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二00九心暢,發展速度更高,扭轉危機更快,民族團結更強,大步奔小康。
諸位師長友朋,這是我創作的“紅段子”,是否還有些微可取之處?我以創作“紅段子”為樂,暢抒心聲,祝福祖國。
世界經濟危機,中國“風景這邊獨好”,這說明30年改革開放經濟騰飛才能抵御風險,我就創作短信描繪中國新景象:
世界逢霜中國暖,各項建設再向前。高速高鐵暢通線,衛星城市連成片。農村農民新姿現,城鄉一體喜開顏。黨的政策后勁滿,誓把全面小康建!
我贊美全國人民團結進取,中華民族偉大復興指日可待:
中華文明源遠流長,奮斗前進激情飛揚。雪災震難共克時艱,經濟危機笑對更昂。盛世小康手中呈現,勤勞團結譜寫榮光。和美和順和諧今茲,偉大復興勢不可擋!
我把創作的短信發給親朋諸友同事鄰好,并發表到報紙上,健康積極、昂揚向上的“紅段子”受到了大家的歡迎。我創作積極性更高了,先后編寫了30多則慶奧運、迎新年、抒胸襟的紅色短信,來展示幸福,抵制庸俗,體現高尚,啟迪人生。
“紅段子”具有先進性、思想性和知識性等特點,內容健康向上、形式短小精悍、效果催人奮進。可以是廉政警句、勵志短句,可以是哲理箴言、管理格言,也可以是真情祝福、幽默小品。它如夏日的清風,讓人們在私欲膨脹時頭腦清醒;它如冬日的暖陽,讓人們在郁悶頹廢時心冰融化。
全民傳播“紅段子”,當使小康社會更和諧。當你收到勤廉為官的短信時,請轉發你的同事共勉;當你收到奮進向上的短信時,請轉發你的同齡人互勵;當你收到心靈如沐春風的短信時,請轉發你的朋友同享。讓我們的短信世界從此“飄紅”,以有趣對抗無聊,以健康對抗庸俗,弘揚社會道德,點燃生活激情,共同為構建富強、美好、和諧社會助力喝彩!
朋友,來吧,讓我們傳播“紅段子”,讓我們《樂了》,抒懷健康、光明、熱烈的心聲:
辣椒樂了,為大地獻出鮮靈靈的紅;
高粱樂了,向季節捧出沉甸甸圖騰;
彩筆樂了,描繪最激情美麗的風景;
長城樂了,成為一條枕海踏漠的龍。
你們樂了,唱響勝利者豪邁的歌聲;
他們樂了,再創人生輝煌氣勢如宏;
1、烘鞋器會不會自動斷電主要取決于你買的烘鞋器的質量。
2、但無論怎樣的小編都建議大家用完后就將其及時收起來,以避免出現什么安全隱患。
3、雖說現在大部分的電器都有安全防護,但是小編不建議大家將烘鞋器開一夜,用烘鞋器烘鞋子一般烘5個小時左右就可以干了,當然濕得厲害可以多烘,但是不能超過一夜。
(來源:文章屋網 )
酒香流茗,西風吹驟髻成霜,誰人簫歌,寂夜獨奏,咽入蕭墻載滿院,寸寸柔腸掩風流,一杯濁酒淚鮫綃。楚楚寒秋,飛花末盡,身悴恨難休,嗟嘆紅塵冷暖自知,掩淚鎖雙眸。
一簾花碎影,霜菊搖落朦朧月,空照年年舊時景,歲月卻成空獨留相思人。提筆依如往,癡斷巫山夢,奈何奈何,殘夢不消歲月痕,卻解紅塵癡情人。余夢殘香,低吟且對寂寞舞,一輪冷月,憑添雙眸愁多少?
獨自倚窗,月照眉心,點點瀅瀅暗生涼。夢深猶恐影蕭蕭,霜菊猶亂迷人眼,一派凄涼寒小樓。夢畫江南,涌相思,曾度春風幾濟,燕子雙飛,憑眸相對,執手風流,佳麗廝情許契,戲蝶花間,風依絮綿,可卻一夜梨花照誰夢,點點揚揚漂誰傷?
紅箋淚滿,一夜寒風如訴,花峭人憔悴,末知今時此刻,西風唳多少失意人,會憑欄,葬淚西風?一杯濁酒還酹,聽落西窗凋花聲,重簾鴻影,月照相思可千里?一枕愁添,凝思故影喚杜鵑,聲聲啼血,滿屋凄楚,一點朱砂印碧窗,情牽兩處,夢依依。
滿目幽恨悵對霜菊傷,舊情難了,還夢新傷,獨自凄笑,誰人斷腸夢江南?夢依依,飛鴻斷,難覓影,簫咽空樓,望斷歸程,了此夢是余生。
兩情若如初見,何來淚沾袖?恐是一朝花飛無人憐,空盈滿院殘花無人葬,淚還天涯,難賦情深。花開能有幾時艷,春歸秋夢涼,紅塵離散乍能易,可嘆香盡終歸影獨舞,吟殘夢,夜夜笙歌且當年,可卻離人淚,漏斷三更誰人知?只怕是日日曉來夢中度年華,獨對黃燈,許情生。
凌宵舞躍癡人笑,袖倚案,寒輕峭,悵影三更畫瘦顏,愁襯絲映,枕衾難寐寂寥乘,冷溶裳騎夢獨醒。傷情離別恨綿長,自古有柳岸殘月之言,何苦空嘆月盈缺?煙消陋室,身倦影憐,一襟幽恨,坐看紅塵潮起落,潮起碧海生,潮落風煙靜。
夢中傳來了奇怪的聲音,仿佛是誰在說話。
“彩虹那端有一個可愛的精靈,你相信嗎?聽說它能帶給你幸福。但是幸福是要自己去尋找的。……”被驚醒了,莫璇揉了揉蓬亂的頭發,心想,那是個什么夢呢?不過很快就把這件事忘得一干二凈了。
她就是莫璇,一個長相平庸,學習和特長與她的長相一樣平庸的莫璇。舞虹中學初一生,在班里沒有任何一個人注意到她。這就是……莫璇。
然而誰也不知道,璇的那個奇怪的夢卻給她帶來了巨大的改變,那個精靈是誰?他會來到璇的生活中嗎?
石頭?精靈?}
終于放學了!璇吐了一口氣。今天的作業果然和以前的一樣多,真是令人懊惱。她在校內的鵝卵石小路上來回漫步,呼吸新鮮空氣。莫璇總天真地認為這樣會緩解壓力。
“璇!你還在這里啊。”璇回頭一看,原來是她唯一的朋友若媛在招手,“哎喲,又被留下來罰抄課文了,像我們這樣的學生總是這樣。真想早早地回家干掉作業,然后看看電視。你說呢?”看來,璇和媛話不投機,只聽她說:“誒,瞧著路邊的野花多有生命力啊!草那么綠……哦對不起,我走神了,媛媛能原諒我嗎?”“好吧。”若媛好像有點生氣了,便離開。
可她仍沉浸在小路的愉悅中。“咦,多么美的鵝卵石啊!閃著亮光……奇怪的亮光。”璇希望把這塊石頭當做自己的項鏈,她揀起來了。石頭有點粗糙,上面蒙了一層薄薄的塵土,但亮光絲毫未減。她拂去塵土,緊緊握著石頭。
璇回到家脫了鞋,說:“我回家了!”可是沒有一個人應。她發現餐桌上有一張紙條,上面寫道:“媽有要緊的差事去一個星期,來不及跟你說,很抱歉。這些日子就靠你自己了。”唉,又去出差。璇低下頭,提起書包進屋寫作業去了。
晚上,璇在陽臺前看著星空,星星像一盞盞路燈。總覺得……有一種奇怪的感覺,好像有什么生命。是錯覺吧!她擦擦眼睛,靠在床上很快安靜地入睡了。
第二天,早上。
“錯亂的輪回?”若媛甩了甩她那算不上柔順的黑色短發,“這是什么?超自然現象嗎?”
于是,愛開始了她的長篇大論:“讓我解釋一下吧。據我判斷,你的前世是瘟疫之神,簡稱‘瘟神’。然而,你被處死后留有怨念,這怨念陪伴你來到了新的輪回。每當你怨念爆發時,只要控制住自己就行了,怨念不會對你造成傷害。你懂了嗎?”
“呃……原來魔法無處不在!”媛點點頭,“可你這矮子又是誰?怎么會到這里來的?”
“那個……”淺愛挑著眉,該怎么說好呢?
突然,璇拽住愛的小手,說:“她,就是我的精靈淺愛,是個魔法生物。對吧?”“呃呃……對。”媛興高采烈地說:“嗯,很高興認識你,淺愛!我是若媛。也很高興認識魔法的世界!”
她們有說有笑地一起回家,真是個溫馨愉快的一天。
“你變瘟神的時候帥呆了!”“應該說難受死了。”“我也覺得很好看嘛……”“你是不是欠扁啊……”
4.神秘插班生}
又是個平凡的一天早晨,璇呆坐在位子上。
咣!教室門被猛地踹開了,外面火急火燎地跑來一位矮矮的學生頭男孩,氣喘吁吁地說:“最,最新消息!我,我們班要新來一位同,學……是個女生,很酷的……”
“你在說我嗎?”如同百靈鳥一般動人的溫柔聲音給學生頭打了針鎮靜劑。未見其人,先聞其聲。
璇心頭微微一顫!又黑又密的睫毛遮住了她的瞳孔,薄薄的櫻桃小嘴,這不就是那天摟住梓倫的女孩嗎?她怎么會來到這個班級?這一切就像濃濃的化不開的霧氣一樣,讓璇感到不解。
那位倒霉的學生頭似乎被電了一下,緊接著就倉皇溜到他的座位上。教室沸騰了,四處傳來不絕于耳的唏噓聲。“她誰啊……”“聽說他父親是個知名的企業家呢!”“哇噻!又高傲又有氣質……”“你看……”
校服穿在她的身上竟也那么美麗。她移著碎步到講臺前,高傲地說:“我希望你們記住我的名字,我叫堇艾。”緊接著,她又不緊不慢地找到了莫璇前面的一個空座位坐了下來。
她從精致的黑白相間的小包中取出一個裝有黑褐色的速溶咖啡的杯子,小口地品嘗著。
“那個女孩就是堇艾……”莫璇自言自語道,“倫和她之間是什么關系呢?”
這時,璇不經意間看到倫的嘴角泛起了一絲微笑,向堇艾打著招呼:“歡迎你,堇。”“謝謝。”堇若無其事地丟出兩個字,繼續喝她的咖啡。
這個驕傲得要命的家伙!璇咒罵著,把頭埋進抽屜里休息。
“站住。”誒!本該放學回家吃晚餐啊,怎么又被倫拽住了!?璇悄悄地發著脾氣。
倫用他那大手手緊緊地握住璇的小手,來到學校后面的廢棄工廠。工廠里只亮著一盞昏暗的燈。“你你你……你干嘛……啊……”璇越說越沒力氣,用斜在一邊的劉海遮住自己的眼睛。
“當然是訓練啊。”倫放開了璇的手,變出一團液態水,“喏,快練。”
璇仿佛想起什么重要的事情,便接過液態水問道:“那個,堇艾跟你是什么關系啊?”倫眼神間流過一絲猶豫,但很快回答道:“不關你的事。”“什么啊?那么那天為什么堇艾和你在一起啊?我……”璇說不下去,臉也漲得很紅。
“接招!”宮梓倫二話不說便從手里射出一道閃著銀光的閃電,直擊莫璇。
“不許偷襲!”璇也將水化作盾牌,射過來的閃電被水吸收了,發出“噼啪”的聲音。
2、白首偕老,白頭偕老。
3、百年好合,永浴愛河。
4、盟結良緣,乾坤定奏。
5、天作之合,甜蜜佳緣。
6、宜室宜家,佳偶天成。
7、愛情永固,螽斯衍慶。
8、締結良緣,白首成約。
9、五世其昌,喜結伉儷。
10、之子于歸,妙選東床。
11、美滿家庭,鸞鳳和鳴。
經優資萊官方統計,2013年上半年,優資萊品牌終端門店一共開展近2000場促銷活動,實現銷售額7000多萬元,不僅有效提升了終端的動銷,更是減輕了門店庫存壓力。
在產品同質化嚴重、終端門店略顯銷售乏力的今天,優資萊憑借多年來對終端渠道的開拓,對消費者需求的及時了解以及對產品差異化的不斷摸索,終于在植物護膚這塊紅海領域打造出了自己的特色。
終端要利潤也要動銷
通過走訪市場我們不難發現,今年的終端消費受到較大影響,消費者在控制自己的消費,其消費心態更趨理性,花錢態度更謹慎。這樣的變化,也導致渠道商心態更趨保守,渠道需求開始發生變化。
“現在我們需要的不僅是利潤和產品,我們更需要能幫助終端店賺得人氣、提升銷量的增值服務。”河南某商告訴記者,面對大環境的變化,品牌如果還是照著老套路去做的話,在終端肯定是行不通的,終端店也越來越理性了,簡單的廣告加忽悠只能是過去式。
當然,也有業內人提出異議:商幫著店家開店,廠家幫著商服務門店。越俎代庖的事情干得太多了。產業鏈條上的每個角色都需要各司其職,終端店賣產品,渠道商做服務,品牌只管做好產品就行。
“產品實現終端動銷,是廠家、渠道商、終端商所夢寐以求的。因為只有實現了終端動銷,才會有利潤和營收,企業才會持續穩健地發展。”對于優資萊來說,廠家僅僅回歸產品本身,提升產品品質,在當今的競爭環境下,是遠遠不夠的。好酒也怕巷子深,如何深耕渠道,牢牢抓住渠道的需求,才是更重要的。
優資萊正是意識到這一點,在回歸產品本身的同時,開始進一步順應渠道商需求的變化,整合上下游資源,幫助門店解決動銷問題。
記者從優資萊春季商會議中得知,優資萊在福建福州長樂市舉行的“約‘惠’春天炫禮送出來”春季千場主題促銷活動中,有一場活動在五天時間里,銷售總量高達20多萬元,這為2013年優資萊品牌春季全國促銷活動打響了第一槍。
優資萊“三大法寶”助力終端
為了讓優資萊產品在終端有“好產品自己會說話”的效果,品牌方主要通過三個方面來助力終端銷售。
首先,加強品牌力建設。
2013年優資萊不但注重新產品的研發,推出全新阿爾卑斯草本精萃系列和水仙水潤精萃系列,完善了優資萊的產品線結構,更在此基礎上精確定位了優資萊的品牌定位,找準了鮮活植物護膚力的市場。
同時,優資萊自上市以來,一直保持著高密度的有效曝光:2013年優資萊斥資億元,在深度和廣度上加大媒體廣告的投放;集結浙江衛視、湖南衛視、江蘇衛視等全國收視率前三甲的衛視,滾動播出廣告大片;橫跨行業雜志、時尚雜志等平面媒體;跨越網絡新媒體的廣告投放,實行空中立體營銷模式。
其次,加強終端生動形象建設。
規范終端陳列是優資萊頗為看重的一項工作。品牌每個季度都會提供統一形象的吊旗、海報、展架、跳跳卡等終端物料配合終端銷售。2013年,優資萊更是在加強終端門店建設這塊發力,全新升級后的終端陳列柜臺設計整體更簡潔、流暢,很好地詮釋了優資萊自然、清新的品牌形象。
最后就是促銷拉動。
一年兩次大型主題促銷活動在全國的火熱展開是優資萊終端動銷的利器。
2011年秋季優資萊開展了“綠色健康行”的全國大型主題促銷活動,此次活動在全國有近3000家客戶參與,共實現銷售額近1億元;
2011年開展的“優資萊獎給你”大型澳洲游活動,大幅度提高了茶韻芯肌系列的銷量,加強了消費者對優資萊品牌的認知度;
2012春季以“萬人進店禮狂送”為主題的大型促銷活動在全國火熱展開,優資萊美的電飯煲作為此次贈品受到消費者的喜愛,大幅度提高了終端的動銷;
2013年的“約‘惠’春天炫禮送出來”和“綠色健康行”活動……
[關鍵詞] 系統性紅斑狼瘡;ANA;ds-DNA;ENA;自身免疫病
[中圖分類號] R593.24+1 [文獻標識碼] B [文章編號] 1673-9701(2013)05-0088-02
系統性紅斑狼瘡(systemic lupus erythematosus,SLE)是一種臨床表現復雜多樣涉及機體多個組織和器官的彌漫性結締組織疾病,該病主要由自身免疫介導,突出表現是免疫性炎癥[1]。其發病原因到目前為止尚不明了,與多種因素有關[2]。由于患者體液免疫的失調及細胞免疫功能的紊亂,血清中出現以抗核抗體為代表的多種自身抗體和多系統受累是系統性紅斑狼瘡的兩個主要特征[3],因此對患者血清中的多種高度特異性的自身抗體進行檢測,可達到對疾病進行診斷的目的,如檢測抗核抗體(antibody to nuclear antigen,ANA)、抗雙鏈DNA抗體(ds-deoxyribonucleic acid,ds-DNA)及抗可提取核抗原多肽抗體(extractable nuclear antigen,ENA)等[4]。隨著生物化學和免疫學技術的發展,對ANA、ds-DNA、ENA等自身抗體的檢測已經廣泛應用于臨床檢查,并對系統性紅斑狼瘡的診斷與治療起到了積極作用。本研究通過分析136例系統性紅斑狼瘡患者的自身抗體檢測結果,以期為SLE的臨床診治提供實踐依據。
1 資料與方法
1.1 臨床資料
136例樣本均為2010年1月~2012年12月我院門診接待及住院治療的SLE患者。樣本中男19例,女117例,平均年齡為41歲,年齡最小11歲,最大72歲,所有患者均符合美國類風濕病學會1997年修訂的SLE診斷標準[5]。另選100例健康體檢者作為對照,其性別、年齡與實驗組無明顯差異。所有血清均分離自受試者空腹靜脈血。
1.2 方法
①抗核抗體(ANA)采用間接免疫熒光法(IIF)進行測定,將待測血清用稀釋液做1∶100稀釋,血清稀釋≥1∶100定義為有臨床意義。每次試驗均作陰、陽對照,陰、陽對照不做稀釋,試劑盒購自德國歐蒙公司,嚴格按照說明書進行操作。②采用免疫印跡法(IBT)進行抗可提取核抗原多肽抗體ENA自身抗體譜檢測,包括抗SSB、抗rRNP、抗nRNP、抗SSA、抗Jo-1、抗Scl-70、抗Sm抗體等7種不同抗原IgG類抗體的檢測。此試劑盒購買于德國歐蒙公司,操作嚴格按照說明書進行。③抗雙鏈DNA抗體(ds-DNA)采用間接免疫熒光法(IIF)測定,試劑盒購自德國歐蒙公司,嚴格按照說明書進行操作。
1.3 統計學方法
統計結果采用SAS 9.0進行分析。
2 結果
2.1 SLE患者一般臨床特點
136例SLE患者中,首發癥狀為關節疼痛或關節腫痛的最多,占55.9%,其次為面部紅斑,占51.5%,發熱頭痛和下肢水腫各占42.6%和26.5%。
2.2 檢測項目與檢出率的關系
見表1。136例SLE患者中各種自身免疫抗體的檢出率差異較顯著。其中以ANA的陽性檢出率最高,為97.8%;其次為ds-DNA,陽性檢出率達69.1%。ENA中自身多肽抗體的檢出率均不相同,其中抗Sm檢出率為53.7%,與ds-DNA檢出率較相近。而在正常對照100例中僅有3例檢出ANA陽性,其他項目均無陽性檢出,說明僅用ANA檢測不能準確判定病情,在實際臨床中還需將ANA、ds-DNA及ENA等三種自身抗體聯合檢測才能準確判定病情。
3 討論
系統性紅斑狼瘡(SLE)是一種系統性的自身免疫性疾病,發病年齡多在近20歲~40余歲,男女發病比例約為1∶9,且此病多發于生育期婦女[6],種族對SLE發病亦影響很大,黑人SLE患者普遍較白人更為嚴重[7],在全世界患病率大約為17/10萬~48/10萬,中國患病率達1/2 000,高于其他國家,并呈逐年上升趨勢[8]。SLE患者的臨床表現較為復雜多樣,且早期一般無典型表現。由于SLE的發病機制與自身免疫有關,血清學特征又能產生多種自身抗體,因此,患者血清自身抗體的檢測對臨床診斷、早期確診及治療提供了極大的幫助。SLE患者中因性別不同,導致其自身抗體的檢出率存在著較為明顯的差異,女性患者相應自身抗體檢出率顯著高于男性,原因是由于免疫系統反應受不同性激素調節,其中雌性激素可增強免疫反應,而雄性激素則抑制免疫反應[9]。
對ANA抗體、ds-DNA抗體、Sm抗體的檢測是診斷SLE的主要指標。本次試驗中,患者血清中檢測出ANA陽性率高達97.8%,其次是ds-DNA陽性率為69.1%,抗Sm陽性率相對較低為53.7%,因此對這三種自身抗體進行聯合檢測不僅可以提高SLE檢測的準確率,還為預防、判定和追蹤SLE病情起到良好的積極作用。不同的自身免疫病所產生的抗核抗體譜是不同的。ANA抗體檢測的優點在于其敏感性強且檢出率高,缺點是特異性不高。故此,ANA抗體檢測為陽性時,患者還需進行進一步其他自身抗體的檢測以確診。ENA包含7種自身多肽抗體如Sm、SSB、nRNP、SSA等,這些抗體在系統性紅斑狼瘡的診斷中同樣具有不容忽視的重要意義,其中抗Sm抗體對系統性紅斑狼瘡的檢測具有高度特異性,對早期、不典型的SLE或經過治療的SLE回顧性診斷具有很大的幫助,為SLE診斷的又一標志抗體[10],但由于抗Sm抗體較低的陽性檢出率一定程度上影響了SLE的診斷,所以需要其他項目的輔助診斷。ds-DNA能反映SLE的活動性,同樣是SLE的特異性抗體,但其檢出率同樣不高。在臨床診斷中為有效提高各種自身免疫疾病檢測準確率,應以ANA作為篩選指標,與ds-DNA、ENA的檢測結果相結合,從而提高系統性紅斑狼瘡的檢測率,對疾病進行及時判斷和針對性的治療。
在自身免疫性疾病發展過程中有許多高度特異性抗體對疾病診斷具有重要意義。對部分SLE患者而言比較復雜的血液學異常通常出現在發病早期,尤其對于年輕女性患者,如若同時伴有皮膚損害、發熱或關節病變的尤其需要警惕是否是SLE的可能。應及時進行相關自身抗體的檢測,做到早發現、早治療避免耽誤病情。
綜上所述,三種自身抗體聯合檢測明顯優于單個項目的檢測,可大大提高檢測的敏感性。鑒于各種自身抗體在SLE診斷中的不同意義,對多種抗體進行聯合檢測將更有利于SLE的鑒別診斷、療效觀察和預后。所以臨床常規項目中抗體的聯合檢測對提高SLE的診斷具有重要意義。
[參考文獻]
[1] Manson JJ,Rahman A. Systemic lupus erythematosus[J]. Orphanet J Rare Dis,2006,1:6.
[2] 張秀英. 系統性紅斑狼瘡病人的臨床護理及出院指導[J]. 現代生物醫學進展,2008,12(8):2399-2401.
[3] 中華醫學會風濕病學分會. 系統性紅斑狼瘡診斷及治療指南[J]. 中華風濕病學雜志,2010,5(14):342-348.
[4] 楊湘越,蘭小鵬,王德春. 1120例自身抗體檢測結果分析[J]. 實用醫技雜志,2004,11(11):2381-2383.
[5] Tebbe B,Geilen CC,Schulzke JD,et al. Helicobacter pylori infection and chronic urticaria[J]. J Am Acad Dermatol,1996,34(4):685-686.
[6] 張鋆. 系統性紅斑狼瘡的病因機制及相應的治療方法[J]. 生命科學趨勢,2003,1(4):1-10.
[7] D'Cruz DP,Khamashta MA,Hughes GR. Systemic lupus erythematosus[J]. Lancet,2007,369(9561):587-596.
[8] 王蓉,杜琴. 系統性紅斑狼瘡患者自身抗體聯合檢測的意義[J]. 臨床和實驗醫學雜志,2008,11(7):50-51.
[9] Carlsten H,Tarkowski A,Holmdahl R,et al. Oestrogen is a potent disease accelerator in SLE-prone MRL/l mice[J]. Clin Exp Immunol,1990,80(3):467-473.
關鍵詞:毛細管血紅蛋白電泳; 地中海貧血; 基因診斷
Abstract:Objective In order to access the application value of Automated Capillary zone Hemoglobin Electrophoresis in Thalassemia screening.Methods Implement the automated capillary Hb electrophoresis apparatus to do Hemoglobin analysis for 2177 specimens in our hospital, which patient age range is from one year old to adult. Besides, implement the single-tube multiplex PCR and RDB/PCR technical to detect and diagnose α&βThalassemia genetic respectively in these specimens.Results In 2177 specimens, there are 653 cases of HbA23.5% is 230 cases, proportion is 10.56%. Select 116 case of HbA23.5% to α&βThalassemia genetic diagnosis. For 116 case of HbA23.5%, also conduct the same types Thalassemia genetic analysis and detection. The detect result is 98 cases β- Thalassemia and 16 cases α&βcomposite Thalassemia, coincidence rate is 99.13%.Conclusion The Hemoglobin analysis and Genetic detect analysis have good coincidence by capillary electrophoresis technique, which can be implement for Thalassemia screening.
Key words:Capillary electrophoresis; Mediterranean anemia;Gene diagnosis
地中海貧血是由于編碼珠蛋白的α或β類珠蛋白基因發生缺失或點突變,使α或β類珠蛋白鏈缺如或不足所致的貧血,我國南方地區高發[1]。目前尚無有效的治療方法,對攜者做出診斷及產前進行篩查,是防止地貧患兒出生,減少本病發生的唯一有效措施。本研究通過對比血紅蛋白分析與基因分析檢測結果,評估采用全自動毛細管電泳法血紅蛋白分析對地中海貧血的診斷應用價值。
1資料與方法
1.1一般資料 受檢對象年齡1歲~48歲,其中男871例,女1306例,全部為2012年6 月~2013年7月在本院住院或門診就診患者共2177例,進行毛細管血紅蛋白電泳,對其中HbA23.5%的115例進行α缺失型、中國人常見的三種α非缺失型和中國人常見的17種β-地中海貧血基因診斷。
1.2儀器和試劑 ①血紅蛋白分析:2907全自動毛細管血紅蛋白電泳儀及配套試劑、校標品、質控品(Sebia 公司提供);②基因分析:地貧基因診斷試劑盒(深圳亞能生物技術有限公司提供)。
1.3方法
1.3.1血紅蛋白分析 將EDTA -K2 抗凝靜脈血混勻后直接上機, 按2907全自動毛細管血紅蛋白電泳儀的要求定標、質控并完成檢測。
1.3.2基因分析 α珠蛋白基因的檢測:采用單管多重PCR(gap-PCR)法檢測東南亞缺失(--SEA)、右缺失(-α3.7) 和左缺失(-α4.2)3 種缺失型[2]。β-地貧基因的檢測:采用 RDB /PCR技術檢測17種突變類型。
1.3.3評估內容 以基因診斷作為參考方法,評估血紅蛋白分析在特定閾值下對地中海貧血診斷的靈敏度與特異度,分析血紅蛋白含量變化與突變類型的相關性。
2結果
對2177例進行全自動毛細管血紅蛋白電泳,見表1。對其中HbA23.5%的115例進行α,β地中海貧血基因診斷,HbA23.5%的115例檢出β-地貧98例,α并β復合地貧16例,符合率為99.13%,見表2。
3討論
地中海貧血是華南地區高發的單基因遺傳性溶血性疾病,人群攜帶率高,1999年廣西柳州α地貧檢出率為11.19%,β地貧檢出率為6.78%[3]。地貧的實驗室診斷以往主要采用MCV、紅細胞滲透脆性試驗等方法進行篩查,影響因素較多,敏感度和特異性均較低,且部分地貧患(特別是α地貧)MCV和(或)紅細胞脆性可以正常,是造成地貧基因攜帶者漏診的主要原因, 漏診率達13.23%[4]。基因分析是地中海貧血診斷的金標準, RDB-PCR 技術可檢測17種β-地貧基因突變和三種α-非缺失型,采用單管多重PCR(gap-PCR)法檢測東南亞缺失(--SEA)、右缺失(-α3.7)和左缺失(-α4.2)3 種α-缺失型。但檢測條件要求較高, 價格昂貴, 耗時繁瑣, 不適用于常規篩查。而毛細管電泳技術是診斷和分離異常血紅蛋白的有效方法,是臨床診斷血紅蛋白分子病,特別是地中海貧血不可缺少的手段[5]。全自動毛細管血紅蛋白電泳技術綜合了經典電泳技術與現代微柱分離技術兩者的優點,具有快速、簡便、高效、通量大和自動化的特點[5,6]。應用全自動電泳分析系統對臨床標本進行血紅蛋白電泳, 發現其對HbA2和HbF 分辨率較高。本法既能直接用肉眼觀察比較,得出HbA2是否增高的判斷,又能掃描出HbA2含量,電泳區帶清晰,掃描定量準確,可以為地中海貧血的診斷提供重要依據[7]。
本研究中,以地貧基因診斷作為參考方法,評價毛細管血紅蛋白電泳對地中海貧血的診斷價值。臨床上α-地中海貧血常表現為HbA2 含量偏低或正常,輕型β-地中海貧血表現為HbA2 增高、HbF 含量正常, 中間型及重型β-地中海貧血表現為HbF 明顯增高、HbA 2正常或增高[8]。因此本實驗選取毛細管血紅蛋白電泳后HbA23.5%的115例測出98例β-地貧,16例α并β復合地貧,符合率為99.13%,具有較高的符合率。
綜上所述,應用全自動毛細管血紅蛋白電泳技術是一種靈敏度、特異性高、重復好的分析工具,具有操作簡便,通量大的優點。全自動毛細管血紅蛋白電泳分析系統的引進將為我國地中海貧血診斷提供更精確的篩查。
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