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關鍵詞:家畜;轉基因;安全性;解決方案
中圖分類號:S814.8;TS201.6 文獻標識碼:A 文章編號:0439-8114(2012)24-5562-05
應用轉基因技術對家畜進行遺傳改良,必將給畜牧業生產帶來革命性的變化。與此同時,同其他轉基因生物一樣,其安全性也引起了廣泛關注。世界各國紛紛加強對轉基因生物安全性的研究,力圖通過各種技術措施消除轉基因生物的安全隱患,并制定相應法律、法規和制度對轉基因生物的安全性進行管理?!掇r業轉基因生物安全管理條例》(國務院,2001)總則第一條指出:“為了加強農業轉基因生物安全管理,保障人體健康和動植物、微生物安全,保護生態環境,促進農業轉基因生物技術研究,制定本條例”[1]。根據對上述文字的理解,轉基因家畜的安全性應包括3個方面:一是食品安全性,轉基因家畜的主要產品是人類的食品;二是環境安全性,轉基因家畜的環境釋放會影響環境安全,也即生態安全的隱患;三是轉基因家畜自身的安全性,家畜轉基因之后,有可能會出現生存能力和適應性的變化。轉基因家畜與轉基因農作物相比發展滯后,到目前為止還沒有大批量的商業化產品上市。然而轉基因家畜的產生卻已有20多年的歷史,有些已進入中間試驗、環境釋放和生產性試驗階段。隨著中國“轉基因生物新品種培育”重大專項的強力推進,其商業化生產已經為期不遠。為促進轉基因家畜試驗研究和產業化的健康發展,本文根據中國《農業轉基因生物安全評價管理辦法》所涉及到的以及目前所能認識到的一些主要問題,提出轉基因家畜安全性的解決方案,僅供參考。
1 轉基因家畜食品安全性的解決方案
可能影響轉基因家畜食品安全性的因素主要有如下幾方面:①轉入基因的構件(包括目的基因、載體、標記基因等)及其表達產物;②非預期效應;③受體家畜的安全性。
1.1 轉入基因的構件及其表達產物
1.1.1 目的基因及其表達產物 目的基因表達的蛋白是轉基因家畜的目標產物,是可能影響食品安全性的直接因素。以高效、優質生產食品為目標的家畜轉基因遺傳改良,大體可分為如下幾類:①提高畜產品的產量;②改善畜產品的品質;③提高家畜的抗病力;④加強環境保護,如降低磷的排放量等。
1993年,國際經濟發展合作組織(OECD)提出了食品安全性分析的原則——實質等同性(Substantial equivalence)原則[2,3],目前各國都以這一原則為基礎,對食品包括轉基因食品的安全性進行管理和評價。實質等同性的概念為:如果某種新食品或食品成分與現有的某一食品或成分大體相同,那么在安全性方面,兩者可等同處理,即新食品與傳統食品同樣安全。按照實質等同性原則,轉基因家畜中轉基因編碼的蛋白可分為兩類:
一類是已經存在的某一食品成分,與現有的食品成分具有完全的等同性。例如:轉基因豬高表達的ω-3不飽和脂肪酸酶,轉基因奶牛表達的人乳清白蛋白、人乳鐵蛋白等,這些都是已經存在于人類食品中的營養成分,具有安全性。
另一類是已經存在的食品中尚沒有的成分,即所謂“新蛋白”。對人類健康有危害的蛋白有兩類:一是毒素,即對人體有毒性的蛋白;二是可成為過敏原的蛋白。通過使用歐洲分子生物信息學網基因序列庫EMBL、蛋白序列庫SWISSPORT,根據對毒素蛋白質和DNA序列的查詢,共發現各種毒蛋白1 458種[4]。這為我們在選擇目的基因時,排除毒蛋白的表達提供了依據。對于可能形成過敏原的蛋白,1996年國際食品生物技術委員會和國際生命科學研究所發展了一種稱為“樹型判定法”的程序來進行過敏原性分析[5],2001年再次對其作了修訂。依照“樹型判定法”,在設計轉基因家畜目的基因時,應進行如下分析:①轉基因的來源,如來自已知過敏原的材料,就避免用于轉基因;②序列同源性,將轉基因編碼的蛋白與已知過敏原的氨基酸序列進行比較;③編碼新蛋白的免疫化學分析,與有關過敏患者血清IgE是否存在交叉反應;④耐酸性或耐消化性,多數過敏原能耐受胃酸和消化道蛋白酶的水解;⑤熱穩定性或耐受加工處理,熱不穩定的過敏原若在需經熟食處理、或經加工處理的食物中,則無需擔心過敏性[6]。選擇目的基因之后,還應對其表達產物進行毒理學評價。通過上述分析篩查和評價過程,可確保目的基因及其表達產物的安全性。
1.1.2 載體 動物基因工程常用的載體有質粒載體和病毒載體,其中病毒載體的安全性受到廣泛關注。構建轉基因動物常用的是逆轉錄病毒載體,其中的慢病毒載體由于整合效率較高近年來得到快速發展。一般情況下通過包裝細胞分泌的病毒已經喪失了自我復制的能力,但當病毒轉染目的細胞后經過基因組整合,在一定條件下病毒轉錄表達的同時可以促使其相鄰的目的細胞的某些基因也表達,若這些基因與輔助病毒的基因具有高度同源性的時候,將大大提高產生具有自我復制能力的逆轉錄病毒(Replication competentret rovirus,RCR)的可能性[7]。用逆轉錄病毒為載體有可能在轉基因動物體內合成新的感染性病毒[8]。逆轉錄病毒載體的插入還可能會激活附近的內源性基因表達,從而觸發被轉染細胞的表型轉變[9],這稱之為“插入誘變”。插入誘變可能發生最嚴重的副作用是誘導癌基因的表達。盡管有些逆轉錄病毒載體(例如第二、第三代慢病毒載體)已經進行了改造,其安全性大大提高,但對病毒載體的使用仍需持謹慎態度。
1.1.3 標記基因 標記基因(Marker gene)是選擇標記基因(Selectable marker gene)的簡稱,可分為兩類:一類是指其編碼產物能夠使轉化的細胞具有對抗生素的抗性,在培養基中加入抗生素等選擇試劑,非轉化的細胞死亡或生長受到抑制,而轉化的細胞能夠繼續存活,從而將轉化的細胞從大量的細胞中篩選出來的一類基因。構建轉基因動物常用的這類標記基因有kan(卡那霉素)、amp(氨芐青霉素)、neo(氨基糖苷磷酸轉移酶基因)、tk(胸腺嘧啶激酶基因)等。另一類也稱報告基因(Reporter gene),是指其編碼產物能夠被快速地測定,常用來判斷外源基因是否已經成功地導人受體細胞、組織或器官,并檢測其表達活性的一類特殊用途的基因。目前轉基因動物常用的報告基因是GFP(綠色熒光蛋白基因),由GFP衍生出來的還有BFP(藍色熒光蛋白基因)、YFP(黃色熒光蛋白基因)等各種可視光的熒光蛋白基因。
轉基因成功之后,這些標記基因留在轉基因個體中,并隨著轉基因個體的擴群繁殖傳遞給后代。這些帶有標記基因的動物及其產品是否具有不安全的因素,還需要大量的試驗和時間來證明。但可能的食品安全隱患有如下幾方面:①當人們食用了轉基因動物的產品,標記基因編碼蛋白有可能被轉移到人體的細胞或腸道微生物中,從而可能會降低抗生素在臨床治療中的有效性;②標記基因編碼蛋白是否會成為新的致敏原,尚不得而知;③報告基因的存在會讓消費者產生一種心理排斥反應。
標記基因的功能是把轉化的和未轉化的細胞、組織區分開。但是,一旦完成篩選得到所需要的轉化細胞、或完成轉基因動物的構建之后,標記基因就變成不需要的和多余的。為了消除標記基因的安全隱患,目前我們能夠采取的解決方案:一是在篩選轉化細胞或構建成功目的基因表達的動物之后,剔除標記基因;二是使用無標記基因的轉基因技術。
位點專一性重組系統能有效地對目標基因進行剔除,目前可用于動物基因剔除的有Cre/Loxp和FLP/frt系統,其中以Cre/Loxp應用較多。Cre/Loxp系統是利用Cre重組酶的重組特性,將選擇標記基因置于兩個Loxp位點之間,目的基因置于Loxp位點之外,通過Cre蛋白的識別重組,使兩個Loxp位點之間的DNA區段與動物基因組之間發生置換,從而剔除選擇標記基因,獲得只含有目的基因的轉基因動物[10]。FLP/frt與Cre/Loxp重組原理基本相似,也是利用FLP基因編碼的重組酶,可以識別frt位點并進行重組[11]。
無標記基因的家畜轉基因技術其實早已有之,先期建立的顯微注射、介導等方法,都可以不使用標記基因,而是依靠分子生物學技術在個體水平或胚胎水平上進行篩選。其中又以原核的顯微注射法重復率高,效果可靠。只是這些方法導入的外源基因一般是隨機整合的,后期篩選的工作量大。
1.2 非預期效應
非預期效應指的是在考慮了目的基因插入產生的預期效應的情況下,轉基因與非轉基因親本(在相同環境和條件下)在表型、反應和組成上所顯示出的統計學顯著的差異[12]。轉基因植物的非預期效應一般認為是由于外源基因的隨機整合所導致。根據已有轉基因家畜研究的情況分析,可能引發轉基因家畜非預期效應的因素主要來自于兩方面:①外源基因的隨機整合;②某些種類目的基因的非可控表達。
1.2.1 隨機整合引發的非預期效應 隨機整合是指外源基因不受人為控制,隨機地插入任意染色體的任意位置。研究表明,轉基因生物由于外源基因的隨機插入,可能通過以下幾種機制改變內源基因的表達進而導致非預期效應的產生:①外源基因插入內源基因的“閱讀框”,破壞基因的核酸序列使其不能有效表達;②外源基因插入內源基因調控元件的“功能區”,使調控基因失去功能,導致受其調控的內源基因不能有效表達;③外源基因插入基因組的某個“敏感域內”,使原本“沉默”的內源基因被“激活”而高效表達;④外源基因的轉錄或表達產物成為誘導或抑制內源基因表達的活性因子,直接或間接地使這些內源基因的表達發生質或量的改變[13]。無論哪一種原因引起轉基因生物細胞成分的改變,都將導致食品成分的改變,而食品成分的任何一種改變都會與人類健康密切相關。因此隨機整合引發的非預期效應是引起食品安全性問題的重要原因之一。
解決轉基因家畜隨機整合的方案,就是采用基因打靶技術,將事先設計好的DNA序列插入選定的目標基因座,或者用事先設計好的DNA序列去取代基因座中相應的DNA序列,即實現定位整合(或靶向修飾)。目前,已建立的家畜基因組靶向修飾技術有:體細胞核移植途徑的靶向修飾技術、鋅指核酸酶(ZFNs)介導的靶向修飾技術和PhiC31整合酶介導的靶向修飾技術。相對于體細胞介導的基因組靶向修飾,ZFNs技術和PhiC31整合酶技術具有如下優勢:①效率高,相比傳統的同源重組方法提高了3~4個數量級;②不需要藥物篩選,不引入標記基因,省卻了刪除標記基因的繁瑣程序;③可以在胚胎水平上進行基因導入,通過簡單的顯微注射技術即可獲得靶向修飾的轉基因動物。除此之外,ZFNs技術還有可能實現雙等位基因的靶向修飾,能夠一次性得到純合子個體,這對于轉基因家畜育種尤其有利。
1.2.2 目的基因非可控表達引發的非預期效應 目的基因的非可控表達,包括過量表達、非特定發育階段的表達以及非組織特異性的表達。某些種類目的基因(如生長激素類基因)的過量表達有可能影響轉基因家畜的健康和食品的安全性。如:20世紀80年代,將生長激素類基因導入家畜,有少數轉基因家畜由于激素表達量過高而導致生長發育不正常[14],過量激素的蓄積還可能影響食品的安全。有些基因在胚胎階段或幼畜階段表達,有可能導致胚胎或幼畜發育的不正常。轉基因隨著胚胎的發育進入到各種組織細胞并在各種組織中表達,有些基因的表達產物會對其他組織基因的表達產生干擾,從而影響轉基因家畜的健康和食品的安全性。因此,調控某些基因的表達量、調控其在發育的特定階段和特定組織中進行表達就很有必要。轉基因可誘導表達系統和組織特異表達系統為上述問題提供了解決途徑。
目前用于家畜可誘導表達比較成熟的是四環素(Tet)誘導表達系統,該系統相當于轉基因表達的開關,在需要的時段在家畜的飼料中添加誘導劑使基因開啟,不需要的時候去掉誘導劑、沉默子抑制目的基因的表達使基因關閉。轉基因動物中外源基因的組織特異性表達依賴于組織特異性表達基因的啟動子和上游調控區,可以通過不同啟動子的選擇,使目的基因實現特定時間和特定器官組織的表達。例如乳腺特異性表達載體需要三部分有效的構件:乳蛋白基因啟動子及5′上游調控區、目的基因和包含poly(A)信號的基因3′端及下游區。乳蛋白基因的5′上游調控區包含有激素應答元件等時空特異表達調控位點,能準確地控制目的基因表達的特異組織(乳腺)和時間階段。
1.3 受體家畜的安全性
受體家畜的安全性無疑對轉基因家畜的安全性產生最直接的影響。考古研究表明,早在新石器時代,人類就開始飼養家畜,家畜作為人類的食品至少已有6 000~7 000年的歷史,其自身并無安全性的問題。但有些攜帶人畜共患傳染病原的家畜,會將病原傳染給人類,可對人類健康產生不利的影響;攜帶其他傳染病原的家畜會危害轉基因家畜的健康。因此,用于轉基因受體的家畜必須進行嚴格的檢疫,攜帶人畜共患傳染病原或其他傳染病原的家畜不能用作受體。為了防止病原的感染,作為轉基因受體的家畜應在相對凈化和隔離的環境下飼養,同時應做好嚴格的免疫接種、消毒、衛生等防疫工作。
2 轉基因家畜環境安全性的解決方案
轉基因生物的環境或生態安全風險,是通過基因漂移實現的。基因漂移有2種方式,即基因的垂直漂移(Vertical gene flow)和水平轉移(Horizontal gene transfer)[15,16]。
基因水平轉移通常指基因在親緣關系很遠的物種之間進行交換和移動,多發生于微生物的物種之間。可能引起轉基因家畜基因水平轉移的途徑有以下幾種:①腸道微生物。轉基因家畜的外源DNA與腸道微生物進行基因交換重組,從而發生轉移并形成新的致病微生物;②畜舍內的其他動物,如蚊、蠅、老鼠等。當蚊吸食轉基因動物的血液之后,再吸食其他動物的血液;蠅、老鼠食用了轉基因動物的排泄物之后,再四處飛行或流竄,從而發生轉移;③排泄物。轉基因家畜的糞便施放到田地作為肥料,其中可能含有未降解的細胞或細胞碎片。分析上述①的途徑,整合在動物基因組的外源DNA,如果能發生與腸道微生物進行基因交換重組,其實與內源基因是等同的。但腸道微生物是伴隨著動物的出現就一直存在的,并未見動物的DNA與腸道微生物DNA發生交換重組的現象,也不具備這種機制。已知微生物之間可通過轉導、轉化或接合進行基因轉移,但尚無DNA在腸胃系統中轉入微生物的報告[17]。至于上述②、③的途徑,顯而易見,圈養的動物與在大田里生長的植物相比,上述可能引起基因水平轉移事件發生的概率要低得多。就轉基因生物安全的風險評價而言,風險是危害性及其發生概率的函數,即:風險=危害性×發生概率。即使對于植物,目前也還沒有充足的證據表明,基因的水平轉移會導致轉基因逃逸和帶來明顯的環境安全問題[15]。
基因的垂直漂移是指通過有性雜交的方式發生于親緣關系很近或同一物種不同群體之間的基因交換。轉基因植物的基因垂直漂移,通??梢酝ㄟ^3種不同的媒介來實現,即花粉介導、種子傳播介導和無性繁殖器官介導的基因漂移[15]。家畜(哺乳動物)與植物不同的是,其受精過程是在體內完成的,不存在如轉基因植物由于花粉或種子介導的“基因漂移”問題;同時家畜在自然狀態下不能進行無性繁殖,也不存在無性繁殖器官介導的基因漂移。惟一可能造成基因垂直漂移的途徑,就是轉基因家畜的逃逸。轉基因家畜從圈舍內逃出,與非轉基因家畜,從而造成轉基因的逃逸。而防范轉基因家畜的逃逸,可以通過如下措施加以控制:①轉基因家畜的研發或生產必須在專用的圈舍內進行;②轉基因家畜的畜舍與非轉基因家畜的畜舍之間要有嚴格的隔離設施和隔離帶;③按照中國“農業轉基因生物及其產品安全控制措施”的規定,制定嚴格的防止轉基因家畜逃逸的管理制度和應急措施。
3 轉基因家畜自身安全性的解決方案
轉基因家畜自身的安全性,根據《農業轉基因生物安全評價管理辦法》附錄II“轉基因動物安全評價”[18],可理解為相對于受體家畜,其存活能力、繁殖、遺傳及其他生物學特性的改變。從轉基因動物生產過程到外源基因的表達,都有一些影響轉基因動物自身安全性的因素。本文的第一部分可能影響轉基因家畜食品安全性的因素中,已經涉及到一些影響轉基因家畜自身安全性的因素,其中比較重要的是載體和非預期效應。除此之外,轉基因方法也對轉基因家畜自身的安全性產生一定的影響?,F有的每一種轉基因家畜制作方法都存在自身的一些缺陷。顯微注射法、介導法、病毒感染法以及其他非同源重組的方法,外源基因一般是隨機整合,整合位點的不確定性可能帶來非預期效應,不僅影響食品安全性,也影響轉基因家畜自身的安全性,而且首先表現的是對轉基因家畜自身安全性的影響。病毒感染法還存在病毒載體帶來的安全患。體細胞核移植介導的轉基因方法,與基因打靶技術相結合,雖然能實現定位整合(靶向修飾),但其產生的部分克隆動物確實存在健康問題。體細胞核在卵胞質中重編程的不完整性(或其他原因),有可能會導致部分轉基因動物其解剖結構、生理功能和行為方式上的些許改變,這些變化可能會對動物自身的健康造成影響和存活能力的下降,如死胎、胎兒肥大、早期流產、成年后表型和解剖學異常等現象[19]。
上述問題的解決方案可以從兩方面考慮:其一是對不管是用哪一種方法獲得的轉基因家畜,都應加強生長發育、繁殖、遺傳及各種生物學性狀的監測和評估。對于用作生物制藥的轉基因家畜,在動物血液中是否有藥物的殘留、藥物的實際含量,對動物消化系統中的微生物菌區的微生物是否有一定影響,是否對該種藥物產生特定的抗藥性都應仔細監測。通過監測和評估,淘汰有異常表現的個體,保留具有正常生長發育態勢、繁殖和遺傳穩定的個體。已有的轉基因動物的試驗表明,出現上述存活能力下降的只是少數。其二是改進現有的轉基因技術,使其更具安全性。例如:通過顯微注射途徑的ZFNs技術和PhiC31整合酶技術,既可以實現靶向修飾,又可以規避目前克隆技術的一些弊端。從能在細胞水平上對轉基因的整合和表達進行篩選而言,體細胞介導的轉基因方法仍有不可替代的優勢,目前應著力研究體細胞重編程的機理,提高完整重編程的效率,從而提高克隆效率、減少轉基因克隆家畜的異常。
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【論文摘要】:21世紀是生物科技迅猛發展的時代,生物技術為農業、漁業、林業以及食品工業的可持續發展提供了強有力的手段。近幾年來,轉基因植物推出的品種之多、推廣面積之大、發展速度之快,遠超出人們的預測。在研究與開發轉基因產品的同時,理智、客觀、安全地運用轉基因技術,加強其安全性防范的長期應用研究。
植物轉基因技術將為農業生產帶來一場新的革命,它將為農作物的持續增產和解決全球人炸所造成的糧食危機做出巨大貢獻。但也有人對這一技術持懷疑態度,認為目前人類還不能對它的潛在危險性做出正確的評價。因此,在大規模應用前有必要對轉基因植物的安全性進行更深入的研究和分析。
1植物轉基因技術的研究意義
轉基因植物是指利用重組DNA技術將克隆的優良目的基因導入植物細胞或組織,并在其中進行表達,從而使植物獲得新的性狀。這一技術克服了植物有性雜交的限制,基因交流的范圍無限擴大,可將從細菌、病毒、動物、人類、遠緣植物甚至人工合成的基因導入植物。轉基因作物可提高農作物產量,減少除草劑、殺蟲劑等農藥的使用量,并節省大量勞動力,因而給人類帶來了巨大的經濟和社會效益。根據農業生物技術應用國際服務組織(ISAAA)的年度報告,2006年,全球轉基因作物的種植面積猛增了1200萬公頃,首次突破了1億公頃大關。轉基因植物產生至今僅20年時間,但其研究和應用得到了非常迅猛的發展。
2對轉基因植物安全性評價的必要性
從理論上說,轉基因技術和常規雜交育種都是通過優良基因重組獲得新品種的,但常規育種的安全性并未受到人們的質疑。其主要理由是常規育種是模擬自然現象進行的,基因重組和交流的范圍很有限,僅限于種內或近緣種間。并且,在長期的育種實踐中并未發現什么災難性的結果。而轉基因技術則不同,它可以把任何生物甚至人工合成的基因轉入植物。因為這種事件在自然界是不可能發生的,所以人們無法預測將基因轉入一個新的遺傳背景中會產生什么樣的作用,故而對其后果存在著疑慮。而消除這一疑慮的有效途徑就是進行轉基因植物的安全性評價。也就是說要經過合理的試驗設計和嚴密科學的試驗程序,積累足夠的數據。人們根據這些數據可以判斷轉基因植物的田間釋放或大規模商品化生產是否安全。對試驗證明安全的轉基因植物可以正式用于農業生產,而對存在安全隱患的則要加以限制,避免危及人類生存以及破壞生態環境。只有這樣,我們才能揚長避短,充分發揮轉基因技術在農業生產上的巨大應用潛力。
3轉基因植物安全性評價的主要內容
目前,國際市場上的轉基因食品按照要求必須進行了嚴格審查,證明它們對人類健康無副作用。檢驗不僅在生產國進行,而且聯合國糧農組織和世界衛生組織聯合委員會負責監管。對轉基因植物的安全性評價主要集中在兩個方面,一個是環境安全性,另一個是食品安全性。
3.1轉基因植物的環境安全性
環境安全性評價要回答的核心問題是轉基因植物釋放到田間去是否會將基因轉移到野生植物中,或是否會破壞自然生態環境,打破原有生物種群的動態平衡。
⑴對野生生物的影響:轉基因植物種植推廣后,釋放到自然環境中的機會多。因其具有野生植物缺少的多種抗性,將會迅速成為新的優勢種群,從而影響生態平衡。雖然利用"終止因子技術",以及"化學催化"技術可以限制轉基因植物的擴散,但因此項技術對農業的持續發展等諸多方面影響而受到多方面的關注。
⑵對自然生物類群的影響:出現高抗藥性有害生物。"病毒重組"或"異源包裝"是否會產生新的農作物病原物,自然界存在著植物病毒的重組現象,包括DNA病毒和RNA病毒。轉外殼蛋白(CP)基因的抗病毒植物,當有其它病毒侵染時,入侵病毒的核酸有可能被轉基因植物表達的外殼蛋白質包裝,從而改變病毒的寄主范圍,使病毒病防治更加困難。擔心作物中轉入抗蟲或抗病基因后,會加大對某一種害蟲或病原體的選擇壓,使害蟲或病原體加速突變產生抗性,給防治增加麻煩。
3.2轉基因植物的食品安全性
食品安全性也是轉基因植物安全性評價的一個重要方面。如果轉基因植物生產的產品與傳統產品具有實質等同性,則可以認為是安全的。若轉基因植物生產的產品與傳統產品不存在實質等同性,則應進行嚴格的安全性評價。在進行實質等同性評價時,一般需要考慮以下一些主要方面。
⑴有毒物質:必須確保轉入外源基因或基因產物對人畜無毒。如轉Bt殺蟲基因玉米除含有Bt殺蟲蛋白外,與傳統玉米在營養物質含量等方面具有實質等同性。要評價它作為飼料或食品的安全性,則應集中研究Bt蛋白對人畜的安全性。
⑵過敏源:在自然條件下存在著許多過敏源。在基因工程中如果將控制過敏源形成的基因轉入新的植物中,則會對過敏人群造成不利的影響。所以,轉入過敏源基因的植物不能批準商品化。另外還要考慮營養物質和抗營養因子的含量等。
4總結
植物基因工程食品在解決全球饑餓問題和保障農業的可持續發展方面發揮著舉足輕重的作用,并可通過轉基因能源植物為緩解世界能源危機作出巨大貢獻,盡管與之相伴的轉基因植物安全性問題與公眾態度、貿易中的技術壁壘及倫理、宗教等復雜因素交織為一個科技含量很高的政治、經濟問題,成為了國際、國內普遍關注的焦點和熱點,但轉基因植物輝煌的發展前景是不容置疑的。在研究與開發轉基因產品的同時,理智、客觀、安全地運用轉基因技術,加強其安全性防范的長期應用研究。建立起一整套完善的、既符合國際標準又與我國國情相適應的檢測體系,確保轉基因產品進出口的安全性,讓植物轉基因生物技術成為21世紀解決健康、環境、資源等重大社會與經濟問題的有效手段。
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轉基因植物和傳統植物在環境適應性方面有一定的區別。由于這些植物在種植過程中加入了新型的基因,有可能會有一些風險,對植物種植的安全性和食品的安全性會產生影響。因此對轉基因植物的種植和質檢需要更加嚴格的步驟和技術規范。
轉基因植物的環境安全性分析
轉基因植物對環境的安全性有一定的要求。只有將轉基因植物放在滿足要求的空間環境中,才能讓轉基因植物更好的生長。
轉基因植物的生存競爭性分析。轉基因植物和非轉基因植物的植株沒有較大的差別。包括轉基因水稻,楊樹、蘆筍和甜瓜等植物的生長勢和非轉基因沒有太大的差別。通常相對于非轉基因植物,轉基因的植物長,勢較差。兩種植物的種子活力和越冬能力有一定的區別,包括棉花,煙草、馬鈴薯和油菜在內的轉基因植物的種子活力不高,導致無法提高植物的越冬能力。轉基因植物的生存競爭性主要表現在抗草劑、抗病蟲和抗逆等方面。如果轉基因植物脫離了特定的生存環境,就會喪失生競爭能力。
轉基因植物的生殖隔離距離分析。技術人員在田間試驗過程中,為避免基因出現漂流的情況,需要采取生殖隔離措施。植物的生殖特性,環境條件和傳粉方式不同,導致的隔離距離也有所不同。因為轉基因植物攜帶有除草劑抗性標記和抗生素抗性標記。所以專業人士可以根據這一特點對花粉傳播距離進行科學有效的研究。根據研究會得出很多科學經驗和有效數據。技術人員可以將緩沖作物帶設置在轉基因作物周圍。這樣可以減少花粉的傳播距離。
轉基因植物和近緣野生種的可性分析。根據地理環境和物種的需求,可以確定近緣野生種和轉基因植株的可性,但是二者的情況較復雜。同時,轉基因生物對非靶生物也有一定的影響。根據轉基因植物和非轉基因植物的對照比較,水稻,矮牽牛和馬鈴薯等轉基因植物不會對土壤微生物的數量和種類產生影響。根據國外相關專家的研究,轉基因油菜中的基因可以向黑曲霉轉移,但是卻沒有研究出明確的轉移機制。轉基因植物會影響到昆蟲,我國相關專業人士在這方面也有一些研究。此外,轉基因植物和非轉基因植物殘渣對后季植物的影響基本一致。
轉基因植物的食品安全性分析
根據我國現階段的食品市場現狀,在食品安全性檢驗方面需要遵循“實質等同性”原則,需要保證經過生物技術改造的食品質量達標。技術專家要在這方面加強重視和研究。包括轉基因食品的營養因子和性狀都要符合要求,要檢查食品中是否有過敏蛋白和毒性物質。轉基因植物食品在遇到一些特殊情況時,很可能會出現過敏的現象。對此需要技術人員加強重視,避免過敏現象。技術人員根據對植物過敏蛋白的研究,對黑麥草花粉做了鑒定,其中包含著一些過敏元素。我們可以具體分析轉基因植物出現過敏現象的條件。首先,過敏蛋白子在所轉基因編碼已知的情況下,可能會發生過敏現象。其次,過敏蛋白包含著基因源中。根據科技大學對于食品的研究成果,巴西清蛋白大豆對人體具有過敏性。因此這一產品沒有被批準進入市場。
轉入蛋白和已知過敏蛋白具有同源的氨基酸序列。從相關專家的數據庫中就可以查找并確定同源性。這需要氨基酸保持在連續8個左右。在轉入的蛋白中,有一些過敏蛋白屬于小分子量蛋白,在脊椎動物和真菌中的存在率是非常高的。根據植物的不同種類,氨基酸序列都是相對比較保守的,包括蔬菜,花粉和水果中的小分子量蛋白屬于過敏原,主要是肌動蛋白抑制蛋白在起作用。為了保證食品的安全性符合質量要求,需要對植物基因的安全性進行測評,這就需要專業人員對轉基因食品的安全性進行檢測,將不符合要求的食品排除在外,選擇質量達標的食品進入市場流通。
中國人民大學公共管理學院和國家環保總局南京環境科學研究所合作,在位于北京市城區、近郊和遠郊的12個超市,對1 000名消費者進行的問卷調查顯示,我國公眾對于轉基因食品的了解還遠遠不夠。
調查發現,“完全不了解”和“不太了解”轉基因生物及產品的消費者高達64.9%;“一般了解”的有32.8%;“非常了解”的只有極少數,占2.3%。
所謂轉基因食品,就是利用分子生物學手段,將某些生物的基因轉移到其它生物物種中去,使其出現原來物種不具有的性狀或產物,以轉基因生物為原料生產和加工的食品稱為轉基因食品。轉基因食品能夠提高農作物的產量、食品質量以及在一個特定地區生長的食物的多樣性,有助于人們增進健康和營養,并獲得更多的經濟效益。對于生命的繁衍規律來說,轉基因技術是一種近乎神話的顛覆,它徹底打破過去人對自然的敬畏,也充分顯示出人的再造能力,人類在挑戰自然造物主的角色。然而,和任何高科技不一樣的是,轉基因技術的顛覆,不再僅限于對自然界現象解惑式的探索,而是試圖將組成生命的鏈條重組,因而其安全性引起了全球社會的普遍關注。
目前對轉基因食品的安全性討論主要集中在兩個方面:一是食用安全性,轉基因技術可以準確地將DNA分子切斷和拼接,進行基因重組,但是由于新插入的基因是隨機的,插入基因后產生的產物或許是迄今為止人類沒有充分認識到的新的產物,如致癌物、激素、過敏源等。另外,由于新的基因的轉入或基因重組,對固有生物的性質或許也會有影響。二是環境安全性,人們關注環境安全性的核心問題是轉基因作物到田間后,是否將轉基因移到野生植物中,是否會破壞自然生態環境,打破原有生物種群的動態平衡。
隨著轉基因技術在世界范圍內的迅速發展,許多國家建立了完善的轉基因安全體系,評估和降低轉基因技術所帶來的風險。我國亦是如此。那么,我國關于轉基因安全的管理政策是否健全?關于轉基因技術安全的種種爭論是否合理?我國轉基因安全體系能否將各種潛在風險大大降低?帶著這些問題,本報記者專訪了中國農業科學院生物技術研究所所長林敏。
問:轉基因技術在世界許多國家蓬勃發展,各具特色的轉基因安全體系隨之應運而生。建立轉基因安全體系是出于什么考慮?有什么必要性?
林敏:任何新技術的應用都可能存在風險。在生物育種領域,轉基因技術如此,人們熟悉的雜交育種技術也是如此。這種潛在的風險可能涉及生態環境安全、人畜安全等多方面的問題。為了更好地預見和控制這種風險,世界各國建立了各自的轉基因安全體系。需要指出的是,雖然各類生物育種技術都存在潛在風險,但迄今只針對轉基因技術建立了系統的安全體系,這足以大大克服和避免這種潛在風險。
健全、嚴格的轉基因安全體系也是參與國際合作和國際競爭的必然要求。如今世界許多從事轉基因生物研發及進出口的國家建立了各自的相關安全體系,制定了或緊或松的管理策略,并以此作為技術性貿易措施,以維護其產業、貿易利益。因此建立健全的轉基因安全體系,是在相關國際合作和競爭中保障自身利益的重要條件。
應當指出,在世界各國的嚴格管理下,全球大面積種植轉基因作物已超過14年,迄今并無科學證據表明轉基因作物及其產品對人體健康和生態環境造成了現實的安全問題。
問:我國轉基因安全體系建設始于何時?包括哪些內容?目前體系建設進展如何?
林敏: 我國是世界上較早研究和應用農業轉基因技術的國家之一。對于轉基因生物研究、試驗、生產、加工、經營和進出動的安全管理,我國早在10年前就與發達國家接軌了,制定了《農業轉基因生物安全管理條例》等相關法律法規,實施了嚴格的管理措施。早在1993年,國家科委就制定了基因生物安全管理的指導性文件。1996年,農業部正式實施《農業基因工程安全管理辦法》,開始對轉基因生物的研究試驗進行安全性評價和管理。2001年5月23日,國務院又頒布了《農業轉基因生物安全管理條例》(以下簡稱《條例》)。將農業轉基因生物安全管理從研究試驗延伸到生產、加工、經營和進出口各環節。2002年1月5日,農業部了與《條例》相配套的《農業轉基因生物安全評價管理辦法》、《農業轉基因生物進口安全管理辦法》和《農業轉基因生物標識管理辦法》,自2002年3月20日正式實施。2002年4月,衛生部了《轉基因食品衛生管理辦法》,自2002年月1日正式實施。2004年6月,國家質檢總局了與進出口安全管理相銜接的《轉基因產品進出境檢驗檢疫管理辦法》。
《農業轉基因生物安全管理條例》及相關配套規章的制定和實施,有效規范了我國農業轉基因生物安全評價、進口安全管理、標識管理、加工審批、產品進出境檢驗檢疫工作。我國轉基因生物安全體系建設遵循“加快研究、推進應用、規范管理、科學發展”的指導方針,工作成效顯著,實施了技術檢測國家標準100余項,制定了轉基因植物、動物用微生物安全評價指南和轉基因作物田間試驗安全檢查指南等,形成了一整套適合我國國情并與國際接軌的法律法規、技術規程和管理體系,有效地保障了生物安全,促進了生物技術研究與產業化可持續發展。
問:目前有多少轉基因品種在我國獲得轉基因安全證書?考核其安全性及頒發證書的程序如何?
林敏:截至目前,我國共批準發放7種轉基因植物的農業轉基因生物安全證書,即:1997年發放耐貯藏番茄、抗蟲棉花安全證書;1999年發放改變花色矮牽牛和抗病辣椒(甜椒、線辣椒)安全證書;2006年發放的轉基因抗病番木瓜安全證書;2009年發放轉基因抗蟲水稻和轉植酸酶玉米安全證書。
根據《條例》及配套規章規定,國家建立農業轉基因生物安全評價制度,對農業轉基因生物實行分級、分階段安全評價和管理。安全評價分為實驗研究、中間試驗、環境釋放、生產性試驗和申請領取安全證書五個階段。安全評價工作由農業轉基因生物安全委員會負責。安全委員會按照《條例》、配套規章、評價指南的要求,遵循科學、個案、熟悉的原則,參考國際食品法典委員會、聯合國糧農組織、世界衛生組織、經濟合作組織等制定的轉基因生物安全評價指南,開展農業轉基因生物安全評價工作。目前我國轉基因作物安全評價指標全面規范,評價過程科學嚴謹,評價結論真實準確,決策過程慎之又慎。
問:按照慣例,對于安全性未達到相關規定的轉基因品種會如何處理?
林敏:按照國際慣例,在安全評價中被確定為未達到相關規定的轉基因品種會立即停止其安全評價過程,甚至停止研發。比如1994年美國先鋒公司嘗試將巴西堅果中某種蛋白的基因轉入大豆,以提高大豆的營養品質。在隨后的過敏性分析中,發現對巴西堅果過敏的人可能同樣會對這種轉基因大豆過敏。先鋒種子公司因此立即終止了這項研究計劃。這個案例充分說明現行的轉基因安全評價體系能有效預防轉基因技術應用的潛在風險,確保安全。
1997年以來,農業部共受理了192家研發單位的生物安全申請1525項。經國家農業轉基因生物安全委員會評審,共批準了中間試驗456項,環境釋放211項,生產性試驗181項。雖然對轉基因抗蟲棉花、抗蟲水稻、植酸酶玉米、抗病毒木瓜等發放了安全證書,但真正進入商品化生產的作物只有轉基因棉花和木瓜。最初安全申請與最終獲得安全證書之間的懸殊數量,從另一個側面說明了我國轉基因安全評價程序的嚴格。
問:自轉基因技術誕生以來,關于其負面影響的爭議從未停歇,并有諸多負面案例見諸媒體報端。您如何看待目前關于轉基因作物安全性的爭論?
林敏:“轉基因食品的安全性還沒有定論”是媒體上常見的說法,但是這種說法是錯誤的。事實上,世界衛生組織、聯合國糧農組織以及世界各國權威機構均認為,目前凡是通過安全評價上市的轉基因食品,與非轉基因食品一樣安全。轉基因食品是有史以來評價最透徹、管理最嚴格的食品。全球轉基因作物規?;瘧靡延?4年,種植面積、作物種類、加工食物種類和食用人群逐年擴大,但由于實施了規范管理和科學評價,全世界每年上億公頃土地種植轉基因作物,每年數億人群食用轉基因食品,迄今尚未發現確有科學實證的轉基因食用和環境安全問題。轉基因技術在發展過程中伴隨著激烈的安全爭論,發生了“英國普斯塔事件”、“美洲班蝶死亡”、“加拿大超級雜草事件”、“歐洲轉基因玉米對哺乳動物健康影響”等一連串所謂的“轉基因事件”。但這些事件由于缺乏科學依據,最終被各國政府和權威研究機構一一否定。當前,轉基因安全性爭論涉及科學、技術、貿易、宗教等復雜因素,但其實質是貿易之爭,是國家利益之爭。
問:在圍繞轉基因作物的爭論中,公眾最關注的是如何保障自身的知情權,即及時知曉食品等產品中是否含有轉基因作物。對此我國相關法規中有何規定?
據英國《衛報》報道,美國非盈利性測試機構“消費者報告”測試,稱美國大多數標有 “天然”標識的食品中含有大量轉基因成分。該機構食品安全與可持續性部門執行總監烏瓦時·蘭格(Urvashi Rangan)表示,消費者正受到“天然”標識的誤導。
玉米和大豆是美國境內種植范圍最廣的轉基因食品?!跋M者報告”對80余種含玉米或大豆成分的加工食品進行了調查,以判斷所標注轉基因成分是否屬實,所有產品均于2014年4-7月間采購。測試結果表明,這些被認為不含轉基因成分的產品中均含有不超過0.9%的轉基因玉米或大豆成分。
該機構表示,雖然標識“非轉基因”或“有機”的食品確實不含轉基因玉米和大豆,但幾乎所有標有“天然”標識或未使用標識的食品中都含有一定的轉基因成分,其中包括谷物早餐、薯片和嬰兒配方奶粉。
近日,美國雜貨制造商協會不斷敦促聯邦政府對食品包裝袋上的“天然”標識進行界定,并呼吁允許含轉基因成分的食品在表示中使用“天然”字樣。
當前市場上的生物技術作物主要包括玉米、大豆、菜籽油和甜菜,這些作物通過轉基因技術避免害蟲侵襲,并可直接噴灑除草劑。開發商聲稱這些轉基因作物是安全的,并且有不少科學研究支持這一觀點。
但有評論家指出,有研究表明轉基因食品影響人類和動物的健康,并對環境造成了破壞。2013年10月,某國際科學家聯盟表示科學界對于轉基因作物的安全性缺乏共識。
美國佛蒙特州已通過一項法案,強制要求對含轉基因成分的食物進行標識,另有包括科羅拉多州、俄勒岡州在內的20多個州正在計劃強制對轉基因食品進行標注,并將其列為2014年11月美國國會中期選舉的議題之一。
國際上的轉基因技術發展態勢
現在全球轉基因技術研發勢頭強勁,發達國家都在搶占這個技術的制高點,發展中國家有很多也在積極跟進。美國政府態度積極、方向明確,已經占據了全球轉基因產業發展先機,在全球種業具有明顯優勢。美國是最早商業化種植轉基因作物的國家,轉基因抗蟲玉米和抗除草劑大豆的種植面積已分別超過玉米、大豆面積的90%。美國市場上70%的加工食品都含有轉基因成分。
歐洲轉基因的研發水平曾一度領先于美國,但之后態度趨于謹慎,目前已大大落后于美國。如今,歐盟部分成員國也在積極推動政策調整,2013年西班牙、葡萄牙、羅馬尼亞、捷克和斯洛伐克等5個歐盟國家抗蟲玉米的種植面積已達到14.8萬公頃,其中西班牙種植面積最大,占其種植面積的94%。2014年2月11日,歐盟部長會議還通過了對杜邦先鋒良種公司培育的一種新型轉基因抗蟲玉米TC1507的種植許可。這表明,歐盟的轉基因政策正在發生一些變化。
目前,國際上關于轉基因標識管理主要分為4類:一是自愿標識,如美國、加拿大、阿根廷等;二是定量全面強制標識,即對所有產品只要其轉基因成分含量超過閾值就必須標識,如歐盟規定轉基因成分超過0.9%、巴西規定轉基因成分超過1%必須標識;三是定量部分強制性標識,即對特定類別產品只要其轉基因成分含量超過閾值就必須標識,如日本規定對豆腐、玉米小食品、納豆等24種由大豆或玉米制成的食品需進行轉基因標識,設定閾值為5%;四是定性按目錄強制標識,即凡是列入目錄的產品,只要含有轉基因成分或者是轉基因作物加工而成的必須標識。目前,我國是唯一采用此種標識方法的國家,也是對轉基因產品標識最多的國家,凡是列入農業部《農業轉基因生物標識管理辦法》中標識目錄的轉基因生物及其直接加工品,都應該按規定進行標識,以充分保障公眾的知情權和選擇權。由于實行定量標識的國家都設定了閾值,而通常食品中轉基因成分很難達到這個值,這些食品雖然是轉基因食品但不標識。因此,在這些國家的市場上很難發現有標識的轉基因產品。
我國的轉基因技術
我國從2000年開始大量進口大豆,至2013年進口大豆達6338萬噸,大部分為轉基因大豆,全部用作加工原料,沒有用于商業化種植。美國、巴西、阿根廷等國家是我國大豆進口主要來源地,這些國家絕大部分種植的都是轉基因大豆。2013年,美國轉基因大豆種植面積占93%、巴西為92%、阿根廷為100%。
進口轉基因大豆是我國合理利用國際、國內兩個市場和兩種資源的成功舉措。進口的轉基因大豆品質好、出油率高,據專家測算,轉基因大豆加工成豆油的總成本比非轉基因國產大豆每噸要低300元。我們國家每年的大豆播種面積在1.2億畝左右,而我們的品種和技術水平比國外一些國家還有差距,多、亂、雜和混收、混種問題比較突出,勞動力成本也不斷上漲,關鍵是國內產量難以滿足需求。近幾年,我國每年都進口5千多萬噸以上的大豆,這些大豆按現有的品種和技術水平來測算,需要4億多畝耕地,這個面積接近目前玉米或者水稻的播種面積。就是說,我們自己生產這5千萬或6千萬噸大豆,就要犧牲掉同等面積的高產作物。
2002年,農業部了《農業轉基因生物標識管理辦法》,制定了首批標識目錄,對在中華人民共和國境內銷售的大豆、油菜、玉米、棉花、番茄5類17種轉基因產品進行強制定性標識,其它轉基因農產品可自愿標識。自首批標識目錄至今,我國批準種植的轉基因作物僅有棉花和番木瓜,批準進口用作加工原料的有大豆、玉米、棉花、油菜和甜菜5種作物。如轉基因木瓜未列入我國首批標識目錄,主要是因為目前我國農民小規模分散種植的木瓜仍占較高比例,農民直接到農貿市場銷售,這樣很難做到對所有木瓜進行標識,標識的成本很高。當前,國際上還沒有任何一個國家對所有的轉基因產品進行標識。
依據國際食品法典委員會的標準,我國制訂了《轉基因生物及其產品的食用安全性評價規范和技術指南》。評價內容主要包括四個部分,第一部分是基本情況:包括供體與受體生物的食用安全情況、基因操作、引入或修飾性狀和特性的敘述、實際插入或刪除序列的資料、目的基因與載體構建的圖譜及其安全性、載體中插入區域各片段的資料、轉基因方法、插入序列表達的資料等;第二部分是營養學評價:包括主要營養成分和抗營養因子的分析;第三部分是毒理學評價:包括急性毒性試驗、亞慢性毒性試驗等;第四部分是過敏性評價,主要依據聯合國糧農組織與世界衛生組織提出的過敏原評價決策樹依次評價,禁止轉入已知過敏原。另外,對轉基因生物及其產品在加工過程中的安全性、轉基因植物及其產品中外來化合物蓄積情況、非預期作用等方面還要進行安全性評價。
轉基因食品安全性
轉基因食品的安全性是有定論的,即凡是通過安全評價、獲得安全證書的轉基因食品都是安全的,可以放心食用。國際食品法典委員會于1997年成立了生物技術食品政府間特別工作組,認為應對轉基因技術實行風險管理,并制定了轉基因生物評價的風險分析原則和轉基因食品安全評價指南,成為全球公認的食品安全標準和世貿組織裁決國際貿易爭端的依據。轉基因食品入市前都要通過嚴格的毒性、致敏性、致畸性等安全評價和審批程序。世界衛生組織以及聯合國糧農組織認為:凡是通過安全評價上市的轉基因食品,與傳統食品一樣安全,可以放心食用。迄今為止,轉基因食品商業化以來,沒有發生過一起經過證實的食用安全問題。
關鍵詞 轉基因食品;分析檢測技術;基因工程
中圖分類號 TS207.7 文獻標識碼 A 文章編號 1007-5739(2017)03-0236-02
20世紀70年代重組DNA技術的問世將生物技術帶進基因工程時代,農業生物技術在世界范圍內迅速崛起,轉基因植物在全球范圍內得到廣泛種植,隨之而來的轉基因食品也迅猛發展。由于轉基因生物技術的廣泛應用和轉基因作物的大規模種植,轉基因食品的安全性問題也已引起人們越來越多的關注。
1 轉基因食品標識制度與分析檢測技術
我國在2015年對《食品安全法》的修訂中有明確的指示,企業對轉基因食品必須按照規定進行標識。目前國際中對于轉基因食品標識制度主要分為強制性標識與自愿性標識2種。在我國對于轉基因食品的標識有著較為嚴格的法律制度,對于企業生產與經營的產品中轉基因食品含量超過閾值必須進行標識。而在一些歐美國家對轉基因食品標識沒有嚴格的要求,只對于存有過敏因素的轉基因食品進行標記。而在我國產品進口時需要進行嚴格的分析檢測,對于合格的轉基因食品批準進口并進行轉基因標識,其也是產品流通的關鍵。由此可見標識的重要性[1]。
而對轉基因產品的標識需要通過分析檢測來實現,故轉基因食品標識制度是轉基因食品的重要標簽。實際檢測能力決定標識制度的建立,定性和定量分析檢測技術所達到的檢測限為標識制度提供科學依據;然而在實際檢驗檢疫工作中標識制度是通過檢測技術來實現的。因此,標識制度與分析檢測技術的關系十分密切,二者相互影響,相互作用[2]。
2 轉基因食品問題現狀
2.1 轉基因食品概述
在基因工程中,利用DNA重組技術將外源性基因轉移到其他生物體中,使生物體顯現出特殊的遺傳特征與生物性狀,得到新的基因重組的生物體就是轉基因的內容。而所謂轉基因食品則是應用這些特殊的生物體進行加工而成的食品。
轉基因在某種程度上只是利用外源性基因加快生物體的生長進程,在基因工程中,轉基因食品主要是為了縮短作物生長周期、增加作物產量、增加抗病蟲害能力,從而有效降低生產成本,提高作物的生產效益。在目前的轉基因研究中,并沒有發現食品中含有大量的毒素。但是由于轉基因食品屬于人工制造的外來生物體而非自然選擇生成的物種,在基因漂流的過程中產生的基因序列的改變無法完全地進行掌握,外源性基因在與DNA進行重組時存在著不可控制的性狀,因而對轉基因食品的安全性也無法進行確切的定論[3]。
2.2 D基因食品存在的問題
轉基因食品自出現開始便成了一種非常具有爭議的食品,越來越多的轉基因食品流入市場與媒體的發酵使人們對轉基因食品的安全性有了很大的質疑。而在轉基因食品安全的問題上,目前還沒有嚴謹的科學結論與研究報告對其安全性給出確切的證據結論,其存在的問題主要有以下幾個方面。
第一,轉基因食品是由基因植入及基因重組形成的新的生物體,其原本具有的結構與成分是否發生了變化;第二,轉基因食品不是自然界生成的產物,食用轉基因食品是否會對人體產生負面影響,長期食用是否會有毒素的積累,對人體的發育生長有什么影響;第三,轉基因作物不是在自然選擇下出現的產物,其是否會對生物鏈有影響,是否會破壞生態平衡;第四,轉基因作物是基因流動下的產物,這種情況下是否會出現基因污染的情況,波及到其他自然界的作物,使其基因發生改變[4]。
由于上述這些問題并沒有得到有效的解決,因而才迫切需要完整、準確、嚴謹的轉基因食品分析檢測技術對其安全性進行保證,從而進一步完善我國轉基因食品監管方面的科學規范。
2.3 轉基因食品檢測技術的內容和分類
目前,對于轉基因食品的安全性主要依靠轉基因食品分析檢測來進行測定。而在轉基因食品的分析檢測過程中,主要是對DNA、蛋白質及核酸這3類物質進行測定,可以根據這3類物質分成3個種類的檢測方法,在實際情況中可以根據需要進行檢測方法的聯用。由于蛋白質水平檢測方法僅適用于未進行加工的食品檢測和新鮮食品范圍,具有較大的局限性,因而現階段外源基因測定方法的使用范圍較為廣泛[5]。
3 轉基因食品檢測技術的研究進展
3.1 蛋白質印跡檢測技術
蛋白質印跡檢測主要是利用聚丙烯酰氨凝膠電泳對轉基因食品外源蛋白質進行分離,并與顯色酶反應進行結合,從而使外源蛋白質可以有效地進行分離檢測。這種檢測方法主要是對轉基因食品中不可溶蛋白質進行分析,檢測在轉基因食品中的蛋白質含量,并與蛋白質預定限值進行比對。
3.2 復合擴增PCR檢測技術
目前在轉基因食品檢測中多重PCR檢測技術是一種被廣泛使用的檢測手段。PCR(聚合酶鏈式反應)一般只能對1個DN段進行放大擴增檢測。為了能在轉基因食品檢測中獲得更全面的基因序列信息,在進行基因檢測時利用PCR反應原理進行多重檢測,由此形成了復合擴增PCR轉基因食品檢測技術。這種檢測技術的應用可以有效提升檢測效率,并且可以對基因序列多個靶位點同時進行檢測,實現轉基因食品檢測的準確性與可靠性[6]。
3.3 外源DNA檢測技術
轉基因食品主要是將外源DNA導入生物體中,而對外源DNA的檢測主要是對植入的DN段進行轉基因食品基因序列特征的檢測,以轉基因食品DNA序列作為檢測目的,轉基因食品核酸水平檢測作為最主要的轉基因產品檢測技術,其主要檢測啟動子、基因和終止子,便于檢測轉基因食品。
3.4 基因芯片檢測技術
基因芯片是對轉基因生物體的基因組序列進行測定,通過將轉基因食品的DNA有規律排布在硅片或是玻片上形成微距陣。通過對基因芯片上的基因序列進行計算機軟件的計算處理,從而獲得轉基因食品的基因特征與生物信息,這種方法可以準確有效地對轉基因生物體的基因表達特征進行檢測[7-9]。
3.5 LAMP檢測技術
LAMP(h介導等溫擴增)技術是眾多核苷酸擴增技術中的一種,這種技術在使用時沒有特定的環境條件要求,只需要在恒溫狀態下就可以進行檢測試驗,操作技術較為簡單。LAMP檢測技術主要是利用顯色反應對轉基因生物體進行觀察,并且利用濁度儀對其在反應過程中產生的沉淀物進行檢測判斷,是一種較為簡單的檢測技術。
3.6 聯用檢測技術
聯用檢測技術主要是集合多種檢測技術的優點對轉基因食品進行有效的分析檢測,這樣可以起到取長補短的作用。在基因檢測中,現有的聯用檢測技術有PCR技術與酶聯免疫吸附法的結合使用等方法[10-11]。
4 結語
轉基因食品分析檢測技術主要是對轉基因食品的安全進行評價。目前,轉基因食品分析檢測技術有多種,由于轉基因食品的基因片段不同,因而采用的檢測技術也需要依據實際需求進行選擇,確保檢測技術的有效性。在未來市場上會出現越來越多的轉基因食品,分析檢測技術作為其中重要的檢測手段也必定會有新的發展。
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人工制造將外源基因導入生物,也就是轉基因生物,其誕生與重組DNA技術同樣,因為重組DNA需要導入細菌以便大量生產。1978年,基因泰克公司用此技術,通過轉基因的大腸桿菌生產胰島素。
生物技術的興起,在農業和醫藥方面起到了其他技術無可替代的作用。在醫藥方面,為治療人類疾病、減輕人類痛苦,起了很大作用?;蚬こ躺a胰島素、基因工程生產肝炎疫苗都是直接改善了包括我國在內的全世界人民健康的藥物。單克隆抗體治療疾病,包括一些腫瘤,發揮了傳統化學藥物不能達到的療效。
基因技術使得人類可以將特定基因轉入農作物,用來改進農作物的抵抗力(比如抗病蟲害),以便提高產量。目前,轉基因技術已廣泛應用于醫藥、工業、農業、環保、能源、新材料等領域。
基因技術和抗體技術等現代生物技術導致美國生物技術產業的起飛。1970到1980年代,很多美國大學教授除了發明和應用DNA相關技術外,紛紛在校外開公司。麻省理工學院的教授、諾貝爾獎得主夏普和哈佛大學諾獎得主吉爾伯特于1978年成立Biogen公司(全球生物技術產業巨擘)。生物技術利潤遠高于人們熟知的信息產業,繁榮了經濟。
轉基因技術的安全性
所有公司用的大腸桿菌,都是經過篩選,不能對人致病。農作物中能抵抗農作物病蟲害的基因,其產物對人體完全沒有作用。如常用的抗生素可以殺死細菌,但對人的細胞毫無作用一樣,這些轉基因產物的靶點只存在于農作物的致病害蟲。在農作物中轉入特定基因,也會改善其營養價值(如維生素)。
此外,轉基因不僅不污染環境,而且還可以有利于環保。2010年美國科學院的報告稱,農作物對病蟲害抵抗力提高,可以減少殺蟲劑的使用,有利環保。
絕大多數人都吃過轉基因
事實上,絕大多數人,海內外的、也包括所謂反對轉基因的人,恐怕也都已經吃過轉基因食品。如果不是直接,也是間接吃過,而其中直接吃過的人為多數。所以,除非有特殊方法,否則多半也吃過轉基因食物。
原因很簡單,比如:美國從二十世紀九十年代末就推出轉基因大豆,除了用于各種加工外,也直接制作常見的豆制品。因為美國不標記轉基因和非轉基因的食品,而轉基因大豆占美國大豆的絕大部分,所以,十幾年來,只要吃過美國大豆產品的人,基本不可避免地直接食用了轉基因食品。
而中國大量進口美國、阿根廷、巴西的大豆,雖然我國對轉基因有標識,但因轉基因的作物產量高、產品價格低,恐怕多數人直接吃過轉基因大豆產品。又因為大豆有很多其他的加工產品,所以更多的人都間接食用過轉基因。
以上不過是以大豆為例,還有玉米。盛產玉米的美國也是以轉基因作物為主,而玉米不僅直接食用,也是美國喂養家禽、豬、牛的重要食物、甚至主要食物,所以在美國,即使不吃玉米,只要吃過雞肉、豬肉、牛肉,就間接吃過轉基因食品。
國際科學和醫學團體的態度
國際科學界對轉基因農作物的判斷是明確,并非不確定的,而且經常苦口婆心進行解釋。包括世界衛生組織、美國醫學會、美國國家科學院、英國皇家學會等在內的國際科學和醫學組織,都支持轉基因食物。
美國科學促進會理事會明確表示反對標示轉基因食品,因為“科學非常清楚:現代分子生物技術改善的農作物是安全的”,歐洲共同體投資三億歐元研究轉基因生物的生物安全性,其五百多個獨立研究組、歷經25年、做了130個課題,得出的主要結論是生物技術,特別是轉基因生物,本身不比常規植物種植方法更危險,世界衛生組織、美國醫學會、美國國家科學院、英國皇家學會以及每一個檢查過證據的可尊重組織,都得出同樣結論:食用轉基因農作物的食物成分,不比普通方法改善的農作物來源的組分更危險?!盀樵诿绹@得批準,每一新的轉基因農作物必需經過嚴格的分析和測試。如果含有蛋白質,必需被顯示無毒性、無過敏性。與公眾錯覺不同,轉基因農作物是我們食物中檢驗最多的農作物。有時有人聲稱轉基因食品導致動物從消化到生育、腫瘤、死亡等異常。但這其中,沒有一項經得起嚴格的科學檢視。新近對十幾個長期的、設計很好的動物喂食實驗表明,土豆、大豆、水稻、玉米的轉基因和非轉基因種類營養相當?!?/p>
反轉基因技術的結果
西方有些人反轉基因是出于宗教原因:不能改變上帝的杰作。中國有些人打著民族主義的旗號,號召不吃美國的轉基因食品。而實際上,這些反對絲毫不影響美國產品出口到中國,中國因為自身需求進口美國大豆,而美國大豆規定不能標明轉基因,轉基因大豆和不轉基因大豆沒有分開進口。反轉基因只能影響中國的轉基因技術,這些技術有些是引進、改進的,有些是國內發明的。世界歷史上,先進產品的發展不是誰能擋住的。反轉基因的結果是減慢中國新技術,而不能影響世界。所以,看似好像保護中國人民,其實,如果按其做法,最后只能是損害中國自身發展,使中國長期依賴進口國外產品,所以其結果將和他們的初衷正好相反。
輿論已經導致各級負責官員退縮,不批準中國國內任何研制的轉基因產品,但不影響已在大量進口的美國轉基因產品。這樣下去,受害的一定是中國。
對轉基因技術的態度
一般人對轉基因安全的關心是應該的,不能簡單分為反對和支持轉基因,而是應兼顧糧食需求和食物安全兩方面的討論。從原則上,筆者支持轉基因作物。筆者支持的是:中國積極開展轉基因研究,打好基礎、開發優質產品。從仿制開始,逐漸推出擁有知識產權的產品,嚴格檢驗和監控轉基因農作物的安全性,建立轉基因商業化的有序途徑,批準經過檢驗的轉基因農作物,應用無安全問題的轉基因農作物。筆者雖然在原則上支持轉基因,但認為具體對每個轉基因要求比一般的更嚴格,在生態安全上要高要求,在食品安全上也要高要求。如果中文世界沒有充斥對轉基因的非理性干擾,可能很多討論就會集中于如何建立對轉基因的較高安全標準。
摘要:隨著基因生物工程技術的不斷發展和完善,轉基因食品在世界農產品總量中的比重越來越大,相應地占世界農產品國際貿易總額的份額也在迅速提高,因此,積極關注轉基因食品國際貿易的現狀,對當今亞須解決的問題提出可行的辦法和對策,這既是當今國際貿易發展的客觀要求,也是提高我國農產品的競爭力,更好地維護我國的權益的根本所在。
隨著基因生物工程技術的不斷發展和完善,其在農業中的應用也越來越廣泛,因而在未來農業發展中的作用將越來越大。據有關權威機構統計,2000年世界農產品國際貿易總額達到5600億美元,其中約三分之一的農產品國際貿易與基因生物工程技術有關。因此,轉基因食品逐步成為國際貿易爭端的重要焦點。這種現狀對作為傳統的農產品貿易(出口)大國的我國在該領域保持并擴大份額無疑會產生重大影響。因此,積極關注和預測轉基因技術的發展現狀與未來趨勢,研究轉基因食品國際貿易中的有關問題,制定相應的對策,尤其是建立完備的法律法規體系,已日顯緊迫。
一、轉基因食品及其安全性
基因(gene)是遺傳物質的基本單位,是DNA雙螺旋結構片段。無數特定的基因相互連結,構成生命遺傳的物質基礎。轉基因(genetransfer)是指利用分子生物學手段將外源性基因轉移至某種特定生物體中,使其生物性狀或機能發生部分改變的過程。以轉基因生物體直接作為食品或以其為原料加工生產的食品就叫做轉基因食品。
自從1983年首例轉基因煙草問世以來,轉基因食品的安全性問題受到廣泛關注,爭論甚為激烈,逐步形成了支持和反對兩種截然不同的意見。支持方的觀點為:(1)轉基因技術可增強糧食產量,減少食品生產的投人,有助于解決世界范圍的糧食間題;(2)轉基因農作物具有抗病蟲害特性,可減少殺蟲劑的使用,有利于環境保護;(3)可以利用某些基因增加食物品種,使食物更加可口;(4)轉基因技術可準確地生產人類想要的動植物品種,克服傳統嫁接及雜交技術的不確定性,使癌癥等頑癥的治療可望取得突破。反對方的觀點為:(1)轉基因技術使不同物種的基因相互融合,可能造成“基因污染”,引起生物學上的混亂;(2)轉基因食品可能存在毒性問題,疾病可能有很長的潛伏期,轉基因食品對人體的長期影響難以確定;(3)一些人對轉基因食品存在過敏反應;(4)轉基因食品的營養作用、對抗生素的抵抗作用、對環境的威脅等問題還未得到證實或解決;(5)一些實驗已經表明了轉基因食品的負面影響。上述兩派觀點爭論至今,雙方都未能找到令人信服的證據,因此,轉基因食品是否安全的問題,尚有待時間來證明。
二、當前國際轉基因食品的發展狀況
聯合國糧農組織提供的資料顯示,1997年全世界轉基因作物的播種面積約為1100萬公頃,1998年上升到近3000萬公頃,1999年底達4000萬公頃,2000年約為4500萬公頃,增長十分迅速。進人21世紀以來,其發展勢頭更是迅猛。
從全球范圍來看,美國是轉基因技術采用最多、最先進的國家。目前美國農產品的年產量中SS%的大豆、45%的棉花和40%的玉米已逐步轉化為通過基因改制方式生產。目前,大約有20多種轉基因農作物的種子已經獲準在美國播種,包括玉米、大豆、油菜、土豆和棉花。據估計,從1999年到2004年,美國轉基因農產品和食品的市場規模將從40億美元擴大到200億美元,到2019年將達到7S0億美元。專家預計,在本世紀初,很可能美國的每一種食品中都含有一定量基因工程的成分。
1997年初,歐盟以安全為由禁止進口美國的轉基因玉米,使美國出口商每年蒙受約2億美元的損失。美國要求其出口商向歐盟提供他們出口的玉米并非轉基因產品的證明,但歐盟只認自己的檢驗標準。1999年7月,歐盟環境部長們決定無限期延長對轉基因農產品的進口禁令。美國農業部最新公布的調查報告表明,受歐洲國家和本國市場抵制的影響,2000年全美轉基因玉米的種植面積銳減了24%,轉基因棉花的種植面積占棉花種植總面積的比例已由1999年的55%下降到2000年的48%轉基因大豆則由1999年的57%降至2000年的52%。
近年來,我國轉基因方面的研究與開發也有較大進展。中科院植物所提供的資料表明,我國已經開展了棉花、水稻、小麥、玉米和大豆等品種的轉基因研究,取得了一系列研究成果,并在轉基因藥物、轉基因作物、農作物基因圖譜與新品種等方面具有相對比較優勢。但目前我國只有抗蟲面、矮牽牛花、抗病毒甜椒、抗病毒和延熟番茄等少數品種進入了商業化生產階段。據國外一家研究機構發表的報告,1999年中國種植了30萬公頃轉基因作物,較1998年增長了2倍,是全球增長最快的國家,主要品種是棉花。該報告表示,目前中國轉基因農產品的播種面積僅次于美國、加拿大和阿根廷,居全球第四位。另外,我國在轉基因產品檢測技術方面的研究也取得了重大突破。據報道,國家出人境檢驗檢疫局日前利用改進的PLR結合核酸雜交技術,從一批進口大豆中成功檢測出了轉基因成分。此外,廣東、江蘇等省的出人境檢驗檢疫局也具備了對轉基因產品的檢測能力。
三、各主要國家對轉基因食品的立場
在世貿組織的現有多邊貿易協議中,與轉基因食品國際貿易有關的協議有二,即《衛生與植物檢哭刻昔施協議》(SPS)和《技術貿易壁壘協議》(TBT)。前者規定:各成員國為保護境內人類和動物的生命或健康,可以采取必要的檢疫措施,并允許各成員國在認定某種商品進入本國市場缺乏充分的科學依據時,自行制定本國的規則并建立相應的貿易壁壘。后者規定:技術性貿易壁壘的實施必須有合理的目的,而且實施的成本必須與目標相稱。具體到轉基因食品,由于各種觀點的科學依據不足,人們的認識不同,現有多邊貿易協議的規定過于模糊,解釋空間過大,對轉基因食品缺乏約束力。
由于對轉基因食品的安全性存在疑慮,世貿組織有關協議的規定不甚嚴密,以及出于各自的利益考慮,世界各主要農產品貿易國都對轉基因食品的國際貿易采取了不同立場,使得轉基因食品的國際貿易爭端不可避免。以下為各主要國家對轉基因食品的立場:(1)美國:在生產、流通中不給予任何限制;不人為劃分消費食品是否屬于轉基因種類;基因改造作物毋須用標簽注明;反對在國際貿易中對轉基因食品施加貿易壁壘。(2)歐盟:對轉基因技術在食品中的應用持謹慎態度;要求在其市場上銷售的轉基因產品加貼標簽,提醒消費者可能存在風險;強調世貿組織成員國應有權采取預防性措施,主張制訂有關生物標簽的多邊規則。(3)英國:支持發展生物科技,但在沒有證據顯示基因食品是否有害的情況下,對轉基因食品持謹慎態度;大型連鎖超市和餐廳不得出售經基因改造的玉米、大豆等食物,多數地方禁止學校和老人院的餐廳使用轉基因食品;自1999年9月起,飲食行業必須在菜單上標明食品里轉基因成分,否則罰款5000英鎊。(4)俄羅斯:不明令禁止轉基因食品上市銷售,但對2000年7月1日前上市的轉基因食品有在包裝上做出提醒性標記的要求;從2000年7月1日起,沒有做出提醒性標記的轉基因食品將禁止上市。(5)日本:持較為中立的立場,一方面對轉基因食品有進口需求,另一方面對其安全性又有所顧慮;規定采用基因技術獲得的農作物及食品不能作為綠色食品;2000年4月公布30種轉基因食品目錄,對目錄中列明的品種需要加注標簽。
據上可知,對轉基因食品所持的不同觀點和立場,將直接決定一國或地區對此所采取的不同的政策。歸納起來,大致可分為三類:
一是以美國為代表的,在轉基因技術開發領域一直處于國際前列的國家,極力主張對轉基因食品采取寬松的管理。美國作為轉基因產品商業化生產的積極倡導者,認為轉基因生物及其產品與非轉基因生物及其產品沒有實質的區別,轉基因食品是一種科技創新,是用現代科技去加快自然選擇的過程,只要轉基因食品通過新成分、過敏原、營養成分和毒性等常規檢驗,就可以上市。
二是歐盟內部大多數國家奉行較為嚴厲的管理制度?;镜恼J識是,在轉基因食品(作物)擁有眾多優越性,如遺傳性穩定,有利于保護環境,加快光合作用,提高作物抗病害、抗鹽堿、抗干旱的能力,增強作物產量等等的前提下,其不安全因素仍然存在,至少存在著潛在的、不清晰的危害性,而對此則需科學技術尤其是生物技術的發展來加以進一步的證明,除非有技術的證據支持,并足以表明轉基因食品的安全性,否則將不改先前的嚴厲的管理措施。
三是相對于美國和歐盟,其他國家包括中國對轉基因技術的研究特別是應用性開發較晚,相應的管理法規和措施尚在逐步建立和完善之中。這些國家從本國國家利益出發,權衡轉基因食品(作物)的利弊,往往采取較為溫和的政策和措施?;镜挠^點是,轉基因食品(作物)是未來農產品發展的必然方向,雖然目前尚存在一些較模糊的、不確定的、不安全的因素,但只要深人研究,趨利避害,就一定能在避免轉基因食品的危害的基礎上,進一步推動轉基因食品(作物)的發展,同時又滿足本國及世界經濟未來發展對糧食產量的進一步要求。
四、我國的相關對策分析
各國在轉基因食品國際貿易問題上存在著巨大的經濟利益之爭。各國經濟發展程度的不一致,轉基因技術水平的差異,以及產業規模的不同,更加劇了各國在這一問題上的分歧。市場決定觀念,歐盟及其他國家對轉基因食品的抵制,究其實質,則是對美國在這一領域壟斷優勢的抵制,主要目的是為了保護其經濟利益。鑒于轉基因食品安全性問題的長期影響,世貿組織各成員國在短期內不可能在科學的基礎上達成共識,因此難以形成統一的國際標準,各成員國只能自行制定相應的貿易標準和政策。
我國作為一個傳統的農產品出口大國,應盡早制定有關轉基因食品進出口貿易的政策法規。筆者以為,可從以下幾方面作出相應的對策安排:
1.對轉基因食品的政策選擇。從我國的實際情況出發,在對轉基因食品的政策選擇上有三種模式或路徑:一是將轉基因食品視同其他普通農產品,對其進口不加管制;二是采取“二嗯英”模式,禁止轉基因食品的進口;三是在嚴格檢疫的前提下,有條件地允許轉基因食品進口,并在進口的轉基因食品包裝上作出提醒性標記,讓消費者判斷是否購買。不難發現,第一種選擇可能對我國農業帶來巨大沖擊,導致某些農產品市場最終被幾個擁有轉基因技術的跨國公司所壟斷,以致對經濟安全造成影響;第二種選擇可能會給我國對外談判、履行承諾帶來很大壓力,并可能引發貿易戰;第三種選擇符合國際慣例,可能是對我國較為有利、可進可退的政策選擇。此外,對進口農產品進行嚴格的轉基因檢疫,張貼提醒性標記,會加大進口商的成本(約增加10%左右),消費者也可能會持慎重態度,從而削弱進口農產品的競爭力,以維護我國廣大農民的切身利益。