)繁殖并產(chǎn)生毒素等致病因子,此為致病之外因。
2、在飼養(yǎng)池中高密度飼養(yǎng)的各種魚類,與在河湖海洋等自然水體中生活的魚類所承受的環(huán)境壓力是不同的,前者所受到的應(yīng)激性刺激要顯著地高于后者。正是由于養(yǎng)殖魚類頻繁地遭受各種應(yīng)激因子的刺激,才導(dǎo)致了飼養(yǎng)魚類免疫力下降,對(duì)各種傳染病的易感性增加。此為致病之內(nèi)因。在內(nèi)因和外因共同作用下,導(dǎo)致魚病的暴發(fā)與流行,國(guó)內(nèi)諸多報(bào)道也證實(shí)了這1點(diǎn)。
3、發(fā)病特點(diǎn)及應(yīng)注意問(wèn)題從魚類的感染類型來(lái)分析,單純感染、原發(fā)性感染較少。正常魚體內(nèi)分離出多種條件致病菌且共生于同1魚體,這1事實(shí)說(shuō)明水體中存在有利于它們生長(zhǎng)繁殖的共同條件,因此在致病過(guò)程中往往起到協(xié)同作用,引起混合感染、繼發(fā)感染,使病情更加復(fù)雜化、嚴(yán)重化,故在魚類細(xì)菌性疾病防治中同樣不可忽視。同時(shí),有關(guān)文獻(xiàn)指出:寄生蟲寄生于體表或鰓上,而其本身往往是帶菌者,魚體皮膚被寄生蟲損傷后,細(xì)菌就會(huì)大量侵入體內(nèi),促使疾病暴發(fā)且較嚴(yán)重。故在魚病防治中要注意檢查和殺滅寄生蟲。
4、控制對(duì)策近年來(lái),由于水產(chǎn)動(dòng)植物病害的日趨嚴(yán)重以及防病技術(shù)滯后,漁農(nóng)為了挽回?fù)p失,或盲目用藥,或加大用藥濃度污染了水域環(huán)境,造成了水產(chǎn)動(dòng)物的抗藥性,降低了魚產(chǎn)品的品質(zhì),這1切將會(huì)直接威脅人類的安全。在1993年泰國(guó)曼谷召開的亞洲水產(chǎn)養(yǎng)殖病害會(huì)議上,與會(huì)知名專家提出了“水產(chǎn)動(dòng)物健康養(yǎng)殖”的問(wèn)題,把病害的控制與環(huán)境的改善緊密聯(lián)系起來(lái)。為此筆者根據(jù)實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)和有關(guān)文獻(xiàn),提出如下控制對(duì)策。
關(guān)鍵詞:水產(chǎn)養(yǎng)殖 水體 疾病預(yù)防 優(yōu)化
一、對(duì)魚塘徹底消毒
清塘消毒包括清除池底污泥和池塘消毒兩個(gè)內(nèi)容。一般老池塘每年都要清除池底淤泥,只保留底泥10~15cm即可。老魚塘致病因子較多,應(yīng)注重清塘殺菌防病,這是控制養(yǎng)魚少生病的關(guān)鍵。應(yīng)選擇晴好天氣進(jìn)行清塘消毒工作。一種方法是干法清塘,即按每畝魚塘用生石灰75~100kg或漂白粉3~4kg加水溶解,在全池均勻潑灑。潑灑后應(yīng)讓池塘曝曬幾日,并用耙子全池耙動(dòng),以達(dá)到充分消毒防病的作用,還可以中和淤泥中的有機(jī)酸、硫化氫等,改變酸性環(huán)境,使淤泥呈弱堿性,有利于魚類的生長(zhǎng)繁殖。另一種方法是帶水清塘,按每米水深每畝用生石灰130~150kg或漂白粉10~12kg溶化后全池潑灑。潑灑時(shí)要到邊到位,尤其池塘四周不要忽視。
二、創(chuàng)建優(yōu)質(zhì)水體環(huán)境
池塘消毒后就要進(jìn)水,進(jìn)水必須進(jìn)行水體消毒,既可以在池水進(jìn)入池塘后用生石灰?guī)?,也可設(shè)單獨(dú)的消毒池,養(yǎng)殖用水經(jīng)過(guò)消毒后再使用。同時(shí),池塘要保持適宜的水深和優(yōu)良的水質(zhì)及水色。在養(yǎng)殖的前期,因?yàn)轸~類個(gè)體較小,水溫較低,池水以淺些為好,有利于水溫回升和餌料生物的生長(zhǎng)繁殖。以后隨著個(gè)體長(zhǎng)大和水溫上升,應(yīng)逐漸加深池水,到夏秋高溫季節(jié)水深最好達(dá)1.5m以上。水色以淡黃色、淡褐色、黃綠色為好,透明度25~35cm。
三、科學(xué)放養(yǎng)
養(yǎng)殖中應(yīng)放養(yǎng)健壯的種苗,并采取適宜的密度。放養(yǎng)的種苗應(yīng)體色正常,健壯活潑。利用某些養(yǎng)殖品種或群體對(duì)某種疾病有先天性或獲得性免疫力的原理,選擇和培育抗病力強(qiáng)的苗種作為放養(yǎng)對(duì)象,可以達(dá)到防止該種疾病的目的。最簡(jiǎn)單的辦法是從生病池塘中選擇始終未受感染的或已被感染但很快又痊愈了的個(gè)體,進(jìn)行培養(yǎng)并作為繁殖用的親體,因?yàn)檫@些魚類的本身及其后代一般都具有了免疫力。所有魚種下池前均用高錳酸鉀或食鹽水溶液進(jìn)行浸體消毒。放養(yǎng)密度應(yīng)根據(jù)池塘條件、水質(zhì)和餌料狀況、飼養(yǎng)管理技術(shù)水平等,決定適當(dāng)密度,切勿過(guò)密。
四、控制餌料肥料的投放
投餌工作在保持池塘水質(zhì)方面起著重要的作用。投餌過(guò)多就會(huì)造成水體污染,水質(zhì)富營(yíng)養(yǎng)化,有毒物質(zhì)積累,水環(huán)境惡化,病原微生物繁殖,使魚生病??梢栽谟?jì)算魚種體重測(cè)算投餌量的前提下,通過(guò)設(shè)置餌料臺(tái),觀察魚類攝食情況,根據(jù)剩料多少來(lái)調(diào)整投喂量。餌料要求質(zhì)量高。餌料及其原料絕對(duì)不能發(fā)霉變質(zhì),餌料的營(yíng)養(yǎng)成分要全,特別不能缺乏各種維生素和礦物質(zhì),應(yīng)是對(duì)環(huán)境污染少的環(huán)保飼料。同時(shí),要注意合理施肥。通過(guò)適度培肥,使浮游生物處于良好的生長(zhǎng)狀態(tài),增加水體中的溶解氧和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),從而培育出良好的水質(zhì),輔助魚類生長(zhǎng)。一般5~6月份以施有機(jī)肥為主,每7~10天一次;7~9月份以施化肥為主,每4~6天施肥一次。對(duì)于養(yǎng)殖鰱、鳙等為主的池塘,應(yīng)根據(jù)水質(zhì)情況及天氣情況施肥,一般要求水質(zhì)透明度在25cm左右,水色應(yīng)以茶褐色為佳。同時(shí)應(yīng)注意一次施肥量不宜過(guò)多,注重少施勤施。人畜糞等有機(jī)肥,每次每畝可施100~150kg;化肥每次每畝用尿素1kg或硫銨1.5kg,加過(guò)磷酸鈣1~1.5kg。馴化養(yǎng)魚池塘一般不施肥。
五、加強(qiáng)對(duì)水質(zhì)的調(diào)控
一是改善生態(tài)環(huán)境。為了凈化水質(zhì),增強(qiáng)魚類的抗病能力,可人為的改善池塘中的生物群落和微生物群落。在養(yǎng)殖過(guò)程中,可定期的用生石灰潑灑消毒,改善環(huán)境,抑制病菌的生長(zhǎng)和繁殖。
二是定期換水。換水是保持優(yōu)良水色的最好辦法,但要適時(shí)適量才有利于魚類的健康和生長(zhǎng)。當(dāng)水色優(yōu)良、透明度適宜時(shí),可暫不換水或少量換水;在水色不良或透明度很低時(shí),或魚類患病時(shí),則應(yīng)多換水、勤換水。
三是及時(shí)增氧。通過(guò)增氧機(jī)的攪水作用,使池塘上下水層形成對(duì)流,增加整個(gè)池塘的溶氧量,使養(yǎng)殖魚類后半夜不至于缺氧。底層溶氧增加,還可以加速物質(zhì)循環(huán),減少有毒物質(zhì)的積累,使魚類健康成長(zhǎng),增加抗病能力。
六、加強(qiáng)對(duì)養(yǎng)殖的管理
在對(duì)魚類捕撈、搬運(yùn)及日常飼養(yǎng)管理過(guò)程中應(yīng)細(xì)心操作,不使魚類受傷。每天至少到池塘上去檢查1~2次,以便及時(shí)發(fā)現(xiàn)可能引起疾病的各種不良環(huán)境,盡量采取改進(jìn)措施,防患于未然。同時(shí)要加強(qiáng)管理,日夜巡塘,調(diào)節(jié)水質(zhì),發(fā)現(xiàn)問(wèn)題及時(shí)采取措施予以解決。塘內(nèi)的死魚、病魚要及早撈起,遠(yuǎn)離深埋,以免病情蔓延或影響水質(zhì)。在生病的池塘中用過(guò)的工具應(yīng)當(dāng)用濃度較大的漂白粉、硫酸銅或高錳酸鉀等溶液消毒,或在強(qiáng)烈的陽(yáng)光下曬干,然后才能用于其他池塘。還要防止水質(zhì)變壞,在魚類浮頭或發(fā)病時(shí),及時(shí)采取措施予以救治。
七、使用藥物防治
在魚類進(jìn)池前要用適當(dāng)?shù)乃幬飳?duì)魚類進(jìn)行消毒,防止魚類體表攜帶病原。魚類進(jìn)池后的藥物防治最好改用內(nèi)服藥,將藥物做成人工疫苗,用口服、浸洗或注射等方法送入魚類體內(nèi)。在多病季節(jié)到來(lái)時(shí),針對(duì)某種常發(fā)疾病定期投喂藥餌或謹(jǐn)慎向全池潑灑藥物也是有效預(yù)防疾病的方法。
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