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各中學(xué)及考生家長(zhǎng):
為使廣大考生能夠深入了解高校教育教學(xué)水平和綜合實(shí)力,準(zhǔn)確把握招生政策,掌握各校招生信息,選擇自己向往的高校,科學(xué)、合理地填報(bào)學(xué)校和專(zhuān)業(yè)志愿。XX工業(yè)大學(xué)定于XX年6月26日在XX工業(yè)大學(xué)友誼校區(qū)內(nèi)舉辦“校園開(kāi)放日”暨20XX年度招生咨詢(xún)活動(dòng)。屆時(shí),我們將邀請(qǐng)哈爾濱工業(yè)大學(xué)、北京航空航天大學(xué)等工業(yè)和信息化部屬高校,同濟(jì)大學(xué)等卓越聯(lián)盟高校,北京大學(xué)、清華大學(xué)等著名重點(diǎn)高校參與本次活動(dòng)。
XX工業(yè)大學(xué)熱忱歡迎中學(xué)領(lǐng)導(dǎo)、教師、考生及家長(zhǎng)參加此次咨詢(xún)活動(dòng)。
時(shí)間:20XX年6月26日上午8:30-下午17:00
地點(diǎn):XXX
學(xué)校活動(dòng)邀請(qǐng)函范文
親愛(ài)的家長(zhǎng)朋友們:
又是一年春花爛漫時(shí),孩子們最快樂(lè)的節(jié)日——“六一”國(guó)際兒童節(jié)來(lái)到了,讓我們由衷的對(duì)孩子們說(shuō)一聲“節(jié)日快樂(lè)!”祝愿孩子們?cè)谖覀兊暮亲o(hù)培養(yǎng)下健康、快樂(lè)、茁壯成長(zhǎng)!為了讓孩子們?cè)谧约旱墓?jié)日中快樂(lè)地展現(xiàn)自我,體驗(yàn)成功,感悟成長(zhǎng),我園定于5月28日在本園舉行慶“六一”聯(lián)歡活動(dòng)。今年的活動(dòng)充分體現(xiàn)“我健康、我快樂(lè)、我成長(zhǎng)”的主題,每一個(gè)孩子都有上場(chǎng)表演的機(jī)會(huì),都是場(chǎng)上的主人、節(jié)目的主角。孩子們用投入的表演,慶祝自己的節(jié)日,表達(dá)內(nèi)心的情感。相信今年的“六一”會(huì)給每位家長(zhǎng)和孩子們留下最美好的回憶!
為了確保活動(dòng)的順利進(jìn)行,請(qǐng)家長(zhǎng)配合做好以下工作:
1、每個(gè)家庭至少有一人參加活動(dòng),最好是爸爸、媽媽都參加。
2、請(qǐng)?jiān)谥付ㄎ恢糜^看節(jié)目,本次活動(dòng)將邀請(qǐng)專(zhuān)業(yè)攝影師全程攝影,如有需要,可登記購(gòu)買(mǎi)。
3、活動(dòng)過(guò)程中,不要隨意在場(chǎng)上走動(dòng)、喧嘩,請(qǐng)注意保持會(huì)場(chǎng)秩序!服從我園的會(huì)場(chǎng)管理,聽(tīng)從老師的安排。
【范文1】
各位x同學(xué):
xx大學(xué)管理學(xué)院將于2017年1月4日舉行EDP校友新年聯(lián)歡晚會(huì),誠(chéng)摯邀請(qǐng)xx黃埔一期全體同學(xué)參加盛會(huì),相關(guān)事宜通知如下:
晚會(huì)地點(diǎn):番禺潮府(番禺區(qū)番禺大道北南大路口)
參會(huì)校友:管理學(xué)院EDP2013屆校友,往屆校友代表,xx同學(xué)
晚會(huì)流程:
17:00-18:00 xx大學(xué)乘大巴出發(fā)前往番禺潮府(可自駕)
21:00- 大巴返校,各班自由安排下半場(chǎng)節(jié)目
注意事項(xiàng):
學(xué)院經(jīng)與理事會(huì)同學(xué)商議,本次聯(lián)歡活動(dòng)作為xx集體活動(dòng),活動(dòng)費(fèi)用由xx活動(dòng)經(jīng)費(fèi)支出并公示。
既是xx成員又是2013屆結(jié)業(yè)校友的同學(xué)請(qǐng)勿在xx重復(fù)報(bào)名,所繳納晚宴費(fèi)用將于活動(dòng)后退還。
【范文2】
尊敬的各位領(lǐng)導(dǎo),老師:
新年的鐘聲即將敲響,新的一年正欣欣然向我們走來(lái)。紅梅爛漫,為我們帶來(lái)春天的信息;雪花飄灑,為我們送來(lái)春天的祝福。在這辭舊迎新的時(shí)刻,我們向?yàn)閷W(xué)院教育事業(yè)發(fā)展正在辛勤工作的教職工致以新年的問(wèn)候,祝愿大家:身體健康,工作順利,新年快樂(lè)!
一元復(fù)蘇,萬(wàn)象更新。為營(yíng)造我院和諧氛圍,增進(jìn)師生交流,展現(xiàn)我院師生風(fēng)采,系元旦來(lái)臨之際,經(jīng)過(guò)積極完善的籌備,以和諧之春為主題的我院2017年師生元旦聯(lián)歡晚會(huì)即將與師生見(jiàn)面。
屆時(shí),XX大學(xué)副校長(zhǎng)、法學(xué)院院長(zhǎng)XXX院士一曲《沁園春雪》將再次展現(xiàn)北國(guó)的風(fēng)光,祖國(guó)山河的壯闊。法學(xué)院師生將傾情奉獻(xiàn),用嘹亮、動(dòng)人的歌聲唱響元月和諧的樂(lè)章,用優(yōu)雅、奔放的舞姿演繹春日的祥和。為此,我們特誠(chéng)意邀請(qǐng)您參加此次元旦聯(lián)歡晚會(huì),相信您的參與一定能夠使我們的晚會(huì)錦上添花。現(xiàn)將晚會(huì)相關(guān)事項(xiàng)函告如下,熱切期待您的到來(lái)!
時(shí)間:XX月XX日晚7:00
地點(diǎn):XX大學(xué)X校區(qū)大禮堂
XX大學(xué)X學(xué)院
2017年XX月XX日
【范文3】
親愛(ài)的朋友:
四年的時(shí)光里,我們彼此陪伴,可是明日天涯,我們卻要踏上孤獨(dú)的旅途。我們將要穿著寬大的畢業(yè)禮袍在照相機(jī)前站成一排努力笑得漂亮;我們將要度過(guò)一個(gè)忙碌而感傷的暑假;我們將要獨(dú)自面對(duì)未來(lái)的不確定;我們將會(huì)由輕薄浮華的少年身,變成背影狼狽的成年人。
離別不算件大事,我們不要聽(tīng)悲傷的那些花兒,我們不要唱撕心裂肺的離歌,我們要快樂(lè)的歡慶,要知道我們擁有彼此,這是一件多么值得慶祝的事。
等考完試,我們一起過(guò)年吧,一起慶祝我們?cè)谝黄鸬淖詈蟮男履?
在xxx教育中,節(jié)日慶典是很大的一個(gè)特色活動(dòng)。這些活動(dòng)幫助孩子們體驗(yàn)各種節(jié)日及自然界中蘊(yùn)含的意義,感受古老的文化氛圍。又是一年端午節(jié),誠(chéng)摯邀請(qǐng)您和我們一起陪伴孩子共同體驗(yàn)這個(gè)傳統(tǒng)文化節(jié)日的民俗活動(dòng)。
我們將和孩子一起歌唱與端午相關(guān)的童謠、歌曲;
我們將和孩子一起畫(huà)額、佩香包、系五彩繩、洗浴蘭湯;
我們將和孩子一起制做粽子,共進(jìn)晚餐;
我們將共同為孩子祈福,贈(zèng)送節(jié)日禮物!
活動(dòng)時(shí)間與安排:
xxxx年xx月xx日(星期x)下午
15:30-16:00 迎接家長(zhǎng)、孩子起床及準(zhǔn)備工作
16:00-16:30 為孩子祈福:雄黃畫(huà)額、佩香包、系五彩繩、洗浴蘭湯
16:30-17:30 歌唱、制做粽子
17:30-18:30 共進(jìn)晚餐
18:30-18:40 贈(zèng)送節(jié)日禮物
18:40-19:00 清潔、再見(jiàn)圈
溫馨提示:1、歡迎孩子的爺爺、奶奶、外公、外婆與我們共享節(jié)日歡樂(lè);
2、請(qǐng)每個(gè)家庭準(zhǔn)備一些食物,同享節(jié)日晚餐;
3、請(qǐng)?jiān)賯淙缦挛锲罚耗樑?洗浴蘭湯)、水杯、碗、筷、勺;
大學(xué)校慶的邀請(qǐng)函范文一
校慶邀請(qǐng)函(個(gè)人)
尊敬的 :
您好!
崢嶸六秩,桃李五洲。20xx年11月,XXXX大學(xué)將隆重舉行六十周年華誕慶典。
XXXX大學(xué)在曲折中奮進(jìn),在奮進(jìn)中發(fā)展壯大。目前,XXXX大學(xué)已是一所面向全國(guó)招生,以工為主,工管等學(xué)科協(xié)調(diào)發(fā)展的大學(xué)。 砥礪奮進(jìn),春華秋實(shí)。六十年來(lái),學(xué)校辦學(xué)規(guī)模不斷擴(kuò)大,辦學(xué)水平穩(wěn)步提高,綜合實(shí)力日漸雄厚。在經(jīng)濟(jì)發(fā)展速度逐漸加快、國(guó)家對(duì)高精尖科技創(chuàng)新成果和專(zhuān)業(yè)技術(shù)優(yōu)秀人才需求迅速增加的新形勢(shì)下,學(xué)校將繼續(xù)堅(jiān)持科學(xué)發(fā)展、突出特色、推進(jìn)改革創(chuàng)新、擴(kuò)大開(kāi)放合作、加強(qiáng)內(nèi)涵建設(shè),努力建設(shè)成為一所高水平大學(xué)。
滄桑鉛洗,蘊(yùn)積涵育。學(xué)校發(fā)展建設(shè)所取得的成就,飽含著歷代教職工的智慧和心血,凝聚著您長(zhǎng)期以來(lái)對(duì)學(xué)校的熱情關(guān)心和大力支持。六十年校慶是學(xué)校發(fā)展史上的里程碑,是繼往開(kāi)來(lái)、再鑄輝煌的新起點(diǎn)。值此盛典之際,我們謹(jǐn)代表三萬(wàn)余名師生員工熱忱邀請(qǐng)您撥冗出席,共襄盛舉!
專(zhuān)此誠(chéng)邀,敬祈惠允!
(慶典活動(dòng)相關(guān)安排我們將另行告知)
邀請(qǐng)人:XXX
XXXX年XX月XX日
大學(xué)校慶的邀請(qǐng)函范文二
校慶邀請(qǐng)函
悠悠六秩風(fēng)華,漫漫征程如歌。20xx年11月,XXX大學(xué)將迎來(lái)60周年華誕。值此喜迎校慶之際,謹(jǐn)向多年來(lái)一直關(guān)心、支持xxx大學(xué)建設(shè)和發(fā)展的各級(jí)領(lǐng)導(dǎo)、專(zhuān)家學(xué)者、各界朋友、廣大校友致以最誠(chéng)摯的問(wèn)候和最崇高的敬意!
六十周年華誕是xxx大學(xué)發(fā)展史上的重要里程碑,是校友賓朋歡聚的盛大節(jié)日,更是學(xué)校開(kāi)放辦學(xué)改革發(fā)展的一個(gè)新起點(diǎn)。學(xué)校將于校慶期間舉行系列活動(dòng),誠(chéng)邀貴單位領(lǐng)導(dǎo)出席校慶慶典大會(huì)、校慶文藝晚會(huì)及相關(guān)活動(dòng),與全校師生共襄盛典。如蒙應(yīng)允,請(qǐng)于9月10日前以回執(zhí)告知,以便安排接待等事宜;如不能親臨,請(qǐng)將賀電、賀信惠寄校慶辦公室,或電話、傳真告知。
敬頌
時(shí)祺!
xxxx大學(xué)
二一二年五月十日
大學(xué)校慶的邀請(qǐng)函范文三
校慶邀請(qǐng)函
尊敬的海內(nèi)外校友:
你們好!
光陰荏苒,歲月如歌。縱覽今昔,六十載櫛風(fēng)沐雨,六十年春華秋實(shí),今天母校即將迎來(lái)六十周年華誕!這是母校發(fā)展史上一個(gè)重要的里程碑!六十個(gè)春秋桃李芬芳,六十載耕耘碩果累累.內(nèi)蒙古工業(yè)大學(xué)已經(jīng)走過(guò)了半個(gè)多世紀(jì)的輝煌歷程。從1941年的綏遠(yuǎn)省高級(jí)工業(yè)學(xué)校輾轉(zhuǎn)前行至今天的內(nèi)蒙古工業(yè)大學(xué),滄桑砥礪卻始終堅(jiān)持弘揚(yáng)熱愛(ài)內(nèi)蒙古、建設(shè)內(nèi)蒙古精神,秉承民主、團(tuán)結(jié)、勤奮、嚴(yán)謹(jǐn)、求實(shí)、進(jìn)取的優(yōu)良校風(fēng)。六十年來(lái),人文蔚起,才俊輩出,為國(guó)家、社會(huì)的建設(shè)做出了不可估量的貢獻(xiàn)。在校慶將至之時(shí),母校師生感慨良多,激情飛揚(yáng)。我們忘不了一代代校友在母校那同學(xué)少年、風(fēng)華正茂的身影,忘不了你們刻苦研讀,求實(shí)求新的精神,也為你們?cè)诟髯怨ぷ鲘徫簧蠟榻逃聵I(yè)不輟耕耘,無(wú)私奉獻(xiàn)所做出的貢獻(xiàn)和取得的成就感到驕傲。內(nèi)蒙古工業(yè)大學(xué)的發(fā)展也深刻著你們的足跡。你們?yōu)槟感T龉獠剩感R蚰銈兌院馈?風(fēng)雨滄桑半世紀(jì),薪火相傳六十載。母校革故鼎新、與時(shí)俱進(jìn),經(jīng)過(guò)幾代人嘔心瀝血、努力拼搏,學(xué)校已建設(shè)成為一所以工為主,工、理、文、經(jīng)、管、法、教育相結(jié)合,具有本科、碩士和博士完整人才培養(yǎng)體系的特色鮮明的多科性大學(xué)。登高前瞻,任重道遠(yuǎn),春和景明,前程燦爛,母校欣逢盛世,又將迎來(lái)一個(gè)蓬勃發(fā)展的春天!母校的歷史,有你們的心血凝鑄和精神傳承;母校的輝煌,有你們的業(yè)績(jī)輝映和實(shí)力見(jiàn)證;母校的未來(lái),更有賴(lài)于你們的熱心關(guān)注和鼎力支持。雖然你們身處五湖四海,但你們的心卻與母校息息相通,始終關(guān)注和支持母校的建設(shè)和發(fā)展,并以自己良好的素質(zhì)和杰出的業(yè)績(jī)?yōu)槟感T龉馓聿剩瑸槊褡逭衽d和社會(huì)進(jìn)步作出重要貢獻(xiàn)。
憶往昔崢嶸歲月,青春的激蕩,理想的光芒,都從這里起飛,翱翔。萬(wàn)水千山,隔不斷對(duì)母校的掛念;時(shí)光流逝,忘不了對(duì)同窗的情誼。 群賢畢至,盛世如約。方遒揮斥間,韶華競(jìng)逝。昔君往矣,濃情依依植霖樓,鐵骨錚錚機(jī)械廠,撫今追昔時(shí),您定會(huì)思緒萬(wàn)千,激情難抑。同窗好友,共話當(dāng)年,共敘友情,共襄盛舉,暢談別后,展望未來(lái),何等快哉!倘若母校承蒙昔日學(xué)子反哺,得以錦上添花,實(shí)乃母校之無(wú)尚榮光!
讓我們相約內(nèi)蒙古工業(yè)大學(xué),我們深信,母校六十華誕的盛典定會(huì)因您的參加而更加精彩!母校的發(fā)展定會(huì)因你們的支持而更加輝煌!
敬祝
身體安康,事業(yè)輝煌!
小學(xué)同學(xué)邀請(qǐng)函樣本一
親愛(ài)的同學(xué):
還記得我們的小學(xué)時(shí)光嗎?還記得我們?cè)餐瑩碛械臏剀巴隆⒓兦闅q月嗎?
時(shí)光如水,歲月如梭,美麗的校園時(shí)光,恰似流光溢彩的畫(huà)卷,烙在我們的記憶深處。同窗數(shù)載,溫馨如昨,浪漫歲月,依稀如夢(mèng)。一別十年載,荏苒中年,當(dāng)年同窗,今散四海。曾記否?渾江岸邊,寒窗苦讀,不舍晝夜;曾記否?青青校園,風(fēng)華正茂,促膝長(zhǎng)談;曾記否?運(yùn)動(dòng)場(chǎng)上,意氣風(fēng)發(fā),龍騰虎躍。十年前的校園生活是什么情景?同班同學(xué)是何樣面龐?同桌的你又是哪位?曾有多少個(gè)晝夜,常在和煦的陽(yáng)光下希冀;常在絢麗的霞光下幻想;常在瞬時(shí)的閃光下尋思;常在皎白的月光下癡望。希望有一天,我們寒窗學(xué)友,故園重逢,憶舊敘新,通曉別后之情!
十功名塵與土,八千里路云和月。同學(xué),不管你現(xiàn)在成績(jī)的好與壞,不管你當(dāng)時(shí)是怎樣的作弄本人,恒久的同窗之情永遠(yuǎn)都不會(huì)改變。無(wú)論你貧窮還是富有,無(wú)論你閑暇還是繁忙,你終究不會(huì)忘記那課桌、那教室、那操場(chǎng)。因?yàn)橥粋€(gè)夢(mèng)想激勵(lì)著我們,我們?cè)鴵碛泄餐臅r(shí)光。也許,你把這一切都冰封收藏,悄悄期待著重逢的春光。我們和你一樣,多少次夢(mèng)里相聚,多少次心馳神往。讓我們拋開(kāi)喧囂,掙脫煩惱,再次走到一起。在青山秀水之間,在母校的鳥(niǎo)語(yǔ)花香之中,回首往事,暢想未來(lái),交流感悟,相互鼓舞。聽(tīng)聽(tīng)久違的聲音,看看久違的面孔,說(shuō)說(shuō)離別的思緒,盡情享受老同學(xué)相聚的溫馨。讓心棲息,忘卻憂(yōu)慮;說(shuō)說(shuō)真話,談?wù)動(dòng)亚椋屛覀兊耐瑢W(xué)之誼天長(zhǎng)地久!
您一定還記得再過(guò)十年,我們來(lái)相會(huì)這句歌詞,現(xiàn)在這熟悉的歌聲所寄托的熱情與希望即將成為現(xiàn)實(shí)。致此,抱全班同學(xué)思念之情,捧全體同學(xué)共鳴之心,籌備舉行子霞小學(xué)02至01班同學(xué)聚會(huì)。(敬請(qǐng)各位同學(xué)屆時(shí)光臨,把您的別后之情帶來(lái),讓我們共溫同窗之誼!
同學(xué)們,讓我們放飛心中的希望,期待人生的第二次握手,相聚在家鄉(xiāng)。相信你除了欣喜和激動(dòng),還會(huì)有更多的收獲!
祝您及全家身體健康,萬(wàn)事如意!并祝同學(xué)聚會(huì)圓滿(mǎn)成功!
小學(xué)同學(xué)邀請(qǐng)函樣本二
親愛(ài)的同學(xué):同窗多載,溫馨如昨,依然常駐心頭;悲歡歲月,依稀如夢(mèng),但愿記得你我!小學(xué)一別,至今已近7載,當(dāng)年同窗、今各西東。但我們相信:無(wú)論你回到故里,或遠(yuǎn)在他鄉(xiāng);也無(wú)論你多么閑暇,或何等繁忙可是,同窗之情不變。你終究不會(huì)忘記在野雞崗小學(xué)和我
們一起攀談、一起嬉戲也許,你把這一切都冰封收藏,悄悄期待著重逢的春光。我們和你一樣,多少次夢(mèng)里相聚,多少次心馳神往。我們很想約你,約你去往事里走走:聽(tīng)聽(tīng)久違的聲音,看看久違的面孔,說(shuō)說(shuō)離別的思緒盡管我們知道你很想抑制內(nèi)心的期盼與波瀾。但是這樣難得的歡聚,會(huì)因你的缺席而黯然失色,更令我們黯然神傷!就讓你我暫時(shí)拋開(kāi)塵世的喧囂、掙脫身邊的煩惱,走到一起,盡情享受老同學(xué)相聚的溫馨讓心棲息,忘卻憂(yōu)愁;談?wù)動(dòng)亚?回首往事,暢想未來(lái);交流感想,相互勉勵(lì)相信除了欣喜和激動(dòng),你還會(huì)有更多的收獲!你會(huì)來(lái)嗎?我們用一如當(dāng)年熱切而期盼的眼睛,一如當(dāng)年火熱而年輕的心在等待......................................................................活動(dòng)會(huì)讓大家意想不到的意外,活動(dòng)主持人汪丹.余友.李行輝.鮑佳昭.還記得那時(shí)候她在學(xué)校給你們帶來(lái)的快樂(lè)嗎?我相信她當(dāng)主持是最好人
選...............同學(xué)聚會(huì)草案一、活動(dòng)旨回味純真情誼、重溫昔日情懷,延續(xù)同學(xué)友情、加強(qiáng)互助協(xié)作,現(xiàn)由本人(萬(wàn)正才)負(fù)責(zé)成立活動(dòng)小組,組織咱們畢業(yè)之后的同學(xué)聚會(huì)。(組委會(huì)缺少人手,希望有時(shí)間的同學(xué)加入進(jìn)來(lái))
二、時(shí)間定于2017年2月7號(hào)(既大年初五)三、地點(diǎn)共同商定
四、人員安排請(qǐng)第一時(shí)間知悉此消息的同學(xué)相互傳達(dá),應(yīng)該都能來(lái)吧(非常特殊的情況除外),希望大家提前做好安排。
五、組委會(huì)名單
總負(fù)責(zé)人:萬(wàn)正才袁喜鄭學(xué)敏余東寶李行輝王蓉余友汪琴汪丹王通那邊就由鮑佳召.余濤。王榮負(fù)責(zé)張杰那邊就由余強(qiáng).張霞負(fù)責(zé)(組委會(huì)缺少人手,希望有時(shí)間的同學(xué)加入進(jìn)來(lái))
成員:待定
聚會(huì)通知及人員到位聯(lián)系由萬(wàn)正才余東寶龔濤鄭學(xué)敏負(fù)責(zé),其他成員密切配合。六、聚餐費(fèi)用:(1)aa制.(每個(gè)人費(fèi)用待定)
(2)使用原則:避免浪費(fèi)。
(3)活動(dòng)結(jié)束后,費(fèi)用收支情況將具詳細(xì)報(bào)告單在當(dāng)日聚餐會(huì)上公布。
大家好!
光陰荏苒,歲月如梭,逝者如斯夫。轉(zhuǎn)眼間,我們從二甲小學(xué)畢業(yè)已有7年。7年間,我們每個(gè)人所走的路不盡相同,或春風(fēng)得意,或平平淡淡,或艱辛坎坷……但是,無(wú)論人生如何浮沉,也無(wú)論世事如何的變遷,我們都沒(méi)有忘記那份同學(xué)間的真摯友情,多少次夢(mèng)里相聚,多少次心馳神往……
7年間,注定了我們共同的緣份,演繹著我們的激情、夢(mèng)想和事業(yè)。小學(xué)同學(xué)的情懷是一種千金難抵的情緣;是一片真誠(chéng)難求的心花瓣。 相信這份真誠(chéng)的情懷,這瓣帶露的心花會(huì)將你的生活裝點(diǎn)得更加多彩而絢麗。歲月就象用這心花釀成的老酒,珍藏了多年的老酒,一定會(huì)令你我一醉方休!二甲小學(xué)六年發(fā)生的故事,沉淀了7年,依然讓人感動(dòng),需要我們用一生去回憶、去收藏……
萬(wàn)仞青山,千里澗水;青春往事,縈繞心間 。雖天各一方,但嬋娟千里,同學(xué)之間的情誼永遠(yuǎn)是別有一番剪不斷的情愫,別有一種抹不去的思念。今天,為了那份思念,為了那份友誼,我們選擇了相逢。親愛(ài)的同學(xué)們,讓我們暫時(shí)拋開(kāi)塵世的喧囂,掙脫身邊的煩惱,去往事里走走吧,重溫師恩同學(xué)情,聽(tīng)聽(tīng)久違的聲音,看看久違的面孔,溫習(xí)曾經(jīng)的浪漫,盡享相聚的溫馨。來(lái)吧,親愛(ài)的同學(xué),來(lái)參加二甲小學(xué)18班學(xué)聯(lián)誼會(huì),我們期盼你的到來(lái),因?yàn)橛心悖覀儠?huì)更開(kāi)心。
我們期望每個(gè)同學(xué)在收到這份邀請(qǐng)時(shí),盡快和我聯(lián)系,讓我們第一時(shí)間知道你的消息(為方便統(tǒng)計(jì)安排,請(qǐng)您收到郵件后務(wù)必編輯您的名字發(fā)送短信到曹良輝或者曹志強(qiáng)的手機(jī)上!)你的近況,因?yàn)槲覀円哑谂瘟四愫芫煤芫茫肋@些對(duì)于老同學(xué)來(lái)說(shuō)是多么的重要和珍貴! 請(qǐng)?jiān)谑盏奖竞蠹赐ㄟ^(guò)qq和手機(jī)聯(lián)系我們。同時(shí)請(qǐng)積極尋找沒(méi)有地址或地址已經(jīng)變化的同學(xué)并通知他(她)。
我們想:這樣難得的歡聚,會(huì)因你的缺席而黯然失色,更令我們黯然神傷!盼望您早作安排,如期赴約。并請(qǐng)盡快給予回復(fù)。時(shí)空距離讓我們更加珍惜友誼,更加彼此思念!
聯(lián)系人:曹良輝 電話13135355558 qq: 460141061 曹志強(qiáng) (協(xié)助) 電話:15115528008 qq:605974606
本活動(dòng)屬于大家自愿參加!如發(fā)生任何意外,組織人曹良輝(主辦方)、曹志強(qiáng)(協(xié)助方)不負(fù)任何責(zé)任,和不負(fù)任何法律責(zé)任,本活動(dòng)請(qǐng)各位一切聽(tīng)指揮。
活動(dòng)費(fèi)用:暫定300元/1人
活動(dòng)地點(diǎn):郴州
活動(dòng)時(shí)間:2019年10月1號(hào)(暫定)
活動(dòng)流程:到時(shí)在定
請(qǐng)各位同學(xué)聯(lián)系你能聯(lián)系到的人,不能聯(lián)系其他人的、請(qǐng)速度聯(lián)系我們!謝謝!
時(shí)間暫定2019年10月1號(hào) 請(qǐng)速度聯(lián)系我們 謝謝!
邀請(qǐng)函發(fā)放成功與否是學(xué)術(shù)會(huì)議是否成功的關(guān)鍵,即使會(huì)議內(nèi)容再好,請(qǐng)的講者再權(quán)威,如果邀請(qǐng)不到重點(diǎn)客戶(hù),這場(chǎng)會(huì)議就達(dá)不到預(yù)期的效果。
發(fā)邀請(qǐng)函看似是個(gè)很簡(jiǎn)單的事情,似乎只是從代表手里遞到客戶(hù)手里如此簡(jiǎn)單的動(dòng)作。但是我相信絕大多數(shù)人新人第一次遞邀請(qǐng)函不會(huì)很成功,因?yàn)槲乙卜高^(guò)同樣的錯(cuò)誤,一上來(lái)直接就遞上邀請(qǐng)函,說(shuō)“X主任,您好,我們公司在XX時(shí)候有場(chǎng)關(guān)于XX的學(xué)術(shù)會(huì)議,您有時(shí)間嗎?”沒(méi)有探尋客戶(hù)的需求,沒(méi)有放大客戶(hù)的利益,沒(méi)有炒作會(huì)議主題,除非你和主任客情關(guān)系非常好,不然多半就以各種理由推脫,或者就是當(dāng)面答應(yīng),你走后隨手往抽屜里一扔,忘到九霄云外。所以說(shuō)這是失敗的邀請(qǐng)。再說(shuō)了,如今產(chǎn)品學(xué)術(shù)會(huì)議多的使人眼花繚亂,主任即使要參加會(huì)議,他又憑什么就會(huì)參加你們公司的會(huì)呢?筆者以為在處方藥學(xué)術(shù)推廣的營(yíng)銷(xiāo)方式里,如何專(zhuān)業(yè)有效的發(fā)放邀請(qǐng)函是至關(guān)重要第一步。
專(zhuān)業(yè)的邀請(qǐng)函發(fā)放應(yīng)該包括6個(gè)步驟:1、拜訪計(jì)劃2、引導(dǎo)交談3、炒作會(huì)議講者及講課內(nèi)容4、處理異議5、到會(huì)的確認(rèn)6、跟進(jìn)。下面筆者就用一個(gè)實(shí)例來(lái)加以說(shuō)明。背景是XX公司要舉辦一次關(guān)于偏頭痛的治療與預(yù)防以及該公司產(chǎn)品某藥品在偏頭痛中的治療經(jīng)驗(yàn)交流的學(xué)術(shù)會(huì)議,大會(huì)主席是XX醫(yī)院的W教授,邀請(qǐng)的講者是山東XX醫(yī)院A教授,時(shí)間是下周六下午兩點(diǎn)。邀請(qǐng)對(duì)象是市級(jí)某三甲醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科主任。
1,首先是炒作會(huì)議主題,這是需要做訪前計(jì)劃的,這個(gè)計(jì)劃應(yīng)該是圍繞此次的學(xué)術(shù)會(huì)議主題所準(zhǔn)備的,比如我們此次舉辦的是偏頭痛的規(guī)范治療學(xué)術(shù)會(huì)議,所以我們應(yīng)當(dāng)去了解目前醫(yī)生是否有比較系統(tǒng)規(guī)范的治療指南及流程。初步判定他所感興趣的話題,來(lái)炒作會(huì)議主題,讓他看到此次學(xué)術(shù)會(huì)議所能帶給他的利益。這是價(jià)值利益銷(xiāo)售的關(guān)鍵。其次請(qǐng)記住主任的時(shí)間是很寶貴的,所以你要在見(jiàn)面后最短的并且最合適的時(shí)間內(nèi)將自己的拜訪目的表述清楚,以至于不會(huì)讓客戶(hù)覺(jué)得你是在浪費(fèi)他的時(shí)間。
“主任,您好!我是XX公司的小張,負(fù)責(zé)XX產(chǎn)品的,不知道您還有印象沒(méi)?”
“哦,知道的,你有什么事嗎?”
“我剛看門(mén)診上患者還挺多的,偏頭痛患者占了不少。您看您是這方面的專(zhuān)家,您一定在偏頭痛的治療上有自己很多經(jīng)驗(yàn),我今天是想就偏頭痛的規(guī)范治療和您做個(gè)探討,耽誤您5分鐘您看可以嗎?”
“偏頭痛是吧?行,你坐。”
2,因?yàn)檫@里所用的是一個(gè)相關(guān)疾病問(wèn)題所做的開(kāi)場(chǎng)白,所以80%是可以得到允許的,接著就要開(kāi)始引導(dǎo)交談,探尋。我們可以運(yùn)用引導(dǎo)交談探尋技巧識(shí)別客戶(hù)的需求,并通過(guò)開(kāi)放式及封閉式提問(wèn)漏斗般的得出真正的需求,并放大及確認(rèn)引起他的重視。
“謝謝主任,您所遇到的偏頭痛的患者應(yīng)該是不計(jì)其數(shù)了吧,那么偏頭痛對(duì)患者的生活,家庭造成了怎樣的困擾呢?”
“偏頭痛是一種常見(jiàn)病,多發(fā)病,對(duì)社會(huì)經(jīng)濟(jì)和患者生活都造成比較嚴(yán)重的影響,發(fā)病輕重不一啊,輕則影響正常工作生活,重則生活不能自理,并且最近兩年確實(shí)有調(diào)查說(shuō)偏頭痛患者在逐漸增加,可能跟環(huán)境和壓力也有很大關(guān)系。”
“那偏頭痛就患者本身而言會(huì)導(dǎo)致什么樣的后果呢?”
“那并發(fā)癥多哦,像什么小腦梗死,腦白質(zhì)病變,并且還有增加發(fā)生腦卒中及不穩(wěn)定心絞痛的風(fēng)險(xiǎn)。”
“也就是說(shuō)偏頭痛不僅僅只是頭痛,而是可以帶來(lái)那么多不堪設(shè)想的隱患及后果,是嗎?“
“確實(shí)是這樣的。”
“如果有很好的治療方案為患者進(jìn)行系統(tǒng)的規(guī)范的治療,能夠緩解乃至改善癥狀,那么對(duì)患者來(lái)說(shuō)可是對(duì)工作,生活,家庭都有了很大的幫助。那么您在這方面是專(zhuān)家,您是如何治療偏頭痛的呢?”
“偏頭痛的治愈確實(shí)能為患者帶來(lái)很大的變化,但是現(xiàn)在并沒(méi)有一個(gè)系統(tǒng)的規(guī)范治療方案,大家都是經(jīng)驗(yàn)性治療,根據(jù)偏頭痛的類(lèi)型啊,癥狀啊進(jìn)行對(duì)癥治療,也很復(fù)雜,所以治愈率也不是很高。”
“也就是說(shuō),我們現(xiàn)在是缺乏一套規(guī)范的系統(tǒng)的治療方案,如果有的話是對(duì)您和患者來(lái)說(shuō)是能幫助解決當(dāng)前很多問(wèn)題的,是非常有價(jià)值的,對(duì)嗎?”
“是的。”
3,上面已經(jīng)確認(rèn)出客戶(hù)的真正需求,“一個(gè)系統(tǒng)的規(guī)范的治療偏頭痛方案”。這時(shí)候時(shí)機(jī)成熟,我們就可以立馬亮劍----亮出我們能滿(mǎn)足他需求的學(xué)術(shù)會(huì)議的邀請(qǐng)函。
“像您剛說(shuō)到的這個(gè)問(wèn)題,其他醫(yī)院的老師確實(shí)也都存在,也令很多老師真的是頭疼。我們?yōu)榱送苿?dòng)湖北地區(qū)在治療偏頭痛領(lǐng)域發(fā)展,更好的加強(qiáng)學(xué)術(shù)交流,所以特別邀請(qǐng)了XX醫(yī)院的A教授來(lái)做偏頭痛的報(bào)告,交流偏頭痛的診斷與防治專(zhuān)家共識(shí),這是會(huì)議邀請(qǐng)函,剛好能為您在偏頭痛治療上帶來(lái)一些新的學(xué)術(shù)信息。”
“哦,邀請(qǐng)的A教授是吧?”
“是的,A教授是中華醫(yī)學(xué)會(huì)神經(jīng)內(nèi)科專(zhuān)業(yè)委員會(huì)的副主任委員,曾經(jīng)還在美國(guó)XXX醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科工作過(guò),是《中華內(nèi)科雜志》《臨床神經(jīng)病學(xué)雜志》等多本醫(yī)學(xué)雜志的編委,也主編了多本著作。您應(yīng)該知道他吧?”
4,當(dāng)你做好了鋪墊工作已經(jīng)遞上了邀請(qǐng)函時(shí),客戶(hù)多半會(huì)拋出異議,這個(gè)異議可能是客戶(hù)真實(shí)擔(dān)心的問(wèn)題,也可能只是拒絕的托辭,所以我們應(yīng)該按照處理異議的4步法則來(lái)進(jìn)行處理。澄清--回答--核實(shí)--延續(xù)
“恩,A教授我知道,看過(guò)他的一些文章,還不錯(cuò),是什么時(shí)候?”
“是的,A教授發(fā)表的很多關(guān)于神經(jīng)內(nèi)科學(xué)的文章都得了不少獎(jiǎng)項(xiàng)。會(huì)議時(shí)間是下周六下午2點(diǎn),因?yàn)榭紤]到各位老師周六一般下午有時(shí)間,所以特意安排在這個(gè)時(shí)候,并且提前一周來(lái)邀請(qǐng),您也好安排時(shí)間。”
“那好吧,到時(shí)候有時(shí)間沒(méi)有別的安排我會(huì)去的。”
5,其實(shí)到這里事情還沒(méi)有敲定,他并沒(méi)有和你達(dá)成協(xié)議,只是敷衍的說(shuō)沒(méi)別的安排是會(huì)去的。所以接下來(lái)我們的到會(huì)確認(rèn)是非常重要的。
“不知道您對(duì)會(huì)議還有沒(méi)有什么其他的擔(dān)憂(yōu)?”
“A教授的會(huì)以前我沒(méi)有參加過(guò),文章寫(xiě)的可以,但不知道講的怎么樣,本來(lái)這段時(shí)間醫(yī)院就比較忙!”
“我理解您的擔(dān)心,畢竟您的時(shí)間是很寶貴的,如果在一場(chǎng)毫無(wú)意義的會(huì)議上浪費(fèi)幾個(gè)小時(shí)是非常不值得的。而且主任您放心,公司特別注重此次會(huì)議,我們還特別邀請(qǐng)了湖北XX醫(yī)院的W教授做大會(huì)主席,我們?nèi)パ?qǐng)的時(shí)候,W教授聽(tīng)說(shuō)是請(qǐng)A教授來(lái)講,立馬就答應(yīng)了,因?yàn)樗?tīng)過(guò)A教授的課,講的非常好。加上我們所邀請(qǐng)的嘉賓全部是湖北地區(qū)神經(jīng)內(nèi)科的主任專(zhuān)家,是絕對(duì)保證會(huì)議質(zhì)量的。您在神經(jīng)內(nèi)科界也是很有聲譽(yù)的,您也可以將您在這方面的治療經(jīng)驗(yàn)分享給其他老師。所以說(shuō)這次會(huì)議對(duì)您和對(duì)其他專(zhuān)家都是很有價(jià)值的。”
“下周六下午2點(diǎn)半是吧?好的。我會(huì)去的。”
“那您看我下周五早上再給您打個(gè)電話提醒下,怕您到時(shí)候事情一多給忘了時(shí)間,周六中午1點(diǎn)30我到您家樓下接您。您看可以嗎?”
“那行,你直接到醫(yī)院來(lái)接我吧,我早上還在醫(yī)院上班。”
“好的,那我就不耽誤您了,主任再見(jiàn)!”
“再見(jiàn)!”
親愛(ài)的同學(xué):
彈指一揮間,一晃畢業(yè)多年。
環(huán)肥燕瘦者,如今為人妻為人母;英俊倜儻者,如今為人夫?yàn)槿烁浮O肽慷靡幌庐?dāng)初的他(她)么?
煽情少表,牛叉少吹,言歸正傳:
茲定于某日舉行同學(xué)聚會(huì),萬(wàn)望還在乎四年同窗情義的你,積極參加。
地點(diǎn):你罵千遍萬(wàn)遍嫌少,人罵半句一句嫌多的母校!
為了保證將此次聚會(huì)搞成安定團(tuán)結(jié)和諧的盛會(huì),特要求如下:
第一,為方便交流同學(xué)感情,避免曬幸福秀恩愛(ài),原則上,單人參加,不歡迎家屬列席。
【友情提醒】小三、小白、前妻、前夫、情人、小蜜及其他中國(guó)法律不予認(rèn)可的親密關(guān)系人,不在家屬范疇。
第二,只敘同窗情,取締攀比炫富之風(fēng)。
1、嚴(yán)禁顯耀房產(chǎn)、珠寶及干爹、干娘。.
2、嚴(yán)禁駕駛豪車(chē),倘若駕駛勞斯萊斯、蘭博基尼、奔馳、寶馬及同等車(chē)型來(lái)會(huì)者,有承擔(dān)本次聚會(huì)所有費(fèi)用的義務(wù),并為他人提供往返路途之費(fèi)用。
3、嚴(yán)禁佩戴名表,單價(jià)低于30000的不在名表之列。
4、嚴(yán)禁配用Gucci、LV、Chanel等名包。
5、嚴(yán)禁當(dāng)著同學(xué)面對(duì)屬下、秘書(shū)、乙方及家屬大聲電話呵斥,太有炫權(quán)之意。
第三,以一顆平常心參加同學(xué)會(huì),若是懷有“沒(méi)事開(kāi)開(kāi)同學(xué)會(huì),拆散一對(duì)是一對(duì)”之惡俗念頭者,謹(jǐn)慎參會(huì)。本組織者有保障家庭和諧穩(wěn)定之義務(wù),倘若發(fā)現(xiàn),及時(shí)糾偏,不留情面。
若是,a.保密工作到位,不被其他同學(xué)察覺(jué);b.其他同學(xué)視而不見(jiàn);c.聚會(huì)結(jié)束后,單獨(dú)交流者,均不在此列。
第四,費(fèi)用:兩天,暫定1000/人。最終核算,多退少補(bǔ)。
為保證費(fèi)用的安全、放心,實(shí)行“物錢(qián)分開(kāi)”原則,本組織者負(fù)責(zé)聯(lián)系住宿、吃飯、娛樂(lè)等事項(xiàng),另選一名信賴(lài)之同學(xué)(財(cái)務(wù))負(fù)責(zé)埋單事宜。
務(wù)必請(qǐng)同學(xué)們參會(huì)前將費(fèi)用轉(zhuǎn)賬至該財(cái)務(wù),憑匯款通知單或是網(wǎng)上匯款截圖打印件參會(huì)!
煩請(qǐng)財(cái)務(wù)務(wù)必仔細(xì)認(rèn)真,做好記錄,最后公布決算。
第五,各自做好安全工作。
包括人身安全、財(cái)物安全。小心駕駛,安全第一。嚴(yán)禁酒后駕駛。住宿注意防火防災(zāi)防盜。
【摘要】 【目的】探討尿毒清膠囊含藥血清對(duì)人近端腎小管上皮細(xì)胞(HK2)增殖與轉(zhuǎn)分化的影響。【方法】將體外培養(yǎng)的HK2細(xì)胞分為6組:正常對(duì)照組,體積分?jǐn)?shù)5%、10%尿毒癥毒素血清組(簡(jiǎn)稱(chēng)尿毒癥血清組),體積分?jǐn)?shù)5%、10%尿毒清膠囊含藥血清組(簡(jiǎn)稱(chēng)含藥血清組),蒙諾組(濃度為10-6 mmol/L)。采用四氮唑藍(lán)(MTT)法檢測(cè)細(xì)胞增殖,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞周期和α平滑肌肌動(dòng)蛋白(αSMA)陽(yáng)性細(xì)胞百分率。【結(jié)果】5%、10%尿毒癥血清組光吸收值(D)顯著高于正常對(duì)照組(均P
【關(guān)鍵詞】 尿毒清膠囊/藥理學(xué);腎纖維化/中藥療法;血清藥理學(xué);細(xì)胞培養(yǎng)
腎纖維化是各種腎臟疾病慢性進(jìn)展到腎功能衰竭的共同病理機(jī)制,而以腎間質(zhì)細(xì)胞外基質(zhì)沉積為主要表現(xiàn)的腎間質(zhì)纖維化過(guò)程是影響腎功能的重要因素[1]。腎小管上皮細(xì)胞增殖、轉(zhuǎn)分化在腎纖維化形成中占重要地位。尿毒癥毒素血清能促進(jìn)腎小管上皮細(xì)胞增殖及轉(zhuǎn)分化已得到證實(shí)[2]。益氣升清、通腑泄?jié)岱ńM方尿毒清膠囊對(duì)5/6腎切除所致腎功能衰竭大鼠腎組織膠原沉積、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGFβ1)表達(dá)具有抑制作用[3],但對(duì)人腎間質(zhì)纖維化中起重要作用的腎小管上皮細(xì)胞(HK2)增殖、轉(zhuǎn)分化的作用尚未明了。本研究觀察正常人的尿毒清膠囊含藥血清對(duì)尿毒癥毒素血清刺激的HK2增殖、轉(zhuǎn)分化的影響,現(xiàn)將研究結(jié)果報(bào)道如下。
1材料與方法
11主要試劑與儀器RPMI1640培養(yǎng)基為美國(guó)Gibco公司產(chǎn)品,新生胎牛血清為杭州四季青生物材料工程有限公司產(chǎn)品,四氮唑藍(lán)(MTT)、二甲基亞砜(DMSO)、25 g/L胰蛋白酶、碘化丙啶(PI)均為美國(guó)Sigma公司產(chǎn)品,蒙諾(福辛普利)原藥粉為美國(guó)施貴寶醫(yī)藥公司產(chǎn)品,鼠抗人α平滑肌肌動(dòng)蛋白(αSMA)一抗IgG2a、熒光素FITC標(biāo)記山羊抗鼠IgG二抗均為德國(guó)Calbiochem 公司產(chǎn)品。WZEF型凈化工作臺(tái)為蘇州凈化設(shè)備廠產(chǎn)品,HEPA CLASS100 3131型CO2培養(yǎng)箱為美國(guó)Termo Electron Corporation公司產(chǎn)品,ALTRA型流式細(xì)胞儀為美國(guó)BECKMAN COULTER公司產(chǎn)品,722型紫外分光光度計(jì)為上海光學(xué)儀器廠產(chǎn)品,TS100型倒置顯微鏡為日本Nikon公司產(chǎn)品,DG3022A型酶標(biāo)儀為美國(guó)BIOMETRA產(chǎn)品。
12培養(yǎng)條件采用RPMI1640培養(yǎng)基,臨用前加體積分?jǐn)?shù)20%新生牛血清、100 U/mL青霉素、100 μg/mL鏈霉素。消化液為25 g/L胰蛋白酶。人近端腎小管上皮細(xì)胞(HK2)由中山大學(xué)醫(yī)學(xué)院腎臟病研究所余學(xué)清教授惠贈(zèng)。
13血清制備
131尿毒癥毒素血清(簡(jiǎn)稱(chēng)尿毒癥血清)收集血清肌酐在707~1 685 μmol/L之間,近期內(nèi)無(wú)明顯全身及局部感染,未接受過(guò)血液透析治療的患者血清40份,清晨空腹無(wú)菌靜脈采血5 mL,室溫靜置2 h,無(wú)菌條件下將全部血清混勻、滅活、抽濾分裝,-20 ℃保存。同期收集正常人血清,收集方法同上。
132尿毒清膠囊含藥血清(簡(jiǎn)稱(chēng)含藥血清)3名正常志愿者口服治療劑量尿毒清膠囊5 d后、最后1次服藥后1 h均抽血30 mL,分離血清,并將含藥血清置于56℃水浴箱中30 min滅活、抽濾分裝,-20 ℃保存。
14實(shí)驗(yàn)分組所有血清濃度均是體積分?jǐn)?shù)。為保持培養(yǎng)基中血清濃度均為20%,及根據(jù)預(yù)試驗(yàn)和文獻(xiàn)[2],設(shè)定尿毒癥血清和尿毒清膠囊含藥血清體積分?jǐn)?shù)分別為5%和10%。實(shí)驗(yàn)分6組:(1)正常對(duì)照組: 10%胎牛血清加10%正常人血清加80 % RPMI1640培養(yǎng)液。(2)5%尿毒癥血清組: 10%胎牛血清加5%尿毒癥血清加5%正常人血清和80% RPMI1640培養(yǎng)液。(3)10%尿毒癥血清組:10%胎牛血清加10%尿毒癥血清和80% RPMI1640培養(yǎng)液。(4)5%尿毒清含藥血清組:10%胎牛血清加5%尿毒癥血清加5%含藥血清和80% RPMI1640培養(yǎng)液。(5)蒙諾組:10%胎牛血清加5%尿毒癥血清加5%正常人血清加蒙諾(濃度為10-6mmol/L)和80% RPMI1640培養(yǎng)液。(6)10%尿毒清含藥血清組:5%胎牛血清加5%尿毒癥血清加10%含藥血清和80% RPMI1640培養(yǎng)液。
15人近端HK2增殖的檢測(cè)[2]常規(guī)消化、收集HK2細(xì)胞,每孔按1×104個(gè)/mL接種于96孔培養(yǎng)板,置37℃、體積分?jǐn)?shù)5%CO2培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)24 h,換成無(wú)血清培養(yǎng)液培養(yǎng)24 h使細(xì)胞處于靜止期(G0期),分別接種于6組培養(yǎng)液中培養(yǎng),每種濃度設(shè)3個(gè)復(fù)孔,實(shí)驗(yàn)重復(fù)2次。繼續(xù)培養(yǎng)48 h,每孔加20 μL(5 g/L)MTT溶液孵育4 h后棄除培養(yǎng)液,每孔滴加DMSO 100 μL,振蕩待紫藍(lán)色結(jié)晶完全溶解,在490 nm波長(zhǎng)處,用酶標(biāo)儀檢測(cè)各孔光吸收(D) 值。
16流式細(xì)胞術(shù)(FCM)檢測(cè)細(xì)胞周期及αSMA陽(yáng)性細(xì)胞百分率各組(每組3瓶,實(shí)驗(yàn)重復(fù)2次)培養(yǎng)的細(xì)胞,繼續(xù)培養(yǎng)48 h后,消化、收集細(xì)胞,每管細(xì)胞數(shù)為1×105個(gè)/mL,冷磷酸鹽緩沖液(PBS)洗2次,體積分?jǐn)?shù)75%冰乙醇固定,搖勻、吹打,4℃保存過(guò)夜,用于細(xì)胞周期檢測(cè)。檢測(cè)時(shí)離心,棄乙醇,PBS洗1次,加500 μL PI染液(含50 mg/L PI、1 g/L TritonX100、100 mg/L 的Rnase A),4 ℃避光染色30 min,采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)。收集培養(yǎng)的細(xì)胞,用20 g/ L多聚甲醛固定20 min,1 000 r/min,離心5 min,去上清,加5 μL一抗αSMA小鼠抗人單克隆抗體1∶100, 37 ℃孵育30 min ,PBS沖洗,1 000 r/min,離心5 min,滴加FITC羊抗鼠IgG二抗,濃度1∶100,37℃避光孵育30 min,PBS沖洗后,每管加PBS 05 mL上機(jī)。FCM在氫激光光源,激發(fā)波長(zhǎng)為488 nm,變異系數(shù)小于2%條件下測(cè)試分析,每管分析105個(gè)細(xì)胞,聯(lián)機(jī)專(zhuān)用軟件處理,計(jì)算出各時(shí)相細(xì)胞的比例、細(xì)胞增殖指數(shù)[4] 。增殖指數(shù)IP=[(pS+pG2/M) /(pG0/G1+pS+pG2/M)]×100%。 注:pS指細(xì)胞周期的DNA合成期細(xì)胞數(shù),pG2/M指DNA合成后期至有絲分裂期的細(xì)胞數(shù),pG0/G1指靜止期至DNA合成前期的細(xì)胞數(shù),從流式細(xì)胞儀中直接讀出的是各期細(xì)胞占總細(xì)胞(pG0/G1+pS+pG2/M)的百分比]及αSMA陽(yáng)性細(xì)胞百分率。PBS代替一抗或二抗作為陰性對(duì)照。
17統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS 115軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì),采用單因素方差分析(OneWay ANOVA)進(jìn)行處理,每?jī)蓚€(gè)均數(shù)間的比較根據(jù)方差齊性檢驗(yàn)(HomogeneityofVariance),當(dāng)總體方差齊時(shí)選擇Bonferroni法,當(dāng)方差不齊時(shí)選擇Tamhanes T 2法。
2結(jié)果
21尿毒清膠囊含藥血清對(duì)人HK2周期和增殖的影響
211流式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)果表1結(jié)果顯示,5%、10%尿毒癥血清組G0/G1期細(xì)胞百分?jǐn)?shù)顯著降低(均P
212MTT法檢測(cè)結(jié)果表2結(jié)果顯示,5%尿毒癥血清組、10%尿毒癥血清組D值均顯著高于正常對(duì)照組(P005)。5%含藥血清組D值顯著低于10%尿毒癥血清組(P
22尿毒清膠囊含藥血清對(duì)HK2 αSMA陽(yáng)性細(xì)胞百分率的影響表3結(jié)果顯示,5%、10%尿毒癥血清組HK2αSMA陽(yáng)性細(xì)胞百分率顯著高于正常對(duì)照組(P005)。5%含藥血清組與5%尿毒癥血清組比較差異無(wú)顯著性意義(P>005),但與10%尿毒癥血清組比較差異有顯著性意義(P
3討論
在纖維化的腎臟中,正常功能的腎小管上皮細(xì)胞明顯減少或消失,一方面是由于在各種損傷因子的作用下,腎小管上皮細(xì)胞發(fā)生壞死或凋亡,另一方面是因它可能會(huì)發(fā)生適應(yīng)性轉(zhuǎn)化。轉(zhuǎn)分化(epithelial mesenchymal transition, EMT)可提高成纖維細(xì)胞或肌成纖維細(xì)胞的活性,促使其產(chǎn)生大量細(xì)胞外基質(zhì),從而促進(jìn)腎間質(zhì)的纖維化。在大鼠腎小管間質(zhì)纖維化研究中發(fā)現(xiàn),損傷的腎小管上皮細(xì)胞處于萎縮和再生狀態(tài),隨著病變的進(jìn)展,腎小管上皮細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)αSMA和波形蛋白(vimentin)的陽(yáng)性表達(dá),而αSMA是肌成纖維細(xì)胞的標(biāo)志性蛋白。透射電鏡下可見(jiàn)腎小管上皮細(xì)胞內(nèi)原纖維出現(xiàn)以及突破基底膜游離到腎間質(zhì)中,并與間質(zhì)細(xì)胞、膠原纖維混合存在,說(shuō)明在大鼠腎間質(zhì)纖維化的發(fā)生過(guò)程中,受損并處于再生狀態(tài)的腎小管上皮細(xì)胞可向肌成纖維細(xì)胞等間胚葉細(xì)胞轉(zhuǎn)化并產(chǎn)生細(xì)胞外基質(zhì)[5]。αSMA陽(yáng)性的肌成纖維細(xì)胞數(shù)目與腎小管間質(zhì)纖維化嚴(yán)重程度之間存在顯著正相關(guān),它是腎間質(zhì)纖維化過(guò)程中細(xì)胞外基質(zhì)沉積的最主要來(lái)源,其數(shù)量是判斷疾病預(yù)后的重要指標(biāo)[6]。增生活化的腎小管上皮細(xì)胞及其轉(zhuǎn)分化而來(lái)的肌成纖維細(xì)胞可以產(chǎn)生血管活性肽如內(nèi)皮素1(ET1)、血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)以及表達(dá)細(xì)胞因子如轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β(TGFβ1)、結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(CTGF)等,加速細(xì)胞的增殖和分化,進(jìn)而加速腎纖維化的進(jìn)程。由此可見(jiàn),異常增殖和轉(zhuǎn)分化的腎小管上皮細(xì)胞一方面促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)的合成直接參與腎間質(zhì)炎癥及纖維化過(guò)程,另一方面可通過(guò)分泌多種細(xì)胞因子和生長(zhǎng)因子,促進(jìn)腎間質(zhì)固有細(xì)胞增殖,從而加速腎纖維化進(jìn)展。已有研究證明,尿毒癥毒素不僅對(duì)腎小管間質(zhì)的損傷有加劇作用[7],而且對(duì)體外培養(yǎng)的人腎小管上皮細(xì)胞增殖和轉(zhuǎn)分化有促進(jìn)作用[2]。本研究也證實(shí),尿毒癥毒素血清能促進(jìn)HK2細(xì)胞增殖并轉(zhuǎn)分化為αSMA陽(yáng)性的肌成纖維細(xì)胞,雖然較低濃度(5%)的尿毒清膠囊人含藥血清能部分抑制細(xì)胞增殖,對(duì)細(xì)胞轉(zhuǎn)分化的抑制作用也不明顯,但較高濃度(10%)的含藥血清則對(duì)這兩方面的作用均有抑制作用。結(jié)合前期研究[3],說(shuō)明中藥制劑尿毒清膠囊抗腎小管間質(zhì)纖維化作用機(jī)理可能有兩個(gè)方面:(1)通過(guò)通腑泄?jié)幔瑥哪c道排泄尿毒癥患者的毒素而降低患者血液中的尿毒素,進(jìn)而減輕尿毒素的促腎小管上皮細(xì)胞增殖和轉(zhuǎn)分化產(chǎn)生的間接的抗腎纖維化作用[8]。(2)可能是通過(guò)直接抑制腎小管上皮細(xì)胞的增殖和轉(zhuǎn)分化而達(dá)到抗腎纖維化作用,確切機(jī)制有待進(jìn)一步研究證實(shí)。
血管緊張素Ⅱ的促腎纖維化作用和血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑(ACEI)、血管緊張素受體1(AT1)拮抗劑(ARB)的抗腎纖維化作用已經(jīng)得到廣泛證實(shí)和認(rèn)同[9-11]。本研究也證明了ACEI類(lèi)藥物蒙諾(福辛普利)對(duì)尿毒癥毒素所致的人腎小管上皮細(xì)胞的增殖和轉(zhuǎn)分化抑制作用,而中藥尿毒清含藥血清具有與蒙諾同等程度的抑制作用,說(shuō)明在抑制腎纖維化作用方面,中藥尿毒清膠囊同ACEI類(lèi)藥作用相近。由于中藥的多方面綜合作用,且ACEI類(lèi)藥在腎功能?chē)?yán)重受損時(shí)使用受限,故中藥尿毒清膠囊具有進(jìn)一步研究和臨床應(yīng)用價(jià)值。
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