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        公務(wù)員期刊網(wǎng) 精選范文 神秘生物范文

        神秘生物精選(九篇)

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        神秘生物

        第1篇:神秘生物范文

        晴好不容易楚楚可憐地哀求他讓她說話..誰叫晴這么沒頭腦呢?

        路上,他一直沒有說一句話,只是默默地帶著在空中漂浮,不知道是速度太快還是怎么的,晴感覺跟沒動似的.

        四周,已從白茫茫的一片變得色彩豐富起來,行走、漂浮、飛翔、蠕動的生物越來越多,似乎快到這個奇怪的地方的聚焦點。

        這本來就是個奇怪的地方,有著奇怪的生物,奇怪的魔法師,更奇怪的是,這些生物們都獨來獨往,感覺,像是誰都不認識誰。

        “到了?!?/p>

        一個急剎,晴簌地沖了出去。

        “該死!”晴不會魔法,她沖到點定住,就從空中掉了下,還好,這不是那個世界,晴沒有感覺到痛。

        “啊——————————”

        一聲銳利的尖叫聲響徹這個奇怪的地方。

        晴捂住耳朵,朝“地面”...

        天啊,這是地面嗎?圓不溜湫的,一件花格子裙,一頭假發(fā)似的卷發(fā),脹得鼓鼓的小腿,縮腳的小紅細高根鞋(穿這鞋怎么走路?!它肯定踩爛了幾十雙,不!起碼幾千雙這樣的鞋?。?,這是人,一個胖婦女!不!這不是人,胖婦女生物! 原來,晴是掉在了這個胖婦女生物的身上才不痛的?。?/p>

        霎時,剛才還在自顧自地行走、漂浮、飛翔、蠕動的生物全部圍了過來。

        “它是誰?”(晴:我是人,應(yīng)該用“她”,而不是“它”,笨蛋生物?。?為什么它們都不注意自己的同類,而關(guān)注晴?

        “挖卡卡,它好奇怪哦!”(晴:裝嫩!)

        “這,這..它,她是人,人類!?。 保ㄇ纾喝祟惷?,我就是人類有什么好稀奇的,比你們這些笨蛋生物高級得多?。。?/p>

        “人類???!人類!人類幾百年前毀了我們家族,我們要報仇??!”(晴:我們?nèi)祟悮Я诉@些笨蛋生物的家族?歷史書上沒講啊?。?/p>

        “對!我們要報仇!報仇!”

        “報仇!”

        晴:無語ing..

        “不要怕,”(該死,誰怕了?。┮恢皇执钌狭饲绲募绨?,“正如你所想,它們的確是笨蛋,而且,它們說的話絕對不會付諸行動,第二天它們什么都忘記了?!?/p>

        “你不是啊。”

        “不,我以前是,但從我降世以來,身體里就像存放了兩個生物,我身體里另外那個生物它說的話我總是會無條件執(zhí)行,執(zhí)行的時候沒有任何知覺,

        “有一天,我殺了這個地方一個生物,從此,我很害怕,雖然什么事它們第二天都會忘記,我想我也會忘記,就那次第二天,我沒有忘記,我依然記得我昨天殺了它,

        “以后,我身體里的那個生物再沒給我任務(wù),而我走了很遠,一直走到這個地方的盡頭,

        第2篇:神秘生物范文

        影片中有兩個年齡、外貌完全相同的青年女性─一個波蘭人、一個法國人,她們都叫維洛尼卡,生活習性完全一致:她們都愛好音樂、擅長歌唱,有著相同的舉止和習慣,并且都有家族遺傳性心臟病。她們之間時空揆隔,沒有血緣關(guān)系,沒有來往接觸,但她們彼此能感覺到對方的存在。當波蘭的維洛尼卡死去時,法國的維洛尼卡感到悲傷,似乎自己正在被埋葬。影片中有許多細節(jié)表現(xiàn)兩人間的神秘聯(lián)系,她們都喜歡隨身攜帶一個玻璃球,法國的維洛尼卡在夢中,球體竟然映出了已經(jīng)逝去的波蘭的維洛尼卡離家時同樣的景象。

        情節(jié)、人物的神秘性是許多影片用來吸引人的敘事因素,但《維洛尼卡的雙重生活》并不“聳人聽聞”,其敘事風格是散文化的,淡淡的帶著些許憂傷,總體格調(diào)則呈現(xiàn)著溫馨的暖意,這是由其影調(diào)風格帶來的。全片都在使用金黃色濾鏡片,所有的場景,包括波蘭的維洛尼卡的葬禮都籠罩在一片暖色調(diào)中。這種主觀性的光效很大程度上凸顯出基耶斯洛夫斯基的影片立意,他不是要簡單地敘說一個神秘的故事,而是要通過這個極致化的、帶有寓言色彩的故事,讓觀眾去參與一個發(fā)現(xiàn)。影片的片頭是兩個嬰孩時期的維洛尼卡分別在母親的引領(lǐng)下,或仰望浩瀚星空,或俯視一枚春天的新葉,于是一個認識世界和生命的過程開始了。不僅是這部影片,幾乎基耶斯洛夫斯基的所有影片都在引領(lǐng)觀眾感悟生命、體察人生,他的藝術(shù)中洋溢著人類生命的靈光,并將其罩上了一層神秘的、有時甚至近乎神圣的色彩。所有影片中的人物都是彼此糾葛的,由此構(gòu)成戲劇性情節(jié);但基耶斯洛夫斯基影片中的人物通常不是依靠情節(jié)設(shè)置,而是通過生命中難以言說的神秘聯(lián)系走到了一起。

        基耶斯洛夫斯基這樣獨特結(jié)構(gòu)影片的方式表現(xiàn)出強大的人文關(guān)懷,他是很久以來人們所期待的藝術(shù)家,他的影片充盈著日漸失落的人類最寶貴的內(nèi)涵:情感的慰藉、人性的關(guān)懷、愛的啟迪和對世界與未來的巨大悲憫??墒?,面對殘忍的現(xiàn)實邏輯,這種人性關(guān)注的聲音常常顯得弱小無力,常常被淹沒在更為猙獰強悍的“血雨腥風”中。1994年的戛納電影節(jié)上,基耶斯洛夫斯基帶來了試圖以“愛”拯救世界的《紅色》,他如同熱情莽撞、孤軍奮戰(zhàn)的堂吉訶德,固執(zhí)地以信仰的力量改變世界的冷漠狀態(tài)。而美國的“神奇小子”塔倫蒂諾帶來了槍彈橫飛、鮮血淋漓的《低級小說》,那是一個人性迷失、無愛的暴力世界。結(jié)果,后者取得了勝利,人們承認了殘忍的人性法則,向暴力伸出了棕櫚枝。而基耶斯洛夫斯基也就此引退,《紅色》成為他為人類在世紀末進行的最后絕唱。

        撰寫這篇文章時,內(nèi)心充滿憂傷,1996年3月13日是一個令世界影壇黯然失色的日子,基耶斯洛夫斯基猝然離世。他去世后所留下的缺憾是無法彌補的,基耶斯洛夫斯基對被痛苦現(xiàn)實困擾的人類表現(xiàn)出了真誠的眷顧和脈脈深情的憐惜,并且嘗試以藝術(shù)的溫情彌合心靈的創(chuàng)痛,他為人類構(gòu)筑了一個可以舒展疲憊身心、寄托靈魂的精神家園。今后的日子,我們還會遇到這樣的大師嗎?

        基耶斯洛夫斯基1941年6月27日出生于波蘭,1969年畢業(yè)于波蘭洛茲電影學院,1970年至1978年在華沙紀錄片廠任導演,先后拍攝了《工廠》、《小孩》、《初戀》、《生活故事》、《醫(yī)院》、《年齡不同的七女子》等13部影片。1975年,他執(zhí)導了首部劇情片《人員》。此后,又拍了《疤》、《影迷》、《無止無休》等影片。使他取得國際聲譽的影片是1987至1989年間為波蘭電視臺拍攝的10集系列故事片《十誡》,其中“關(guān)于殺人的短片”和“關(guān)于愛情的短片”作為電影單片發(fā)行,前者獲得1987年戛納電影節(jié)評委會獎和歐洲影展最佳影片獎。

        1991年的《維洛尼卡的雙重生活》是在法國拍攝的,影片中維洛尼卡的扮演者伊萊娜?雅各布作為一名歐洲演員,與眩目喧鬧的好萊塢明星形成鮮明對比,含蓄的美中有種恒久的氣息,在噪雜矯飾的都市熏染下仍保留著難得的寧靜、恬淡,不能簡單地用類似“純潔”、“善良”、“美麗”、“沉靜”等字眼來形容她的氣質(zhì),只能說她是現(xiàn)代社會中難得的一個“純正”的女人,既有女性的激情,又有母性的慈愛,既現(xiàn)代,又傳統(tǒng)。雅各布的表演與基耶斯洛夫斯基的出色導演技巧共同完成了一部藝術(shù)杰作,雅各布本人也因此獲得了戛納電影節(jié)最佳女演員的獎譽,她后來又主演了基耶斯洛夫斯基的另一部影片《紅色》。

        1993年至1994年間,基耶斯洛夫斯基完成了再次轟動國際影壇的《藍?白?紅》三部曲,影片立意源自法國國旗的三種顏色,它們分別代表“自由、平等、博愛”,三部影片依次闡述了三個主題。在這三部曲中,基耶斯洛夫斯基依然延續(xù)一貫風格,用包蘊著哲理性內(nèi)涵的敘事場景表達對當代人生存狀態(tài)的深刻理解。

        最后想提及的是,基耶斯洛夫斯基電影生涯的最后一個鏡頭,是在《紅色》中,女主人公瓦倫蒂娜在紅色背景下,面含憂郁的注視。這也是基耶斯洛夫斯基對我們永恒的注視,給我們溫暖、給我們希望、也給我們思考……

        第3篇:神秘生物范文

        這個班的學生不簡單

        九月的校園,到處洋溢著學生們歡樂的笑聲。我一個人來到學校的林陰小路散步?!癶i!武老師,新來的?”一個坐在樹上的學生說。我點了點頭,問他:“你是哪個班的?”“3(0)”話音剛落,那個學生就不見了。我正納悶,上課鈴響了。我急忙走向教學樓。

        來到班上,所有的學生都在打鬧著。我推開門,重重地咳嗽了一聲。“啪”一條滑溜溜的東西落在我頭上。我一把捉下那個東西一看:“啊啊啊啊??!蛇!”一條正吐著芯子的蛇在我面前搖晃著,我頓時感到頭暈眼花,身子往旁邊一歪,后來發(fā)生什么我不知道,只聽見全班同學一個勁地喊:“老師,老師……”

        (未完待續(xù))

        第4篇:神秘生物范文

        咳嗽

        當食物嗆入氣管、吸入刺激性氣體時,咳嗽能將呼吸道異物或分泌物排出體外,這樣的咳嗽不能強忍。

        而反復咳嗽可能是支氣管炎、肺炎等呼吸系統(tǒng)疾病的表現(xiàn)。中醫(yī)講“五臟六腑皆令人咳,非獨肺也”,過敏性鼻炎、支氣管哮喘、血管神經(jīng)性水腫、心臟病引起的肺淤血,甚至外耳道異物都會引發(fā)咳嗽。因此,如果出現(xiàn)不明原因的咳嗽時,應(yīng)盡快去醫(yī)院就診。

        耳鳴

        用手捂住耳朵,你會覺得耳朵里嗡嗡作響,這是因為外界嘈雜的聲音被阻隔,讓你聽到了耳旁組織的血流聲。首都醫(yī)科大學耳顯微外科主任戴海江教授介紹,寂靜的環(huán)境能夠放大我們的聽力,但如果你平時也能聽到“腦袋里鳴叫”,耳中出現(xiàn)鈴聲、哨聲、波浪聲、蟬鳴聲等,而周圍環(huán)境并沒有相應(yīng)聲源時,就得小心了。耳鳴專家表示:“我診治過不少耳鳴患者,從外表上看,他們至少比實際年齡老10歲?!眹乐氐亩Q不但影響聽力,干擾正常睡眠,還會引起焦慮、煩躁或抑郁等一系列精神問題。

        噪音是引起耳鳴最常見的原因。當某個頻率的噪聲損傷了聽神經(jīng)末梢細胞時,就會產(chǎn)生相應(yīng)頻率的耳鳴。實際上,超過安全噪聲標準(80~90分貝A聲級)的噪音都有可能造成耳鳴及耳聾。濫用藥物也是一個重要因素,研究發(fā)現(xiàn),包括心得安、異搏定、布洛芬在內(nèi)的多種常用藥物都可能引起耳鳴。此外,高血壓、冠心病、糖尿病等常見慢性病也可使微循環(huán)發(fā)生障礙,從而導致耳鳴。

        聽神經(jīng)末梢細胞一旦造成損傷很難恢復如初,但通過營養(yǎng)神經(jīng)藥物等治療手段可以緩解癥狀。已有耳鳴的人切忌酗酒、吸煙、熬夜等不良習慣。

        磨牙

        睡覺時牙齒咬得咯吱響,醒后面部肌肉緊張、酸痛,并伴有頭痛,如果你有此癥狀,很可能患上了“磨牙癥”。引起磨牙的原因很多,側(cè)臥位或俯臥位睡覺、牙齒咬合異常,都會讓人不自主地磨牙;磨牙還可能是胃腸功能紊亂、腸道寄生蟲、尿酸增多癥等的表現(xiàn)。另外,口腔是人體首先興奮的部位,當人們工作緊張、精神壓力增大時,也可能磨牙。

        別看磨牙事小,長期磨牙會引起牙齒及牙周組織的廣泛損耗,不但可能引發(fā)牙周疾病,還會導致面容蒼老,影響美觀。如果經(jīng)常磨牙,可在睡前用毛巾熱敷上下顎,能松弛咬合肌肉,盡量放松自己,適當做些體操、泡泡熱水澡、聽聽輕音樂等。

        打鼾

        偶爾打呼嚕不必緊張。如果鼾聲響亮不均勻,而且有晨起口干、白天疲乏無力、嗜睡、頭腦昏昏沉沉、反應(yīng)遲鈍、注意力不集中、記憶力減退等情況,那可能是得了阻塞性睡眠呼吸暫停綜合征。睡眠時常出現(xiàn)呼吸暫停,會導致血液中氧含量明顯減少,使機體處于缺氧狀態(tài),這不但影響睡眠質(zhì)量,還會引發(fā)心腦血管及內(nèi)分泌系統(tǒng)疾病。

        研究發(fā)現(xiàn),肥胖者、男性、孕婦等都是打鼾的高發(fā)人群。如果打鼾者一覺醒來有口干舌燥、頭暈、頭痛,白天困倦、嗜睡,甚至工作或開車時睡著,以及記憶力減退、注意力不集中、反應(yīng)遲鈍等表現(xiàn),最好去醫(yī)院就診。

        關(guān)節(jié)響

        第5篇:神秘生物范文

        關(guān)鍵詞:神經(jīng)生長因子受體;PRL瘤;生物學特性

        PRL瘤是臨床常見的具有高分泌功能的良性腫瘤,約占所有垂體腺瘤的40%~60%[1],其主要臨床表現(xiàn)為閉經(jīng)、溢乳、不孕(育)、高泌乳素血癥、垂體占位性病變。既往研究認為神經(jīng)生長因子(NGF)對PRL瘤有負性調(diào)節(jié)作用[2],本研究旨在探討PRL瘤表達p75-NGFR與其生物學特性的關(guān)系。

        1 資料與方法

        1.1一般資料 選取2008年2月~2013年10月我院收治的82例PRL瘤患者作為研究對象,其中男性37例,女性45例;年齡19~65歲,平均(38.1±8.5)歲;術(shù)前泌乳素水平300~600 ng/ml 26例,100~300ng/ml 40例,50~100ng/ml 16例;腫瘤體積5.6~47.2 mm3,平均(16.7±7.5)mm3;腫瘤直徑≤10 mm 27例,腫瘤直徑>10 mm 55例;非侵襲性腫瘤45例,侵襲性腫瘤37例。

        1.2方法

        1.2.1 p75-NGFR表達檢測 ①標本處理及免疫組化:PRL瘤組織標本均常規(guī)石蠟包埋,作5 mm連續(xù)切片,用抗生蛋白鏈菌素生物素復合體(SABC)法作免疫組化染色。以PBS代替一抗為陰性對照,用已知的陽性片為陽性對照。②計算標記指數(shù):在光學顯微鏡400倍視野下,每張切片隨機取10個高倍視野,每個視野計數(shù)100個細胞,總共計數(shù)1000個細胞。標記指數(shù)=(1000個細胞內(nèi)染色為陽性的細胞數(shù)/1000)×100%。③結(jié)果判斷:標記指數(shù)

        1.2.2 PRL瘤侵襲性判斷標準[3] 有下列情況之一者認為腫瘤具有侵襲性:①術(shù)前影像學檢查顯示腫瘤包繞單側(cè)或雙側(cè)頸內(nèi)動脈,或侵入海綿竇生長;②術(shù)中可見鞍底骨質(zhì)破壞;③術(shù)后鞍底硬膜送檢有腫瘤細胞浸潤。

        1.3統(tǒng)計學分析 采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件,計數(shù)資料用百分率(%)表示,計量資料用均數(shù)±標準差(MEAN±SD)表示。p75-NGFR表達陽性率比較采用四格表χ2檢驗,ALD比較采用成組設(shè)計t檢驗,P

        2 結(jié)果

        2.1 PRL瘤患者p75-NGFR表達陽性率 82例PRL瘤患者,32例p75-NGFR表達陽性,陽性率為39.0%。

        2.2 p75-NGFR與PRL瘤生物學特性的關(guān)系 男性組與女性組p75-NGFR表達陽性率、ALD相比差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05);血清泌乳素≤300 ng/ml組p75-NGFR表達陽性率、ALD顯著高于血清泌乳素>300 ng/ml組(P10mm組(P

        3 討論

        垂體腺瘤是目前臨床上常見的良性腫瘤,約占顱內(nèi)腫瘤的10%,在顱內(nèi)腫瘤中僅低于腦膠質(zhì)細胞瘤與腦膜瘤[4]。根據(jù)細胞分泌功能分類法,垂體腺瘤可以分為PRL瘤、生長激素垂體腺瘤、促腎上腺皮質(zhì)激素垂體腺瘤等,其中以PRL瘤最為常見。值得注意的是,臨床上可見部分PRL瘤患者呈侵襲性生長且生長速度快,術(shù)后很快就出現(xiàn)復發(fā),并且易并發(fā)垂體瘤卒中,但是其發(fā)生機制至今尚未完全明確[5]。

        NGF是第一個發(fā)現(xiàn)的神經(jīng)營養(yǎng)家族成員,它通過結(jié)合NGFR發(fā)揮維持與促進神經(jīng)元細胞的存活、分化、成熟的作用。NGFR可以分為高親和力受體、低親和力受體兩大類,本研究中p75-NGFR是一個分子量為75kD的跨膜糖蛋白,屬于NGF的低親和力受體,它可結(jié)合神經(jīng)營養(yǎng)家族每一個成員,其主要作用是調(diào)節(jié)酪氨酸激酶活性,促進NGF結(jié)合高親和力受體TrkA,誘導細胞凋亡等[6]。有研究認為PRL瘤表達p75-NGFR明顯高于其他類型垂體腺瘤[7],但有關(guān)PRL瘤表達p75-NGFR與其生物學特性關(guān)系的研究較少見。為此,本研究共分析82例PRL瘤患者,結(jié)果顯示32例p75-NGFR表達陽性,陽性率為39.0%。通過進一步分組、對比分析,結(jié)果顯示男性組與女性組p75-NGFR表達陽性率、ALD相比差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05);血清泌乳素≤300 ng/ml組p75-NGFR表達陽性率、ALD顯著高于血清泌乳素>300 ng/ml組(P10mm組(P

        參考文獻:

        [1]Vozniak OM.Technical peculiarities of trans-sphenoidal surgical interventions for prolactin-secreting pituitary adenoma[J].Klin Khir,2013,32(10):59-62.

        [2]Ahmed S,Duong T,Wang MB,et al.Pathology quiz case 3:ectopic prolactin-secreting pituitary adenoma[J].JAMA Otolaryngol Head Neck Surg,2013,139(1):91-92.

        [3]何躍,雷霆,張華楸,等.神經(jīng)生長因子受體在垂體泌乳素腺瘤中的表達及其與腫瘤生物學特點的相關(guān)性研究[J].中國臨床神經(jīng)外科雜志,2006,11(12):727-730.

        [4]Bakhtiar Y,Arita K,Hirano H,et al.Prolactin-producing pituitary adenoma with abundant spherical amyloid deposition masquerading as extensive calcification[J].Neurol Med Chir(Tokyo),2010,50(11):1023-1026.

        [5]Rotondo F,Kovacs K,Macdonald RL,et al.Non-small cell bronchial carcinoma metastasizing into a prolactin-producing pituitary adenoma[J].Int J Surg Pathol,2013,21(1):68-71.

        第6篇:神秘生物范文

        [關(guān)鍵詞] 丹參; 水楊酸; PAL和TAT; 迷迭香酸; 鈣通道抑制劑; 鈣調(diào)素拮抗劑

        水楊酸(salicylic acid,SA)是一種有效的誘導子,被廣泛應(yīng)用于多種藥用植物以提高其次生代謝物的合成積累量。如用SA誘導可以顯著提高東莨菪中的托品烷生物堿含量[1]、紅豆杉中的紫杉烷和紫杉醇含量[2-3]、肉蓯蓉培養(yǎng)細胞中苯乙醇苷的含量[4]、丹參細胞培養(yǎng)物中丹酚酸B的含量[5]。鈣作為植物體內(nèi)重要的第二信使,主要介導包括誘導子在內(nèi)的許多刺激因子所引發(fā)的細胞信號轉(zhuǎn)導進程,信號的變化發(fā)生在生理反應(yīng)之前[6]。鈣離子可將誘導子信號傳遞給下游的靶酶進而激活靶酶,并通過酶的作用合成多種次生代謝物質(zhì)[7]。研究表明,用誘導子處理歐芹細胞后,2 min內(nèi)可出現(xiàn)Ca2+內(nèi)流增加[8]。水楊酸處理可以引起植物胞質(zhì)Ca2+濃度增加,胞外Ca2+螯合劑EGTA、質(zhì)膜Ca2 +通道抑制nifedipine,LaCl3均可減弱水楊酸的誘導效應(yīng)[9]。胞內(nèi)鈣庫Ca2+釋放參與了殼聚糖誘導茜草細胞合成蒽醌的信號轉(zhuǎn)導過程[10]。麥角固醇處理煙草細胞引起細胞質(zhì)中鈣離子的雙峰型短暫增加,鈣離子通道抑制劑可以阻止或影響鈣峰的發(fā)生[11]。以上結(jié)果說明,鈣離子對植物次生代謝物質(zhì)的合成積累有非常重要的作用[12]。

        迷迭香酸(rosmarinic acid, RA)是植物體內(nèi)的一種酚酸類次生代謝物,具有較強的抗氧化、抗菌、抗炎、保肝、抑腫瘤等作用[13]。迷迭香酸是丹參Salvia miltiorrhiza Bunge中指標性成分丹酚酸B的合成前體,也是丹參中重要的有效成分之一。本項目組前期研究發(fā)現(xiàn),SA可以調(diào)控丹參培養(yǎng)細胞中迷迭香酸合成的2個關(guān)鍵酶苯丙氨酸解氨酶(phenylalanine ammonia-lyase,PAL)和酪氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(tyrosineaminotransferase,TAT)的活性,從而催化丹酚酸B及其合成前體迷迭香酸的生物合成[14-15]。用外源Ca2+處理丹參懸浮培養(yǎng)細胞發(fā)現(xiàn),不同濃度的外源Ca2+對迷迭香酸合成及其相關(guān)酶活性均產(chǎn)生了影響,推測胞外Ca2+內(nèi)流可能參與了迷迭香酸的合成[16]。但是,對于SA是如何被丹參細胞內(nèi)的信號分子感受、傳遞并引起酚酸類化合物合成代謝的一系列過程還不清楚,對胞內(nèi)外鈣離子是否參與SA誘導丹參迷迭香酸的生物合成過程的研究還不夠深入。

        本研究以丹參幼苗為材料,考察SA誘導子對丹參迷迭香酸生物合成及其合成關(guān)鍵酶PAL和TAT活性的影響;并利用質(zhì)膜鈣通道抑制劑Vp(verapamil,異搏定)和LaCl3、鈣調(diào)素拮抗劑TFP(trifluoperazine,三氟拉嗪)和胞內(nèi)鈣通道上IP3受體抑制劑LiCl處理,進一步研究胞內(nèi)、胞外Ca2+在SA誘導丹參幼苗合成迷迭香酸過程中的作用,為探討誘導子誘導植物次生代謝物合成的作用機制奠定基礎(chǔ)。

        1 材料

        1.1 儀器

        HC-3018R型高速冷凍離心機(長沙湘儀);UV-240型紫外分光光度計(上海美譜達);優(yōu)普UPH-IV-90超級組合型超純水機;GM-033 型隔膜真空泵,抽氣速度20 L·min1,10 μm;LC-10ATVP型液相色譜儀(日本島津公司),包括SPD-10AVP型紫外檢測器,shim-pack VP-ODS型色譜柱(4.6 mm×150 mm,5 μm),LC-10ATVP輸液泵,7725i型進樣器(4.6 mm×250 mm,5 μm),數(shù)據(jù)采集系統(tǒng)Class VP色譜工作站。

        1.2 試劑

        色譜級甲醇、乙腈購自美國TEDIA試劑公司,色譜級磷酸購自西安試劑廠,對照品迷迭香酸(純度≥98%;批號 111106),購自中國食品藥品檢定研究院。Vp(verapamil,異搏定)和TFP(trifluoperazine,鈣調(diào)素拮抗劑)均購自Sigma公司,LaCl3購自上海山浦集團,LiCl購自Amresco公司。α-酮戊二酸 (K0005,WOLSEN),DTT(C8166,Sanland Chemical),酪氨酸(F20090915,國藥集團), Vit B6 (01-079,北京奧博星),L-苯丙氨酸 (F20100805,國藥集團),PVP (101210,上海藍季),EDTA-2Na (分析純,廣州金華大)。

        1.3 材料來源與處理

        丹參種子來源于陜西天士力植物藥業(yè)有限公司商洛丹參GAP藥源基地。將種子用自來水浸泡24 h后進行發(fā)芽處理。發(fā)芽溫度為25 ℃恒溫,發(fā)芽床為濾紙或雙層紗布。待種子發(fā)芽后轉(zhuǎn)入營養(yǎng)缽溫室培養(yǎng),培養(yǎng)基質(zhì)為營養(yǎng)土,生長溫度25 ℃,光照12 h·d1,光照度400 μmol·m2·s1,相對濕度75%,每隔1 d用自來水澆灌。

        2 方法

        2.1 水楊酸誘導處理

        待丹參幼苗葉齡50 d時(約8~10片真葉),選取形態(tài)、長勢、大小基本一致的幼苗,分為4組,在葉片上(包括葉面和葉背)噴灑3種不同濃度的SA水溶液(以噴灑蒸餾水為對照),噴至葉片上藥液欲滴為止。分別在噴施 SA后的不同的時間(0,8,12,24,48,72 h)取樣,液氮冷凍,儲存在-80 ℃冰箱。用來檢測迷迭香酸積累量,PAL,TAT活性,確定SA適宜的誘導時間。

        2.2 鈣通道抑制劑/鈣調(diào)素拮抗劑處理

        當?shù)⒂酌缛~齡50 d時(約有8~10片真葉),選取生長狀態(tài)基本一致的幼苗分成12組(6組為抑制劑/拮抗劑處理,6組為抑制劑/拮抗劑+水楊酸處理),分別單獨噴施質(zhì)膜鈣通道抑制劑Vp,LaCl3,胞內(nèi)鈣調(diào)素拮抗劑TFP,胞內(nèi)鈣通道抑制劑LiCl,以及抑制劑/拮抗劑的組合Vp+LaCl3,TFP+LiCl。噴施抑制劑/拮抗劑后60 min再噴施水楊酸(以蒸餾水作為對照)。各處理分別取樣后迅速用液氮冷凍,儲存在-80 ℃冰箱。根據(jù)前期試驗篩選,Vp的處理濃度為250 μmol·L-1,LaCl3 處理濃度為4 mmol·L-1,TFP 處理濃度為200 μmol·L-1,LiCl處理濃度為4 mmol·L-1。

        2.3 苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性檢測

        按照文獻[15]的方法進行。將處理后的丹參幼苗葉片剪成約1 cm×1 cm的方塊并精確稱重。加入 4 mL 4 ℃下預冷的提取介質(zhì) (含 0.05 mol·L-1硼酸緩沖液,5.0 mmol·L-1巰基乙醇,1.0 mmol·L-1 EDTA-2Na,5%甘油,PVP,pH 8.8),冰浴下迅速研磨勻漿后,過濾,濾液在4 ℃下4 000 r·min1離心 15 min,上清液用于檢測酶活性。酶活性的測定系統(tǒng)包含: 酶液 0.5 mL, 硼酸緩沖液 (pH 8.8) 2 mL,0.02 mol·L-1 的L-苯丙氨酸1 mL、蒸餾水 1 mL;對照不加L-苯丙氨酸,用1 mL蒸餾水代替。反應(yīng)液于 37 ℃水浴中保溫 60 min 后加入 0.2 mL 6 mol·L-1 HCl終止反應(yīng)。在290 nm下測定吸光度,以每分鐘A變化0.1為1個酶活單位U。

        式中,Vt酶液總體積(mL);FW樣品鮮重(g);Vs測定時取酶液的體積(mL);ν 反應(yīng)液總體積(mL);t反應(yīng)時間(h)。

        2.4 酪氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(TAT)活性檢測

        按照文獻[15]的方法進行。將處理后的丹參幼苗葉片剪成約1 cm×1 cm的方塊并精確稱重。加入 4 mL 4 ℃下預冷的提取介質(zhì)(0.1 mol·L-1磷酸鉀緩沖液,0.1 mmol·L-1 EDTA,80 mmol·L-1α-酮戊二酸,0.2 mmol·L-1 Vit B6,1 mmol·L-1 DTT,pH 7.3),冰浴下迅速研磨勻漿后,過濾,濾液在4 ℃下 12 000 r·min1離心 30 min,上清液用于酶活性的檢測。測定系統(tǒng)含有酶液 0.2 mL,0.2 mol·L-1磷酸鉀緩沖液 (pH 7.5) 3 mL,10 mmol·L-1α-酮戊二酸 0.2 mL,88 mmol·L-1酪氨酸0.2 mL,0.2 mmol·L-1 Vit B6 0.1 mL。反應(yīng)液于 37 ℃水浴中保溫 30 min 后加入 0.5 mL 10 mol·L-1 NaOH終止反應(yīng)。然后于37 ℃水浴中繼續(xù)保溫 30 min。

        在331 nm下測定反應(yīng)液吸光度,以每分鐘A變化0.1為1個酶活單位U。

        式中,Vt酶液總體積(mL);FW樣品鮮重(g);Vs測定時取酶液的體積(mL);ν 反應(yīng)液總體積(mL);t反應(yīng)時間(h)。

        2.5 迷迭香酸的提取及含量檢測

        按照文獻[15]的方法。收獲不同處理的丹參幼苗葉片,在47 ℃真空干燥箱中干燥至恒重。將干燥的葉片研碎成粉末,稱取0.01 g左右置具塞試管中,用70∶30的甲醇-水溶液在超聲波提取器中提取45 min。提取液在8 000 r·min1下離心10 min,上清液再用0.22 μm微孔濾膜過濾后待檢測。

        含量檢測采用高效液相色譜法(HPLC)。色譜條件為:shim-pack VP-ODS型色譜柱(4.6 mm ×150 mm, 5 μm);流動相乙腈-水-磷酸(25∶75∶0.1);流速 1 mL·min1;進樣量 10 μL;檢測波長 285 nm;柱溫 25 ℃。

        2.6 數(shù)據(jù)分析

        采用SPSS軟件進行相關(guān)性分析和顯著性檢驗,用Graphpad軟件進行誤差分析。實驗為單因素完全隨機設(shè)計,每個試驗3~4重復。

        3 結(jié)果與分析

        3.1 水楊酸對丹參幼苗迷迭香酸合成及其關(guān)鍵酶活性的影響

        3.1.1 水楊酸誘導丹參幼苗合成迷迭香酸的適宜濃度和時間 用0.5,2.0,4.0 mmol·L-1的SA處理丹參幼苗,分別在誘導后的不同時間檢測丹參葉片中的迷迭香酸合成積累量,考察適宜的誘導濃度和誘導時間。與對照相比,3種濃度的水楊酸均提高了丹參葉片中迷迭香酸的合成積累量(圖1)。但不同濃度的SA對迷迭香酸的合成積累具有差異性,誘導效果最好的是2.0 mmol·L-1的SA,其次是4.0,0.5 mmol·L-1;從誘導時間方面來看,迷迭香酸質(zhì)量分數(shù)在SA誘導前僅為(16.36±1.39)mg·g1,SA誘導后的8 h含量有所提高,誘導后24 h時迷迭香酸含量達到峰值,隨后逐漸下降,但始終高于對照。2.0 mmol·L-1的SA誘導迷迭香酸的最大積累量可達到(40.51±2.16) mg·g1,比對照提高了1.97倍;0.5 mmol·L-1的SA誘導迷迭香酸的最大積累量達到(28.91±1.51) mg·g1,比對照提高了1.41倍;4.0 mmol·L-1的SA誘導迷迭香酸的最大積累量達到(37.85±4.58) mg·g1,比對照提高了1.84倍。

        綜上所述,2.0 mmol·L-1的SA可以顯著提高丹參幼苗葉片中迷迭香酸的合成積累量(P

        3.1.2 水楊酸對丹參幼苗迷迭香酸合成相關(guān)酶活性的影響 用0.5,2.0,4.0 mmol·L-1的SA處理丹參幼苗,檢測不同濃度的水楊酸處理丹參葉片后PAL和TAT活性變化。與對照相比,3種濃度的水楊酸均提高了丹參葉片中迷迭香酸合成相關(guān)酶的活性(圖2)。但不同濃度的SA對關(guān)鍵酶合成積累具有差異性,其中誘導效果最好的是2.0 mmol·L-1,其次是4.0,0.5 mmol·L-1的SA;從誘導時間來看,關(guān)鍵酶活性在SA誘導后的12 h達到峰值,隨后逐漸下降。0.5 mmol·L-1的水楊酸誘導后PAL,TAT在12 h的酶活分別是對照的1.47,1.15倍;2.0 mmol·L-1的SA誘導后PAL,TAT在12 h的酶活分別是對照的1.66,1.62倍;4.0 mmol·L-1的水楊酸誘導后PAL,TAT在12 h的酶活分別是8 h的1.47,1.32倍,均差異顯著(P

        由此可知,不同濃度的水楊酸誘導對迷迭香酸的積累和關(guān)鍵酶活性有著不同的效應(yīng)。結(jié)合圖1發(fā)現(xiàn),水楊酸對迷迭香酸和酶活性的影響是激發(fā)式的,即隨著誘導后時間的延長,次生代謝物質(zhì)含量和酶活性上升到一定的水平后逐漸下降,趨于平穩(wěn)。綜上所述,2.0 mmol·L-1的SA可在較短的時間內(nèi)誘導丹參幼苗合成較多的迷迭香酸,且對幼苗生長沒有造成傷害(數(shù)據(jù)未顯示)。因此,在后續(xù)的試驗中均以2.0 mmol·L-1的SA作為誘導子。

        3.2 鈣通道抑制劑/鈣調(diào)素拮抗劑抑制水楊酸誘導丹參幼苗合成迷迭香酸

        3.2.1 胞外鈣通道抑制劑抑制水楊酸誘導丹參幼苗合成迷迭香酸 分別用濃度為250 μmol·L-1的Vp,4 mmol·L-1的LaCl3預先處理60 min后,再用濃度為2.0 mmol·L-1的SA處理,考察胞外鈣通道抑制劑對水楊酸誘導丹參幼苗合成迷迭香酸的影響(圖3)。

        SA誘導丹參幼苗葉片后,迷迭香酸含量從(3.34±0.42) mg·g1提高到(7.73±0.33) mg·g1,顯著高于對照組(P

        3.2.2 胞內(nèi)鈣通道抑制劑/鈣調(diào)素拮抗劑抑制水楊酸誘導丹參幼苗合成迷迭香酸 分別用濃度為200 μmol·L-1的TFP,4 mmol·L-1的LiCl處理60 min后,再用2.0 mmol·L-1的SA處理,考察胞內(nèi)鈣通道抑制劑/鈣調(diào)素拮抗劑對水楊酸誘導丹參幼苗合成迷迭香酸的影響(圖4)。

        鈣調(diào)素拮抗劑TFP和胞內(nèi)鈣通道抑制劑LiCl單獨處理時,TFP和LiCl處理組迷迭香酸的含量均低于對照組。與水楊酸處理組的迷迭香酸積累量相比,SA+TFP處理使迷迭香酸含量降低5.49 mg·g1,SA+LiCl處理使迷迭香酸含量降低4.67 mg·g1,抑制效果均達到顯著水平(P

        植物次生代謝過程中,誘導子或生理性刺激使細胞質(zhì)膜或者液泡膜上的鈣離子通道打開,胞內(nèi)Ca2+濃度上升[22]。Ca2+作為第二信使,通過信號級聯(lián)放大,使得細胞核編碼相關(guān)蛋白的表達,從而產(chǎn)生次生代謝物質(zhì)[7]。鈣離子通道阻斷劑可以使鈣離子通道開放程度減弱或使其開放時間縮短,阻止或減弱Ca2+流入細胞質(zhì)從而減弱或阻礙誘導子的誘導作用。異搏定是一種質(zhì)膜鈣通道抑制劑,它可以使鈣通道開放程度減弱,還可以使其開放時間縮短[23]。如誘導子在促進長春花懸浮細胞吲哚生物堿合成中,添加抑制劑異搏定后使吲哚生物堿含量降低,鈣離子的流入?yún)⑴c這一過程[24]。LaCl3是質(zhì)膜鈣通道抑制劑,能通過阻止Ca2+的跨膜流動而使其不能發(fā)揮信史作用,從而有效地抑制誘導子誘導的植物細胞或組織的防御反應(yīng)[24]。如LaCl3可以阻止真菌誘導后吲哚生物堿合成過程中的Ca2+流入和Ca2+依賴的信號轉(zhuǎn)導[22]。鈣調(diào)素拮抗劑TFP在有鈣離子參與的條件下能抑制CaM依賴的調(diào)節(jié)功能,導致靶酶不能被激活、次生代謝物質(zhì)無法形成[25]。LiCl 是IP3受體的抑制劑,可抑制磷酸肌醇再生,導致小麥原生質(zhì)體內(nèi)鈣離子含量顯著減少[26]。本研究發(fā)現(xiàn),水楊酸誘導提高了丹參幼苗迷迭香酸的合成量及其相關(guān)酶的活性,鈣通道抑制劑/鈣調(diào)素拮抗劑處理均可抑制水楊酸誘導丹參葉片中迷迭香酸的生物合成及其相關(guān)酶的活化。但胞外鈣通道抑制劑與胞內(nèi)鈣通道抑制劑/拮抗劑聯(lián)合處理的效果并沒有比單獨處理的效果強,說明2種抑制劑/拮抗劑之間可能會發(fā)生某種相互抑制或拮抗作用。

        前期用外源鈣離子處理丹參培養(yǎng)細胞發(fā)現(xiàn),丹參細胞中迷迭香酸合成量與外源施加的Ca2+濃度顯著相關(guān),外源Ca2+影響迷迭香酸的生物合成是通過影響胞內(nèi)Ca2+濃度而實現(xiàn)[16]。說明胞內(nèi)外的鈣離子在水楊酸誘導丹參迷迭香酸合成過程中發(fā)揮著重要的信號轉(zhuǎn)導作用,主要機制是水楊酸誘導丹參后激活胞內(nèi)鈣信號,鈣信號通過信號級聯(lián)放大作用,激活下游的關(guān)鍵酶,關(guān)鍵酶通過控制次生代謝物質(zhì)的合成來響應(yīng)水楊酸誘導植物次生代謝物的生物合成。

        綜上所述,水楊酸可以誘導丹參迷迭香酸合成積累量增加和PAL,TAT關(guān)鍵酶的活化,胞外鈣通道抑制劑異搏定(Vp),LaCl3,胞內(nèi)鈣調(diào)素拮抗劑三氟啦嗪(TFP)、胞內(nèi)鈣通道抑制劑LiCl均可抑制水楊酸誘導的迷迭香酸生物合成及其相關(guān)酶活化,說明鈣離子參與了水楊酸誘導丹參迷迭香酸生物合成的信號轉(zhuǎn)導。

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        Regulation effects of intracellular and extracellular Ca2+ on biosynthesis of

        rosmarinic acid induced by salicylic acid in young seedlings of Salvia miltiorrhiza

        CAO Rong-rong, DANG Xiao-lin, XING Bing-yu, ZHANG Jing-yi, DONG Juan-e*

        (College of Life Sciences, Northwest Agricultural and Forestry University, Yangling 712100, China)

        [Abstract] Objective: To investigate the effect of intracellular and extracellular Ca2+ on the biosynthesis of rosmarinic acid (RA) induced by salicylic acid in young seedlings of Salvia miltiorrhiza. Method: Young seedlings of S. miltiorrhiza were used to select an optimal concentration of salicylic acid(SA), and then use the optimal concentration of SA to investigate the effects of extracellular Ca2+ channel inhibitors Verapamil,LaCl3, intracelluar calmodulin antagonist TFP and intracelluar Ca2+ channel inhibitors LiCl on the biosynthesis of RA and related enzymes. Result: SA increased the accumulation of RA and the activities of PAL and TAT, especially the SA of 2 mmol·L-1 after 24 h. SA improved the accumulation of RA to (40.51±2.16) mg·g1, which was 1.97 times than that of control, and the activities of PAL, TAT were 1.42 times and 1.29 times than those of the control. However, Vp,LaCl3, TFP, LiCl inhibited the effects of SA evidently. Conclusion: Ca2+ plays a key role in the regulation of the induction process.

        第7篇:神秘生物范文

        答案真是出乎我們的意料。看上去自由自在,無拘無束的飛行動物和游水動物,它們的運動似乎恰恰遵循著嚴格的規(guī)律。科學家們通過大量的觀察和試驗,發(fā)現(xiàn)飛行動物和游水動物的運動過程中存在著一個神秘的常數(shù),那就是它們的翅膀或尾巴的振動頻率、振幅以及運動速度三者之間的關(guān)系――振動頻率乘以振幅再除以運動速度,計算得到的數(shù)值總是落在0.2~0.4之間。

        比如,世界上最小的鳥類――蜂鳥,其雙翅展開僅有10厘米左右,飛翔時振幅大約是20厘米。蜂鳥的飛行速度非??欤蠹s能達到50米/秒。而科學家們以往觀察到的蜂鳥飛行時雙翅振動頻率在50赫茲-70赫茲之間,根據(jù)上述公式計算出來的蜂鳥的運動常數(shù)就落在0.2~0。4之間。

        與蜂鳥體形相差懸殊的海豚也是科學家們觀察的一個對象。成年海豚的體長一般在3米左右,在大海里游動時,海豚及尾巴擺動的振幅大約是1米,頻率是每分鐘30次左右,游泳速度是每小時100千米。根據(jù)公式計算出來的海豚的運動常數(shù)是0.3,也落在0.2~0.4之間。

        這不僅僅是巧合。研究者們做了大量的試驗,發(fā)現(xiàn)幾乎所有的飛行動物和游水動物的運動機制中都存在這個神奇的常數(shù)。事實上,只有當這一運動常數(shù)的值處于0.2~0.4之間時,動物們才能達到最佳的運動狀態(tài)。

        雖然目前科學家們還不清楚為什么會存在這個運動常數(shù),它的值又為什么恰恰落在0.2~0.4之間,但這一神奇的常數(shù)似乎像物理學中著名的光速不變原理那樣放之四海而皆準,也像光速一樣神秘。它能夠幫助生物學家們根據(jù)動物化石的身體構(gòu)造判斷出那些早已滅絕了的動物曾經(jīng)具有怎樣的運動速度。甚至,不能排除,這一常數(shù)很可能對外星生物也同樣適用。很多科學家都表示:“如果在其他星球上真的存在游水生物或飛行生物的話,我們相信,它們的運動也遵循著同樣的規(guī)律?!?/p>

        此外,這一常數(shù)還能幫助軍方研制出各種高性能的飛行器。比如說,一個翼長15厘米、翼振振幅為10厘米的機械間諜如果要做最有效的飛行的話,其最佳翼振頻率應(yīng)該在30次/秒左右。目前,美國軍方已經(jīng)著手研制類似鳥的有冀飛行器,在配備上微型攝像之后,這樣的機械鳥將可能滲入敵方的任何機密要塞進行刺探。當然,他們最感興趣的還是能夠研制出體積更小,無孔不入的機械昆蟲,相信這一天的到來也為時不遠。

        (選自《科學之謎》2005年11期)

        閱讀訓練:

        1.文章開頭有何特點?這樣寫有何好處?

        答:____

        2.“無拘無束的飛行動物和游水動物,它們的運動似乎恰恰遵循著嚴格的規(guī)律”,這一“規(guī)律”指什么?

        答:_____

        3.文章為何僅以蜂鳥、海豚為例來說明這一神秘的運動常數(shù)?

        答:_____

        4.“無拘無束的飛行動物和游水動物”為何會存在這一神秘的運動常數(shù)?

        答:_____

        5.請舉例說說文章的語言十分準確這一特點。

        答:______

        6。你還知道生物界其他一些神秘的規(guī)律嗎?請寫出一兩個來。

        答:_____

        7.人們了,解這一神秘的運動常數(shù)有何作用?

        答:____

        第8篇:神秘生物范文

        這個東西被人匆匆地命名為“飛棍”,它在照片中的外表呈圓柱棍子狀,兩側(cè)有多片膜狀物,那些晶瑩透明的膜狀物究應(yīng)該是它能移動的秘密——“翅膀”,飛行時會如波浪般不停扭動。它似乎更愛成群結(jié)隊地出現(xiàn),能在全方位發(fā)現(xiàn)它的身影,而且大小不一,可速度絕對能用“音速”相稱……

        飛棍是真實的神秘還是虛幻的騙局?是外星生命制造并留在下的新型生物?或許是從地球的內(nèi)部飛出的活化石?還是地球上另一種未被發(fā)現(xiàn)的高級智慧生物?這些問題似乎只能在疑惑中不了了之了。

        但是,還沒等這個問號沉寂下去,一個另所有人都啼笑皆非的答案卻一下子公諸于我們眼前。這些所謂的神秘生物,其實只要它停下來,它那身神秘的衣紗就不復存在了,你所看到的,將是一些平凡的昆蟲或小鳥,飛棍現(xiàn)象,原來只是因為照相機快門的曝光時間比那些飛行生物扇動翅膀的頻率低而已。假如蜜蜂翅膀的頻率是1/300秒,用一個曝光時間只有1/60秒的相機拍攝,在畫面上看到的則是昆蟲身體劃出的直線或弧線,還有翅膀扇動所留下波浪狀的痕跡。

        第9篇:神秘生物范文

        蛇,大約出現(xiàn)在一點五億年前的侏羅紀時期,遠早于人類歷史,而它們卻堅毅的生活到現(xiàn)今,令我產(chǎn)生了極大的興趣,其中,我最感興趣的便是——黑曼巴蛇。

        黑曼巴蛇在毒蛇界中,身長僅此于眼鏡王蛇。而且黑曼巴蛇在非洲地區(qū)被稱為“死神”、“最恐怖的殺手”,其中還包括了一些傳言,傳說僅一條黑曼巴就殺死了一頭成年雄獅。

        據(jù)當?shù)厥窌涊d:黑曼巴俊郎美麗,令人心儀而又心懷畏懼,是地球上非常神秘的生物之一。曼巴屬共有白唇曼巴、綠曼巴、簡氏曼巴以及黑曼巴幾種,這是以前唯一一條關(guān)于曼巴屬生物的信息,因此黑曼巴就變的很神秘。

        還有一種黑曼巴,就是帝王黑曼巴,它則是黑曼巴中的王者,任何動物,甚至是成群的獅子也會避而遠之。

        傳說它在短距離內(nèi)比汗血寶馬跑的還快,又傳說一條遭圍捕的帝王黑曼巴在幾分鐘內(nèi)就殺死了圍捕它的13個捕蛇人。不過,這是真是假我們難辨。

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