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關(guān)鍵詞:琥珀蠶;繭殼;絲蛋白;硫氰酸鋰
中圖分類號(hào):S886:TS143.2文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)號(hào):A文章編號(hào):1001-4942(2017)05-0124-05
Suitable Extraction Conditions for Yunnan Antheraea assama
Silk Protein using Aqueous Solution of Lithium Thiocyanate
Li Qiongyan, Liu Zenghu, Yang Weike, Zhong Jian
(Institute of Sericulture and Apiculture, Yunnan Academy of Agricultural Sciences, Mengzi 661101, China)
AbstractAntheraea assama is an important economic insect. Its silk shows excellent features, and has a good potential for development and utilization in the fields of textile, biological medicine, biological material and so on. This research used lithium thiocyanate solution to extract A. assama silk protein. The results showed that some A. assama silk protein could be extracted and the extraction efficiency increased with the increase of temperature. At the set maximum bath temperature of 60℃, the protein concentration was 10.257 mg/mL after dissolved for 12 hours and the extraction rate was 8.91%. When keeping the solution temperature of 60℃ and proceeding ultrasonic treatment (53 kHZ, 500 W) for 12 hours, the protein concentration reached 14.552 mg/mL and the extraction rate was 16.93%. SDS-PAGE gel electrophoresis detection results showed that there was no significant difference in the bands of silk protein extracted under different conditions, and there was no obvious degradation of silk protein. The extracted silk protein in both the concentration and quality could meet the needs of laboratory research.
KeywordsAntheraea assama; Cocoon;Silk protein;Lithium thiocyanate
蠶絲是一種天然蛋白纖維,屬多孔性物質(zhì),透氣性好、吸濕性極佳,被用于紡織業(yè)已有上千年,另外蠶絲具有無(wú)毒、無(wú)刺激及良好的生物相溶性,有益于人類及哺乳動(dòng)物細(xì)胞的附著和增殖,所以也被廣泛用于外科手術(shù)縫合、創(chuàng)口覆蓋材料、藥物控制釋放載體、組織工程學(xué)支架、皮膚修復(fù)材料、人造骨骼、韌帶修復(fù)材料等生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的研究[1-7]。與家蠶相比大蠶蛾科的非桑蠶通常在野外或半野外飼養(yǎng),其氨基酸的極性更高,生物活性更強(qiáng)[8-10]。大蠶蛾科的琥珀蠶(Antheraea assama)其絲以耐磨和富有金黃色光澤而聞名,與家蠶絲相比其具有更好的強(qiáng)伸力和吸濕性并具有優(yōu)良的生物學(xué)特性,在紡織、生物醫(yī)藥、生物材料等領(lǐng)域有較好的開(kāi)發(fā)利用潛力,經(jīng)濟(jì)價(jià)值較高。但由于琥珀蠶資源限制,目前琥珀蠶的研究相對(duì)滯后,對(duì)其蛋白的研究更是鮮有報(bào)道。
琥珀蠶絲蛋白是一種潛在的生物醫(yī)學(xué)材料。Kar等[11]用家蠶、琥珀蠶和印度柞蠶3種絲蛋白膜進(jìn)行人類成骨細(xì)胞MG-63的細(xì)胞附著性和生長(zhǎng)性試驗(yàn),結(jié)果表明非桑蠶絲蛋白膜的細(xì)胞相溶性模型可與標(biāo)準(zhǔn)模型媲美,琥珀蠶絲蛋白非常適合作為自然生物工程學(xué)的材料。研究表明,琥珀蠶絲和桑蠶絲的氨基酸組成相似,含有大量的甘氨酸、丙氨酸、絲氨酸等氨基酸[12]以及大量的精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸三肽,三肽能提高細(xì)胞的粘附力并促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)和擴(kuò)繁[1,13],可作為良好的組織工程學(xué)細(xì)胞培養(yǎng)基。另外琥珀蠶絲蛋白還具有很好的血液相容性,可用于構(gòu)建血液仿生支架的體系結(jié)構(gòu)[14]。與桑蠶相比,琥珀蠶絲蛋白在生物醫(yī)學(xué)的運(yùn)用上具有優(yōu)越性。
目前對(duì)絲蛋白的研究和利用大多是從絲腺提取物中獲得,如此很難進(jìn)行大規(guī)模的運(yùn)用,而直接將蠶繭溶解來(lái)獲得絲蛋白,不僅可以獲得大量的絲蛋白還避免了直接從蠶體中取絲腺的道德問(wèn)題。但絲蛋白高度結(jié)晶,選擇合適的溶劑及適宜的溶解條件來(lái)溶解繭殼獲得絲蛋白,對(duì)于絲蛋白的研究和利用有極大的意義。查閱文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn),提取繭殼蛋白主要采用尿素buffer和硫氰酸鋰(LiSCN)溶液[15,16],其中尿素buffer主要是提取絲膠蛋白,而LiSCN溶液可以提取絲素蛋白,同時(shí)也可溶出絲膠蛋白。另有研究分別利用沸騰的Ca(NO3)2和30、40℃的LiSCN溶液提取柞蠶的絲素蛋白,結(jié)果顯示40℃的LiSCN溶液溶解繭殼蛋白的效率較高[17]。因此,本研究利用LiSCN水溶液在不同條件下溶解琥珀蠶繭殼提取絲蛋白,以期獲得利用LiSCN溶液提取琥珀蠶繭殼絲蛋白的適宜條件,為琥珀蠶絲蛋白的研究以及生物材料制備提供基礎(chǔ)。
1材料與方法
1.1材料
選擇形狀為長(zhǎng)橢圓形呈黃褐色且大小適中的云南琥珀蠶蠶繭,剪成大約 1~2 mm2碎片備用。琥珀蠶繭殼由云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蠶桑蜜蜂研究所提供。
1.2不同溫度下溶解琥珀蠶繭殼
取0.5 g繭殼碎片,加入10 mol/L LiSCN水溶液10 mL,分別置于30、40、50、60℃的水浴環(huán)境中溶解繭殼。每隔1 h對(duì)溶解液進(jìn)行一次蛋白濃度測(cè)定,12 h后取出未溶解的繭殼用蒸餾水多次沖洗,并在100℃下干燥5 h,稱重,計(jì)算繭殼的溶解率。繭殼的溶解率計(jì)算公式如下:
溶解率(%)=原重-未溶解的質(zhì)量原重×100。
1.3超聲及振蕩條件下溶解琥珀蠶繭殼
取0.5 g繭殼碎片,加入10 mol/L LiSCN水溶液10 mL,在保持60℃的條件下分別進(jìn)行渦旋振蕩和超聲處理(53 kHZ,500 W),同樣每1 h測(cè)一次溶解液的蛋白濃度,并在12 h后取出未溶解的繭殼用蒸餾水多次沖洗后,在100℃下干燥5 h,稱重,計(jì)算繭殼的溶解率。
1.4蛋白濃度測(cè)定
利用BCA蛋白定量試劑盒(Biomiga,中國(guó))對(duì)提取的絲蛋白進(jìn)行定量。首先按照試劑盒說(shuō)明書(shū)將reagent A與reagent B按照1∶50混合,配置成BCA工作液;用水將蛋白標(biāo)準(zhǔn)品稀釋成0.5 mg/mL;將工作液、蛋白標(biāo)樣及水按照要求加樣到96孔酶標(biāo)板中,混勻,37℃放置30 min,冷卻至室溫,在酶標(biāo)儀(Biotek ELX808IU-PC)中測(cè)定562 nm吸光值,測(cè)得吸光值繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。將20 μL、10倍稀釋的蛋白樣品加到酶標(biāo)板的樣品孔中,再加入BCA工作液200 μL定量后根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線算得樣品蛋白濃度。
1.5SDS-PAGE電泳檢測(cè)
應(yīng)用SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)方法檢測(cè)絲蛋白的提取情況及分子量范圍。配制5%濃縮膠和10%分離膠,加樣10 μL,對(duì)最終提取的絲蛋白進(jìn)行電泳分離。電泳時(shí)濃縮膠電流為10 mA,進(jìn)入分離膠后為20 mA,當(dāng)溴酚藍(lán)指示劑距分離膠底部1 cm處時(shí),電泳結(jié)束。電泳結(jié)束后固定2 h(固定液:40 mL無(wú)水乙醇,10 mL醋酸,50 mL H2O,混勻);之后分別用70%無(wú)水乙醇漂洗2次,水洗1次,20 min/次;0.02% Na2S2O3敏化1 min;水洗3次,20 s/次;硝酸銀染色(染色液:0.4 g AgNO3,20 μL甲醛,100 mL H2O),顯色(顯色液:2 g Na2CO3,10 μL 0.5% Na2S2O3,50 μL甲醛,100 mL H2O);終止(終止液:1 g甘氨酸,100 mL水)。染色結(jié)束后用透射高精度掃描儀對(duì)電泳凝膠進(jìn)行掃描。
1.6數(shù)據(jù)處理
采用Microsoft Excel 2010 和SPSS 17.0 軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計(jì)分析。
2結(jié)果與分析
2.1溫度對(duì)絲蛋白提取的影響
如圖1所示,30℃條件下提取的蛋白濃度最低,第2~6 h內(nèi)蛋白濃度變化幅度較小,從第7 h開(kāi)始逐漸升高,到第12 h濃度達(dá)到6.100 mg/mL;40℃條件下蛋白濃度在12 h內(nèi)變化不明顯,前8 h內(nèi)和50℃條件下提取的蛋白濃度差異較小,從第8 h開(kāi)始50℃條件下提取的蛋白濃度較40℃高;60℃條件下提取的蛋白濃度在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)都為4個(gè)溫度條件下最高,且每小時(shí)濃度增大的幅度也較其它3個(gè)溫度大,溶解第1 h 蛋白濃度為4.122 mg/mL,已達(dá)到30℃條件下第6 h時(shí)的濃度,第12 h濃度達(dá)到10.257 mg/mL。表明相同時(shí)間內(nèi)隨著溶解溫度升高提取的蛋白濃度增大,其中60℃條件下提取的蛋白濃度最高。
2.2SDS-PAGE凝膠電泳檢測(cè)
SDS-PAGE檢測(cè)溶解12 h后提取的絲蛋白,結(jié)果如圖2所示。琥珀蠶絲蛋白連續(xù)分布在整條泳道中,并主要集中在30 kD以上,4個(gè)泳道中都能看到在30 kD附近有一條明顯的條帶,95 kD以上的蛋白更加集中并有大量蛋白滯留在膠孔中。為更加清楚地看到分子量較大的絲蛋白的分布,降低分離膠濃度并延長(zhǎng)跑膠時(shí)間,圖2B結(jié)果顯示,絲蛋白連續(xù)分布在泳道中,主要集中在95 kD以上,且在230 kD處有一條明顯的條帶。從圖2可見(jiàn)4組試驗(yàn)提取的絲蛋白其蛋白條帶無(wú)明顯差異,表明隨著溫度升高,得到的琥珀蠶絲蛋白并沒(méi)有發(fā)生明顯降解。因此,本試驗(yàn)所設(shè)置的4個(gè)試驗(yàn)條件提取琥珀蠶絲蛋白都是可行的。
2.3超聲及振蕩處理對(duì)提取絲蛋白的影響
通過(guò)以上試驗(yàn)可知,不同溫度提取的絲蛋白濃度存在差異, 60℃條件下提取的絲蛋白濃度最高,且通過(guò)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)在60℃高溫條件下提取的絲蛋白并無(wú)明顯降解。為進(jìn)一步提高絲蛋白的提取效率,本試驗(yàn)在60℃且保持相同溶劑濃度、浴比條件下分別增加53 kHZ(500 W)超聲及振蕩處理,每隔1 h測(cè)定溶解液的蛋白濃度。結(jié)果(圖3)顯示,增加超聲和振蕩處理后,蛋白濃度都有一定程度的增大,且超聲處理的效果更加明顯。增加超聲處理后第1 h的濃度為6.081 mg/mL,已超過(guò)無(wú)超聲處理第3 h的濃度;第8 h的濃度為10.536 mg/mL,已超過(guò)無(wú)超聲處理組第12 h時(shí)的濃度;第12 h的濃度達(dá)到14.552 mg/mL,是o超聲處理組的1.42倍。說(shuō)明,增加超聲處理能夠提高蛋白的溶解效率。另外,對(duì)增加超聲和振蕩處理后提取的絲蛋白進(jìn)行電泳檢測(cè),結(jié)果(圖4)顯示,其電泳條帶沒(méi)有明顯變化,這表明隨著溶解條件的加劇,得到的絲蛋白濃度增大但無(wú)明顯降解,說(shuō)明可通過(guò)增加超聲處理來(lái)提高絲蛋白的提取效率。
2.4琥珀Q繭殼的溶解率
不同處理?xiàng)l件下溶解12 h后繭殼的溶解率結(jié)果(表1)顯示,在30~60℃溫度條件下溶解12 h繭殼的溶解率分別達(dá)到5.29%、6.82%、7.71%、8.91%,且隨著溶解溫度的升高溶解率增大,但差異未達(dá)到顯著水平。在60℃條件下增加振蕩處理12 h后其溶解率提高到11.72%,但與60℃溫度處理差異不顯著。在60℃條件下增加超聲處理12 h之后其溶解率提高到16.93%,顯著高于其它處理。溫度升高有利于琥珀繭殼的溶解,超聲和振蕩能提高溶劑在繭殼中的擴(kuò)散,增加溶劑與繭殼的接觸從而增加繭殼的溶解效率,且超聲處理下效果更好。
討論與結(jié)論
本研究結(jié)果表明,LiSCN水溶液能溶解部分琥珀蠶絲蛋白,通過(guò)提高溫度及增加超聲能提高溶液在繭殼中的擴(kuò)散速度,從而提高繭殼的溶解度。
大蠶蛾科野蠶的絲素蛋白僅由絲素重鏈fib-H及多聚丙氨酸形成二聚體,而不含絲素輕鏈(fib-L)及P25蛋白[18]。Adarsh等[19]研究結(jié)果顯示,琥珀蠶fib-H基因編碼230 kD的絲素蛋白。絲素重鏈蛋白是琥珀蠶絲蛋白中最重要的蛋白質(zhì),SDS-PAGE凝膠電泳檢測(cè)顯示,230 kD附近有一條明顯的條帶,推測(cè)為琥珀蠶絲素重鏈(Aafib-H)蛋白,說(shuō)明本試驗(yàn)方法可以提取到琥珀蠶絲素重鏈蛋白。
提取時(shí)間較長(zhǎng),絲蛋白之間的次級(jí)鍵如氫鍵、疏水鍵、二硫鍵等容易被破壞,所以在提取過(guò)程溫度過(guò)高、條件太激烈時(shí)都有可能引起絲蛋白降解。從圖2和圖4中可以看出,在不同條件下提取的絲蛋白其蛋白條帶差異不明顯,說(shuō)明在本試驗(yàn)設(shè)置的條件下絲蛋白間的共價(jià)鍵、次級(jí)鍵沒(méi)有被明顯破環(huán),蛋白沒(méi)有明顯降解。
綜上所述,LiSCN水溶液提取琥珀蠶絲蛋白的方法可行,且在60℃、53 kHZ(500 W)超聲條件下溶解效率最高,溶解12 h后絲蛋白濃度達(dá)到14.552 mg/mL,溶解效率為16.93%,提取的絲蛋白質(zhì)量可滿足普通實(shí)驗(yàn)需要。
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一音韻美
詩(shī)歌本來(lái)就是是一種具有音韻節(jié)奏的語(yǔ)言文字,我國(guó)的古代詩(shī)歌,也素來(lái)講究音韻之美。優(yōu)秀的詩(shī)歌作品,讀起來(lái)抑揚(yáng)頓挫,聽(tīng)起來(lái)韻味無(wú)窮,就是因?yàn)樗邆淞艘繇嵵?。?gòu)成音韻美的方法豐富多彩,如句式(節(jié)奏)、平仄、押韻、重疊等。自先秦至漢魏六朝,古詩(shī)的節(jié)奏句式有它的一般特點(diǎn),如在四言詩(shī)中,一般是一句兩頓的二二句式,如初中課文曹操的《觀滄?!分械脑?shī)句:“樹(shù)木—叢生,百草—豐茂。秋風(fēng)—蕭瑟,洪波—涌起。”在五言詩(shī)中,一般是一句三頓的二二一或二一二句式,如陶淵明《飲酒》中的詩(shī)句:“采菊—東籬—下,悠然—見(jiàn)—南山。山氣—日夕—佳,飛鳥(niǎo)—相與—還。”等等,這種句式和節(jié)奏就形成了一種抑揚(yáng)頓挫的音韻美[3]。而在近體詩(shī)中,由于漢字四聲的發(fā)現(xiàn),平仄交錯(cuò)產(chǎn)生了一種特別悅耳的音調(diào)效果,所以近體詩(shī)又稱格律詩(shī)。五言或七言格律詩(shī)的句式與古體詩(shī)節(jié)奏句式基本相同,最大的區(qū)別是詞語(yǔ)平仄交錯(cuò)。如龔自珍《己亥雜詩(shī)》中“我勸天公重抖擻,不拘一格降人才”的平仄是:仄仄平平平仄仄,平平仄仄仄平平。這樣的平仄既要對(duì)仗,押韻也有嚴(yán)格的限制,形成一種獨(dú)特的音韻美。古代詩(shī)歌基本押韻,如漢樂(lè)府民歌《木蘭詩(shī)》,文中押韻之處極多,使得整首詩(shī)有一種回環(huán)往復(fù)的音韻美。除詩(shī)之外,詞作為詩(shī)歌中的一個(gè)重要分支,音韻美自然不在話下,李清照的《醉花陰》詞首“尋尋覓覓,冷冷清清,凄凄慘慘戚戚”,就鮮明地體現(xiàn)了疊字形成的音韻美。
二意境美
意境是中國(guó)古典美學(xué)的重要范疇。對(duì)于意境的研究與探討一直以來(lái)都是眾說(shuō)紛紜,童慶炳先生在《文藝?yán)碚摻坛獭芬粫?shū)中對(duì)其作了如下界定:“意境是指抒情作品中呈現(xiàn)的那種情景交融、虛實(shí)相生的形象系統(tǒng)及其所誘發(fā)和開(kāi)拓的審美想象空間。”可見(jiàn)文學(xué)意境具有情景交融、虛實(shí)相生、韻味無(wú)窮的特點(diǎn)[4]。根據(jù)這些特點(diǎn),在中學(xué)語(yǔ)文教材的古代詩(shī)歌中也能找到詩(shī)歌獨(dú)特的意境美。具有代表性的如高中語(yǔ)文教材中柳永的詞,柳永作為婉約派的代表作家,其詞風(fēng)纏綿悱惻,哀婉凄美,已經(jīng)達(dá)到意境創(chuàng)造的最高境界,具有很高的美學(xué)價(jià)值。如《雨霖鈴》創(chuàng)造的纏綿悱惻,哀婉凄美的意境;陶淵明的田園詩(shī)《飲酒》中“采菊東籬下,悠然見(jiàn)南山”的閑適淡泊的意境;蘇軾《明月幾時(shí)有》“起舞弄清影”般婉轉(zhuǎn)優(yōu)美的意境;李清照《醉花陰》中“簾卷西風(fēng),人比黃花瘦”的婉約凄清的意境;王維《使至塞上》中“大漠孤煙直,長(zhǎng)河落日?qǐng)A”的雄奇瑰麗的壯美意境等等。在這些詩(shī)歌的意境營(yíng)造中,不能忽略詩(shī)歌的意象,意象是構(gòu)成詩(shī)歌意境的一個(gè)必不可少的重要元素。詩(shī)歌中常用一種反復(fù)出現(xiàn)的意象來(lái)表達(dá)特定的情趣和意味,例如,古代詩(shī)歌中的月亮是思鄉(xiāng)的代名詞。詩(shī)中的月亮不再是純客觀的物象,而是浸染了詩(shī)人感情的意象了,詩(shī)人往往對(duì)月思親思友,借描述明月寄寓離愁別緒,思鄉(xiāng)之愁,如蘇軾的《明月幾時(shí)有》;又如草木的意象,詩(shī)人以草木繁盛反襯荒涼,以抒發(fā)盛衰興亡的感慨,姜夔的《揚(yáng)州慢》中有“過(guò)春風(fēng)十里,盡薺麥青青”的詞句,便是用野草的繁盛反襯如今揚(yáng)州的荒涼。因?yàn)樵?shī)人選取特定的意象,創(chuàng)設(shè)了恰如其分的意境,在某種程度上提升了詩(shī)歌的審美價(jià)值,因此給讀者以美的享受[5]。
三形象美
文學(xué)作品中的形象是審美主體對(duì)客體的直觀感受。它主要是指人物形象,其次也包括社會(huì)的、自然的環(huán)境和景物。中學(xué)語(yǔ)文古代詩(shī)歌中的形象是豐富多彩的。詩(shī)歌中的形象美主要包括人物美和景物美。人物美主要表現(xiàn)在詩(shī)歌中所塑造的人物形象,這些形象既有詩(shī)人自指,也有詩(shī)人的想象創(chuàng)造。中學(xué)語(yǔ)文教材中常見(jiàn)的詩(shī)歌人物形象各具特色,如李白《蜀道難》中刻畫(huà)了一個(gè)不慕權(quán)貴、豪放灑脫、傲岸不羈的詩(shī)人自我形象;杜甫在《茅屋為秋風(fēng)所破歌》中展現(xiàn)出一個(gè)懷抱著“安得廣廈千萬(wàn)間,大庇天下寒士俱歡顏,風(fēng)雨不動(dòng)安如山”的心憂天下、憂國(guó)憂民的詩(shī)人形象;陶淵明在《歸園田居》“采菊東籬下,悠然見(jiàn)南山”的隱居生活中,刻畫(huà)了一個(gè)閑適悠然“衣沾不足惜,但使愿無(wú)違”的隱者形象;柳永的《雨霖鈴》寫(xiě)與所愛(ài)女子離別時(shí)的無(wú)限憂傷和別后相思的綿綿情意,塑造了一個(gè)愛(ài)恨情長(zhǎng)的藝術(shù)形象;《孔雀東南飛》中塑造了勤勞善良、美麗聰明的劉蘭芝和癡情軟弱的焦仲卿;《詩(shī)經(jīng)•氓》中可以看到一個(gè)堅(jiān)強(qiáng)勇敢的女子形象;《離騷》中有不慕權(quán)貴、高潔傲岸、憂國(guó)憂民的詩(shī)人形象等等。古代詩(shī)歌中的人物形象美主要體現(xiàn)在人物性格的完整和偉大。通過(guò)對(duì)這些人物形象的鑒賞,學(xué)生可以感受到不同人物形象的美,從而受到美的感染,有意識(shí)地發(fā)展美的思想和品德,形成美的個(gè)性。除了人物形象美,古代詩(shī)歌中所描寫(xiě)的景與物也是美的。岑參在《白雪歌送武判官歸京》中描繪了一幅“北風(fēng)卷地白草折,胡天八月即飛雪。忽如一夜春風(fēng)來(lái),千數(shù)萬(wàn)樹(shù)梨花開(kāi)”的壯美邊地雪景;白居易的《錢(qián)塘湖春行》描繪了一幅早春的西湖勝景,透出清新氣息,生意盎然;辛棄疾的《西江月•夜行黃沙道中》描繪的是寧?kù)o美好的農(nóng)村夏夜景色;曹操《觀滄?!分姓宫F(xiàn)的是“秋風(fēng)蕭瑟,洪波涌起”的波濤浩淼的壯闊海景;李白的《渡荊門(mén)送別》中“山隨平野盡,江入大荒流。”的詩(shī)句,形象地描繪了船出三峽、渡過(guò)荊門(mén)山后長(zhǎng)江兩岸的特有景色。這些景物美可以觸動(dòng)學(xué)生的審美體驗(yàn),形成一種美感,獲得美的愉悅。中學(xué)語(yǔ)文古代詩(shī)歌中的人物形象和景物形象都蘊(yùn)含著詩(shī)人們的情感,形象是情感的外衣,體會(huì)詩(shī)歌中的形象美能更好地把握詩(shī)歌中的情感美。
四情感美
“詩(shī)緣情”是我國(guó)古典美學(xué)關(guān)于詩(shī)歌審美本質(zhì)的一種理論概括,強(qiáng)調(diào)詩(shī)是作者感情的抒發(fā),古代詩(shī)歌的情感是詩(shī)歌的靈魂,情感美是詩(shī)美的內(nèi)容本質(zhì)。在優(yōu)秀的古代詩(shī)歌中,積極、蓬勃、昂揚(yáng)的情感和感情基調(diào),激勵(lì)著學(xué)生永遠(yuǎn)追求真、善、美,培養(yǎng)完整的、高尚的人格。
關(guān)鍵詞:誦讀誦讀教學(xué)法
“誦讀”,也許是我們并不陌生的詞匯。那么“誦”究竟是怎么讀呢?如果追溯到許慎《說(shuō)文解字》中,是這樣解釋的:“誦,諷也?!倍斡癫迷谧⒔庵羞@樣區(qū)別“誦”和“諷”:“倍文曰諷,以聲節(jié)之曰誦。倍同背,謂不開(kāi)讀也。誦則非直倍文,又為吟詠以聲節(jié)之?!倍^吟詠,實(shí)際上是一種感情的抒發(fā)。《詩(shī).周南.關(guān)雎序》:“吟詠性情,以風(fēng)其上?!笨追f達(dá)疏:“動(dòng)言曰吟,長(zhǎng)言曰詠。作詩(shī)必歌故言吟詠情性也?!本C上可以看出,“誦”應(yīng)是一種寓情于聲,以聲傳情的表達(dá)形式。
在當(dāng)今講求高節(jié)奏、高效率的語(yǔ)文課堂上,在不少老師眼里“誦”似乎就等同于背了,而對(duì)于它本應(yīng)具有的傳情效果往往未給與足夠重視。蘇霍姆林斯基說(shuō):“只有當(dāng)情感的血液在知識(shí)這個(gè)活的機(jī)體中歡騰地流動(dòng)時(shí),知識(shí)才會(huì)成為一種信仰,成為學(xué)生主觀世界的一部分。”語(yǔ)文學(xué)科本來(lái)就具有鮮明的審美性。讓學(xué)生在文本中品味欣賞美,受到熏陶,培養(yǎng)良好的情感品質(zhì),都是語(yǔ)文教學(xué)的目標(biāo)。被選入九義教材的這些古詩(shī)詞,正是一些歷代傳誦、長(zhǎng)盛不衰的精品之作。語(yǔ)文新課程標(biāo)準(zhǔn)在“閱讀”部分的要求中明確指出:“誦讀優(yōu)秀詩(shī)文,注意在誦讀過(guò)程中體驗(yàn)情感,領(lǐng)悟內(nèi)容?!币部梢钥闯觥罢b讀”和“情感”是密不可分的。
在古詩(shī)詞教學(xué)中,我們可以把以誦讀為主的教學(xué)方式稱為誦讀教學(xué)法。它并不是采用單一的朗讀訓(xùn)練來(lái)達(dá)到背誦的目的,而是通過(guò)誦讀來(lái)帶動(dòng)學(xué)生對(duì)詩(shī)詞意象的認(rèn)識(shí)、對(duì)思想感情的領(lǐng)悟。教師講解詩(shī)詞內(nèi)容同時(shí)啟發(fā)學(xué)生誦讀,二者相互促進(jìn):一方面學(xué)生通過(guò)感知頭腦中的詩(shī)詞意境來(lái)思考如何表達(dá);另一方面學(xué)生在自己誦讀的嘗試過(guò)程中不斷加深對(duì)詩(shī)詞內(nèi)涵的理解。古人常言:“熟讀唐詩(shī)三百首,不會(huì)作詩(shī)也會(huì)吟”?!皶?shū)讀百遍,其義自見(jiàn)?!闭f(shuō)的就是這樣的道理。
一般來(lái)講,古詩(shī)詞誦讀教學(xué)應(yīng)包括整體把握、細(xì)節(jié)品味、完整誦讀、課后鞏固四個(gè)階段。
一、整體把握
這一環(huán)節(jié)是誦讀教學(xué)的常規(guī)工作,應(yīng)在老師指導(dǎo)下主要由學(xué)生自主完成。涉及內(nèi)容應(yīng)包括以下方面:
(1)詩(shī)詞作者、相關(guān)文學(xué)常識(shí)、注解以及字詞讀音。了解寫(xiě)作背景,對(duì)于一首詩(shī)詞感情基調(diào)的確定非常重要。如教材中很多詩(shī)人的作品都創(chuàng)作于自己遭貶謫之后,情感上往往帶有憤懣、抑郁之意,這些在誦讀中應(yīng)該有所體現(xiàn)。一些常見(jiàn)字詞的讀音辨析也很不容忽視。如“沉舟側(cè)畔千帆過(guò)”中的“沉(chén)和“忽復(fù)乘舟夢(mèng)日邊”中的“乘(chéng)”。如果讀音上混淆了,對(duì)詩(shī)句意義理解也可能產(chǎn)生偏差。一些古音字或特定讀音的字詞也應(yīng)重視,如“浩蕩離愁白日斜(xiá)”“將(qiāng)進(jìn)酒”“阿(ē)房(páng)宮”等,以免鬧笑話。
(2)根據(jù)古詩(shī)詞一般停頓規(guī)律進(jìn)行斷句。所謂古詩(shī)詞一般停頓規(guī)律指:四言詩(shī),一般采用“2/2”停頓;五言詩(shī),一般采用“2/3”停頓;七言詩(shī),一般采用“2/2/3”停頓。對(duì)于個(gè)別長(zhǎng)句,如《茅屋為秋風(fēng)所破歌》中“南村群童欺我老無(wú)力”“吾廬獨(dú)破受凍死亦足”可以理解成“四言+五言”的停頓形式。這些規(guī)律其實(shí)有一個(gè)原則,即不出現(xiàn)停頓點(diǎn)后半部分短于前半部分的情況,否則讀起來(lái)會(huì)很別扭。值得注意的是,這種古詩(shī)詞的常規(guī)停頓切勿刻意、明顯地去體現(xiàn),否則反而對(duì)詩(shī)詞本身的意境和流暢性構(gòu)成嚴(yán)重?fù)p害。應(yīng)做到“聲斷情不斷”。
(3)找出詩(shī)詞韻腳,了解平仄規(guī)律。押韻、平仄等規(guī)則都是古人為了讓詩(shī)詞讀起來(lái)朗朗上口而制定。押韻不僅便於吟誦和記憶,更使作品具有節(jié)奏、聲調(diào)諧和之美。在律詩(shī)、絕句中一般只有一韻,找出韻腳比較容易。而樂(lè)府詩(shī)或宋詞中,則可能出現(xiàn)兩韻。轉(zhuǎn)韻往往意味著詩(shī)詞層次、情感上的變化。把握韻腳變化對(duì)誦讀很有意義,這在后文還將涉及到。同樣,詩(shī)詞中平仄這兩類聲調(diào)有規(guī)律地交錯(cuò)出現(xiàn),就能使聲調(diào)變化多樣,不致單調(diào),念起來(lái)可以產(chǎn)生音律美。平,包括平聲;仄,包括上、去、入三聲,在現(xiàn)代漢語(yǔ)里,平,包括陰平、陽(yáng)平;仄,包括上聲、去聲。對(duì)于學(xué)有余力的同學(xué),老師可以指導(dǎo)他們標(biāo)出近體詩(shī)的平仄,逐漸認(rèn)識(shí)了解其中一些規(guī)律,這樣的探索過(guò)程本身就不失為一種樂(lè)趣。
二、細(xì)節(jié)品味
同學(xué)們?cè)谕瓿闪松鲜鲆幌盗泄ぷ骱?,將在老師的帶領(lǐng)下,對(duì)詩(shī)詞逐句進(jìn)行細(xì)節(jié)的品味。這是誦讀教學(xué)最重要的一個(gè)環(huán)節(jié)。教師應(yīng)多采用啟發(fā)式教學(xué)法,精心設(shè)計(jì)問(wèn)題,不斷引導(dǎo)學(xué)生走進(jìn)詩(shī)詞中的情境,讓他們自己嘗試用最恰當(dāng)?shù)恼b讀方式去表達(dá)情感。在這個(gè)環(huán)節(jié)中應(yīng)注意以下幾方面:
(1)創(chuàng)設(shè)情境讓學(xué)生真正走進(jìn)詩(shī)詞。喚醒學(xué)生主體意識(shí)是教育界經(jīng)常的話題。在古詩(shī)詞誦讀教學(xué)中,首先要讓學(xué)生產(chǎn)生“我”即詩(shī)人、詩(shī)人即“我”的感覺(jué)。如學(xué)習(xí)杜甫《茅屋為秋風(fēng)所破歌》一課時(shí),教室窗外正好在刮風(fēng)。這不正是一個(gè)創(chuàng)設(shè)情境的契機(jī)嗎?在預(yù)習(xí)之后,我便請(qǐng)一位同學(xué)站到窗邊感受了一會(huì)兒,然后讓他以第一人稱來(lái)介紹杜甫當(dāng)時(shí)的情況。他想了想,這樣說(shuō)到:“你們眼前的我,是一個(gè)衣衫破爛,瘦弱蒼白的老頭兒。誰(shuí)能想到,這就是曾經(jīng)聞名全國(guó)的詩(shī)人杜甫?。∥液貌蝗菀讖陌彩分畞y的烽煙中茍且偷生,找到個(gè)落腳的地方,本以為可以就此安度晚年了,沒(méi)想到這一陣可惡的狂風(fēng)……”他越說(shuō)越動(dòng)情,真的像是“進(jìn)入角色”了———這不正是品味詩(shī)句情感的最好的開(kāi)始嗎?良好的情境,需要老師敏銳的觀察,精心的設(shè)計(jì)。
(2)讓學(xué)生自己悟出“重讀點(diǎn)”所謂“重讀”,即在朗誦中加重語(yǔ)氣,增大音量,以強(qiáng)調(diào)所讀內(nèi)容。詩(shī)句中哪些詞語(yǔ)需強(qiáng)調(diào)?為什么強(qiáng)調(diào)?傳統(tǒng)的做法是老師直接把自己認(rèn)為需重讀之處提出來(lái),讓學(xué)生們照葫蘆畫(huà)瓢———毫無(wú)疑問(wèn),這是對(duì)學(xué)生主體意識(shí)和創(chuàng)造力極大的抹殺。那么,如何讓學(xué)生自己“悟”呢?這就需要老師設(shè)計(jì)啟發(fā)式的問(wèn)題了。如李白《行路難(其一)》中第一句“金樽清酒斗十千,玉盤(pán)珍饈直萬(wàn)錢(qián)”,我們可以設(shè)計(jì)幾個(gè)層次的問(wèn)題:a.這一句表現(xiàn)的是什么場(chǎng)面?———宴會(huì),b.這是一場(chǎng)怎么樣的宴會(huì)?———豪華、奢侈,c.如何能看出這場(chǎng)宴會(huì)的奢華呢?———“金”“玉”的容器,價(jià)值“十千”“萬(wàn)錢(qián)”的酒菜。這三個(gè)問(wèn)題,思路清晰,層次步步推進(jìn),也絕無(wú)“為難”學(xué)生和牽強(qiáng)附會(huì)之感。到了第三個(gè)問(wèn)題,學(xué)生便能頓悟:哦,原來(lái)“金”“玉”“十”“萬(wàn)”一重讀,就能強(qiáng)調(diào)這場(chǎng)盛宴的豪華了。
(3)找出詩(shī)詞中情感變化的“關(guān)鍵點(diǎn)”。前面已提到,在一些樂(lè)府詩(shī)和詞中,常常都有轉(zhuǎn)韻現(xiàn)象。同樣以李白《行路難(其一)》為例。這是一首情感變化跌宕起伏的詩(shī)作,讓學(xué)生們找出韻腳也并不難。我們發(fā)現(xiàn),前面四句一直是“ɑn”韻,到了五、六句忽轉(zhuǎn)為“ɑi”韻,這里一定是我們需要關(guān)注的“關(guān)鍵點(diǎn)”了。前四句,詩(shī)人異常壓抑,面對(duì)美食佳釀毫無(wú)食欲,內(nèi)心急切不安又無(wú)所適從,進(jìn)退無(wú)路卻又想繼續(xù)求索———從整體上看,前面部分都是沉抑的,而在反復(fù)的“行路難”詠嘆之后,一句“今安在?”則像是對(duì)前面“冰塞川”“雪滿山”痛苦迷惘的宣泄,詩(shī)人已不是簡(jiǎn)單發(fā)問(wèn)“我在哪里?”而更像是控訴:“我能往哪里走?”這樣最后一句的豪言壯語(yǔ)便呼之欲出了。在誦讀教學(xué)中,這樣的“點(diǎn)”很重要。學(xué)生一旦用轉(zhuǎn)韻的規(guī)律找到這樣的“點(diǎn)”,便能擁有一份成就感,對(duì)詩(shī)詞的投入便又自然多了一分,前后部分的誦讀自然也能更有意識(shí)地表現(xiàn)出感情的變化了。這樣的“獎(jiǎng)勵(lì)”正是學(xué)生自己給自己的。
(4)可配合表情動(dòng)作來(lái)體會(huì)感情在詩(shī)歌朗誦時(shí),適當(dāng)加上點(diǎn)肢體語(yǔ)言也是讓學(xué)生“進(jìn)入角色”的一種方法。這種方法可以說(shuō)是借鑒和微縮了舞臺(tái)劇的表演形式。有時(shí),一些難以言傳的微妙情感卻能用表情、動(dòng)作入木三分地“表演”出來(lái)。如趙師秀《約客》中“有約不來(lái)過(guò)夜半,閑敲棋子落燈花”一句,表現(xiàn)對(duì)遲遲未到友人的等待。我便嘗試讓同學(xué)們一邊做動(dòng)作一邊朗誦。有一位同學(xué)是這樣表演的:他微皺眉頭,半閉雙眼,一邊不緊不慢地敲擊著手中的筆,口中念念有詞似昏睡狀,忽然筆失手落地,他方才做出驚醒的表情,俯身往桌下尋找。這是多么精彩的表演!把久等未到那種疲憊、昏昏欲睡的感覺(jué)表現(xiàn)得淋漓盡致。那么昏昏欲睡的狀態(tài)怎么用誦讀表現(xiàn)呢?我讓同學(xué)們繼續(xù)討論和嘗試。這樣的方法可以讓課堂氣氛輕松活躍,同學(xué)們也感到有所收獲。“一千個(gè)讀者就有一千個(gè)哈姆雷特”,詩(shī)歌朗誦的方法又為何不能多彩多姿呢?
(5)詩(shī)詞結(jié)尾句可酌情適當(dāng)放緩語(yǔ)速,拖長(zhǎng)音節(jié)在審美活動(dòng)中,“延留”是指對(duì)古詩(shī)詞的接受進(jìn)入階段后的一種心理延續(xù)和留存。是詩(shī)詞中的美感繼續(xù)留存于腦里并使其不斷回味的狀態(tài)。這種“延留”如果從誦讀的角度去表現(xiàn),最好的方式便是對(duì)結(jié)尾一句適當(dāng)進(jìn)行一定的處理??煞啪徴Z(yǔ)速,并將最后一個(gè)音節(jié)稍稍延長(zhǎng),達(dá)到“余音繞梁”的效果。如崔顥《黃鶴樓》末句“煙波江上使人愁”就適合這樣表現(xiàn)。教學(xué)時(shí),可讓學(xué)生自己去體會(huì)如何處理;哪些詩(shī)適合這樣表現(xiàn),哪些不適合。老師并不需要給學(xué)生一個(gè)“標(biāo)準(zhǔn)答案”,而是讓學(xué)生在這樣的思考和嘗試中不自覺(jué)地加深了對(duì)詩(shī)詞內(nèi)涵的領(lǐng)悟。
三、完整誦讀
對(duì)詩(shī)詞作品進(jìn)行完整地誦讀,不僅能讓學(xué)生們對(duì)詩(shī)詞內(nèi)容情境的理解進(jìn)一步加深,而且能促使他們形成更加完整的全局感受。在整個(gè)誦讀教學(xué)中,學(xué)生的個(gè)體差異會(huì)比較明顯。一方面,每個(gè)學(xué)生對(duì)詩(shī)句感悟的程度和角度都不盡相同;另一方面,每個(gè)學(xué)生的誦讀表現(xiàn)能力也有很大差異。因此,一味地讓學(xué)生們反復(fù)齊讀意義不大,缺少了一種層次上的推進(jìn)。那么如何能最大限度地讓全體同學(xué)的誦讀效果達(dá)到理想的水平?具體的方法肯定是多樣的。這里有一種“過(guò)渡法”的思路———即由個(gè)人誦讀逐漸過(guò)渡到全體齊讀。
四、課后鞏固